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Practica # 1:MICROSCOPIA CON
DIFERENCIACION DE CELULAS HEMATICAS.
Dra. Patricia Gómez Ruelas.
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Familiarizar al estudiante con el uso del microscopio.
Fundamento:El microscopio es el instrumento de trabajo mas
empleado por el microbiólogo, a través del cual se observan las estructuras invisibles al ojo humano.
Se conocen diversos tipos de microscopios, con diferentes aplicaciones, como el óptico, el de campo obscuro , el de contraste de fase, el de la luz polarizada, el de fluorescencia y el electrónico
Objetivo:
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1.- Limpiar las lentes con el papel esencial para dicho objetivo.
2.- Colocar en posición el objetivo seco débil (10x), que se conoce por el click que se escucha cuando esto se ha logrado.
3.- Encender la fuente luminosa. 4.- Colocar la preparación en la platina. 5.- Por el medio del tornillo del enfoque
grueso, bajar el tubo de microscopia hasta el tope.
USO DEL MICROSCOPIO.
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6.- observando por los oculares, subir el tubo nuevamente hasta ver enfocada la preparación.
7.- Si se va a usar el objetivo seco fuerte (40x), después del paso 5, se cambia aquel sin necesidad de subir el tubo, si el microscopio lo permite.
Esta operación debe hacerse con cuidado, pues hay modelos de aparato que no son parafocales.
Repetir el paso 6, ajustando la intensidad luminosa por medio del condensador y el diafragma iris.
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8.- para observar con el objetivo 100x (de inmersión) deberá colocarse una pequeña gota de aceite de inmersión sobre la preparación y se sigue el paso 6 para enfocar.
9.- al terminar de usarlos, limpiar los lentes con papel especial, sobre todo el objetivo de inmersión.
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INMUNOLOGIA: estudio de los mecanismos fisiológicos que el ser humano y otros animales utilizan para defender su cuerpo contra la invasión por otros organismos.
Las enfermedades infecciosas son causadas por mos., que tienen la ventaja de reproducirse y evolucionar más rápido que los huéspedes humanos.
Durante una infección, el mo puede reproducirse. En respuesta, el cuerpo humano reproduce cels dedicadas a la defensa, conocido como sistema inmunitario
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DIFERENCIACION DE CELULAS HEMATICAS
Anemias - serie roja.Leucemia e infecciones- serie blanca.Purpura- plaquetas
Ayuda al diagnostico en:
La observación microscópica de un frotis sanguíneo nos
indica:
Forma, tamaño y anormalidades de los eritrocitos que conducen al diagnostico de padecimientos
hematológicos.
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El sitio anatómico de la hematopoyesis cambia con la edad. En las 1eras fases embrionarias, las céls sanguíneas se producen 1ero en el saco vitelino y más tarde en el hígado fetal. Del 3ero al 7mo mes de vida fetal, el bazo es el principal sitio de hematopoyesis.
Durante el desarrollo de los huesos en los meses 4to y 5to del crecimiento fetal, la hematopoyesis comienza a trasladarse a la médula ósea, y hacia el momento del nacimiento éste es el único sitio en que ocurre.
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En el adulto la hematopoyesis se realiza principalmente en médula ósea de cráneo, costillas, esternón, columna vertebral, pelvis y fémures.
Estas células sanguíneas viven poco, deben renovarse continuamente, y la hematopoyesis es activa por toda la vida.
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LINFOCITOSProvienen de los
linfoblastos de la medula ósea y se distribuyen en
la sangre, donde corresponden de 20 a 30% de los leucocitos
circulantesSe dividen en: B y T
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pequeños- miden entre 6 a 10 um de diámetro.
Grandes – miden entre 10 a 20 um de diámetro.
Se clasifican:
CARACTERISTICAS:
Núcleo voluminoso en comparación con el citoplasma, redondo u ovalado y muy basófilo, se colorea de color rojo violáceo obscuro y su cromatina es densa.
Su citoplasma se tiñe de color azul celeste intenso.
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Fiebre. Hepatitis vírica. Hipertiroidismo. Leucemia linfocítica Tuberculosis. Mononucleosis infecciosa. Paperas. Rubeola. Tosferina.
Los linfocitos se encuentran elevados en:
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NEUTROFILOS.
Leucocitos mas abundantes en la sangre del humano
Representa del 50 al 60 % del total de leucocitos
IMPORTANCIA EN:- Componente celular de la inflamación
infecciosa aguda.- Inflamación mediada por bacterias
patogénicas.- Reacciones en las que intervienen complejos
antígeno- anticuerpo.
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Marginan las cavidades de las células
endoteliales, se adhieren a esta y cruzan los sitios
de lesión
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Diámetro aproximado entre 11 a 14 um.
Citoplasma abundante, lleno de gránulos pequeños que no se tiñen en forma intensa con colorantes ácidos ni básicos.
El núcleo se tiñe de rojo violáceo constituido por dos o mas segmentos unidos entre si por filamentos de cromatina
Características
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Eosinofilos.
En sangre se encuentran del 1- 5 %
Citoplasma incoloro, cubierto de granulaciones refringentes ricos en arginina y tienen afinidad por los
colorantes ácidos como la eosina y se tiñe de un color rojo anaranjado.
Núcleo excéntrico en el citoplasma y bilobulado y elipsoide
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SE ENCUENTRAN ELEVADOS EN:
• Alergia a fármacos.• Anemia perniciosa.• Picadura de araña viuda negra.• Asma bronquial.• Colitis ulcerativa.• Enfermedad de Cronh.• Dermatitis hipertiforme.• Enfermedad por Echinococcus.• Policitemia vera.• Postradiccion.• Triquinosis.
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• Eritema multiforme.• Fiebre de heno.• Intoxicación por fosforo.• Gastroenteritis eosinofilica.• Enfermedad de Hodgkin• Leucemia miolegena crónica.• Pénfigo.• Poliarteritis nudosa.• Postesplenectomia.• Sarcoidosis.• urticaria
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Basófilos.
Diámetro de 14-
18 umCitoplasma se
tiñe de color rosa
leve o incoloroNúcleo no plenamente segmentado y puede ser disimulado por los abundantes gránulos
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ELEVADOS:Anemia hemolítica crónica.
Embarazo.Mixedema.Nefrosis.
Enfermedad de Hodgkin.
Fase de infección aguda.
Leucemia miologena crónica.
Metaplasia mieloide.
Policitemia veraSinusitis crónica.
varicela
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DISMINUIDOS O NEGATIVOS EN :
Hipertiroidismo.Postesplenectomia.
postradiacion
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Monocitos.
Leucocitos
sanguíneos
fagociticos.
1-3% de los leucocitos en circulación.
Miden entre 10-
20 um
Núcleo voluminoso, puede ser ovalado,
escotado o en forma de riñón o
herradura.Citoplasma abundante .
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ELEVADOS:
SarcoidosisTifus.
tripanosomias
is
Enfermedad de Hodkin
Intoxicación por
tetracloroetano.Tuberculosis.
Artritis reumatoide.Brucelosis.
Colitis ulcerativa
crónica
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Malaria.Metaplasia
mieloide.Policitemia vera.
Fiebre macular de las montañas
rocosas.Leucemia monocitica.
Lupus eritematoso sistémico.
Enfermedad de Crohn
Endocarditis infecciosa
Enfermedad de Gaucher
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Eritrocitos.
Forma bicóncava, sin núcleo y de
color rojo-amarillento
Mide 7-7.5 um
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Plaquetas. miden de 2- 3
micras
Células anucleadas, poseen glucógeno,
ADP, ATP, y enzimas glucoliticas y trombostenina
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ELEVADAS:Deficiencia de
hierro.Leucemia.Linfoma o
cáncer.Terapéutica
postadrenalina.Enf.
Intestinales inflamatorias.
Postesplenectomia.
Postratamiento con vit. B12
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DISMINUIDAS.• Anemia aplasica.• Anemia perniciosa.
• Complicación del embarazo.• Deficiencia de
folato.• Enfermedad de tejido conectivo.• Infección vírica.
• Administración de
heparina.•Mielodisplasi
a.•Postransfusion sanguínea.• Fármacos.
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REALIZACION DE LA PRACTICA
La sangre se obtiene del pulpejo del dedo medio o anular, aunque también se puede obtener del lóbulo de la oreja, previa limpieza del sitio elegido, se hace la punción con una lanceta, se limpia la primera gota de sangre, y ejerciendo ligera presión, se deposita la segunda gota en un portaobjetos limpio y seco, se produce la preparación del frotis.
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Una vez hecha la preparación, se deja secar, se fija con metanol y se tiñe con el hemocolorante rápido de sigma; un minuto en solución No 1, lavar con agua del grifo y sumergir otro minuto en la solución No 2; lavar con agua y secar al medio ambiente observar al microscopio con 100x
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FIN