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7/24/2019 Ph y Temperatura Terminados
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Laboratorio de Microbiologa General yAplicada
ACCIN DE AGENTES FSICOS SOBRE LOSMICROORGANISMOS
I. EFECTO DE LA TEMPERATURA
OBJETIVOS:- Determinar la temperatura de muerte trmica de los
microorganismos Escherichia coli y Staphylococcus aureustratados a 40C y 65C durante diferentes intervalos de tiempo
- Determinar el nmero de microorganismos
supervivientes resistentes al tratamiento trmico
-Determinar la temperatura optima de supervivencia de
los microorganismosEscherichia coli y Staphylococcus aureus. MATERIALES
PROCEDIMIENTO
Cepas de Staphylococcus aureus.
Cepas deEscherichia coli
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Nos entregaron los dos cultivos de E.coli y S. aureus, crecidos en caldo
nutritivo se sometera a 40! y "#!.
!ada 0,40, $0, %00 min. se cogera % ml
de cada uno de los tubos &ue contieneny se reali'ara diluciones seriadas.
Luego de las diluciones seriadas de cadatubo &ue contienen las cepas
microbianas a ambas temperaturas , se
sembrar( por el m)todo de di*usi+n
Agregamos el agar a nuestras placas.otulamos cuando estas esten secascorrectamente, las placas petri donde
indicamos el tratamiento y la cepamicrobiana
-ncubamos a $ ! por 4$ /oras enposicion invertida
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Observacin
!ara el mtodo de difusin se utili"aron placa pl#sticas $ue se esterili"aron con%ido de etileno&
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0 min.N de coloniascontadas1 "4
40 min.N de colonias contadas1
%#2
$0 min.N de colonias contadas1
#04
%00 min.N de coloniascontadas1 %%04
0 min.N de colonias contadas1
"4
40 min.N de colonias contadas1
%20
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RESULTADOS'eali"amos el recuento de microorganismos en cada uno de los tratamientos&
ES!3E-!3-A !L-40!
ESCHERICHIA COLI (65C)
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$0 min.N de colonias contadas1
$"
%00 min.N de colonias contadas1
%2$4
0 min.N de colonias contadas1
4$2
40 min.N de colonias contadas1
%40
$0 min.N de colonias contadas1
05
%00 min.N de colonias contadas1
440
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STAPHYLOCOCCUS AUREUS
40C
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0 min.N de colonias contadas1
4$2
40 min.N de colonias contadas1
%4"#
$0 min.N de colonias contadas1
50
%00 min.N de colonias contadas1
65%
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STAPHYLOCOCCUS AUREUS
65
()C*ml + ,-mero de colonias % )DD.* /olumen de siembra
/olumen de siembra m1
)actor decimal de dilucin ,)DD. + * dilucin reali"ada 2 * 03 2 )DD+0
7!'8('8 97!O ,79-.
C'C979-O 79C'O:98-O ,()C*ml.
Escherichia c!iS"a#h$!ccc%s
a%re%s
&'C
' ()&*+', &-*+',
&' +/)*+', +&)'*+',
-' )/'&*+', )'0)*+',
+'' ++'&*+', )&&'*+',
(/C ' ()&*+',
&-*+',
&' +)'*+', +&(-*+',
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-' )-)(*+', )0)'*+',
+'' +-&*+', ,0+)*+',
Con los resultados obtenidos ;allamos el iempo de 'educcin decimal o valor D en
ambas temperaturas utili"ando la siguiente frmula
Dt=
X
log (N
o
Nx
)
Dt iempo en minutos para reducir el de clulas al inicio del tratamiento trmico
-% n> de clulas supervivientes despus de un tratamiento
Escherichia c!i
emperatura 40C
.
?. @+ 00
.4. -o+6?4%0
5.6. -%+04%0
A.
B.
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B.@+00
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6B.
CO7!8'89O- D C'C979-O !O:18C9O-81 -' 1O
79C'OO'H8-97O
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a las temperaturas anali"adas ,40 y 65 C . &sto indicarEa $ue los
Staphylococcus aureus tambin activaron sus mecanismos de defensasus
to:inas &ue est(n compuestos por protenas o p)ptidos y &ue son
altamente estables, y resistentes al calor, congelaci+n eirradiaci+n.Asi tambien tiene como estrategia adaptativa deautoprotecci+n, la producci+n de enteroto:inas y la *ormaci+n de
biopelculas .
A6. )uente
;ttp**LLL&eliMa&net*datos*pdfsNagrupados*Documento
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El pro*esor nosentreg+ un tubocon cultivo de
4 /oras deedad de
Esc/eric/ia coli
;rocedemos ainocular con unaa'a de siembra el
cultivo de E. coli encada uno de lostubos de caldonutritivo con
distintos valores dep/.
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aPustados con GCl a &0 - y -aOG &0 - con p; de &0 5&0 A&0
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,esultadodespues deinocular acada tubo
con lasmuestras de
E. coli
5
-ncubamos a$0 !
durante dosdias y
anotamosnuestras
observacione
s.
$
Estereli'amos la bo&uilladel tubo con
el cultivopara &ue
este no secontamine
4
3acemos lainoculacion a
cada tubocon el p/indicado
#
,otulamoslos tubos connumero de
mesa.
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0.
0?.
0.
RESULTADO04. 8notamos las observaciones $ue tuvieron los tubos separadamente
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En este tubo seobservo &ue es decolor /ialino , se
podria &ue suturbiade' es
po&uisima con unresultado negativo
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En este tal como eltubo anterior es de
color /ialino,tambien con pocaturbiade' con un
resultado negativo
p3 #
Este tubo seobserva con mayorturbide' por lo cual
en terminos decantidad de
crecimiento1 es deregular crecimiento
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05. -uestro factor para este proceso es la TURBIADE606.
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En el caso de laturbiade' este tubo
representa uncrecimiento regular de
la E. coli
p3 2
Aca se observa lamayor turbiade' con losdemas tubos por lo cual
el resultado es decrecimiento moderado
p3 %%
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0A.
0B.
0
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