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Microbiologa farmacutica I UANCV - EAP:FYB
UNIVERSIDAD ANDINA NESTOR CACERESVELASQUEZ
FACULTAD CIENCIAS DE LA SALUD
ESCUELA ACADEMICO PROFESIONAL DE FARMACIA YBIOQUIMICA
MICROBIOLOGIA FARMACEUTICA I (PRACTICA)
PRACTICA N 07
MEDIOS DE CULTIVO
DOCENTE: Q.F. Fredy Catacora Yucra
ALUMNO: Ever Nilson Choue Tiacacala
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PREPARACIN DE MEDIOS DE CULTIVO Y ESTERILIZACION
OB+ETIVOS,
- Conocer/ di0erenciar/ clasi1car y 2re2arar 32esada/ 2re2araci4nesterili5aci4n y conservaci4n6 los di0erentes )edios de cultivoutili5ados en el la7oratorio de )icro7iolo89a.
- #re2arar un )edio de cultivo co)2leto aadiendo cada uno de sussu2le)entos.
- Conocer los )edios de cultivo de uso 8eneral/ di0erencial y selectivo.
FUNDAMENTOS TE-RICOS
Md&o% d C!.&/o
!ran 2arte de la )icro7iolo89a de2ende de la ca2acidad de cultivar y)antener )icroor8anis)os en un la7oratorio/ y esto s4lo es 2osi7le si sedis2one de los )edios de cultivo adecuados.
Und&o d #!.&/o es un sustrato o soluci4n de nutrientes/ en los uecrecen y se )ulti2lican los )icroor8anis)os en el la7oratorio/ con el o7;etode aislar las di0erentes es2ecies 7acterianas/ 2roceder a su identi1caci4n yllevar a ca7o estudios co)2le)entarios.
Los )edios es2eciales son i)2rescindi7les 2ara aislar e identi1car los)icroor8anis)os/ evaluar la sensi7ilidad a los anti7i4ticos/ anali5ar a8ua yali)entos/ en )icro7iolo89a industrial y otras actividades.
Aunue todos los )icroor8anis)os necesitan 0uentes de ener89a/car7ono/ nitr48eno/ 04s0oro/ a5u0re y varios )inerales/ la co)2osici4n2recisa de un )edio adecuado de2ender< de la es2ecie ue se uiere
cultivar/ 2orue las necesidades nutricionales var9an considera7le)ente. Elconoci)iento del hn deter)inada 2or su co)2osici4n.
A8entes 8eli1cantes.
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Los )edios de cultivo 2ueden clasi1carse se8n di0erentes criterios/2ero los )
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E;.: agar nutritivo, agar EMB, CLDEy todos los )edios de aisla)iento2ri)ario y de identi1caci4n.
Medios %e)is4lidos.%e 2re2aran a 2artir de )edios l9uidos/ a8re8ando un a8ente
solidi1cante en una 2ro2orci4n )enor ue 2ara 2re2arar )edios s4lidos.Uno de sus usos es la investi8aci4n de la )ovilidad de las 7acterias.
E;.: agar cepa, SIM, medios base para utilizacin de aminocidos.
= S1;$ % #o4o%&'$ito de la 2re2araci4n est< in=uenciado
2or una serie de 0actores co)o:
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Eactitud de la 2esada y 2er0ecta )edici4n del volu)en de a8ua Control de 2 Correcta disoluci4n del )edio de cultivo Correcta esterili5aci4n Correcta conservaci4n del )edio de cultivo Correcto 0racciona)iento.
#ara la 2re2araci4n de )edios se 2arte de )e5clas deshidratadas de losco)2uestos ue la inte8ran. a7itual)ente s4lo es necesario aadir a8ua yesterili5ar en autoclave/ 2ero en al8unas ocasiones es necesario aadirdes2u>s de la esterili5aci4n al8n co)2onente ter)ol
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instrucciones de 2re2araci4n 2ara deter)inar el 2eso. Lue8o)ediante una si)2le re8la de tres de7e)os calcular.#ara nuestro a8ar ue viene a ser el a8ar nutritivo
C
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' Lue8o se )e5clan las cantidades de a8ua destilada y los 8ra)os del)edio de cultivo. La )e5cla 2re2arada en el )atra5 de Erlen)eyer sediluye reali5ando )ovi)ientos circulares de la 2re2araci4n con la
)ano y calentando a la lla)a del )echero 2ara acelerar el 2roceso.
Lue8o se reali5a la esterili5aci4n en elautoclave a una 2resi4n de J.K
at)os0eras/ JB(C y 2or JK )inutos. ay al8unos )edios de cultivoue no de7en esterili5arse al autoclave.
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K Lue8o se reali5a el vaciado a los reci2ientes est>riles 3ca;as #etri ytu7os de ensayo6 de 0or)a r
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Lue8o 8uardar en 0or)a invertida/ envolviendo 2revia)ente en 2a2elra0t o 2a2el )adera/ en la secci4n de conservaci4n de unre0ri8erador.
RESULTADOS CONCLUSIONES,
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CONCLUSIONES,
-#or )edio de esta 2rtodo de esterili5aci4n ueeli)inar9a los restos )icro7ianos ue 2udiesen ha7er uedado en el)edio de cultivo ya ue si eiste al8uno de estos/ ya no ser9aadecuado 2ara el uso ue se le 2udiera lle8ar a dar.
- #or lti)o/ se a2rendi4 a envolver correcta)ente los )edios decultivo y ue estos cuando se al)acenan en ca;as de 2etri de7encolocarse inversa)ente 2ara evitar su deshidrataci4n 2oreva2oraci4n y de esta )anera no tener ue desechar las )uestras.
CUESTIONARIO,
J Cu
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B Mencione los )edios de cultivo ue no de7en esterili5arse alautoclave.
En el caso del medio TCBS, no se autoclava porque algunos de sus componentes se
degradan con la temperatura de autoclave, como la bilis de buey. Adems, el medio TCBS
es un medio altamente selectivo, es hipersalino y con pH muy alcalino. Solamente
sobreviven bacterias halo y alcalinotolerantes, como las bacterias del gnero Vibrio, as que
no se necesita esterilizar porque su riesgo de contaminacin es muy bajo.
El )edio A8ar %% en su co)2osici4n tiene 2roductos ue se de8radancon el calor. En estos casos se esterili5a 2or 1ltraci4n a trav>s de 1ltrosde (.BB )icrones.
B&8!&o1"@2".
J Mo8&o!o12" C!2$"< M'd!o :< T"o$o2" F&%&o!o12"Mo8&"$". R#o!##&'$ ."$%4o. d %."% 4"" !d&"1$'%.o d &$@##&o$%. AAM? Cole8io de Iiou9)icos de la
#rovincia de Entre "9os? Facultad de Iiou9)ica y Ciencias Iiol48icasUniversidad Nacional del Litoral. J++&.
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B Mo8&o!o12" C!2$"< M'd!o =< Po#%"&$.o &$&"! d !"%%."% 4"" ! d&"1$'%.o o#o8&o!'1o