IDENTIFICACIÓN DE FUENTES DE ALIMENTACION E INFECCIÓN POR
TRYPANOSOMA CRUZI EN PANSTRONGYLUS HERRERI EN
UTCUBAMBA , AMAZONAS - PERÚ
MINISTERIO DE SALUDINSTITUTO NACIONAL DE SALUDCENTRO DE INFORMACIÓN Y DOCUMENTACIÓN CIENTÍFICA
2006
ABRAHAM G. CÁCERESSILVIA VEGA CHIRINOS
JESÚS ANTONIO PINTO CABALLEROANTERO GONZÁLES PÉREZCESAR NÁQUIRA VELARDE
SERIE INFORMES TÉCNICOS Nº41
IDENTIFICACIÓN DE FUENTES DE ALIMENTACION E INFECCIÓN POR TRYPANOSOMA CRUZI EN PANSTRONGYLUS HERRERI EN UTCUBAMBA , AMAZONAS - PERÚ
CODIGO OGITT: 2-01-05-03-056
IDENTIFICACIÓN DE FUENTES DE ALIMENTACION E INFECCIÓN POR
TRYPANOSOMA CRUZI EN PANSTRONGYLUS HERRERI EN
UTCUBAMBA , AMAZONAS - PERÚ
Abraham G. Cáceres, *Silvia Vega Chirinos, *Jesús Antonio Pinto Caballero,
Antero Gonzáles Pérez**, +Cesar Náquira Velarde
Laboratorio de Entomología, Instituto Nacional de Salud e Instituto de Medicina
Tropical “Daniel A. Carrión, UNMSM, *Laboratorio de Parasitología, INS, ** Instituto
Nacional de Salud.
Correspondencia:
Abraham G. Cáceres. División de Entomología, Centro Nacional de Salud
Pública, INS.
Teléfono: 4719920 - 458
E-mail: [email protected]
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RESUMEN
Objetivos: a) estandarizar la prueba de precipitina, b) conocer la fuente
alimentaria de los triatominos capturados, c) captura de triatominos en
ambientes intradomiciliarios, d) búsqueda de la infección por T. cruzi en
triatominos colectados y e) adaptar colonias de triatominos al laboratorio.
Material y Métodos: Localidades del distrito de Cajaruro, Utcubamba –
Amazonas, fueron seleccionados para las capturas de los triatominos
realizadas en el interior de viviendas (08:00 - 19:00 Horas), con linterna de
mano y vasos colectores. La estandarización de la prueba de precipitina, se
realizó en dos etapas: a) estandarización en la preparación de los antígenos y
antisueros precipitantes y b) evaluación de la sensibilidad y especificidad de la
prueba utilizando ninfas de Triatoma infestans de IV y V estadio, criadas en
laboratorio y alimentadas con sangre de perro, cobayo y el hombre. Los
ejemplares de P. herreri silvestres capturados en el distrito de Cajaruro,
departamento de Amazonas, fueron evaluados utilizando la prueba de
precipitina, para determinar sus fuentes de alimentación. El contenido intestinal
de cada triatomino se impregno en papel filtro y se guardó a -20º C. Los
antisueros utilizados fueron contra humano, perro, gato, cobayo y pollo, las
cuales se enfrentaron con el contenido intestinal del triatomino. En los
triatominos estudiados, se correlacionó, la fuente hemática con su infección
intestinal por Trypanosoma. Los triatominos se adaptaron al laboratorio en
cajas de tecnópor de 78 cm de largo X 59 cm de ancho X 25 cm de alto.
Resultados. Se obtuvo títulos apropiados de antisueros para ejecutar la
prueba, la cual resultó tener una mayor especificidad que sensibilidad. Se
capturaron 102 ejemplares de P. herreri siendo todos de intradomiciliarios, de
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ellos 93 triatominos fueron examinados por la prueba de precipitina. La
principal fuente de alimentación de P. herreri fue la sangre de cobayo, seguido
de humano y de pollo. No se logró identificar la fuente de alimentación en 17
ejemplares de P. herreri. El índice trypano - triatomínico fue de 62,4%, estando
asociado como principal fuente alimentaria al cobayo, seguido de pollo y de
humano. Respecto a la adaptación de colonias al laboratorio, de los 79
ejemplares adultos de P. herreri se obtuvo 123 huevos de los cuales
eclosionaron 70 y que a su vez dieron origen a 122 P. herreri de segunda
generación. Discusión. La prueba de precipitina en tubos capilares, mostró
mejor especificidad que sensibilidad debido a la absorción de los antisueros,
con los sueros no correspondientes. El alto índice de infección a T. cruzi
estuvo relacionado a la fuente de alimentación por cobayo, quien estaría
contribuyendo a la presencia del vector en estas viviendas y como posible
reservorio del parásito. Asimismo, el alto índice de infección relacionado a la
fuente de identificación humana, indica que P. herreri tienen una alta
antropofilia y una gran capacidad vectorial de la especie existiendo el peligro
latente de transmisión de la Enfermedad de Chagas para esta zona.
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INTRODUCCIÓN
En el oriente del Perú existen áreas que presentan condiciones óptimas que
favorecen para la presencia y proliferación de las diversas especies de
triatominos, de las cuales, algunas especies están consideradas como vectores
de la Enfermedad de Chagas; las condiciones óptimas son: clima, viviendas
precarias, hacinamiento y escasa educación sanitaria de sus habitantes (9). Se
conoce de la presencia de varias especies de vectores de la subfamilia
Triatominae que tienen comportamiento domiciliario, destacando entre ellos el
género Panstrongylus. En muchos casos las personas de estas áreas cohabitan
con animales domésticos como: perros, gatos, aves de corral, cobayos, etc., que
sirven de fuente de alimento de los triatominos y como reservorios del agente
etiológico, favoreciendo así la presencia y colonización del vector; por lo tanto la
aparición de la Enfermedad de Chagas en las personas; constituyendo un serio
problema de salud pública.
El desconocimiento de los diversos animales silvestres y domésticos de los
cuales se alimentan los diversos triatominos y otros factores vinculados al
hospedero, no permite llevar a cabo un efectivo control del vector, debido a que
en la actualidad las medidas de control empleadas están dadas por el uso de
insecticidas y van dirigidas únicamente a eliminar el vector.
En el Perú, solo se conoce un trabajo de investigación acerca de fuentes de
alimentación en triatominos (Triatoma infestans) y que se realizo en la zona sur
del Perú (16), resaltando la importancia de llevar a cabo mas estudios de este
tipo, para lo cuál es necesario la estandarización de una técnica que pueda ser
aplicada en forma rutinaria en la búsqueda del tipo de sangre ingerida por el
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vector. Para tal propósito, existe una prueba de precipitación en tubo capilar,
conocida también como prueba de precipitina, que es sencilla, altamente
específica y de bajo costo en comparación con otras, y que puede brindar
datos de especial valor epidemiológico; como son el conocimiento de selección
de hospederos, antropofilia por parte del vector, afinidad por los mamíferos,
correlación entre infección trypanosómica y la fuente hemática, asimismo, esta
información ayudará a diseñar y definir las estrategias de control del vector. Por
otro lado, también cabe resaltar la importancia que tienen los triatominos de la
zona, de estar infectado con T. cruzi, pues serian los responsables de la
transmisión a las personas de la localidad.
En el presente trabajo se da a conocer: a) la estandarización de la prueba de
precipitina con la finalidad de detectar cual o cuales son la (s) fuente (s)
(animales) de alimentación (es) de P. herreri, b) el índice de infección Trypano -
triatomino (IITT) de los mismo triatominos utilizados en la prueba de precipitina,
y c) el numero de generaciones de triatominos adaptados al laboratorio.
Objetivo General:
Determinar las fuentes de alimentación e infección por T. cruzi de los triatominos
intradomiciliarios del distrito de Cajaruro, Utcubamba, Amazonas - Perú.
Objetivos Específicos:
Estandarizar la prueba de precipitina.
Captura de triatominos en ambientes domiciliarios.
Conocer la fuente alimentaria de los triatominos capturados.
Búsqueda de la infección por T. cruzi en los triatominos colectados.
Adaptar colonias de triatominos al laboratorio.
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MATERIAL Y METODOS
Estandarización de la Prueba de Precipitina. Para la estandarización de esta
prueba se utilizó la metodología de Siqueira, (1960)
Preparación del Antígeno y Antisueros precipitante. Se utilizó suero de pollo
como antígeno, con la finalidad de comprobar la reacción (control positivo A):
a) Antígenos. Se diluyo 5 mL de suero de pollo con 16 mL de agua destilada en
un balón, adicionándole 18 mL de una solución al 10% de AlK(SO4).12H2O en
agua destilada; ajustándose el pH a 6.5 con solución NaOH 5N. Se centrifugó la
mezcla y se lavó el precipitado dos veces con solución fisiológica mertiolatada
(1:10 000). El precipitado final se resuspendió en 20 mL de solución
mertiolatada.
b) Método de Inmunización. El antisuero anti-pollo fue preparado en conejos
(New Zelanda) con más de 2kg de peso y de aproximadamente dos meses de
edad. Se inmunizó con 3 inoculaciones espaciadas en una semana y tres
semana, siendo cada dosis de 1 mL de antígeno más 1 mL de adyuvante
completo de freund colocando un volumen final de 3 en mL de antígeno La
colecta del antisuero se realizó después de 10 días de la última dosis.
c) Titulación del Antisuero Precipitante. La titulación del antisuero anti-
pollo, se realizó con la prueba de precipitina. Se hicieron diluciones del suero
de pollo y se enfrento con el antisuero anti-pollo. El título fue definido por la
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mayor dilución del suero que provocó una formación de precipitado posterior
a una hora de incubación con el respectivo antisuero.
Prueba de Precipitación. Para la prueba de precipitación se utilizaron tubos de
2,1 mm de diámetro x 40 mm de alto. El antisuero precipitante se tomó por
capilaridad, hasta alcanzar una altura de 6 mm de alto; luego fueron colocados
sobre un soporte de madera, el que se fijó con plastilina en el extremo basal
adicionándole un volumen de suero similar al volumen de antisuero. Los tubos
fueron incubados a temperatura ambiente por diferentes tiempos 1, 2 y 3 horas,
así como a 37ºC por 1, 2 y 3 horas, siendo positiva la prueba cuando se
observó la formación de un anillo blanco en el medio del tubo.
Prueba de Precipitación empleando Triatominos alimentados y
conservados en Laboratorio (control positivo B).
Para esta prueba, también se ha utilizado la metodología de Siqueira (1960).
Se utilizaron ejemplares de Triatoma infestans, (F1) criados en el laboratorio.
1. Preparación de antisueros precipitantes.
a) Antígenos. Se utilizó suero de: humanos, perros, cobayos. Se obtuvo el
suero de estos animales el cual se proceso siguiendo el método ya descrito,
para la estandarización de la técnica.
b) Método de Inmunización. Las inmunizaciones se realizaron de la misma
manera que se realizó para la estandarización de la técnica, utilizando dos
conejos por cada suero.
c) Titulación de Anticuerpos Precipitantes. Las titulaciones de los
antisueros se realizaron siguiendo el método ya descrito para estandarizar la
técnica. Se hicieron diluciones de cada uno de los sueros correspondientes a
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cada antisuero. El título fue definido por la mayor dilución del suero que
provocó una formación de precipitado posterior a una hora de incubación con
el respectivo antisuero.
d) Determinación de la Especificidad. La especificidad del antisuero para
cada suero, se determinó cuando el antisuero no reaccionó con los sueros no
correspondientes, en las diluciones 1:10 y 1:100
e) Absorción de Anticuerpos no Específicos. Se obtuvo una mezcla de
todos los sueros no correspondientes a cada antisuero, luego se adicionó una
parte de la mezcla a 100 partes del antisuero a ser absorbido. Seguidamente,
se incubo por dos horas a 37° C y luego se dejó 12 horas a 4° C, luego se
procedió a centrifugar y el sobrenadante se enfrento con cada suero no
correspondiente usado para la absorción.
f) Conservación del Suero Específico, con anticuerpos precipitantes. El
antisuero se conservó en congelamiento a –20° C hasta el momento de su uso.
2. Prueba de Precipitación para la identificación del contenido intestinal
en Triatoma infestans alimentadas en laboratorio.
a) Triatoma infestans. Se utilizaron ninfas de III, IV y V estadio de T. infestans,
criadas en laboratorio. Los antecesores de estos triatominos procedieron de la
ciudad de Arequipa.
b) Alimentación. Los triatominos fueron divididos en tres grupos de prueba
(n=40) siendo en total 120 triatominos. Cada grupo de prueba fue alimentado
durante 30 minutos con la sangre de perro, cobayo y humano.
c) Preparación de los especimenes. Los triatominos fueron sacrificados en
grupos a los 7, 14, 21 y 28 días después de su alimentación. Posteriormente se
decapitaron obteniendo el contenido intestinal, el cual se trituró sobre papel
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filtro conservando en recipientes herméticos a –20° C (Gomes et al. 2001). Las
manchas en papel filtro fueron recortadas un día anterior a la ejecución de la
prueba y puestas al fondo de los tubos con 1,5mL de solución salina al 0,85%.
Estos tubos fueron centrifugados por 5 minutos a 2000rpm. El sobrenadante se
retiro y fue vertido sobre el antisuero precipitante en el interior de los tubos
para llevar a cabo la prueba (Siqueira, 1960).
Aplicación de la Prueba de Precipitina en Panstrongylus herreri
procedentes de la localidad de Cajaruro.
Captura de los triatominos en ambientes domiciliarios. Los ejemplares de
P. herreri se obtuvo de las localidades del distrito de Cajaruro, provincia de
Utcubamba (Amazonas). La búsqueda de los triatominos se realizó durante el
día en el intradomicilio: a) dormitorios (sobre la cama, debajo de los colchones,
grietas de las paredes, entre la ropa de cama, debajo de las mesas y detrás de
los muebles); b) cocina-cuyero (donde permanecen cuyes, depositan los
alimentos, hendiduras, grietas de las paredes), en la parte baja de la cocina; c)
sala (debajo de las mesas, bancas, detrás de los afiches, almanaques o
plásticos y grietas de las paredes. Para la captura de los triatominos se utilizó
linterna de mano, pinzas y alambres removedores; estos fueron colocados en
vasos de plástico con tapa cubierta con horganza. En el interior de los vasos se
colocó papel bulki doblado en forma de pliegues para protegerlos de la luz.
Todos los ejemplares capturados fueron trasladados al Laboratorio de
Entomología del Instituto Nacional de Salud, donde fueron identificados de
acuerdo al trabajo de Elliot et al. 1989. Para la identificación de estadios
evolutivos se consideró el trabajo de Guillen et al., 1991.
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Preparación de los triatominos ya alimentados. Los ejemplares se
sacrificaron para obtener su contenido intestinal, el cuál se impregno en papel
filtro y guardados a -20º C hasta la ejecución de la prueba. El reconocimiento
de la infección natural por Trypanosoma se realizó mediante la observación
microscópica de las heces, y hemolinfa de los insectos.
Aplicación de la Prueba de Precipitina. Los antisueros que se usaron para
la identificación de la fuente alimenticia, fueron antisueros contra sangre de
humano, perro, gato, cobayo y pollo, los que a su vez fueron enfrentados con
el contenido intestinal del triatomino en la búsqueda del antígeno
correspondiente.
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RESULTADOS
A continuación se mencionan los resultados obtenidos de la estandarización de
la prueba de precipitación:
El tiempo de incubación seleccionado fue de una hora a 37º C obteniéndose
un precipitado en forma de anillo blanquecino en la interfase de ambos
reactantes, lo que indicó la formación de los complejos antígeno-anticuerpo.
El esquema utilizado para obtener los antisueros precipitantes fue el apropiado,
ya que se obtuvo títulos de hasta 1:30 000, que luego fueron absorbidos para
evitar las reacciones cruzadas.
Los Antisueros precipitantes estándar obtenidos de los conejos a ser utilizados
en la investigación, luego de su tratamiento para mejorar la especificidad,
tuvieron los siguientes títulos: Anti-humano: 25,000; Anti-canino: 1:15,000; Anti-
gato: 1:10,000; Anti-cobayo: 1:10,000; Anti-pollo: 1:15,000 (Se muestran en la
Tabla 1.
La sensibilidad y la especificidad, fue determinada en ejemplares de Triatoma
infestans criados y alimentados en laboratorio del INS con sangre de humano,
canino y cobayo, cuyos resultado se muestra en la Tabla 2 y 3.
Para determinar las fuentes de alimentación se utilizó 93 ejemplares de P.
herreri, capturados de las localidades de El Hebron y El Ron. De ellos en 16
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ejemplares no se identifico la fuente de alimentación y en 77 ejemplares si se
identificaron las fuentes.
De los 77 ejemplares en 60 de identificó una sola fuente de alimentación,
mientras que en 17 se identificaron mas de dos fuentes. Ver Tabla 4.
De los 60 ejemplares de P. herreri que se identificó una sola fuente de
alimentación un 46.7% corresponde a cobayo y un 23.3% a humano (Tabla 5).
De los 17 ejemplares de P. herreri en que se identifico dos fuentes de
alimentación, estas correspondieron a un 6.5% de preferencia por sangre de
cobayo/pollo, un 5.2% por sangre de humano/cobayo. Ver Tabla 6.
En dos ejemplares de P. herreri de los 17 con alimentación múltiple, se
identifico hasta tres fuentes de alimentación que correspondieron a sangre de
humano/cobayo/pollo y humano/canino/cobayo.
Respecto a la infección a Trypanosoma cruzi en los ejemplares de P. herreri
silvestres se observaron Trypanosomatideos compatibles a T. cruzi en 58
ejemplares de los 93 trabajados. Ver Tabla 7.
Respecto a la adaptación de Panstrongylus herreri al laboratorio. En
Octubre del 2004, se realizo capturas de Triatominos en viviendas del El
Hebrón, distrito de Cajaruro, provincia de Utcubamba, departamento de
Amazonas, capturando 79 ejemplares adultos de P. herreri y después de 15
días de permanecer en cautiverio a 23º C de temperatura y 70% de humedad,
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se obtuvo 123 huevos de los cuales eclosionaron 70 (F1). De ellos en la
actualidad (Agosto, 2006) solo quedan 5 Adultos y 1 Ninfa V (F1). También se
cuenta con 122 P. herreri (Ninfa II y III) de segunda generación (F2) que
provienen de la eclosión de 150 huevos.
En agosto de 2005 se visito la localidad de El Hebrón, capturando 82
ejemplares de P. herreri que posteriormente se obtuvo 125 huevos y que hasta
la actualidad (Febrero, 2006) se tienen adaptados al laboratorio 105 ejemplares
correspondientes a Ninfa IV y Ninfa V.
En enero de 2006, en la misma localidad de de El Hebrón, se capturaron 109
ejemplares de P. herreri (45 Adultos y 64 Ninfas) y 69 ejemplares de la misma
especie (31 Adultos y 38 Ninfas) en Jaén, Cajamarca y que hasta la actualidad
se tiene 300 huevos en el laboratorio.
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DISCUSION
Estandarización de la prueba de Precipitina. Los tubos de vidrio de 2.1 mm
de diámetro por 40 mm de alto, fueron apropiados para la prueba. El
antisuero (anti-pollo) se hizo ingresar a los tubos por capilaridad hasta una
altura de 6 mm, (40 uL volumen de antisuero), para la cuál se utilizó los
pozos de placas de ELISA, a los cuales se les agregó 300 uL del antisuero
y se colocaban en los tubos, y por capilaridad, el antisuero ascendió hasta
la altura óptima.
Como parte de la estandarización de la prueba de precipitina se incubó a
temperatura ambiente por 1, 2, 3 horas así como a 37º C por 1, 2, y 3 horas se
seleccionó la incubación a 37º por una hora, ya que se observo un buen anillo
blanquecino en el centro de los tubos controles positivos.
Es importante tener en cuenta el título adecuado del antisuero precipitante para
la realización de la prueba, y que en este trabajo hemos elegido 1:10 000 o
más (14). Un alto título del antisuero nos asegura una alta sensibilidad de la
prueba, sin embargo es importante también la especificidad para no tener
reacciones cruzadas (falsos positivos). La especificidad estuvo dada cuando
los antisueros no reaccionaron con los sueros no correspondientes en la
dilución 1:10 y 1:100 (Casanova, comunicación personal). Una vez realizada la
absorción de los antisueros estos se titularon nuevamente obteniendo títulos
óptimos para realizar la prueba de precipitina (Tabla 3).
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Es importante tener en cuenta para la realización de esta prueba, la cantidad
de muestra impregnada, ya que de esto también dependerá la sensibilidad de
la prueba. En aquellos triatominos sometidos a ayunos prolongados, las
manchas impregndas eran escasa y por tanto incoloras, de tal manera queno
se pudo identificar la fuente de alimentación.
La sensibilidad y especificidad de la prueba fue evaluada en triatominos
alimentados con sangre de humano, canino y cobayo a los 7, 14, 21 y 28 días
obteniendo una especificidad del 100% en todos los intervalos de tiempo
evaluados, mientras que la sensibilidad no es constante en los intervalos de
tiempo evaluados, lo cual concuerda con otros trabajos reportados (11) que
señalan la variación de la sensibilidad según el tiempo en que se realiza la
prueba.
Aplicación de la Prueba de Precipitina en Panstrongylus herreri
procedentes de la localidad de Cajaruro, provincia de Utcubamba. Entre
los insectos reactivos (93 individuos), resultaron mas frecuentes las
identificaciones sobre una fuente de alimentación (77 insectos) predominando
la alimentación sobre cobayo (46,7%), seguida de humano (23,3%). Este
resultado era de esperarse ya que en casi todas las viviendas escogidas para
la captura de triatominos, hubo presencia de cobayos tanto en la cocina como
en el dormitorio.
El hecho de obtener 17 triatominos con alimentación múltiple nos estaría
indicando la movilidad que tienen estos insectos y al aprovechamiento de
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varias fuentes de alimentación disponibles en las viviendas, ya que muchas de
estas tienes mas de 4 tipos de animales domésticos diferentes.
Las aves que resultaron terceras en frecuencia de identificación (18,3%) fueron
los pollos muy abundantes en estas viviendas y relacionadas con los
triatominos quienes se encuentran ubicados principalmente en las grietas de
las paredes de adobe.
Se detecto en las ninfas de cuarto y quinto estadios y en los adultos la
presencia de hemoproteínas humanas, no así en los estadios evolutivos más
tempranos. Esto podría relacionarse a la mayor movilidad de los adultos y a
una mayor agresividad alimentaria en las ninfas grandes, que colonizan la
cocina, el dormitorio, los corrales (17).
El hecho de que 17% de los insectos examinados dieran resultados negativos
por esta prueba de precipitina, ilustras las probables condiciones de ayuno en
que pudieron estar sometidos estos triatominos y que fue avalado por la
observación del abdomen comprimido y contenidos intestinal escaso e incoloro.
El alto índice de infección a T. cruzi por parte de P. herreri, estuvo relacionado
a la fuente de alimentación por cobayo, quien estaría contribuyendo a la
presencia del vector en estas viviendas y además estaría comportándose
como un posible reservorio del parásito en el interior de las viviendas de la
localidad de Cajaruro.
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El alto índice de infección relacionado a la fuente de identificación humana
encontrada, nos estaría indicando una alta antropofilia y gran capacidad
vectorial de P. herreri, existiendo como un peligro latente en la transmisión del
Trypanosoma cruzi, agente etiológico de la Enfermedad de Chagas.
Adaptación de colonias al laboratorio. La frecuencia alimentaria fue una vez
por mes lo cual influyo en el desarrollo del ciclo biológico, ya que
aproximadamente tardaron 1 año en llegar a adultos.
La eclosión de la F1 fue cerca del 60% (70/123), mientras que de la F2 fue del
81% (122/150), esto debido a que la frecuencia alimentaria de los adultos F1
fue de dos veces al mes.
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BIBLIOGRAFIA
1. Andrade JCR, Rocha e Silva EO, Souza JMP. Comparacao entre duas
técnicas serologicas aplicadas ao estudo do sangue ingerido por
triatominos. Rev Saúde Publ Sao Paulo 1975; 9: 534-545.
2. Burkot TR, Goodman WG, Foliart GR. Identification of mosquito blood
meals by enzyme-linked inmunosorbent assay. Am J Trop Med Hyg
1981; 30: 1336-1441.
3. Calderón-Arguedas O, Chinchilla M, García F, Vargas M. Preferencias
alimentarias de Triatoma dimidiata (Hemíptera: Reduviidae) procedentes
de la meseta central de Costa Rica a fianles del siglo XX. Parasitol día
2001; 25: 3-4.
4. Correa RR & Aguilar AA. O teste de precipitina na identificao da fonte
alimentar do Triatoma infestans. (Hemíptera Reduviidae). Arq Hyg
Saúde pub 1952; 17: 3-7.
5. Cuba Cuba CA, Abad-Franch F, Roldán J, Vargas F, Pollack L, A Miles
M. The triatomines of northern Peru, with emphasis on the ecology and
infection by trypanosomes of Rhodnius ecuadoriensis (Triatominae).
Mem Inst Oswaldo Cruz 2002; 97: 175-183.
IDENTIFICACIÓN DE FUENTES DE ALIMENTACION E INFECCIÓN POR TRYPANOSOMA CRUZI EN PANSTRONGYLUS HERRERI EN UTCUBAMBA , AMAZONAS - PERÚ
6. Carneiro SP, Lorosa ES, Silva DC, Carneiro AL, Montes TC. Fontes
alimentares de Triatoma pseudomaculata no Estado do Ceará, Brasil.
Rev Saude Pública 2005; 39: 27-32.
7. Fuentes AR, Marzochi MCA, Sabroza P CH, Silva VL & Batista M. Perfil
de alimentacao do Triatoma brasiliensis capturados em abrigo de cabras
no municipio de Saco Sebastiao do Umbuzeiro Paraíba. Mem Inst
Oswaldo Cruz 1988; 83 (Suppl I): 197.
8. García-Zapata MTA, Soares VA & Marsden PD. Aspectos evolutivos da
fonte alimentar dos triatominos capturados en area sob controle da
doenca de chagas, Manabí-Go. Mem Inst Oswaldo Cruz 1992; 87 (suppl.
II): 220.
9. Guillén Z, Cáceres I, Elliot A, Ramírez J. Triatominos del norte peruano y
su importancia como vectores de Tripanosoma spp. Rev Per Entomol
1989; l 31: 25-30.
10.Guillén Z, Cáceres I, Elliot A, Ramírez J. Distribución geográfica de los
Triatominos en el oriente del Perú. Rev Per Med Trop UNMSM 1992; 6:
93-97.
11.Gomes AM, Duarte R, Lima D, Sansón D, Serrao M, Labarthe N.
Comparison between precipitin and ELISA tests in the bloodmeal
detection of Aedes aegypti (Linnaeus) and Aedes fluviatilis (Lutz)
mosquitoes experimentally fed on feline, canine and human host. Mem
Inst Oswaldo Cruz 2001; 96: 693-695.
IDENTIFICACIÓN DE FUENTES DE ALIMENTACION E INFECCIÓN POR TRYPANOSOMA CRUZI EN PANSTRONGYLUS HERRERI EN UTCUBAMBA , AMAZONAS - PERÚ
12.Herrer A. Trypanosomiasis Americana en el Perú V. Triatominos del
Valle interandino del Marañon. Rev Med Exp Lima 1955; 9: 69-81.
13.Lorosa ES, Pinto M, Cunha V, Lent H, Jurber J. Foco de Doenca de
Chagas em Arcádia, Estado do Río de Janeiro, Brasil. Mem Inst
Oswaldo Cruz 2003; 98: 885-887.
14.Lorosa ES, Andrade RE, Pujol JR, Jurberg J, Carcavallo RU.
Determinacao das fontes alimentares e da infeccao natural do Triatoma
jurbergi (Carcavallo, Galvao & Lent, 1998) Triatoma vandae Carcavallo,
Jurberg, Rocha, Galvao, Noireau & Lent, 2001 capturados no estado do
mato Grosso, Brasil. Rev bras Zoociencias 2003; 5: 253-265.
15.Marcondes CB, Dias JCP, Guedes LA, Ferraz Filho AN, Rodrigues
VLCC, Mendonica DD. Estudo epidemiologico de fontes de alimentacao
dos triatominos de fazenda aroeira (catolé de Rocha, Paraíba) o
circunvizinhancas. Rev Soc Bras Med Trop 1991; 24: 137-140.
16.Solís H, Carvalho E, Ferreria C, Casanova C, Huamán A, Mendoza V.
Contribución al estudio de la epidemiología de la enfermedad de Chagas
en tre localidades de la zona sur del Perú. Anales de la Facultad de
Medicina UNMSM 2003; 64: 223-227.
17.Salvatella R, Calegari L, Puime A, Basmadjian Y, Rosa R, Guerrero J,
Martínez M, Mendaro G, Briazo D, Montero C, Wisnivesky C. Perfil
alimentario de Triatoma rubrovaria (Blanchard, 1834) (Hemiptera,
Triatominae) en ámbitos peridomiciliarios, de una localidad rural de
Uruguay. Rev Inst Med trop Sao Paulo. 1994; 36: 311-320.
IDENTIFICACIÓN DE FUENTES DE ALIMENTACION E INFECCIÓN POR TRYPANOSOMA CRUZI EN PANSTRONGYLUS HERRERI EN UTCUBAMBA , AMAZONAS - PERÚ
18.Siqueira AF. Estudos sobre a reacao de precipitina aplicada a identificao
do sangue ingerido por triatomineos. Rev Inst Med Trop Sao Paulo 1960;
2: 41-53.
19.Wisnivesky-Colli C, Frey C, Solara N. Detection of host proteins in the
intestine of Triatoma infestans by agar double diffusion tests. Rev Inst
Med Trop Sao Paulo 1980; 22: 118-123.
IDENTIFICACIÓN DE FUENTES DE ALIMENTACION E INFECCIÓN POR TRYPANOSOMA CRUZI EN PANSTRONGYLUS HERRERI EN UTCUBAMBA , AMAZONAS - PERÚ
Tabla 1. Título de los anti-sueros precipitantes
ANTISUEROS TITULO
Anti- humano 1: 25 000
Anti- canino 1: 15 000
Anti- gato 1:10 000
Anti- cobayo 1:10 000
Anti- pollo 1: 15 000
Tabla 2. Sensibilidad de la prueba de precipitina, en ninfas III, IV y V de T.
infestans alimentadas en el laboratorio con sangre: humano, canino y cobayo
SENSIBILIDAD DE LA PRUEBA DE PRECIPITINA (%)
Tiempo después de la alimentación (días)
Antisuero 7 d 14 d 21 d 28 d
Humano 100% 100% 80% 90%
Canino 100% 100% 100% 90%
Cobayo 100% 90% 100% 70%
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Tabla 3. Especificidad de la prueba de precipitina, en ninfas III, IV y V de
T. infestans alimentadas en el laboratorio con sangre humano, canino y cobayo
ESPECIFICIDAD DE LA PRUEBA DE PRECIPITINA (%)
Tiempo después de la alimentación (días)
Antisuero 7 d 14 d 21 d 28 d
Humano 100% 100% 100% 100%
Canino 100% 100% 100% 100%
Cobayo 100% 100% 100% 100%
Tabla 4. Número de Ejemplares de P. herreri, por estadio evolutivo, examinados
por la prueba de precipitina, según el número de fuentes alimentarias, 2004
N1 N2 N3 N4 N5 M H TOTAL
Ejemplares examinados - 4 11 10 2 35 31 93
Ejemplares con fuente identificada - 4 9 10 2 30 22 77
Ejemplares con una sola fuente
identificada- 4 7 6 - 25 18 60
Ejemplares con varias fuentes
identificadas- - 2 4 2 5 4 17
N1: Ninfa 1; N2: Ninfa 2; N3: Ninfa 3; N4: Ninfa 4; N5: Ninfa 5; M: Macho; H:
Hembra
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Tabla 5. Ejemplares de P. herreri con alimentación única. 2004
Fuente Alimentaria Nº de especimenes (%)
Humano 14 23,3
Canino 6 10
Gato 1 1,7
Cobayo 28 46,7
Pollo 11 18,3
TOTAL 60 100
Tabla 6. Índice de fuentes alimentarias de P. herreri, capturados en
intradomicilios (Cajaruro, Utcubamba, Amazonas, 2004)
Fuentes alimentarias Nº de especimenes (%)
Humano 14 18,2
Canino 6 7,8
Gato 1 1,3
Cobayo 28 36,3
Ave 11 14,3
Humano/Cobayo 4 5,2
Humano/Pollo 1 1,3
Canino/Cobayo 2 2,6
Gato/Cobayo 3 3,9
Cobayo/Pollo 5 6,5
Humano/Cobayo/Pollo 1 1,3
Humano/Canino/Cobayo 1 1,3
TOTAL 77 100
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Tabla 7. Índice de infestación de P. herreri, según fuente alimentaria.
(Cajaruro, Utcubamba, Amazonas, 2004)
Fuentes alimentarias Nº de ejemplaresPositivo para
T. cruzi %
Humano 4 4,3
Canino 3 3,2
Gato 1 1,1
Cobayo 22 23,6
Ave 6 6,4
Humano/Cobayo 2 2,2
Canino/Cobayo 2 2,2
Cobayo/Pollo 5 5,4
Gato/Cobayo 3 3,2
Humano/Canino/Cobayo 1 1,1
Otros 9 9,7
TOTAL 58/93 62,4