![Page 1: Estudios experimentales para terapia celular en mmc](https://reader035.vdocumento.com/reader035/viewer/2022062420/55c0009ebb61eb35748b45fd/html5/thumbnails/1.jpg)
Estudios experimentales para la espina bífida:
¿es posible la terapia celular? Dr. Fernando de Miguel PedreroLaboratorio de Terapia Celular
Instituto de Investigación Hospital La Paz
VII JORNADAS DE AMEB
![Page 2: Estudios experimentales para terapia celular en mmc](https://reader035.vdocumento.com/reader035/viewer/2022062420/55c0009ebb61eb35748b45fd/html5/thumbnails/2.jpg)
Colaboración Cirugía Pediátrica- Lab. Terapia Celular
![Page 3: Estudios experimentales para terapia celular en mmc](https://reader035.vdocumento.com/reader035/viewer/2022062420/55c0009ebb61eb35748b45fd/html5/thumbnails/3.jpg)
![Page 4: Estudios experimentales para terapia celular en mmc](https://reader035.vdocumento.com/reader035/viewer/2022062420/55c0009ebb61eb35748b45fd/html5/thumbnails/4.jpg)
Origen EB: Defecto de cierre del tubo neural en la 3ª semana de gestación
![Page 5: Estudios experimentales para terapia celular en mmc](https://reader035.vdocumento.com/reader035/viewer/2022062420/55c0009ebb61eb35748b45fd/html5/thumbnails/5.jpg)
¿Qué hacer?
Cirugía, rehabilitación…
![Page 6: Estudios experimentales para terapia celular en mmc](https://reader035.vdocumento.com/reader035/viewer/2022062420/55c0009ebb61eb35748b45fd/html5/thumbnails/6.jpg)
Modelos experimentales de MMC
• Teratogénicos (ácido retinoico en ratas)• Quirúrgicos (lesión lumbar en ovejas,
conejos)
![Page 7: Estudios experimentales para terapia celular en mmc](https://reader035.vdocumento.com/reader035/viewer/2022062420/55c0009ebb61eb35748b45fd/html5/thumbnails/7.jpg)
Ácido retinoico en rata
• Ratas preñadas a día g10• 60-100 mg/kg ácido retinoico en aceite de oliva p.o.• Cesárea a día g15-g21
ControlControl +AR +AR +AR
![Page 8: Estudios experimentales para terapia celular en mmc](https://reader035.vdocumento.com/reader035/viewer/2022062420/55c0009ebb61eb35748b45fd/html5/thumbnails/8.jpg)
Ácido retinoico en rataAnomalías esqueléticas
Control+AR
![Page 9: Estudios experimentales para terapia celular en mmc](https://reader035.vdocumento.com/reader035/viewer/2022062420/55c0009ebb61eb35748b45fd/html5/thumbnails/9.jpg)
Ácido retinoico en rataAnomalías medulares y vertebrales
Control, H/E, 10x +AR, H/E, 20x
![Page 10: Estudios experimentales para terapia celular en mmc](https://reader035.vdocumento.com/reader035/viewer/2022062420/55c0009ebb61eb35748b45fd/html5/thumbnails/10.jpg)
Ácido retinoico en rataAnomalías celulares
Iba-1 (microglía), 20x y 63x
![Page 11: Estudios experimentales para terapia celular en mmc](https://reader035.vdocumento.com/reader035/viewer/2022062420/55c0009ebb61eb35748b45fd/html5/thumbnails/11.jpg)
Ácido retinoico en rataAnomalías por MRI
![Page 12: Estudios experimentales para terapia celular en mmc](https://reader035.vdocumento.com/reader035/viewer/2022062420/55c0009ebb61eb35748b45fd/html5/thumbnails/12.jpg)
Ácido retinoico en rataFuncionalidad vesical
![Page 13: Estudios experimentales para terapia celular en mmc](https://reader035.vdocumento.com/reader035/viewer/2022062420/55c0009ebb61eb35748b45fd/html5/thumbnails/13.jpg)
Modelo quirúrgico en oveja
Meuli M. et al. Nature Medicine 1:342-347, 1995Meuli M. et al. J Pediatr Surg 30:1028-1033, 1995
• Lesión a día g75• Cesárea a día g135
![Page 14: Estudios experimentales para terapia celular en mmc](https://reader035.vdocumento.com/reader035/viewer/2022062420/55c0009ebb61eb35748b45fd/html5/thumbnails/14.jpg)
Modelo quirúrgico en oveja
Meuli M. et al. Nature Medicine 1:342-347, 1995Meuli M. et al. J Pediatr Surg 30:1028-1033, 1995
![Page 15: Estudios experimentales para terapia celular en mmc](https://reader035.vdocumento.com/reader035/viewer/2022062420/55c0009ebb61eb35748b45fd/html5/thumbnails/15.jpg)
Modelo quirúrgico en oveja
![Page 16: Estudios experimentales para terapia celular en mmc](https://reader035.vdocumento.com/reader035/viewer/2022062420/55c0009ebb61eb35748b45fd/html5/thumbnails/16.jpg)
Modelo quirúrgico en ovejaAnomalías cerebrales
Encinas JL. et al. Pediatr Surg Int (2008) 24:1335-1340 Encinas JL. et al. J Pediatr Surg (2011) 46:713-722
![Page 17: Estudios experimentales para terapia celular en mmc](https://reader035.vdocumento.com/reader035/viewer/2022062420/55c0009ebb61eb35748b45fd/html5/thumbnails/17.jpg)
Modelo quirúrgico en ovejaAnomalías vesicales
Bladder thickness
0
50
100
150
200
Control Non-selfclosure
Non-selfclosure
Correctivesurgery
mic *
Encinas JL. et al. Cir Pediatr (2010) 23:122-125
![Page 18: Estudios experimentales para terapia celular en mmc](https://reader035.vdocumento.com/reader035/viewer/2022062420/55c0009ebb61eb35748b45fd/html5/thumbnails/18.jpg)
Qué es Terapia Celular
• Administración de productos biológicos que contengan células para el tratamiento de enfermedades o servir de apoyo a otras terapias
![Page 19: Estudios experimentales para terapia celular en mmc](https://reader035.vdocumento.com/reader035/viewer/2022062420/55c0009ebb61eb35748b45fd/html5/thumbnails/19.jpg)
Qué es Terapia Celular
• Directiva Europea 2001/83/CE sobre medicamentos de uso humano, modificada por Directiva 2009/120/CE sobre medicamentos de Terapia Avanzada
• Reglamento 1394/2007 del Parlamento sobre medicamentos de Terapias Avanzadas
• Transposición a la legislación española (Orden SAS/1144/2010 de 3 de mayo que modifica el Anexo I del RD 1345/2007 de 11 de octubre)
![Page 20: Estudios experimentales para terapia celular en mmc](https://reader035.vdocumento.com/reader035/viewer/2022062420/55c0009ebb61eb35748b45fd/html5/thumbnails/20.jpg)
Material para Terapia Celular
• Qué células se pueden usar
– diferenciadas (Paracelso, s XVI: “igual cura igual”)
– indiferenciadas/pluripotentes= madre/troncales• Embrionarias• Adultas• Pluripotentes inducidas (iPS)
![Page 21: Estudios experimentales para terapia celular en mmc](https://reader035.vdocumento.com/reader035/viewer/2022062420/55c0009ebb61eb35748b45fd/html5/thumbnails/21.jpg)
Células madre embrionarias
Dr. J.A. Thomson1998
![Page 22: Estudios experimentales para terapia celular en mmc](https://reader035.vdocumento.com/reader035/viewer/2022062420/55c0009ebb61eb35748b45fd/html5/thumbnails/22.jpg)
Células iPS
Dr. S. Yamanaka Dr. J.A. Thomson
2007
2012
![Page 23: Estudios experimentales para terapia celular en mmc](https://reader035.vdocumento.com/reader035/viewer/2022062420/55c0009ebb61eb35748b45fd/html5/thumbnails/23.jpg)
Células madre adultas
1970s
1990s
![Page 24: Estudios experimentales para terapia celular en mmc](https://reader035.vdocumento.com/reader035/viewer/2022062420/55c0009ebb61eb35748b45fd/html5/thumbnails/24.jpg)
Células madre de médula ósea
![Page 25: Estudios experimentales para terapia celular en mmc](https://reader035.vdocumento.com/reader035/viewer/2022062420/55c0009ebb61eb35748b45fd/html5/thumbnails/25.jpg)
Células madre mesenquimales
• Médula ósea, tejido adiposo, líquido amniótico, cordón umbilical– Crecimiento en colonias fibroblastoides– Mismos marcadores citometría– Diferenciación osteogénica, adipogénica, condrogénica
osteoRojo alizarina
adipoOil Red O
condroAzul alcian
![Page 26: Estudios experimentales para terapia celular en mmc](https://reader035.vdocumento.com/reader035/viewer/2022062420/55c0009ebb61eb35748b45fd/html5/thumbnails/26.jpg)
Ensayos clínicos de Terapia Celular
• Más de 100.000 ensayos clínicos reconocidos que se desarrollan en más de 150 países distintos
• En diferentes etapas de desarrollo (fase I/II/III), constan unos 3.000 EECC de terapia experimental con células progenitoras: la mayoría emplean células adultas de diversos orígenes, 5 se basan en células embrionarias diferenciadas (uno a oligodendrocitos)
• 1 en Japón con células iPS diferenciadas (epitelio retina)
• Uso autólogo (mayoritario), y uso alogénico
![Page 27: Estudios experimentales para terapia celular en mmc](https://reader035.vdocumento.com/reader035/viewer/2022062420/55c0009ebb61eb35748b45fd/html5/thumbnails/27.jpg)
Terapia Celular para reparación del SN
• Diferenciación (neuronas, glía, oligodendrocitos)• Apoyo trófico• Detener procesos degenerativos y/o inflamatorios• Facilitar crecimiento axonal• Facilitar función glial• Secreción neurotransmisores
![Page 28: Estudios experimentales para terapia celular en mmc](https://reader035.vdocumento.com/reader035/viewer/2022062420/55c0009ebb61eb35748b45fd/html5/thumbnails/28.jpg)
Terapia Celular para reparación del SN
Motoneuronas: rhodamina (rojo)HSC: GFP (verde)
![Page 29: Estudios experimentales para terapia celular en mmc](https://reader035.vdocumento.com/reader035/viewer/2022062420/55c0009ebb61eb35748b45fd/html5/thumbnails/29.jpg)
Terapia Celular para reparación del SN
![Page 30: Estudios experimentales para terapia celular en mmc](https://reader035.vdocumento.com/reader035/viewer/2022062420/55c0009ebb61eb35748b45fd/html5/thumbnails/30.jpg)
Terapia Celular para reparación del SN
![Page 31: Estudios experimentales para terapia celular en mmc](https://reader035.vdocumento.com/reader035/viewer/2022062420/55c0009ebb61eb35748b45fd/html5/thumbnails/31.jpg)
ASC para MMC: factores neurotróficos
hASC tratadas con medio de diferenciación neural
![Page 32: Estudios experimentales para terapia celular en mmc](https://reader035.vdocumento.com/reader035/viewer/2022062420/55c0009ebb61eb35748b45fd/html5/thumbnails/32.jpg)
Terapia celular en MMC
GDNF BDNFX-gal BrdU/nestin
![Page 33: Estudios experimentales para terapia celular en mmc](https://reader035.vdocumento.com/reader035/viewer/2022062420/55c0009ebb61eb35748b45fd/html5/thumbnails/33.jpg)
Terapia Celular para MMCDiseño experimental en oveja
Ovejas preñadas (n=70)
Datación ecográfica
Cirugía defecto lumbar (MMC) (n=60)Inyección FluoroGold
d75g
Control sano (n=10)Inyección FluoroGold
Reparación ITissucol (n=20)
Reparación IITissucol+ASC (n=20)
Controlno reparado (n=20)
d100g
Parto
d150g
• Evaluación física• Manometría ano-rectal• Contractilidad vejiga• Histología cerebro, médula, ano-recto, vejiga
![Page 34: Estudios experimentales para terapia celular en mmc](https://reader035.vdocumento.com/reader035/viewer/2022062420/55c0009ebb61eb35748b45fd/html5/thumbnails/34.jpg)
Terapia Celular para MMC en oveja
![Page 35: Estudios experimentales para terapia celular en mmc](https://reader035.vdocumento.com/reader035/viewer/2022062420/55c0009ebb61eb35748b45fd/html5/thumbnails/35.jpg)
Terapia Celular para MMC en oveja
ASC en tissucol (H/E, 40x)
Piel a término (d140)
Médula lumbar a término (d140) (H/E, 20x)
![Page 36: Estudios experimentales para terapia celular en mmc](https://reader035.vdocumento.com/reader035/viewer/2022062420/55c0009ebb61eb35748b45fd/html5/thumbnails/36.jpg)
MMC en feto de ovejaCirugía con Membranas PLLA
Colaboración con Dra. D. Farmer, UCSF
![Page 37: Estudios experimentales para terapia celular en mmc](https://reader035.vdocumento.com/reader035/viewer/2022062420/55c0009ebb61eb35748b45fd/html5/thumbnails/37.jpg)
Terapia Celular para MMC en rata
100 µm
100 µm
rASC-GFP
Filtro policaprolactona(3.5 mm x 1.5 mm)
![Page 38: Estudios experimentales para terapia celular en mmc](https://reader035.vdocumento.com/reader035/viewer/2022062420/55c0009ebb61eb35748b45fd/html5/thumbnails/38.jpg)
Terapia Celular para MMC en rata
![Page 39: Estudios experimentales para terapia celular en mmc](https://reader035.vdocumento.com/reader035/viewer/2022062420/55c0009ebb61eb35748b45fd/html5/thumbnails/39.jpg)
Terapia Celular para MMC en rata
![Page 40: Estudios experimentales para terapia celular en mmc](https://reader035.vdocumento.com/reader035/viewer/2022062420/55c0009ebb61eb35748b45fd/html5/thumbnails/40.jpg)
Terapia Celular para MMC en rata
![Page 41: Estudios experimentales para terapia celular en mmc](https://reader035.vdocumento.com/reader035/viewer/2022062420/55c0009ebb61eb35748b45fd/html5/thumbnails/41.jpg)
Terapia Celular para MMC en rata
![Page 42: Estudios experimentales para terapia celular en mmc](https://reader035.vdocumento.com/reader035/viewer/2022062420/55c0009ebb61eb35748b45fd/html5/thumbnails/42.jpg)
Terapia Celular para MMC en rata
![Page 43: Estudios experimentales para terapia celular en mmc](https://reader035.vdocumento.com/reader035/viewer/2022062420/55c0009ebb61eb35748b45fd/html5/thumbnails/43.jpg)
Terapia Celular para MMC en oveja
![Page 44: Estudios experimentales para terapia celular en mmc](https://reader035.vdocumento.com/reader035/viewer/2022062420/55c0009ebb61eb35748b45fd/html5/thumbnails/44.jpg)
Colaborar para competir
Grupo 41. Terapia Celular y Genometástasis
Grupo 38. Cirugía de Malformaciones Congénitas
Fundación para Investigación en Urología-AEU