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ESTUDIOS EN MATERIA FECAL EN EL DIAGNÓSTICO
DIFERENCIAL DE LA DIARREA• ELECTROLITOS Y OSMOLARIDAD
– GAP OSMOLAR• ESTUDIOS DE PÉRDIDAS DE NUTRIENTES:
– GRASAS – PROTEÍNAS– HIDRATOS DE CARBONO
• MARCADORES (SURROGATE MARKERS) – DE LA FUNCIÓN PANCREÁTICA EXÓCRINA– DEL ESTADO INFLAMATORIO DE LA MUCOSA
INTESTINAL
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ESTUDIOS EN MATERIA FECAL EN EL DIAGNÓSTICO
DIFERENCIAL DE LA DIARREA• INGESTA + SECRECION INTESTINAL= 7 LITROS• 5 LITROS ABSORBIDOS POR ID• 1.5 LITROS ABSORBIDOS POR EL COLON• AGUA FECAL 100-250 ml• UNA DISMINUCIÓN DEL 10% EN LA ABSORCIÓN
COLÓNICA DUPLICA EL VOLUMEN FECAL
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GAP OSMOLAR EN EL DIAGNÓSTICO DIFERENCIAL
DE LA DIARREA
• GAP OSMOLAR: 290 – 2x (Na+K):
• >125 DIARREA OSMÓTICA• <50 DIARREA SECRETORA
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EVALUACIÓN BIOQUÍMICA DE LOS SINDROMES
MALABSORTIVOS• CUANTIFICACIÓN DE LAS
PÉRDIDAS DE NUTRIENTES
GRASAS FECALESPROTEÍNASHIDRATOS DE CARBONO
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EL PROBLEMA PRE-ANALÍTICO EN EL LABORATORIO PEDIÁTRICO
• CAUSAS DE ERROR EN EL LABORATORIO
• INDICACIONES• RECOLECCIÓN AL AZAR• RECOLECCIÓN CONTROLADA• EL PAÑAL
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EVALUACIÓN BIOQUÍMICA DE LOS SINDROMES
MALABSORTIVOS• CUANTIFICACIÓN DE LAS PÉRDIDAS
DE NUTRIENTESGRASAS FECALES:
• VAN DE KAMER• ESTEATOCRITO
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DIGESTION Y ABSORCIÓN DE LOS LIPIDOS DE LA
DIETA• HIDROLISIS ENZIMATICA• TRANSPORTE DEL LUMEN AL INTERIOR
DE LA CELULA• RESINTESIS DE LOS TRIGLICERIDOS• SALIDA A LA LAMINA PROPIA• INGRESO A LOS CAPILARES LINFATICOS• TRANSPORTE Y DISTRIBUCIÓN
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TRASTORNOS DIGESTIVOS QUE CONDUCEN A LA
ESTEATORREA
FASE LUMINAL• LIPASA
• COLIPASA MALDIGESTION• MICELA MIXTA • SALES BILIARES
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Sales biliaresLipidosemulsionados
LipasaColipasa
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TRASTORNOS DIGESTIVOS QUE CONDUCEN A LA
ESTEATORREA• FASE LUMINAL: MALDIGESTIÓN• PANCREATITIS CRONICA• FIBROSIS QUISTICA• OBSTRUCCIÓN DE LAS VB• DEFICIT DE COLIPASA• SOBREDESARROLLO BACTERIANO• pH INADECUADO: Z. ELLISON
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TRASTORNOS DIGESTIVOS QUE CONDUCEN A LA ESTEATORREA
FASE DE ABSORCIÓN CELULARSINDROMES DE MALABSORCIÓN• DESNUTRICIÓN• GIARDIASIS• ENFERMEDAD CELIACA• ENTEROPATÍA AUTOINMUNE• ABETALIPOPROTEINEMIA
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TRASTORNOS DIGESTIVOS QUE CONDUCEN A LA ESTEATORREA
FASE DE TRANSPORTE LINFATICO
• LINFANGIECTASIA INTESTINAL• INFILTRACIÓN NEOPLÁSICA
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LINFANGIECTASIA INTESTINAL
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COMPOSICIÓN DE LOS LÍPIDOS FECALES
• TRIGLICÉRIDOS• MONO Y DIGLICÉRIDOS• ÁCIDOS GRASOS DE CADENA
LARGA, MEDIANA Y CORTA• OTROS LÍPIDOS (ESTEROLES,
FOSFOLÍPIDOS)
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METODOLOGÍAS DE ESTUDIOPRUEBA DE VAN DE KAMER
ESTEATOCRITO ÁCIDO• VAN DE KAMER MIDE TODAS LAS
GRASA EXCRETADAS : GRASAS NEUTRAS Y ÁCIDOS GRASOS
• ESTEATOCRITO MIDE PRINCIPALMENTE LAS GRASAS NEUTRAS
• MICROSCOPÍA SEMICUANTITATIVA
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ESTEATOCRITO ÁCIDO
• HOMOGEINIZACIÓN• DILUCIÓN ADECUADA• CENTRIFUGACIÓN SUPERIOR A
10.000 RPM• LECTURA MICROMÉTRICA
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ESTEATOCRITO ÁCIDO
• VALORES DE REFERENCIA
• RECIÉN NACIDO MENOR DE 15 DÍAS HASTA 12%
• NIÑO MAYOR HASTA 5%• ADULTO HASTA 8%
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INSUFICIENCIA PANCREÁTICA CRÓNICAQUIMOTRIPSINA FECAL
• METODO CROMOGÉNICO EN VÍAS DE EXTINCIÓN
• VALORES DE REFERENCIA• RN MENORES DE 7 DÍAS:
3.0 -6.0 UNID/g• NIÑOS MAYORES Y ADULTOS MAS
DE 6.0 UNID/g
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INSUFICIENCIA PANCREÁTICA CRÓNICA
ELASTASA INMUNO REACTIVA FECAL
• METODO INMUNOENZIMÁTICO• VALORES DE REFERENCIA:• NORMAL MÁS DE 200 U/g MF• INSUFICIENCIA PANCREÁTICA
MODERADA: MENOS DE 200 U/g MF• INSUFICIENCIA PANCREÁTICA SEVERA:
MENOS DE 100 U/g MF
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EVALUACIÓN BIOQUÍMICA DE LOS SINDROMES
MALABSORTIVOS
CUANTIFICACIÓN DE LAS PÉRDIDAS DE NUTRIENTES:
• ENTEROPATÍA PERDEDORA DE PROTEÍNAS
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ENTEROPATIAS PERDEDORAS DE PROTEINAS
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ENTEROPATÍA PERDEDORA DE PROTEINAS
• ES LA TRASLOCACIÓN IRREVERSIBLE DE PROTEÍNAS ENDÓGENAS DEL COMPARTIMENTO VASCULAR HACIA LA LUZ DEL APARATO DIGESTIVO
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ENTEROPATIAS PERDEDORAS DE PROTEINAS:
MECANISMOS• Por trastornos metabólicos, neoplásicos
o inmunológicos del epitelio• Por pasaje a través de la mucosa
ulcerada• Por trastornos anatómicos vasculares o
linfáticos• Por incremento de la presión linfática
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ENTEROPATÍA PERDEDORA DE PROTEINAS:
PATOLOGÍAS ASOCIADAS
• ENFERMEDAD CELIACA• ENFERMEDAD INFLAMATORIA INTESTINAL• LINFANGIECTASIA INTESTINAL• PERICARDITIS CONSTRICTIVA• ENFERMEDAD DE MENETRIER• ADENOMA VELLOSO DE COLON• PARASITOSIS• INTOLERANCIA A LA PROTEINA DE LA LECHE DE VACA• INFECCIÓN BACTERIANA ENTEROINVASIVA• CITOMEGALOVIRUS• LUPUS ERITEMATOSO SISTEMICO
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α-1 ANTITRIPSINAPM 47.000
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COMPLEJO PROTEASA INHIBIDOR
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DIAGNÓSTICO DE ENTEROPATÍA PERDEDORA DE PROTEINAS EN NIÑOS CON EL CLEARANCE INTESTINAL DE
ALFA-1 ANTITRIPSINA
Heffes Nahmod LA, Litwin N, Guastavino E.
Fecal alpha 1-antitrypsin clearance in protein-losing enteropathies in pediatricsActa Gastroenterol Latinoam. 1987;17(2):97-103
![Page 32: ESTUDIOS EN MATERIA FECAL EN EL DIAGNÓSTICO … · estudios en materia fecal en el diagnÓstico diferencial de la diarrea • ingesta + secrecion intestinal= 7 litros • 5 litros](https://reader033.vdocumento.com/reader033/viewer/2022041807/5e55546045e7802103373819/html5/thumbnails/32.jpg)
![Page 33: ESTUDIOS EN MATERIA FECAL EN EL DIAGNÓSTICO … · estudios en materia fecal en el diagnÓstico diferencial de la diarrea • ingesta + secrecion intestinal= 7 litros • 5 litros](https://reader033.vdocumento.com/reader033/viewer/2022041807/5e55546045e7802103373819/html5/thumbnails/33.jpg)
ENFERMEDAD INFLAMATORIA INTESTINAL
![Page 34: ESTUDIOS EN MATERIA FECAL EN EL DIAGNÓSTICO … · estudios en materia fecal en el diagnÓstico diferencial de la diarrea • ingesta + secrecion intestinal= 7 litros • 5 litros](https://reader033.vdocumento.com/reader033/viewer/2022041807/5e55546045e7802103373819/html5/thumbnails/34.jpg)
NEUTRÓFILO, ANTICUERPOS Y COLITIS
ULCEROSA
![Page 35: ESTUDIOS EN MATERIA FECAL EN EL DIAGNÓSTICO … · estudios en materia fecal en el diagnÓstico diferencial de la diarrea • ingesta + secrecion intestinal= 7 litros • 5 litros](https://reader033.vdocumento.com/reader033/viewer/2022041807/5e55546045e7802103373819/html5/thumbnails/35.jpg)
VASCULITIS SISTÉMICAS Y ANTICUERPOS ANTI-CITOPLASMA
DEL NEUTRÓFILO (ANCA)
• GRANULOMATOSIS DE WEGENER• GLOMERULONEFRITIS PROGRESIVA
NECROTIZANTE• POLIANGEITIS MICROSCÓPICA• S. DE CHURG-STRAUSS• TITULO RELACIONADO AL TRATAMIENTO• LOS ANCA TIENEN UN ROL EN LA
PATOGÉNESIS DE LA ENFERMEDAD
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NEUTROFILO:BLANCO DE LOS ANCA
• GRANULOS AZURÓFILOS:– MIELO PEROXIDASA– PROTEINASA 3– CATEPSINA G– ENOLASA– LACTOFERRINA– BPI
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c-ANCA
• BLANCO PRINCIPAL:PROTEINASA 3
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c-ANCA
![Page 39: ESTUDIOS EN MATERIA FECAL EN EL DIAGNÓSTICO … · estudios en materia fecal en el diagnÓstico diferencial de la diarrea • ingesta + secrecion intestinal= 7 litros • 5 litros](https://reader033.vdocumento.com/reader033/viewer/2022041807/5e55546045e7802103373819/html5/thumbnails/39.jpg)
p-ANCA
BLANCO PRINCIPAL:MIELOPEROXIDASA
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p- ANCA
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COLITIS ULCEROSA :ANCA ATIPICO
a-ANCA• BLANCO ANTIGENICO:• NO MIELOPEROXIDASA• NO PROTEINASA 3• PROBABLE PROTEÍNA PERINUCLEAR DE
50 Kd (envelope)• ASPECTO SIMILAR A p-ANCA (IFI)• NO CAMBIAN POR TRATAMIENTO• NO TIENEN ROL EN LA PATOGENESIS DE
LA ENFERMEDAD
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a-ANCA
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ANTICUERPOS ANTI-PROTEINA BACTERICIDA DEL NEUTROFILO (BPI) CLASE IgG EN NIÑOS
CON ENFERMEDAD INFLAMATORIA DEL INTESTINO (EIIC).
• Litwin N, Guastavino E y De Rosa S.Hospital de Pediatría Garrahan-Instituto de Investigaciones Médicas -UBA
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ANTICUERPOS CIRCULANTES Y
ENFERMEDAD DE CROHN
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ANTICUERPOS ANTISACCHAROMYCES Y ANTINEUTRÓFILO EN NIÑOS CON
ENFERMEDAD INFLAMATORIA INTESTINAL
Néstor Litwin *, Susana De Rosa **, Elsa Guastavino **
* Instituto de Investigaciones Médicas “A. Lanari”Laboratorio de Investigación en Gastroenterología
Universidad de Buenos Aires** Hospital de Pediatría “Prof. Dr. Juan P Garrahan”
Servicio de GastroenterologíaBuenos Aires - Argentina
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ASCA-G
01020304050607080
UN
IDAD
ES
CROHNC.U.C.I.PDIG
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ASCA- A
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IDAD
ES
CROHNC.U.C.I.PDIG
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MARCADORES DEL ESTADO INFLAMATORIO DE LA MUCOSA
INTESTINAL
• ESTUDIOS EN MATERIA FECAL
• PROTEÍNA EOSINÓFILA CATIÓNICA• MIELOPEROXIDASA• ELASTASA PMN• LACTOFERRINA• CALPROTECTINA
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CALPROTECTINA
• PRESENTE EN GRANULOCITOS NEUTRÓFILOS
• PERTENECE A PROT S100• TIENE CARACTERÍSTICAS
MICROBICIDAS• SE ASOCIA AL CEA EN FORMA
MOLECULAR (CEA-CAM3)
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CALPROTECTINA FECAL
• ASOCIADA A:• INFECCIONES ENTEROINVASIVAS• NEOPLASIAS• ENFERMEDAD INFLAMATORIA
INTESTINAL (EIIC)• TERAP. CON NSAID AINES• MISCELÁNEAS
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• Smecuol E, Pinto Sanchez MI, Suarez A, Argonz JE, Sugai E, Vazquez H, Litwin N, Piazuelo E, MeddingsJB, Bai JC, Lanas A.
• Low-dose aspirin affects the small bowel mucosa: results of a pilot study with a multidimensional assessment.
• Clin Gastroenterol Hepatol. 2009 May;7:524-9.
NSAID y CALPROTECTINA
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CALPROTECTINA FECAL EN EIIC
• ELEVADO VALOR PREDICTIVO NEGATIVO (CAPACIDAD DE EXCLUSIÓN DE ENFERMEDAD ORGÁNICA)
• SENSIBILIDAD 70-100%• ESPECIFICIDAD 60-90%
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CALPROTECTINA FECAL EN EIIC
• ELEVADA CORRELACIÓN CON EXCRECIÓN DE LEUCOCITOS MARCADOS CON 111In
• AUMENTOS INDEPENDIENTES DE LOS MARCADORES SÉRICOS
• ÚTIL EN EL MONITOREO DEL TRATAMIENTO ANTIINFLAMATORIO O INMUNOSUPRESOR (Cy-FK- Xmab)
• PREDICTOR DE ACTIVITY FLARES
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CORRELACIÓN CON HISTOLOGÍA
• Bunn SK, Bisset WM, Main MJ, et al. Faecalcalprotectin: validation as a non-invasive measure of bowel inflammation in childhood inflammatory bowel disease. J Paediatr Gastroenterol Nut 2001; 33:14–22
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METODOLOGÍA DE LA DETERMINACIÓN
• LA CALP ES ESTABLE EN MF 72 HS A T.A.
• FASE DE EXTRACCIÓN CON BUFFER.
• FASE DE RECONOCIMIENTO CON Mab EN PLACA DE ELISA
• FASE DE DETECCIÓN Y LECTURA
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• VALORES DE CALPROTECTINA SUPERIORES A 150 µg/g de MF predicen reactivación de la enfermedad en el 50% de los pacientes con EC y en el 80% de los pacientes con CU
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CONCENTRACIONES DE CALPROTECTINA FECAL EN VOLUNTARIOS SANOS
Age-related faecal calprotectin, lactoferrin and tumour M2-PK concentrations in healthy volunteersShilpa Joshi, Stephen J Lewis, Siobhan Creanor, and Ruth M Ayling
Ann Clin Biochem, May 2010; 47: 259 - 263.
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CONCENTRACIONES DE CALPROTECTINA FECAL EN VOLUNTARIOS SANOS
Age-related faecal calprotectin, lactoferrin and tumour M2-PK concentrations in healthy volunteers
Shilpa Joshi, Stephen J Lewis, Siobhan Creanor, and Ruth M AylingAnn Clin Biochem, May 2010; 47: 259 - 263.
EDAD CALP FECAL2 a 9 años Menor a 166 μg/g10 a 59 años Menor a 51 μg/gMayor de 60 años Menor a 112 μg/g
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INCÓGNITAS Y FUTUROS CAMPOS PARA LA INVESTIGACIÓN
• CORRELACIÓN CON SCORES DE ACTIVIDAD EN ECROHN Y CU
• OVERLAP INFLAMACIÓN NEOPLASIAS
• VALORES EN POLIPOSIS COLÓNICA• EXCRECIÓN EN OTRAS
PATOLOGÍAS (AUTOINMUNIDAD, ENF CELÍACA, TRASPLANTE)