Di r ecci ó n:Di r ecci ó n: Biblioteca Central Dr. Luis F. Leloir, Facultad de Ciencias Exactas y Naturales, Universidad de Buenos Aires. Intendente Güiraldes 2160 - C1428EGA - Tel. (++54 +11) 4789-9293
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Tesis de Posgrado
Estudio de la composición delEstudio de la composición delaceite esencial y resinoide de laaceite esencial y resinoide de la
Adesmia boronioides HookerAdesmia boronioides Hooker(Paramela)(Paramela)
Peltz, Leonor
1962
Tesis presentada para obtener el grado de Doctor en CienciasQuímicas de la Universidad de Buenos Aires
Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales y de maestría de la BibliotecaCentral Dr. Luis Federico Leloir, disponible en digital.bl.fcen.uba.ar. Su utilización debe seracompañada por la cita bibliográfica con reconocimiento de la fuente.
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Cita tipo APA:Peltz, Leonor. (1962). Estudio de la composición del aceite esencial y resinoide de la Adesmiaboronioides Hooker (Paramela). Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad deBuenos Aires. http://digital.bl.fcen.uba.ar/Download/Tesis/Tesis_1111_Peltz.pdf
Cita tipo Chicago:Peltz, Leonor. "Estudio de la composición del aceite esencial y resinoide de la Adesmiaboronioides Hooker (Paramela)". Tesis de Doctor. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales.Universidad de Buenos Aires. 1962.http://digital.bl.fcen.uba.ar/Download/Tesis/Tesis_1111_Peltz.pdf
UNIVERSIDAD DE BUENOS AIRES
FACULTAD DE CIENCIAS EXACTAS Y NAÏURALES
Estudio de la composición del aceite
esencial y resinoide de laAdesmia boronioides Hooker
(Pgramela)
Leonor Peltz
Tesis presentada para optar al titulo deDoctor en Quimica
l 9 6 2
7254'1111
k4
UNIVERSIDAD DE BUENOS ¿IRES
FACULTLD DE CIENCI.'.S EXACTLS Y NATURuLES
Estudio de la composición del aceite.
esencial y resinoido de la¿dosmia boronioides Hooker.
(Paramcla)
Leonor Peltz
Resumendo Tesis presentado para optar al título de
Dootc: en Química.
fiat7a.”!.'
(¡m*“m í
UBICAQIQN EN LA SLETEMÁIICá:
9135;; Dicotiledóneas; sub-clases Arquiclamídeas; orden: Rosales; familiasLeguminosas;sub-familia: Papilionoideas; tribut Soforeas.
Eggggggggggjgz Se trata de un genero exclusivamente sudamericano, que
comprendemas de 120 especies; su utilización esti afin poco estudiada, la
mayoría son forrajeras, las leñosas dan leña de bastante valor. Nose conocen especies tóxicas y ninguna se cultiva.
QBIEBQIQNDELMAEERLAL:Este arbusto, común en la Patagonia, fué facilita
do por la Dirección le Parques Nacionales.I' CIONES NA IT C EN E TERI 8
Aguas en hojas: 11,3% en ramas: 12,5%
.,, A _, , .; ., ,7 . .; ,1 . ,_- , .— ,_ .p _,t_ g
¿91.12 extracto etóreo: 3,2%; extracto alcohólico: 25,3%; extracto alcohó
lico secado a vacio y 40v: 23,0%
gamas: extracto alcohólico: 12,6%
Por consiguiente, estimóndose el extracto etóreo de poco valor, se
procedió a la obtención del resinoide de hojas y de ramas, por separado,
con alcohol y a reflujo.
QEBAE; de hojas: 16,17%; de ramas: 11,92%
ESEEQLL;(obtenida por arrastre con vapor de agua) de hojas 2,52%; ramas:
1,01%
W: dehojas39,64%;deramas4,94%DEL INOIDE J D a
EEEECEEOFOEOMEIBLADE AQQORCIONEN EL ELEBAVIOLETA: se efectuó con solucio
nes líoo de resinoide en alcohol libre de aldehidos, obteniéndose para ra
mas los siguientes máximosy minimos: Long. de onda en mu 250....E.0,62
(minimo) y long. de onda en mu 270...E.O,7O (máximo). Para el resinoide de
hojas no se ha observado extinciones máximas o minimas.
sygzgyg;¿¿ggygp;gg¿ Dada la anterior curVa de absorción hemos procedido a
1a separación de la sustancia fenólica en resinoide de ramas: 10,13%, de la
cual se efectuó una cromatografía monodimensionalen placa, cuya resolución
indica la presencia de por lo menosdos fenoles y la posibilidad de presen
cia de polifenoles.NIFIC C N: (promediocb 4 determinaciones)
1.5. LE. LS.
Hojas 38,79 5,85 44,55
Ramas 17,08 82,77 99,86
EÉEUDIQQE; ¿CEIEE ESENCIA; DE ngég g DE gégég!
En amboscasos se trata de fluidos limpidos, ligeramente viscosos, de
olor a frutos maduros, mós penetrantes para la esencia de ramas, y de color
pardo rojizo.
¡E50 EgPECIFICOaa201G. Hojasz..1,0031 Ramas:..0,9785
IQIQ m 11523591635 ¡1,2,0 " 1,49305 " 1,49255
INDICE DE ÁCLQQ: " 44,21 " 39,97
INDICE DE 3511.3 s " 79,34 " 84,62
INDICE DE fiAEONIFICACION: ' 123,55 " 124,63
gggygzggggggg_ggsggggz Se observó poca resolución para hojas y ramas en con
Junto.
AQQORQIOEQN'EL QyTRAVIOLETgsSe observó para ambos aceites esenciales un má
ximo para long. de onda 235 mu.
H0 S
Indice de óster fl OHalcohólico
Hojas 135,35 4,48
Ramas 159,79 4,71
CID IBRES:Por observación microscópica se encontró ác. propiónico en su
mayor parte y ¡cido isobutirico en menor cantidad, para ambaesenciai.
gogfiUEgTOSCAfigONILICOfi:Se obtuvieron las 2-4dinitrofenilhidrazonas, de co
lor rojizo y P.F. 1429 para hojas y 142/30 para ramas, de los cuales se hizo
las curvas de absorción en el ultravioleta. Se procedió a separar los com
puestos carbonilicos con sulfito de sodio y nuevamentese obtuvieron lo 2-4
dinitroderivados, de los cuales se efectuó una absorción ynseiaultraviolete
y una separación cromatográfica en placa. Se obtuvo asimismo, las semicarba
zonas para hojas, cuyo P.F. es 14596.
naa.
En consecuencia, se deSprende de 1a observación de las curVas de ab
sorción de compuestos carbonilicos, la existencia de cetonas que poseen
una doble ligadura conjugada respecto a la función cetónica. Las curvas de
absorción de los 2-4 dinitroderivados, correspondería a cetonas terpónicas.
FENOLEs se obtuvo los 3-5 dinitrobenzoatos de la sustancia fenólica pre
viamente separada de ramas. Se trata de pequeñas placas y agudas que comien
zan a fundir a 1459, 1589 y terminan de fundir a 1689.
De acuerdo a la separación cromatografica y a los P.F. de los 3-5 dini
troderivados habria: - fenol de Rf 0,53, manchacolor amarillo y P.F. 1450;
isoeugenol, de Rf 0,745, color violeta y P.F. 1589 y presumiblemente m-cre
sol, de Rf semejante al anterior, color amarillo í P3 F. 1689C.
¿CIDgg x ¿ggflgmg y¿o FENOEQEgTERIFICAQQfi:Se identificó acido propióni
co e isobutirico; se consideró 1a posibilidad de presencia de l b fencholde P.F. 1570 o borneol de P.F. 156/79 para hojas y de isoborneol para ramas.
CROMATOG ' 0 DE CEITE É ¡NC L DE HOJ 8 Y DE z Nuevamente,
se observa poca resolución, con un pico alto para hojas, que correSpondería
a los'ósteres. Para ramas no se observa tal pico. Se consignaron además, las
curvas de absorción en el ultravioleta, para las distintas fracciones cromatográficas.BEQQMENg CQNcLUfiIONEfizSe han determinado constantes fisicas y químicas,
se ha separado e identificado ácidos libres y combinados, cetonas, alcoho
les libres y combinados, fenoles libres y combinados, que bien podrian ser
aprovechadosen posteriores estudios.
Se considera que no cabría su consideración desde el punto de vista de
producción de compuestos, pero si seria provechoso su estudio desde el pun
to de vista farmacológico ya que se conoce la Adesmia localmente, comode
_/¿ Mi MJU/HH/’ _____> —'
Padrino dc Tesis
Dr. L. A. MCFTES
Mi más profundo y sincero agradeci
miento al Df. A.L.Montcs, quien hizo po
sible esto trabajo. Asimismo,dojo cons
tancia dc que su libro "Analítica dc losProductos aromáticos", fué unaconstanto
guia, dc inestimable valor.
Agradezco asi también a todos aquellos
que en una u otra forma colaboraron para
llevar a feliz término esta tesis, con cspecial mención al Dr; Molfino y a la Lic.
-A. Vázquez.
1'. MIS PQJDRES
"' ,I. p.) g a' . U 0.0 ¡.7 ví- : :0 0...0:1: .. :Oí o...oo 'o' ono . : . :.o.:.:.
-\-,-- h'fi _1'T_| '1‘erng G..;l‘;;;P¿.L ’
1.- ;_;_¿T_1ï.<3¿31.19CIC-;¿:
19) Clasificación Ju los productos arcnáticos...29) Mátodcs Go extracción ¿o las sust. aromática
3Q)Ccujcsición Cc los aceites cs;ncialcs.....o.39) Usosde les aceites oscncialcs.....,........HQ)Los aceites; csoncialcs cn la Lrgcntína.....
59)Explotacióninuustrial.....0................
II .—___AN.BQTÁQLIEÉ:19) Ubicación cn la sistemática....
¿dl onooooooonooooooIoo3Q)Descripciónbotánica.....................,..
UsosiooooooooooccOOoIOOOlQOQooaocon¡000000.0
....Ü.......G...°C.....l.HOSinOidoooOo'nocoooco-¡ooo-¡coo
B)Estudicdel aceite cssncial.................Y oovoeeooaOooooooooeno
Vo" EI_E;I1:[_C.GB¿1F.ELQOOOOOooloccccooooaoanooanan-on.
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..pág.0...0..OOOOG
r'r'mmH
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COÑO\O\
. 11
315556
CLASIFICACIÓN DE LOS PRODUCTOS ARQQATICOS
WBajo el nombre de productos aromáticos se agrupa un enorme
número de sustancias de naturaleza quimica compleja, capaces de prg
vocar en el sentido del olfato sensaciones agradables, ejerciendo,
comoasi también, acciones sobre el gusto, vinculadas con aquella.
Tal es asi, que encuentran aplicación en perfumeria, cosmg
tica, condimento de alimentos, elaboración de bebidas, productos me
dicinales, confituras, jaboneria, etc.Su clasificación ha sido encarada con distintos criterios,
según su composicífn,'l m parte del vegetal del que se obtiene, la
familia botánica que les corresponde, etc.
Una clasificación general, basada en su origen, métodos de
obtención o use, seria la siguiente (l)f/ a) Especias: enteras y sus aceites
esencialesb) Aceites de expresión
1 c) Aceites esenciales, o volátilesny!
3 l, Tecetaícs: \ d) Concretos 33 AbsolutosC e) Resinoides }ro f) Posadas y sus concenbadosS
g Polvos aromatizadosA J > , .R ‘a) ue ma- de rumiantesC . miferos: de carnívorosM 1. Verte-_ de CetáceosÁ 'b) de avesT ¿quñ1 o brados:I 2° h' '“res° c) de reptilesC
o JÏ,inve1-Sa) de moluscosS tebra» dos: lb) de insectos
3. LlntébICCSSreproóeccn los natarïles
e; Artificiales: imitan o nó el aromade naturales, siendo\ de composicióndistinta.
5.
6.moaoduoww
mOOHHuzow>
-2
Perfumes complejos
Aguas de Colonia y agua floridaDerivados: r
Lociones
Licores
Accesorios:Fijadores: naturales, sintéticos y artificiales.
METODOS DE EXTRAQQlQfi_pE LAS SUBSTANCIASWÉBQfigïggéí
Dado que el rendimiento de sustancias aromá+icas y sus canracteristicasclasificaci
1-wt
o
KH
La comp051c:
des fisicas
- Iaria???V ¿"0_¡. gún el método empleado, se opta por una
en de los mismos:
a) mediante esponja,EL-",15";r: LVI ex- .
b) a la ascudillaste: '2} ]
fc) co; rïehsask
(a) destilacion en agua»or ¿es 5, ¿ión:¿Íiz“ ' " a ‘b) ¿estilación mediante agua y vapor
5 i \ . .. .\cjunesï11aclón nor arrastre con vapor de agua.
J¿¿;hccién N'<;¿nte disolventes volátiles que nos perq\Jah re: a, ccncretos (¿e vegetaJes frescos) y b) resi
noiees (de vegetales secos)
Extracción naciente \a) "enfleurage" cn frío"enfleurage" en caliente o
(4) (5) l por digestión
Otros Métodos: a) Método neumático de Fiver (6)
Metodo de Verley (7)
tros métodos de patente elenacon anhídrido carbónico
60.} AC"'r'1'-r\’.\" a'.'.¡.l.h'L\4.".:'“vn” s ipsïras BSEFCIALES
de los aceites esenciaies es compleja; por afinida«se agrupan sustancias químicamente diferentes y en ca
-3
da tipo se hallan representadas las distintas funciones: hidrocar
buros saturados y no saturados, alcoholes primarios, secundarios y
terciarios, aldehidos, cetonas, ácidos, ésteres, éteres óxidos, fenoles, lactonas, etc.
A los componentes conocidos, se los puede agrupar como si
gue:
l) los compgggntes terppnicos: siendo los más importantes y
característicos los: aciclicos o ciclicos, monoterpénicos,sesqui
terpénicos y diterpénicos, monoo biciclico; por ejemplo: limoneno,
pineno, canfenc, geraniol, citra , linalol, citronelas, cineol,mentol, mentona, carvona, alcanfcr, vetiverol, santalol, cedrol,
cedreno, etc.
2) los gmeonentes de núcleo bencénico: muyimportantes y
predominantes para algunos aceites esenciales ( por ejemplo en la
canela, tomillo, anís etc.), comoser: benzaldehido, vainillina,
pi;eronal,utimel, anetolymeueenol,-paeimene;wéeidoBenzoico, áci
do cinámico, etc.
3) los gpmpgnentes alifáticos ge_cadena recta: que en gene
ral son componentesmenores, siendo particularmente importantes
los ácidos; por ejemplo: fórmico, acético, isovaleriánico, caproi
co, caprilico, etc. aldehido decilico, metilnonilcetona, metilheptenona, etc.
H) los gggpgnggtes sulfuïggggl_nitÏOgGQÉgRíJLÉEüÉEQPIClii
cos: asi comotambién los aún no idencii;cacos; entre ellos: iso
cianato de alilo (comoonenteprincipal del aceite esencial de mos
taza), los alil sulfuros (aceite esencial de ajos), sulfuro de butilo y propenilo, sulfuro dicrotilico, antranilato de metilo, indol,furfural,wetcv—u
-h—
USOS DE LOS ACTITES BSEHCIALES9-.
En la antigüedad, los aceites esenciales fueron usados en
la vida religiosa, por distintos pueblos, y en numerosospreparados.
También en la misma época eran buy estimados como antisépticos por
los egipcios, griegos y romanos. El valor comotales, ha sido con
firmado experimentalmente para algunos de ellos por sus componentes
preponderantes,(9) comoel de la esncla por el cinamaldehido; el de
clavos por el eugenol; el anceliptus9 el timol, cl isocienato de
alilo y los aceites esenciales que los COHÜiGHCJ.
No sólo los usan en Farmacologia conc antisépticos, Sino
también presentan otras propiedades: estimulantes, antineurnlgicos,
anties;asmódicos,"verïiflgos, etc.Algunos componentes han encontrado aplicaciones especiales,
comoen el caso del alcenfor, usado en el extremo oriente para obte
ner el mejor negro de humopara preparar la tinta china, y en el nun
do moderno, comoplastificante en la fabricación de peliculas cinemg
tográficas.
Asimismo,se los usa en perfumeria, cosmética, licoreria,
confituras, jabones, etc.
;¿É¿¿g;ggggigïggggggggí EH LA REPUBLIC; ¿363323312
Posibilideggs¿3¿jggtiïg:(lO)Po: sus regiones fitogeográficas de climas variados, crece en la República Argentina, numerosas plantas aro
máticas nativas, poco estudiadas aún, salvo unas pocas, que en épocas
distintas despertaron el interés de investigadoresaEspecialmente aptas para el cultivo, se consideran z Kisig
tz)(.nes (lemongrass, eucalipto citriodora, vetiver, citronela, mentasCorrientes ‘ Entre Rios (es ecialmente ara Rutáceas) Córdoba San7
Luis (peperina, poleo, yerbabuena, tomillo, Chinchilla, etc.), Saltay Jujuy (alpa mato y horco molle) Rio Negro y Mendoza (lavanda, euca
-5
liptus globulus y menta piperita). -ambión en la Provincia de Bue
nos Aires se ha ensayado con resultado, el cultivo de diversas plan
tas aromáticas (salvia, aenjo, tomillo, perejil, apio, lavanda, men
ta japonesa, etc. y una planta productora de alcanfor: albahaca alcanforera . En el Bolsón (Prov. de Rio Negro) se han efectuado con
tode éxito, desde hace dos años, plantaciones de lúpulo.
Se ha hecho un estudio experimental de adaptación y rendi
miento en aceites esenciales de diversos vegetales, para la zona de
Concordia (prev. de Entre Rios) (ll), recomendándoseel cultivo y
explotación de: malvarosa, vetiver, dedrón de le India y verbena,
romero, orégano, tomillo, 0to., y numerosas especies florales.
Explotación industrial: (12) La explotación nacional, se ha desa
rrollado muy lentamente. En el año l9hl fué tan sólo de 11.28% kg.,
contra una importación de 102.866 kg., cantidad inferior con res
pecto a otros años anteriores a la Segunda Guerra Mundial, puesto
que en 1937'haúïaéé importado 190.9É0 ké. y'éh'igjs 178.332 k¿.(l3)nEn los últimos años, impulsada por las diiicultades de im
portación, toma incremento esta industria, y en 19h? la producción
sobrepasa las MOtoneladas, en 1953 de 78 a 88 toneladas y para el
ejercicio 1959/196C un total aproximado de 200 toneladas es esti
mado.
Actualmente, y conforme a datos de reparticiones oficiales,
ha ido disminuyendo, hasta anularse para algunos renglones, la im
portación de aceites esenciales, comoasi son numerosas las compa
ñias comerciales e industriales que ubicadas en la Capital Federal,
Mendoza, Corrientes, Misiones, Buenos Aires, Entre Rios, Rio Negro,etc. trabajan aceites esenciales nacionales.
-6_.
DATOS BOTAHICOS QQLLA ADEfiglA BORONIOIDES
UBICACION EN LA SISTEMATICA:
CLASE: Diootiledóneas
SUB-CLASE: _Arquiclamideas
ORDEH: Rosales
FALILIA: Leguminosas
SUB-FALILIA: Papilionoideas
TRIBU: Soforeas (e)
(+) A. Engler y K. Prantl (1h), la ubican comopertinente al
género ngggggiug, dentro de la sub-tribu de las Hedysa
reas, mientras que en la obra de Burkart (15), se encuen
tra ubicada comoSoforeas, debido a los estambres libres,
que les da un carácter de jerarquía superior, y a la for
ma_delfrth-(parecido al de.¿gggngpggggg, razón de su encasillamiento en las Hedysareas).
un la tribu de las Soforeas, puede aceptarse la sub-tri
bu fatagoniinae Taubert, para Adeggig.
FITOGECGRAFIA DEL GEEERQ:
Género exclusivamente sudamericano, comprende más de 120
especies;
El mayor número de ellas se encuentra en el centro de Chi
le y sur y oeste de la Argentina; desde alli irradia el área
marcada por los valles andinos, hasta Bolivia y sur del Perú,
hacia el centro y este argentino y más allá, llega un pequeño
número de especies (Córdoba, Buenos Aires, Mesopotamia Argenti
na, Uruguay, sur del Brasil).
- 7 _
Según un catálogo, Burkart 1939, c, se han citado más de
ochenta especies para la Flora argentina, y aunque esta cifra
requiera una revisión, demuestra que este género es el más nu
meroso de las leguminosas argentinas.
Se trata de una planta sufrutcscente quebradiza, muygla
bra, de tallo de 30 a ¿C cm., poco leñoso, articulado y con mu
chas glándulas a modode verrugas que segregan una resina amailla.H
Sus ramas son ascendentes, cilindricas, del grueso de una
pluma de cuervo y de 18 a 23 cm. de largo.
Sus hojas miden de 3 a 5 cm. de largo, con grueso peciolo
y 1C a 15 pares de hojuelas alternas u opuestas, orbiculares
trasaovadas, de 2 a 5 nm. de largo, groseramente dentadas, amg
rillentáé;“¿aïiácé¿é“9736n glanáulas gruesas en las márgenes
(16), estipulas algo aparentes, cortas, casi abrazadoras, estipelas ausentes. Racinos laterales y terminales obtusos (17)
de 7 a lO cm. de largo, algo valloso, hacia arriba y compuesto
de flores cortanente oblongas, pedicelos más cortos que el cá
liz, que es ancho y campanulado con 5 dientes o lóbulos y cor
tamente quinquefido, algo pubescente y tres veces más corto que
el estandarte, que es muyglabro.
Legumbre amplamente oval, muy comprimida, compuesta de tres
artículos algo separados unos de otros y punteada de gruesa
glándulas negruzcas.
Ecológicamente, son criófilas y mesófilas y numerosas espocies son xerófilas.
Por lo demás, la utilización de las numerosas especies de
Adesmia, está aún poco estudiada. La mayoria son forrajeras;
los ejemplares se ven a menudomutilados por el ganado y no
hay ninguna constancia de especies tóxicas. Hasta las espino
sas son, en parte, forraje de cabras. .
Las especies leñosas, inclusive las en cojín, dan leña de
bastante valor, dadas las regiones semidesérticas donde pros
peran (18).
{ingunaespecie se cultiva.
_ lo _
¿Emma
Estudio del rosínoidc de hojas y ramas do la Adesmia=Eï'
(parafilola)ooooo-o-rooo.ooo-oootonoouoooaooo
B: Estudio del aceite esencial de hojas y de ramas de
la boronioideslli.tO...GOOOOODUIOOOOOOOIOOOOO
ESTUDIO DEL ‘ESINOIDE QE.
-11...
——u — u —
1m
2Q)
3Q)
ha)
59)
69)
79)
8Q)
99)
109)
119)
12o)
13°)
¿030.339.1235 (plgagazs'm)
InatoriO-J...O0.000.000.000.IDeterminaciónde agua..........................Extraccióndel resinoidc.......................Ccras..........................................Absolutos......................................Esendïfi..¡...............................;;....Espectrofotomctría.............................Absorciónen cl u.v. de sol. de rosinoido......
Croln'ïtogrïtfiaooolooc0.000.000.000.UOUOOOOOOOOI.
Cromatografía monodimensicnal en placa de loscompuestosfenólicos.........................áciCÉCOÓCOQOOOOOOO.OIIOIOIOOO.OO00;...
65tcr......IOOOOIIOÓCDOCOOOOOUOIOI...
Indice¿osaponificación.......................
IIOJAé;¿zasRama,
12
12
12
13
13
14
15
19
22
28
29
29
29
Para la realización del presento trabaje, se utilizó elmaterial facilitado por la Dirección de Parques Nacionales, cg
rrespondiente a la especie Adesmiaboroeioides Hooker, conoci
da comunmente con el nombre de "paramele"(l9) y cuyo nombre a
raucano es el ¿e "yaqneu".
Se trata de un arbusto glutinoso inerme, comúnen la Patg
gonia, conocido localmente comode valor mediciral; es utilizg
¿o para vias respiratorias, comosaumerio, y tanbien comoageL
te digestivo.
semestres A614:Para la determinación de agua en el material vegetal, se
utilizó el aparato Go Biúwell y Sterling (20), donde le muestra
es destilada con un liquido inmiscible en agua (tolueno satu
rado con agua).
Este aparato posee una trcnpa especial que colecta y mide
el agua condensada y donde el disolvente roba sa y vuelvo aldestilador.
Valor obtenido para hojas: 11,3 %
Valor obtenido para ramas: 12,5 %
EEBA®.LO;¿_QF¿_¿ELE
Conel propósito oe extraer los principios aromáticos
del material vege el, se ha procedido al cálculo del rendi
miento en distintos disolventes, comoser: alcohol etílico yéter de petróleo.
Mrs.s-.c>_biea.i9_%=
Begin ide qe hoias:--.- 4... ...r-_.._“:cA‘...
- 13 _
Extracto etérec (sólido pastcso, aromático de color
eme-‘31? 'z e- "11) " 9.u...(..Ï ...,_...O «.11<..I311,]¿.(AO J, ._
Extracto alcoholico (sólido tastoso, aromático, de
color pardo) 25,3%
secado a vacio y a MOQ 23,05
Extracto alcohólico (sólido pastoso, aromático, de
color pardo vcrdoso) 12,C%
ol o:s'fuie-ce stinun” se - ¿ALJe ' ' - ocP r c v 1) n’ , e"L 1‘ o cl vtw cto etérco “e poco
alor, se prOCcdió, por separado, a la obtención de los extrag
tos alcohólicos ¿e hojas y de las ramas previamente molidas, e
reflujo.La separación del disolvente se efectuó luego del enfria
miento en helaeera y posterior filtración, por cestilación cncolumna e presión reducida.
Por tratamiento con alcohol etílico en caliente, se di'1suelven todos los componentes aromáticos ee los resinoides, prg
cipitando por enfriamiento las ceras y otros acompaïantes, se
filtre, retiene el precipitado, elimina el alcohol, obteniéndose:
Ceras de hojas 16,17%
Ceras de ramas 11,92%
¿ESQ-929.2:
Se procede a eliminar el alcohol Ce los liquidos del fil
trado, que aún contienen de un 50 í a un 80 fl de roeuctos ce
rosos solubles, que contribuyen a fijar los aromas y pigmentos.
Se trata de liquidos viscosos d: color pardo obscuro.
Efectuando el arrastre por vapor ee agua, sc separa elaceite esencial:
Esencia de hojas 2,52%
Esencia 19 ramas 1,01%
Rosiduo etéreo de hojas 39,6H%
Rosiduo etéreo de ramas H,9h%
.E.5'.E.I‘;2'CIA=
Una vez efectuado el arrastre con vapor do agua, se inso
lubilizó la csoncia con cloruro de sodio y extrajo con éterctilíco.
- 15'
BSJJCTROFOTOEETRLA: ABSORCION EN EL ULTRAVIC ETA-wLa espectrofotometria de absorción está basada en la dis
minución de intensidad de un rayo de luz monocromático al pa
sar a través de una solución, debiéndose esto fundamentalmente,
a la absorción de la luz por la solución.
La propiedad que presentan ciertos compuestos orgánicos y
también inorganicos, de adsorber radiaciones de distinta lon
gitud de onda, se debe a que poseen en su molécula grupos cro
(
La absorción se llama gglggtiïa cuando se produce en forma
más intensa en ciertas regiones del es;ectro. Asi, la mayoriade los aceites esenciales muestran una absorción selectiva de
luz ultravioleta, por lo que se los estudia en la región delespectro que va desde h.0CO A a 2200 A. El primero es el limite
arbitrario que se‘confunde con la región-visible; el segundoe_tá fijado por los aparatos utilizados y la transparencia de losdisolventes usados.
Gaia aceite esencial, como asi los componentes del mismo,
presentan una absorción caracteristica, de nodo que el estudio
de la curva dada por el poder de absorción respecto de las di
ferentes longitudes de onda, permite su identificación, como
también juzgar su pureza (22) (23)
luis-¡1992:La reducción de la intensidad de un haz de luz monocromá
tica que pasa a través de un medio absorbente, depende:
a) de la concentración de la solución;
b) de la-longitud-del canino recorrido a través de ese me
dio por el rayo incidente;
.'. 16_
c) del poder de absorción de la sustancia o solución a
una determinada longitud de onda.Las relaciones cuantitativas de estos factores están de
finidas en las leyes de Lambert y de Beer.
La ;¿Q¿533_ngbgrt establece que, si IO es la intensidadde la luz incidente de una determinada longitud de onda que pee
netra en un medio absorbente homogéneo, de espesor d (espesor de
la celda, en centimetros), e I es la intensidad de luz emergen
te, su relación será:
siendo g el coeficiente de absorción.También:
log É, : E : D extinción o densidad óptica oabsorbancia del “odie.
La lg1¿a¿jïgr relaciona el coeficiente de absorción conla concentración-ée-la-sastancianabsorbente+w
¡.1a z 1 . c siendo g el coeficiente de proporcignalidad.
Relacionando ambas leyes se tiene:
E = D k log Ég a k.c.dadonde g es en este caso, la medida de la capacidad de absorción
..de la luz para una sustancia dada y a una determinada longitud
Es una constante pa‘: las sustancias cue obedezcan la leyL
ee Lambert-Beer, a cualquier dilución o espesor de capa absorben
Come la longitud G se expresa en centimetros, la defini
ción de :.dependerá de cono se exprese la concentración g, Siende las siguientes las más comunes:
- 17
a) si g está dada en mol-gramo por litro, g se llama ce;
ficientc molecular de absorción o extinción GE);
b) si g sc expresa en gramos por litro, g se llama coefim
ciente especifico de absorción o extinción ( K, k,aL);. . 1. 1%
c) Sl g se ineica en gramos por lOC ml, g es El/Cm.
Esta última puede transformarse cn el coeficiente eSpeCÍu
fico multiplicando per 0,1 y g se transforma enjÉ, multiplicando
por ;l peso molecular de l; sustancia absorbente.Comolos valores dc los coeficientes de extinción varian
con la longitud dc onCa, para obtener el espectro ¿e absorción7
se construye un gráfico en que figuren valores de coeficientes
de extinción comoordenadws, y las corresgonCientes longitt.i
de onda come abciszs; en la curva obtenida, los máximosineïca;
las longitudss se onda en las cua_es la sustancia present: ab; rción selectiva. .
Unade 1€:“cbnciaisnós requeríáas.á.rá la exactitud de las
determinaciOLcs es la elección d;l disolvente, wuecebc pre n“"r
absorción minima en la región estudiada.
Alarm s-32213245.Los cspectrofotómetros corscan esencialmente de:
a) un pri ma para d ispersar la luz;
o un sistema óptico que inclure los recipientms con la so
'lución absorbente y con el solvente puro;
sara comparar las intensidades (Io) de laluz transmitida por al solvente y (I) transmitida por la so'ucion.
Al traba ar con luz ultravioleta, todo el sistema Gebe sar
En Luestro caso, se utilizó un Carl aciss PMQ II, C01 eeu¿
_ 18 _
Los aceites muestra“ una activida- variable (2%), de-pen
Cu iendo dc su composición. Se ha comprobado el fuerte poder ab
sorbentc que poseen los fenoles, sus'óstercs y los aceites eseg
ciales que los contienen, los aldehidos y cetonas y la influen
cia que tiene la estructura del resto de la molécula, de los ng
cleos bencónieos, de los derivados de alcoholes y fenoles de los
3-5 dinitrobenzoatos por la introducción de esta agrupación atómica y semicarbazonas de a dehidos y cetonas. Comoasi también,
2 dinitrofenilhidrazonas de estos últimos.
Se ha observado también la variación notable que sufre la
curva de absorción del aceite esencial cuando Se lo priva e al
guno de sus componentes, como asi también la influencia de un dg
terninado grupo cromófero sobre otros.
Es ¿e muchautilidad la sensibilidad que presentan los deri
vados de los compuestos nombrados anteriermente, sobre todo cuan
do se dispone de pequefas cantidades de muestra, que no alcanzan
para determinar los pratos de fusión de los derivados y además
un auxiliar poderoso para confirmar otros datos de identificación.
De todo esto, sc infiere que la espectrofotometria er el
ultravioleta, es una valiosa técnica auxiliar para el estudio delos aceites esenciales ya sea en su identificación comoasi tam
bién, para valorar algunos componentesy develar las adulteraciones.
EÉKBPEEHFDLCÁ @.T..R_Ïix_:..É&Ï-3_S.O_R.C.ïïp.ïí .33}. .U.I¿.TÏ’LAÏI.9.I¿EÏÁ:
Las determinacionus fueron cfcctuuÜfis con soluciones
al 1%00de -csinoidc en alcohol libro de aldohidos.
SCutilizó a tal efecto el espectrofotómctro GoCarl
Zeiss PM Q II
El estudio Cc 1: tabla de valores obtenidos, que so coasirna a continuación muestra para :1 rasinoicc de ramas
7 - a
los siguientes máximos y minimos:
Longitud to onda cn mu: 250 E —0,62 niniwo
Oitud fic onda en mu: 270 a : ,70 máximo
Para el :csinoidc de hojas no su obscrvan cxtinciones
máximas o minimas
ngmígxymmág_11AA@QQHMENQAEEMmEEïAgggjfiïfijïggngfirRAMAS Y HOJAS DE LA ADESEIA BORONIOIQEQ
(PAR LA)
Longitudos de onda Extincionos ramas Extinciones hoja
mu (milimicras) log ¿EQ= E log _I__o___E
215 1,87 1,95
225 1,695 1,66230 1,57 1,57235 1,16 1,38245 0,655 1,05250 0,62 0,95255 0,625 0,88260 0,66 O,8’-:0,69 0,83270 0,70 0,80272 0,70 0,785271-l 0,69 0,7657?"? 0,68 0,7h2.20 0,6% 0,693*: 0,59 0,6352.90 0,1}65 0,565¿VC 0,36 O,L:7310 0,305 0,H13M" 09235 09335330 0,195 . 0928300 0,175 ! 0,25350 0,165 0,235
si
- c
CROMATOGMIA - EVOLUCIóg HISTÓRICA:
Al comienzodel presente siglo (1903), el investigador ru;
so Tswett, desarrolló un método de absorción para la separación
de pigmentos de plantas, al que denominó cromatografía, debido a
las bandas coloreadas que se formaban en cl adsorbcnte. Las o
bras clásicas referentes al análisis cromatográfico, lo considg
ran comoiniciador del método (25) (26).
Previamente (1850) F.F.aunge analizó mezclas de colorantes
sobre papel secante y se interesó en las posibilidades del uso
del ascenso capilar de ciertas disoluciones en bloques de made
ra, ya que así se produce la separación de los solutos.
Goppelsroeder, discípulo de Schonbein, investigó dicha po
sibilidad coincidiendo sus publicaciones con las de Tswett.Schonbcil demostró que introduciendo tiras de papel cn agua
que contenga sales inorgánicas, avanza el-firente líquido arras
trando cationes inorgánicos, los cua es se muevenindependiente
mente, según su estado relativo de difusibilidad.
Ctros investigadores extendieron los métodos cromatografí
cos por varios caminos, inclusive a sustancias incoloras, y si
bien el término cromatografía, tal comoes usado hoy, es erróneo.
está bien establecido y es difícil reemplazarlo por otro más de;criptivo.
Sin embargo, y a despecho de su simplicidad, es poco utili
zado, hasta que recién en el año 1931, Kuhn y Lederer lo aplica
ron para separar alfa y beta carotenos, recibiendo los métodos
de absorción cromatográfica un notable impulso y difusión. A ell<
contribuyeron_tamhión«los-estudios-sobre enzimas-de Willstater y
su escuela; se continuó con el estudio de otros carotenoides
-23(Winterstein y Karrcr), se pasó al campode las vitaminas y sc
incursionó en el campode la quimica orgánica; se resolvieron
mezclas de elementos, de iones inorgánicos y aún de isótopos.
Es extraordinaria la forma que tiene su desarrollo, siem
pre con una incrcmanada velocidad y son por fin numerosos'lostrabajos que periódicamente se publican en todo el mundo.
LÉMQS__CRC2;&JZOPELÁI_IQOS=
93.01:‘=.€-t<:.&r;«<afíasan. É.9.J:Ll*7‘nP-.._d..’fase.- lisLui_-- ---n— — —-..---—.- "-
Adsorc1ón Tswctt l9C3
I":,1c_é; Haitin v Syng‘ 19hl
Cr ‘ e iónico v*1 "s tI-L j : -n 10H?
gggnntogrzfi: en papel:
Consden, Gordon y Martin/ 0
9301:: i .—‘ 5.9.5.9;.823.--.. .. __-._. .__
Adscrción Hesse l9h2
r:_cic-61 James y Eartin 1952Todos los métodos involucran una distribución del material
para ser separados entre dos fases con movimiento dc una con
respecto a otra. Generalmente, una fase es fija y la otra mó
il. Le fase fija puede ser sólida o liquida, pues de otro modo<:
no es convenientemente fija. La fase móvil puede ser liquida o
Actualmente es aún utilizada la ;orma descripta por consden,
Mer in (27), quienes desarrollaron este proceso al noC.) 0 H D; O .5 k; d
podcr sonarar_mezclas de aminoácidos_en columnas de sílice-gel._
¿n la celulosa del panel (papel de filtro WhatmannQ l, ya.I.
_ 2h _
que no todos son iguales en su eficacia), encontraron un adecua
do carrier cn que los aminoácidos puedenser separados por partición directa.
La mayorventaja respecto a la cromatografía de partición
en columna es que es posible trabajar con cantidades sumamente
pequeñas.
Las diferencias de velocidad de movimiento de los componentes son causadas por los distintos coeficientes de partición.
La distancia recorrida por la sustancia en un cierto disolvente
puede ser cuidadosamente determinada y cuando la rclacicnamos
cen la distancia recorrida por el mismoCisolv nte, habremos op
tenif: t;a pïïpiñifd intrínseca del mismo.
31 valer Ef es la relación entre la distancia desde el punzcncro de la manchay el punto de partida al
Jc; {a(:1 disolvente,“fran
Conocs riemart mayor el recorrido del disolvente, el valorIA.
de R? es siemnre menor de 1.J.
CROLATOGRÍFÍA EN PLfCA (CHROKATOSTRIP):
Su técnica, ideada por Kirchner, Miller f Keller, consistirA
Lcn cubrir con una caeafinisima de adsorbcnte, una tira de vi
drio. Luego se estaba en presencia de una tira adsorbonte que SL
crematografiaba tal comouna tira de papel.
Sus autores la usaron con éxito para diversas sustancias;
tenia el inconveniente de variar el Rf de tira en tira. Standaarizado el método, se alcanzó una reproductividad de hasta cuatro unidadgsn
Este mÉtOdo'fuó mejorado por Montes y Labat (28ïfl
Reitzema (29) utiliza un chromatoplatq que permite alreden
-25dor de cuatro cromatografias independientes a la voz, eliminan
do, por consiguiente, 1a variación de los Rf. Utiliza, asimismo, una mezcla de ácido salicilico y almidón empastados a baño
Maria. La sílice es previamente tamizada por 200 mallas; la su
perficie de la placa debe ser uniforme, nunca áspera o rugosa.
El calentamiento de la placa adsorbente esla operación
más importante pues es cuando se activa. Cuanto mejor se activa
la silica al vacio, mayores el poder resolutorio de la placa.
Qüi'áïf sm. .I.A..E.PL_C_QI¿ÍIP¿TLA.=
A pesar de que los primeros trabajos fueron hechos sobre
papel, el método que desarrolló primero fuó el de columna;
Fundamentalmenteconsta de un tubo de vidrio con un esti
ramiento en un extremc, con un pequeño tapón: de41ana de vidrio,
papel Ce filtro, alzocón, o un disco poroso y sobre éste el material adsorbente.
Los adsorbentas utilizados son en la mayoria de los casos
óxidos, hidróxidos, sales alcalino-tórreas, comeasi, substancias polares.
La dificultad principal en el desarrollo de una teoria
'matemática del análisis cromatográfico, estriba en que la formación del cromatograma es un fenómeno dinámico durante el cual
se produce una adsorción y una deserción simultáneas y conti
nuan, alas que siguen una readsorción de la sustancia que se está separando en la columna.
El primer intento de una teoria cuantitativa pare.1a adsog
ción cromatográfica se debe a Wilson (30), quien recién en el
año 19H0formula una relación diferencial que rige el proceso de
adsorción en una columna cromatográfica.
En l9hl Martin y Synge (31), publican una teoria de la cro
- 26 _
matografía de partición que puede aplicarse a la cromatogra
fía común, comparando la columna cromatográfica con una colum
na de destilación fraccionada que comprende un número de pla
tos teóricos elementales sobre la base teórica de la inexis
tencia de un equilibrio en todos los puntos de la columna y
considerando despreciables los efectos de difusión entre plato
y plato. Meyer y Tompkinsla perfeccionaron, pudiendo asi pre
ver la composición del líquido que se escurre de la columna.
La teoría de Wilson ha sido completada por Weiss (32),
Offord (33), De Vault (34) y Glueckauf y sus colaboradores (35).
papi-aaoeaaiaEl principio de este método se encuentra descripto por Mar
tin y Synge en un trabajo de introducción para otra clase de cro
natoqrafía (36). La idea del uso de una fase móvil gaseosa no.
lui ¿¿LICDÉQWCRteexplota a hasta que James y Martin (50, pubri
caron su clásico trabajo.
Sus técnicas se encuentran en constante perfeccionamiento,
habiéndose alcanzado mayor sensibilidad para mínimas cantidades
de muestras ( del orden de los microlitros o inferiores).
La naturaleza de la fase fija, es base para subdivisiones
majores: si se trata de un sólido (comocarbón activado), el mé
todo se llama cromatografía gas-sólido. Si la fase fija es un 1;quido se denominacromatografía gas-líquido o cromatografía de
partición gas-líquido.El líquido fijo es utilizado comoun delgado film sobre pa;
tículas sólidas o en la pared interior de una columnacapilar (38)
Los metodos empleados mas comunmente scn tres, a saber: E12
ción, desplazhïiento y análisis frontal.Analisiswfrgntal: la muestra pasa continuamente a través de la
-27.
columna con adsorbente. Los componentes emergen en el orden de
sus afinidades relativas por el adsorbente, pero sólo el primg
ro es separado del resto de los componentes.
Análisis por desplaquiento: la muestra es puesta sobre una te;minación de columna adsorbente. Un.cas carrier conteniendo el
vapor de una sustancia más fuertemente adsorbible que cualquier
componente de la muestra, es pasado a través de la columna. Es
te desplaza la muestra por el adsorbente y cada uno de los com
ponentes tiende a separarse de los otros que son menos fuerte
mente adscrbidos y se ordenan en zonas bien definidas en orden
de su creciente afinidad por el adsorbente y eventualmente, eme;
gen en sucesión.
glugignz Esto método involucra el constante pzsaje de un gas
carrier a través del sistema.
la ¿n;stra, gaseosa o liquido volátil, es introducida a es
:n y transportada sobre la columna de acsorbente. Cada con
abc ¿e Ois;ribuye de una manera caracteristica entre le fase
¿Ppposzy i: fiSe tija (sólida e liquida) y aquella porción que
está un gaseosa s; nueve con el ¿ortadcr. Los componentes
sel se : u: y ydsrn desde la columna a la corriente efluyen
te a distintts tierpos.
El tiempo de retención ta es un medio de determinación cug
litativa y está vinculado a su tempetatura de ebullición y mag
nitud molecular, y la altura del pico o el área encerrada es proporcional a las cantidades de sustancias que los producen.
-28...
comagsros FEI-IOLICOÉ:
De 1a observación de la curva de absorción, se desprende
una inflexión correspondiente a fenolos, procediéndose por con
siguiente, a la separación de los componentesfenólicos.
Tomar2 g. de resinoide, disolver en éter de petróleo li
viano, cuyo papel es vehiculizar 1a esencia, y agitar con solg
ción acuosa al 5 % de KOH(dos porciones de 20 ml. e/u.). Sepé
rar la solución alcalina, filtrar, acidular con SOHHgal 20 %
y extraer con ótcr etílico. Secar con SOqNaQanh., evaporar y
La sustancia separada corresponderá a los fenolos.
Fcnoles presentes em el resinoide de ranas: 10,13%
lara el resinoido ¿e hojas no se observa a mencionada in
%..*:ïfi.:I:1.
ego; 1_.'a_ï.-?_0¿¿_‘.—_'R_I-._I«_‘_Ï:L‘_I¡;01’=02)IDEELSÁOÍEAL E2; PLACA E LOS COMPUESTú s
findeJul-_.. .._.
a)Conccntración de la solución etérea: 0,3 ng/ml.
b)Distancia cubierta por el solvente: 1%,9cm.c)Tiempo de desarrollo: 2 horas
d)Sc1vente: acetato de etilo-étor de petróleo 609/709aprox. 3:7
o)Reactivo: para nitroanilina diazotada
Rfm Rfa Rfr Color de la mancha
0,7H5 0,75 1,37 violeta rodeada de coloración amarilla0,53 0,555 0,98 amarillo parsuzco
0,128 0,15% 0,23 amarillo
0,07H 0,0765 0,13 anaranjado
(+) Rfr: Rf relativo al fenol (Rf_fen01: 0,5%)La fracción fenólica centenaria por lo menosdos fenoles,
a los que corresponderían los deos primeros datos de Rf.
_29.
Además, 1a primera mancha de color violeta, rodeada de u
na aureola amarilla, indicaria la presencia de una mezcla de
fenoles. Sobre la misma linea, las manchas de Rf pequeño, po
drian smrdepolifenoles.
ÍNDICES DE ÁCIDCLÍÉSTER Y SAPONIFICACIÓN EN LOS REsgggrQEs DE
RAMAS Y HOJAQ:IIndlgp de ácido:
"Es el número de mg. de KOHnecesarios para neutralizar
los ácidos grasos libros de l gramodo resinoido".
gégngoa: 'n un orlenmoysr ¿o boca osmorilada se disuelven l grg1mouC r2sinoice on 5 ml. oo etanol noutralizado al rojo ¿onol.
So T‘ÏQÏÏ iv reidcz libro con solución acuosa C,lï de NaOH.l‘A. : --..:Luïngrga-lïéïíC>14;...._
poso del rosinoidc en g.
nero do mg. de KOHnecesarios para saponificar
los óstcrcs de l gramo de rosinoido"
Té nick: Luegode la valoración Co la acidez libre, se procede
a agregar 10 ml. de KOH0,5N en solución alcohólica, y so ca
lienta a rcilujo durante 2 horas (en baño maría). Sc enfría y
valora ol enceso de álcali con solución do HCl 0,5N. So efectúa
paralelamente un blanco.
I.E.: 28.05 x ml. de KOH0,5Npeso del resinoido en gramos
Índico de saponificggign:
"Es ol número do mg. do KOHnecesarios para noutralizo“
los ácidos grasos libros y saponificar los óstoros de
l gramo do rosinoide"
1.8. = ICA + IDE.
u-30-o
CUADROCQEBARATIVO QQÏLOS DISTINTOS ÍNDIggg
n? de_goter— I.A. I.E. I.S.TÍnaCl n Hojgg Ragas Hojas Ramas Hojas +_nggg_
1 37,82 17,93 5,72 80,2% h3,5n 97,67
2 39,22 16,98 5,9+ h 92,09 HH,90 109,07
3 39,16 17,53 5,67 81,22 hu,83 98,75
h 38,97 16,H}_4__¿¿72 77,55 E3369 93,96_Promcdios 38,79 17,08 5,85 82,77 H4,65 99,80
_ 31
ESTUDIO DEL ACEITE ESEI‘ECLLL HOJAS _13_EJ__R¿L_I‘E_¡¿5__D_E__L_¿Ï¿
ADESMIA BOROHIGIPBS Iflflnfianl
Obtencióndela eSencia................................Caracteresorganolópticos..............................Pesoespecífico........................................Indicederefracción...................................Indicesde ácido, óster y sapcnificación...............
del aceiteCromatografía U -e hojas y ramas......Absorc. en el u.v. de solución de aceite csencial......Determinacióndealcoholes.............................Identificación¿e ácidoslibres........................Determinaciónde compuestoscarbonílices...............Separaciónde compuestoscarbonílicos..................Investigacióndc compuestoscarboníliccs...............Investigacióndefenoles...............................Identificaciónde ácidoscsterifiCnlos.................
esterificados..Identificación de alcoholes y/o fenelus
Cromatografía gaseesa ¿el aceite es. de hojas...........1Absorc.en el ultra violeta del ac. es. o; hojas.......
Cromatografíadel aceite esencial de r:nas.............Absorciónen el u.v. del aceite esencial de ramas......
32
32
32
32
32
33
35
37
38
39
H2
50
52
53
OBTENCIÓN DQ:LA Esgygggz
Efectuado el arrastre con vapor de agua, como se indica en
la pág. 14, se procedió a insolubilizar la esencia con clorurode sodio y extrajo con éter etílico.
Recuperado ol éter, se terminó la eliminación del mismoe
presión reducida.
CARACTERQLORGANOLÉEIQOÉ:
HOJAS RAMAS
Color pardo rojizo pardo rojizontos maduros masOlor frutos maduros fru
penotrantos
En amboscasos se trata de fluidos Iirpidos, ligeramente
2
Rïsp.3;}BC;FICQ: (por duplicaJo) a 20°C
>'.;-L:‘).aoeoOIa;'.-ooot‘o
l:í-.:-ït'8-Sonontoooc0...0!-_"-._. ñ _. _ Y _.I‘ A o
a: of. ui;J‘-'RA(:C_LON_.5__29¿2¿J_: ns..._7. ... __—-....__.....«. .
oe d ¿trainó con refrautómetro de Abbe (39), que permite
efectuar 1¿ ¿octuLo con luz blanca, puesto que dispone de un
sistema compensadorpozu obtener el dato para le linea D del
espectro, en el que so suele expresar:
I-Io.jas Ram as
migo 1,49305 1,h9255I 112919.3; (verpág.29)
I90OOOIOO go.o..'- 'l '. "1 ¿I 'n.v‘394.91-14;gm;= (ver pág. 29)
+' -'r, 31+ P 01+IiOdnS.soolueoooo79’J ¡{:{maSolnooooooU
ÍIZLJ'JE DE SAEOIÏIFICACION: (ver pág. 29)
Hojas..........l23,55 Ramas........12h,63
'33SfiflyíïofifisïíLÁAfiáQïfa.DELWACïIlïfifiïï10.23-.QKQJAS...
Homesutilizado el método dc olución descripto oa la pág.
27, y para cllo el aparato Per¿in El:cr,Modolo 15HD.
So utilizó además nitrógeno como gas uluycnto y una colum
na SAIB(diacctato hoxabutirato de sacarosa 10%sobre tierras Gp
diatcrncas).
lELu>01..
3 W/w í 3 WAY
| SOLENGAL)
V ALVE VALVE
_ r7
u \ L|QU|DPQESS RE GAUGEx SAMPLING
CARM“ VALVE
GA‘ 0wSuPPLY Fl. METER'\
|-—-—-- PRESSUREREGULATOR
\ FLOW SCHEMA‘HCOF MODEL 154-0 VAPOR FRACTOÁ’ER
:Longitudes de onda
- 35
VALORES OBTENIDOS PARA LA ABSORCION EN EL ULTRAVIOLETA
DEL ACEITE ESENCIAL DE HOJAS Y RAMAS QE LA ADESMIA BO
NIOIDES (PARIÉELÁQ
Extinciones hojas Extincioncs ramas1
f mu (milimicras) ¿ log:Ï°: E ¡ log. ¿0; E
215 1,67 r 1,63220 1,81 1,68225 2,07 ‘ 1,85230 2,37 1 1,98
2 5 2,53 2,032 0 2,h7 1,92h5 2,22 1,7%250 1,83 . 1,07255 1,27 1,12260 0,83 0,84265 0,56 0,6627g 0,h2 0,55275 , 0,3%5 ¡ o,h95280 n 0,305 s 0,155285 0,272 0,h229¿ 0,2h3 0,38505 0,22 0,3h7
300 0,1 —w —- 0,305310 0,152 0,225320 0,117 0,172330 0,087 0,1263+0 0,060 0,085350 0,0%0 I 0,060
-37
ELEJJJLACJLQILQE.¿209.120.185
Los alcoholes presentes en las esencias puedenser: prima
rios, secundarios y/o terciarios. Son en general de aromasuave,
dulce y persistente, en especial, los terpénicos y sesquiterpénicos.
El fundamentode los métodos de valoración es le esterifi
cación mediante distintos radicales ácidos o sus derivados (anhi
dridos o cloruros, principalmente), variando las condiciones y elcataliZador utilizado.
Para le determinación de alcoholes totales, hemosaplicado
el metodode acetilación descripto por Fiore y adoptado por la
"Essential Oil Ass." of U.S.A.
ceá En un erlenmeyer con tapa esaerilada, se colocan, enfría
do con hielo, lO ml. de alcohol aislado o de aceite esencial (prev
Viamonte secado con SOMNeQehh.) y una vez bien frio se agregan
Ú.. ¿e iihubil-enilina (libre de monometilanilina, sueeptible
de ser ¿Cotilafia), se mezcle bien y agregan 8 ml. de cloruro de
ucetilo y 5 si. de anhídrido acético (sirve comodisolvente para
evitar le cristalización de le mesareaccionante). Se enfría unos
minutos y Ceja lue e a temperatura'ambiente por medie hora; se su»
merge en baño de esta a HOQC1 lQC, por 3 horas. Luego el aceite
acetilado se leva con 75 ml. de agua helada, por 3 veces y des
pués con porciones de 25 ml. de SOhHQal 5%, para eliminar la di
metil-enilina y con solución de CO3Na2al 10%para eliminar elácido y finalmente con agua destilada, hasta neutralidad. El acei
te se seca con SOhNa2anh. y determina su indice de óster, segúnel procedimiento indicado para los ésteres cn la pág.29.
El resultado, cuando son varios los alcoholes presentes, se
exprese comoindice de óster, luego de acetilar:. . - 2 0 n 0‘ O WI.E. oespuósde acetller - ”-*°Éhrjíjílgfigí¿í*íáa-""“‘““- peso eel aceite acecllado en g.
-38
:Tambiónpuede expresarse en porcentaje de hidroxilo alcohólico:
OH % : 17 x ml. de KOH 0,5N20 (g. de aceite acetilado - 0,021 x ml.KOH0,5
El valor 0,021 corresponde al peso que se incorpore al acw
te durante la acetilación, por m1. de KOH0,5N gastados, (es le
cir, peso del radical de acetilo, menosun hidrógeno que pierd;
el alcohol por m1. de solución 0,5N).1Valores obteni-os:
Índice de ester % OHalcohólico
Hojas. 135,36 h,u8
Ramas 159,79 H,7l
QEEEIÏICÁQI'ÓH __D‘E‘¿-jLCIDOS GRASOS LIBRES:
Los aceites esenciales, por ser productos obtenidos por
arrastrr con vapor de agua, pueeen poseer ácidos grasos libres
Los más ccmunmcntepresentes en los aceites esenciales veulátiles sen:
a) solubles en agua: fórmico, prepiónico, butirico, isobutilico e iseveleriánico.
b) pece solubles en agua: ceproico
c) inseluh es en agua: cáyrico y láurico (este último destila
parcialmente)
¿É_nicg: Se separen los ácidos con solución de CO3Na2el 5%yse hace le observación microscópica por el método de Deniges (MC
En un portaobjctcs se coloca una gota dc la solución de e
senc'a a estudiar, y una gota de reactivo plata amoniacel (N03Ap
el 3%y NH3hasta redisclución de precipitado)Se deje difundir los dos líquidos. Se observa cristales
bien netos, de diferentes aspectos, según el ácido de que setr Citi?.
- 39
En nuestro caso identificamos, en su mayor parte, ¿oigo
Brooiggigg, tanto para hojas como para ramas y en un menor por
centaje ¿gigg_¿sggggirico.
_¿ggngFICACIóN Qg_COMPUEsrosCARBQrírrggs:
Se utilizó el metodo de Shrincr y Fuson (H1)
Eggnicg: Egggïilo: 0,Hg de sulfato de 2-hdinitrofenilnidrazi“
más 2 m1. de SOHH2conc.. Se hace unapasta y se agregan 3 ml.
agua, gota a gota, agitando hasta solución completa. A la mis
ma aún caliente, se adicionan lO ml. de alcohol de 959, libre
(Dd- aldehides. Si no queda suficientemente limpida la solución,
se filtra. figlggiáfi¿¿y¿¿ygjgyygligg: 0,5g. de compuesto carbo
niliOO ¡c disuelven en 20 m1. de alcohol de 959 libro de a1dehiáos.r
Ala solución de cerbonilico se le agrega la solución del
ÏJCCtíVOy se Ceja a temperatura ambiente. En general la cris»
talización se produce entre 5 y lO minutos. Si asi no ceurrior'
a estar por una noche. Excepciona mente es necesario ca
lentar a reflujo por unos minutos. Se recristaliza de alcoLol
etílico o de acetato dc etilo, ácido acético glacial, xilono (nitrobenceno.
Ennuestro caso se obtuvieron cristales d; color rojizo,cuyos puntos de fusión corrOSpondientes son:
Hojas......... 1H2oc Ramas.......1h2/3QC.Se preparó solución alcohólica al 2%00de los cristales
de ramas para la ulterior observación al espectrofotómetro,obteniéndose los valores y curva que se consignan a continuación
--—.
- no
VALORES OBTENIDOS PARA LA ABSORCICNQ_EN EL ULTRAVIOLETA
DE DERIVADOSDE LA 2-h dinitrofenilhidrazina DE COMEHQE;
TOS CARBONILICOS DEL ACEITE ESENCIAL DE RAMAS DE LA
ADESMIA BOROHlolggfi (PARAMELJ9__
Longitudes de onda Extinciones E
mu(milimicras) log %”: EL__L J
215 0,258217 0,27218 0,275220 0,285225 0,255230 0,20223*; 0,1%2%0 1 0,122h5 0,117250 0,108255 0,12260 0,12265 0,115270 0,107275 0,105280 0,096285 - 0,082290 0,06h295 0,050300 0,038305 0,027310 0,022320 0,02333o 0,0383H0 0,058350 0,08360 0,111370 0,195375 0,1+5378 0,148380 a 0,1%9385 0,15239o 0,153 ¿395 0,1h7 sMCO 0,140 '
y
Í
y. (n “nm “4-. .,
w- .-,‘..,. ,.W.,¿...¿.._
H“Tumm.
¿EÏARACION DE LOS PRODUCTOS CARngrtrgqs (ALDE‘FHDOSY CETOEGAS):
fiátodo por absorción:
Los aldehidos y cetonas dan compuestos de adición con el
sulfito de sodio y con el bisulfito de sodio, de acuerdo a lassiguientes reacciones:
19) R-CH=O 4 SO3HNa = R-COSO3Na
2Q) R—CH=O+ SO3Na2 g R-CosogNa e OHNa
Estos derivados son doscompuestos por la acción de los á
oidos minerales o bien por los álcalis, dejando en libertad al
aldeñido o cetona, que luego puede ser identificado.
En nuestro caso, hemos procedido a la absorción con sulfi
tc neutro de sodio, en solución saturada, que pone en libertad
NaOHque se neutraliza con solución de acético 10%a la fenol
ftaloina. Se prosigue neutralizando hasta que no hay producción
ie color, controlando, en esta forma, el final de reacción.Se alcaliniza y extrae con éter etílico.
EUSÉLTJEÁCJÉJLQE. 9923923.120; _ .QAFEIPLQSLI.L.IQ.0.S.=
A la sustancia asi separada, se le aplicó la técnica de
Schiner y Fuson, descripta en Ta página 39, obteniéndose cris
tales rojizos cuyos puntos de fusión son:Hojas..........166° Ramas..........1639
Se preparó una solución alcohólica de los cristales, parala ulterior observación al espectrofotómetro, obteniéndose los
valores y curvas que sc consignan a continuación; asimismo, he
mos efectuado la separación cromatográfica en placa, de estoscristales.
.--Ñ-......
“+3
¿13341903 PAR};LA ABSCRCICN EL ULTRÁVICLBL;
DEn;__IVPDQS._D;3_.I¿-‘a2:}*.511-11.th 2.1.132_i_d2922.i.a21.9}3.291%.
eng-¿1005DEL¿aya ESENCIALDEagus YRA:1
-.—-...asigna};;u:;3_s_I.:-.I_A_1.3.03 '._._
Longitudes de onda Extinciones Hojas Extinciones Ramas
mu (milimicras) log li: E H omHw.
trJll
215
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OONÑIÑ\1QO\G\\J'LJÏLU'Ml\.)I-'MMUJUJUJfrummmmmmmmflfiúü\J'1’»3<.)l—‘l-Jl--lOOO\Ñ\JO\ÑO\O
.45
ggq-¿groomrm ¿LCDODIï-EÉÏSICÏEAL EN I-LACA‘ _L_¿¿.sg:_H__D_I_I'9_I,IfiQF_IQy_I_I¿
¿IpanemaSolvonte: 30%de acetato ue ctilo en solvente 7
Distancia cubierta por el solvente: 15,2 cm.
Rfm Rfa Color de la mancha
0,869 0,901 amarillo anaranjado
0,765 0,790 amarillo pálido
QQÉÏJEQIPLDe ¡zx.zAflicando el método de Guenthcr (H2), hemos obtenido la
semicarbazida para hojas:
gécgiggi A una solución de clorhidrato de semicarbazida, se agrg
ga una cantidaC equimolecular de acetato de sodio, y a esta so
lución se añade una cantidad ligeramente menor que la equimole
cular del aldehido o cetona; agitar, suele ser necesario agre-,
gar alcohol para obtener una solución clara. ( Si c1 compuesto
carbonílico es insoluble cn agua, conviene disolvcrlo previamen
te en 5 ó lO ml. de alcohol libre de aldchidos).
En general la semicarbazona cristaliza en pocos minutos.
Otras veces, tarda más tiempo. A veces requiere ser calcntada.
Para una purificación final, se recristaliza de un disolventeadecuado, tal comoagua, alcohol o acctona.
Hemosobtenido un precipitado blanco grisáceo de punto de
fusión 14590, para hojas.
En consecuencia, de la observación de las curvas de absor
ción en el ultravioleta, se desprende la existencia de cotonasque poseen una doble ligadura conjugada respecto a la funcióncarbonilica. Las curvas de absorción en cl ultravioleta de las
2-H dinitrcfenilhidrazonas, correspondcrian a cetonas tcrpénicas.
- hó _
II‘JVBSTIGACIOH D3 FzNQIigs
De la sustancia fenólica, separada del resinoide de ramas,
se procedió a efectuar el arrastre por vapor ¿e agua, a efectos
de obtener los feneles aromáticos, cuyes 3-5 dinitrobenzoatos
se separaron de acuerdo al método siguiente:
gggnigg: Se disuelve l g. de cloruro de 3-5 dinitrobenzoilo (pu
ro; en lo posible de preparación reciente), en lO ml. dc benceno,
y a'esa solución se le agrega el equivalente de fenol a esterifi'
car, bien seco. Se agrega dimetilanilina y calienta suavemente.
Una vez frio, se agrega un exceso de éter y se procede a lavar
con ácido diluido, luego con álcali diluido y finalmente, con a
gua hasta neutralidad. Se evapora la solución etárea a sequedad
y recristaliza de éter Ce petróleo, bencenou otro disolvente apropiado.
En nuestro caso homes obtenido pequeñas places y agujas que
funden a lHEQ, 1589 y terminan de fundir a 1689C.‘
De acuerdo a la cromatografía efectuada en placa (pág. 28),
y a los puntos de fusión Ce los 3-5dinitrobenzoatos, habria:
7 fïbnol cuyo Rf ’C5.,0,53 manchacolor amarillo y P.F. 1h50;
isocugenol, do Rf 0,7h5, color violeta u P.F.15890, y presumible
mente, m-cresol, de Rf semejante al anterior, color amarillo y P.F. 16890.
IDENTIFICACION DE ACIDOS Y ALCOHOLESY/O FENOLBS ssrggiriggpgg:
Previamente saponificados los ésteres con KOH0,5N. en solu
ción alcohólica, se procedió a la identificación de los ácidos
por un lado, y los alcoholes y fenoles por otro lado, de acuerdo
a los métodos indicados para cada caso.
ACIDOS: Se determinaron per el método de Deniges descripto en
la página 38, para ácidos libres. Se identificó: ácido propiónicol
47-.y ácido isobutirico, cuyas nicrofotografias se observan a conti#nuación:
/‘oo a.
ALCOHOLEQ_I/OFENOLES: Para las hojas, hCMrs doscartaCo la po
siblilidad dc prcscncia de fenoles, de acuerdo a las curvñs de ;absorción en el ultravioleta.
Yara la identificación do alcoholes, hemosobtenido los 3-5
dinitrodorivados y determinado sus respectivos puntos de fusión:
- #8 _
Hojas (placas marrones).....l569/157QC
Ramas(placas marrón claro).....l33QC
Consideramosentonces la posibilidad de l/Ü¡fonchol de P.F.
15700 ó borneol de P.F. 156/1579 para hojas y de isobornool, para
ramas.
QfiQEATOGRAFIA GASBOSA:
Respecto a la cromatografía gaseosa, podemosobservar poca
resolución, con un pico alto cn la fracción nQH de hojas, que
corresponde a los ésteres; para ranas no se observa tal pico.
A continuación, se consignan los gráficos obtenidos, como
así también, las curvas de absorción cn el ultravioleta y cuadros
de valores, para las distintas fracciones.
- 50
yggggggiggyggïgyys_PAR1 LA ABSORCION31 3L ULngïgggggg
Qg_;¿s FR¿QQJ;;;;;¿;1_;¿MQR031100R¿FI¿ 0133051-3313193_
22;;533011L 33 HOJ1s DE LA ADE3NIABCRONICIDES'(P; pia
LA 2
Longitudes de onda fracción l * frac. 2‘ í frac.3‘ frac.h‘
mu (milizicras) log.¿93 E E E E
215 0,35 ‘ ¡ 1,6 2,2222o C730 1753 Qahh225 0,275 1,37 2,62230 0,26 1,25 2,72235 0,2%5 1,16 2,582h0 0,238 1,1h 2 522H5 0,23 1,1h 2,1250 0,22 1,17 1,8%255 0,21 1,0% 1,06260 0,125 0,86 1,13265 0,10 0,73 0,92329 0,167 0,67 0,83gg; -,:a -,-— -,——:7á 0,15 0,6% 0,78280 0,137 0:575 0:72285 0,12 0,51 0,65290 0,105 0,hh5 0,565295 - au0,003 a -0,h0 0,50300 0,074 ' 0,31 0,525305 -,-: ; ’a” '9"310 0,056 - 0,235 0,32320 0,0h2 0,18 ' 0,255330 ’l"? “7"" '7"340 0,028¡_ 0,096 0,15350 0,02% 0,072 0,108
0 Extinciones
,- 53,
XÉLORES OBTEHIDCS FAHL LA ¿BSCRCICK EE EL ULTRATICLETA
UE LÁS FR¿”CICÏES D: LL CRCHLTOGRgïï; GASEOSADSL ¿CEI
¡—'.| LI'J ESEHCÏnL DE RAMAS DE L“ LDJSZIA ÉCIOHICIDES (PARAHE
LÁL.
Longitudcs de onda Extincioucs fqu.l Ext. frac.2 Ext. frac.3
mu (milimicras) los. %2-: E E E
215 0,006 0,75 1,50220 0,013 0,91 1,70225 0,018 1,10 2,06230 0,021 1,96 2,32235 0,020 1,16 2, g200 0,027 1,02 2,3205 0,029 1,20 2,10250 0,029 0,96 1,70255 0,02 0,655 1,20260 0,026 0,02 0,83265 0,020 0,295 0,615270 0,02"I -0,235 0,51275 0,018 0,203 0,05280 "“0,016 "M0;18“‘- 0,005290 0,0-0 -0,13 0,303C0 O,CCC C,O92 0,23310 0,00; 0,066 0,18330 0,0CC 0,028 0,13350 0,000 0,020 0,090
W.» H‘.4vu:.
-55
RESUMENY CONCLUSIQïgfi:Nuestro trabajo ha teniúo por objeto e
fectuar el estudio del resin(ide y aceite esencial d; la Adesmia
boronieiúes Hooker (paranela), no sólo Pcsde el pento de vista
cientifico, sino también comouna contribución al conocimiento
de los aceites esenciales y plantas en general, Ge nuestro pais;
La bibliografia existente sobre este tema es muyescasa ylos articulos encontrados no hacen referencia e su composición.
Hemoscomenzado con una reseña y clasificación de los pro
ductos aromáticos y de los distintos grupos en que se dividen, en
tre los que encontramosa los aceites esenciales o volátiles.
Determinamosconstantes físicas y químicas, tanto del resinci
de comodel aceite esencial y a‘ dados ptr la ospectrofotomctria
y cromatografía en placas y en la e gaseosa, comoasi también perU1
las técnicas clásicas indicadas vara cada caso, procedimes a la separación e identificación de compuestos.
Respecto a las técnicas segui-as para 1a identificación de
compuestos, cabe señalar que en se mayoria son aplicables cuando
los productos son puros o se encuentran en cantidad apreciable,
por lo que se nos ha presentado muchas dificultades, ya qu; hemos
trabajado con muyescasa cantidad de nuestra.
A pesar Ge ello, hemos constataCo la resencia Ce ácidos li
bres_y combinados, dejando asimismo constancia Ge puntos de fusión
dc derivados de cetonas, alcoholes, fenoles libres y ombinad
que prodrian ser aprovechadcs en posterirres cstuóios.
Teniendo encuenta que ;n las zonas (once se encuentra la Adeg
mia, se la conoce comode valor medicinal, debiera encararsc su es
tuCio desde el punto de vista farmacológico, ya que desfe el punto
de vista de producción de compuestos no cabría s consider;ción.
j (J,
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(H)
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