Download - Curs 5 Electroforeza Capilara
-
7/30/2019 Curs 5 Electroforeza Capilara
1/15
ANALIZEFIZICO - CHIMICEELECTROFOREZA
-
7/30/2019 Curs 5 Electroforeza Capilara
2/15
2
Electroforeza= metoda ce se bazeaza pe
migrarea componentilor dintr-o proba, supusaunei diferente de potential, intr-o solutie sau
printr-un suport solid poros (hartiecromatografica, gel), separarea explicandu-se
prin vitezele de migrare diferite alecomponentilor incarcati electric pozitiv saunegativ, care sunt atrasi de polii opusi aicampului electric, proportional cu natura,
marimea si sarcina lor.
-
7/30/2019 Curs 5 Electroforeza Capilara
3/15
3
Mobilitatea electroforetica
= viteza cu care se deplaseaza particulelepurtatoare de sarcini electrice, in camp electric inconditiile experimentale date
In care:
d = distanta de migrare parcursa in timpul t (m);
E = gradientul de potential (V/m);0 = mobilitatea electroforetica (m
2/V/s).
Et
d
0
-
7/30/2019 Curs 5 Electroforeza Capilara
4/15
4
Mobilitatea electroforetica vatriaza functie de :
Factori ce depind de particula: marimea
natura
forma
sarcina
gradul de hidratare si disociere
coeficientul de frecare
-
7/30/2019 Curs 5 Electroforeza Capilara
5/15
5
Mobilitatea electroforetica vatriaza functie de :
Factori ce depind de solutia de electrolit:
natura
concentratia forta ionica
pH-ul
vascozitatea
temperatura
-
7/30/2019 Curs 5 Electroforeza Capilara
6/15
6
Factori care influenteaza electroforeza
Natura moleculelor separate Marimea moleculelor
Mobilitatea
Natura Sarcina
Aparatura
suportul
-
7/30/2019 Curs 5 Electroforeza Capilara
7/15
7
Factori care influenteaza electroforezaCurentul electric
Deplasarea electroforetica este proportionala cu
Mobilitatea
Campul electric
Timpul de trecere a campului electric
d = distanta parcursa de particulaU0 = mobilitatea particulei (V/cm)
E = tensiunea (V)
t = timpul de trecere al curentului
tEUd 0
-
7/30/2019 Curs 5 Electroforeza Capilara
8/15
8
Factori care influenteaza electroforeza
pH - ul In cazul acizilor si bazelor tari (electroliti tari)
pH-ul nu influenteaza migrarea
Natura solutiei
natura sarurilor
natura acizilor
natura bazelor influenteaza
natura altor substante mobilitateaexistente in solutie
-
7/30/2019 Curs 5 Electroforeza Capilara
9/15
9
Electroforeza capilara Cea mai noua si mai utilizata tehnica electroforetica
utilizata pentru separarea speciilor incarcate cu sarcinielectrice
Pentru efectuarea separarilor se efectueaza unmontaj automatizat ale carui elemente principale sunt:
tub capilar sistem de introducere a probei
sistem de detectie
electrozi de platina sursa de alimentare cu curent
-
7/30/2019 Curs 5 Electroforeza Capilara
10/15
10
Electroforeza capilara
-
7/30/2019 Curs 5 Electroforeza Capilara
11/15
11
Avantajele electroforezei capilare:
timpi de analiza relativ scurti;
volume mici de proba;
cantitati mici de solventi (tampon);
posibilitatea automatizarii intregului ciclu deanaliza;
poate opera atat in medii apoase cat si in mediineapoase;
detectia se face in capilar (UV); sensibilitate inalta.
-
7/30/2019 Curs 5 Electroforeza Capilara
12/15
12
Miscarea unui analit incarcat pozitiv
+ -+
+ -
Miscarea unui analit neutru
Miscarea unui analit incarcat negativ
+ --
Uep= mobilitatea electroforetica
Ueo = mobilitatea electroosmotica
UR = mobilitatea rezultanta
-
7/30/2019 Curs 5 Electroforeza Capilara
13/15
13
Separarea unui amestec de cationi
-
7/30/2019 Curs 5 Electroforeza Capilara
14/15
14
Separarea unui amestec de compusiaromatici
-
7/30/2019 Curs 5 Electroforeza Capilara
15/15
15
Separarea unui amestec de medicamente