CASOS CLINICOS Y HERRAMIENTAS DE
DIAGNOSTICO EN AVICULTURA
Eliana Icochea, Laboratorio de Patología Aviar y Producción Avícola
Facultad de Medicina Veterinaria – Universidad Nacional Mayor de San Marcos
INTRODUCCIÓN
Enfermedad es la pérdida de la salud del cuerpo y es el resultado de la alteración de las
funciones normales del cuerpo, el grado de alteración determinará la severidad de la
enfermedad.
Diagnostico es el arte de reconocer una enfermedad y distinguirla de otra.
Las enfermedades aviares pueden ser de etiología diversa:
Enfermedades infecciosas:
- Por virus - Por Bacterias, Micoplasmas - Por Hongos y levaduras - Por Parásitos: Insectos y artrópodos, helmintos , protozoos
Por deficiencias, excesos o desbalances nutricionales
Por agentes físicos y mecánicos.
Por compuestos químicos y tóxicos
Metabólicas, genéticas y las de etiología desconocida
El diagnóstico puede ser hecho en base a:
- Signos clínicos y lesiones a la necropsia (Requiere confirmación) - Serología - Aislamiento del agente - Histopatología - Detección del ácido nucleico.
DIAGNOSTICO DE CAMPO:
Es fundamental identificar la presencia de una enfermedad lo mas pronto posible
durante el proceso, cuando efectivos programas preventivos pueden ser iniciados, para ello el Médico Veterinario que realiza el diagnóstico debe conocer perfectamente cuando un ave esta sana y cuando no lo esta, esto se aprende observando constantemente el comportamiento de las aves lo cual permite percibir la presencia de ruidos, miradas tristes, hinchazones, lagrimeos, andar tambaleante, aspecto no normal, etc. que muestran las aves. Debe ser de rutina la observación panorámica y a la vez individual de todas las aves de los lotes de la granja, diariamente. Si se encuentra un ave aparentemente enferma o aves muertas, examinarla, realizar la necropsia y buscar otros animales con el mismo cuadro, este procedimiento determinará si estamos ante caso aislados o ante verdaderamente un problema del lote.
La experiencia indica que la mayoría de problemas que llegan a los laboratorios de
diagnóstico son condiciones no infecciosas producidas por fallas de manejo, factores
ambientales y stress, por lo tanto inmediatamente investigue errores de manejo y condiciones
de crianza, vea cual es el problema: Es respiratorio? por ejemplo si observa cabezas hinchadas
verifique la temperatura y ventilación, presencia de amoniaco, filtraciones de agua, tenga en
cuenta la infraestructura del galpón: material y altura de techos, ubicación del galpón etc. Hay
un cuadro entérico? Observe las cloacas, la condición de humedad de la cama, comunique al
nutricionista. Observa menor peso o tamaño en las aves? vea el manejo de los pollitos, el
número de comederos, la calidad y granulometría del alimento, comunique al nutricionista. Los
pollitos BB están muriendo? averigüe como llegaron, como fue la recepción, de que lote de
madres proceden, avise a la planta de incubación. Etc. Tome nota principalmente de aquellos
factores que podrían estar relacionados al problema. Analice siempre los registros de
producción, vea el consumo de alimento y la ganancia de peso corporal. Cuando se está en
campo se tiene la ventaja de que se pueden observar todos los aspectos, manejo del
medioambiente, abastecimiento de agua, del alimento, la calidad de la cama etc. Muchas veces
estas observaciones permiten arribar al diagnóstico de la causa en el campo y el problema es
corregido inmediatamente. En otras ocasiones es necesario acudir al laboratorio, el diagnóstico
debe ser hecho lo mas pronto posible.
DIAGNOSTICO DE LABORATORIO:
Comprende los siguientes elementos:
Historia clínica
Examen clínico
Necropsia
Exámenes de Laboratorio
Exámenes complementarios
HISTORIA CLINICA
Una buena historia proporciona la clave que ayudará a resolver el problema. Es
importante elaborar una ficha clínica que contemple todos los datos posibles relacionados a la
granja. Anamnesis:
Tomarse el tiempo suficiente para conseguir la información necesaria sobre:
- Nombre, propietario, domicilio, fecha. - Tipo de ave, edad, población total., población afectada, - Número de aves enfermas y muertas - Signos clínicos, duración de los mismos. - Programa de vacunación. - Consumo de alimento y peso corporal - Fuente de alimento y fuente de agua. - Manejo de la ventilación - Material de cama, condición de humedad o sequedad de la misma. - Drogas que están siendo usadas. - Temperatura ambiental - Información sobre la infraestructura del galpón.
La forma como se presenta el problema ayuda a orientar el diagnóstico. Tener en
cuenta como se presentan las manifestaciones clínicas:
1. Enfermedad infecciosa de tipo entérico por Ej. Infección por salmonella o colisepticemia en
gallinas de postura comercial en piso, Coriza infecciosa etc. Comienza por un corral y de ahí
se va desplazando poco a poco al resto de galpones.
2. Enfermedad infecciosa respiratoria viral: BI, ENC SCH. Etc. Se inicia en un galpón, en todos
los corrales. De ahí se difunde a los otros galpones.
3. Procesos compatibles con intoxicación alimenticia. Se observan signos clínicos
indistintamente en todos los galpones , corrales y generalmente en todas las granjas de la
empresa que usan los mismos insumos. Aparecen ave muertas en cualquier corral.
SELECCIÓN DE LAS MUESTRAS:
Se deben seleccionar las aves que son representativas del problema tanto muertas
como enfermas, un grupo de aves que están sufriendo de la enfermedad aguda, con signos
clínicos evidentes, por ejemplo si nos preocupa que las aves están roncando, remitir al
laboratorio un grupo de aves con ronquera, si nos preocupa una mortalidad que aparece
súbitamente remitir tantas muertas como sea posible, si hemos notado que están apareciendo
aves postradas remitir las aves cojas.
EXAMEN CLINICO:
Es el examen externo individual o de un grupo de aves que están sufriendo de la
enfermedad aguda, con signos clínicos evidentes, el clínico a través de los órganos de los
sentidos educados: mirando, escuchando, palpando y olfateando debe percibir toda actitud
anormal y obtener la mayor información posible para tratar de determinar cual de los órganos o
sistemas es el afectado y ante que tipo de problema estamos; Respiratorio, nervioso, digestivo,
locomotor etc.
Si el problema presenta mortalidad es necesario examinar un grupo de animales recientemente
muertos, no descompuestos.
MUESTRAS DE SANGRE:
Antes de proceder al sacrificio siempre es necesario tomar muestras de sangre, si ellas
no son necesarias podrán ser descartadas, en lo posible 2 ml de sangre es una cantidad
adecuada.
NECROPSIA:
Tanto las aves enfermas como las muertas deben ser necropsiadas. La necropsia debe
ser minuciosa y completa, debiendo examinarse minuciosamente todos los órganos.
La técnica de necropsia permitirá la observación de lesiones y la toma de muestras.
PRUEBAS DE LABORATORIO:
Si bien por medio del examen clínico y con los hallazgos de necropsia podemos orientar
el diagnóstico de la enfermedad, debemos recordar que este diagnóstico es en la mayoría de
los casos presuntivo y que para su confirmación se requiere de los exámenes de laboratorio.
En base a sus conocimientos de anatomía, fisiología, patología y del comportamiento de
los animales, el clínico debe saber que exámenes complementarios necesita y debe interpretar
los resultados en relación al caso clínico estudiado.
El Patólogo aviar de acuerdo al tipo de problema del que se sospecha determinará que
pruebas de laboratorio utilizar.
I. Exámenes serológicos: La colección de la muestra de suero permitirá la medición de anticuerpos con fines de diagnóstico u obtener información sobre el estado inmune del ave.
La interpretación de los datos obtenidos por serología deben hacerse con mucho
cuidado y se realiza en función del programa de vacunación empleado. En aves no vacunadas
tiene valor diagnóstico. Las pruebas comúnmente usadas en aves son:
1. ELISA: Existen Kits comerciales disponibles para casi todos los agentes, es de rutina la detección de anticuerpos a los virus de la Enfermedad de newcastle (ENC), Bronquitis infecciosa (BI), Enfermedad de Gumboro(EG) y Reovirus (REO) por este método. También es empleada para Micoplasma gallisepticum (MG) y Mycoplasma synoviae (MS), Leucosis aviar(AVL), Pneumovirus (TRT o SCH), Laringotraqueitis aviar(LTA), Influenza aviar(IA) y para el Agente de la Anemia del Pollo(CAV). La única desventaja es que la prueba solo puede ser usada en la especie que ha sido usada para producir los anticuerpos secundarios del conjugado.
2. Inhibición de la hemaglutinación: Se usa para detectar anticuerpos a agentes hemaglutinantes: ENC, AI, EDS, MG, MS y para BI (Inducido con fosfolipasa C.) Es una prueba muy sensible y específica, pero detecta mayormente IgM y poca IgG por lo tanto es útil para detectar infecciones de campo. Contrariamente no es útil para medir protección de programas de vacunación. Se puede usar en cualquier especie de ave por ello es la prueba oficial de la Oficina Internacional de Epizootias (OIE) para ENC e IA en esta última identifica el tipo de hemaglutinina viral.
3. Precipitación en Agar (AGP): Es poco sensible pero muy específica, detecta niveles altos niveles de anticuerpos del tipo IgG, es útil para detectar desafíos de campo. Es muy usada para detectar anticuerpos a todos los virus tipo A de Influenza aviar y es considerada también la prueba oficial de la OIE para este agente. No diferencia el tipo de hemaglutinina. También puede ser usada para otros agentes incluyendo enfermedad de Marek.
4. Virus neutralización: Poco usada como rutina en la detección de anticuerpos, discrimina serotipos por lo tanto es mayormente usada en laboratorios de diagnóstico e investigación para identificación y diferenciación de virus o anticuerpos desconocidos. Se puede hacer en embriones de pollos o cultivos celulares.
5. Aglutinación: Es una prueba tamiz para detectar anticuerpos a Salmonellas y
Mycoplasmas y generalmente los resultados positivos requieren ser confirmados con otra prueba serológica. También se usa para Coriza infecciosa.
II. Exámen bacteriológico:
Si las lesiones macroscópicas indican que son necesarios cultivos bacterianos, ellos
deberán ser hechos de las superficies no expuestas.
III. Aislamiento viral:
Si se sospecha de una enfermedad viral y se requiere de un aislamiento, deberán ser tomadas
muestras relacionadas al problema que se sospecha, por ejemplo si se sospecha de una
enfermedad respiratoria deben tomarse secciones de la parte baja de la tráquea y pulmones. Si
se sospecha de DVA aviar tomar las lesiones cutáneas.
IV. Pruebas moleculares
Amplifican el ácido nucleíco in vitro a niveles que pueda ser detectado. Detecta
porciones del ácido nucleíco, DNA o RNA que son específicos de cada microorganismo. La ventaja de estas técnicas es que son muy sensibles y permiten a la vez detectar e identificar microorganismos Las herramientas de diagnóstico molecular de enfermedades de aves incluyen principalmente a la Reacción de Polimerasa en Cadena (PCR en punto final y PCR en tiempo real), Reversa Transcriptasa – PCR (RT-PCR), y al Polimorfismo de la Longitud de los Fragmentos de Restricción (RFLP). Existen actualmente protocolos validados para la mayoría de patógenos en aves.
V. Exámenes histopatológicos:
En muchas de las enfermedades de aves la evaluación histopatológica es
imprescindible y sirve para establecer un diagnóstico definitivo por medio de lesiones
patognomónicas o por medio de identificación del agente usando tinciones específicas. En
otros casos ayuda a obtener la el diagnóstico definitivo al proporcionarnos información sobre
las lesiones histopatológicas de los tejidos. Por ello es preferible tomar la muestra aunque a lo
mejor después no la necesitemos.
EXAMENES COMPLEMENTARIOS:
Para diagnósticos tales como intoxicaciones de origen diverso o Aspergilosis, que requieren investigar la fuente de contaminación es necesario realizar el análisis de muestras de todo aquello que estuvo en contacto con las aves por ejemplo alimento, agua y cama .
Tabla 2. Diagnostico diferencial de enfermedades respiratorias en aves: Aspectos clínicos y de laboratorio
Enfermedad y
agente causal
Huéspedes
Resistencia agent
Químicos y físicos
Periodo de
incubación y
transmisión
Signos clínicos
Principales
lesiones
Muestra
de
elección
Aislamiento y/o
detección
Pruebas
serológicas mas
usadas
Influenza Aviar
Familia Orthomixoviridae
Virus Influenza A
(ARN ss-)
8 segmentos
Antigénicamente inestable
16 HA y 9 NA
Mutante
Virus con actividad
hemaglutinante
Múltiples especies Principal reservorios: aves silvestres acuáticas y costeras, principal anseriformes
P.I.: De 03 a 14 días.
T.Horizontal:
Secreciones respiratorias o heces por
contacto directo de
aves enfermas,
(silvestres o domesticas),
o fomites,
personas (zapatos y
ropa), vehículos.
Variables, según: Patogenicidad viral, especie y edad.
patog.: sin signos o
respiratorios leves o
severos. Adultos: producción. Severidad según infecciones concurrentes o factores ambientales.
patog.:( H5 y H7)
Silvestres pocos signos excepto H5N1 de Asia. Domesticas: depresión,
mort., signos nerviosos
y producción huevos, signos respirat. y diarrea.
Variables, según:
Patogenicidad viral, especie y patógenos 2º.
patog.: Más en sist.
respiratorio, traqueítis /exudados, aerosaculitis, sinusitis, neumonía Peritonitis/ huevo, regresión ovario, huevos deformes o cáscara delgada.
patogenicidad.:
Lesiones necróticas, hemorrágicas y edematosas Principalmente
en digestivo, proventr, p. de peyer y tonsilas cecales. Hinchazón de cabeza, cuello y patas por edema subcutáneo.
Tráquea, pulmones,
Cerebro, heces frescas, hisopados de cloaca
Huevos embrionados de 10 días.
Saco alantoideo
Muerte de embriones hasta 2do pasaje, con hemorragias.
HA fluido alantoideo (FA), Diferenciar de vENC con kits rápidos de detección de antígenos para Influenza aviar
RT-PCR.
Patogenicidad: en pollos o PCR para ver secuencia de AA en punto de corte de proteína H
Inmunodifusión en gel de agar
ELISA,
Determinación de subtipo por IH, IN o PCR.
Virus relativamente inestable en ambiente. Inactivado por calor y desinfect, pero protegido por secreciones nasales
y heces que la resistencia a la inact. quím. y física.
Enfermedad de Newcastle
Fam Paramixoviridae
Gen. Avulavirus
PMVA-1(ARN ss-)
Muy estable. Un solo serotipo.
Actividad hemaglutinante
Múltiples especies Principal reservorios: Aves de riña y aves silvestres
P.I:2 a 15 días.
T.Horizontal:Secreciones respiratorias o heces, por
contacto directo con
aves enferm, o fomites, Personas: zapatos,
ropa, vehiculos
Variables, según cepa viral, especie, edad, stress, estado inmune.
Severos signos con alta mortal, signos nerviosos, respirat, queratitis,
producción de huevos, depresión y diarrea verde.
Vacunas: Reacción post vacunal o infección subclínica
Variables, según cepa viral y órgano afectado.
Velogénica viscerotropica: Más común, lesiones necróticas, hemorrágicas y edematosas. Princpalm en digestivo, proventr, p. de peyer y tons. cecales. Tracto respiratorio: Aerosaculitis. Peritonitis/ huevo, regresión ovario, huevos deformes o cáscara delgada.
Silvestres: Signos nerviosos.
Tráquea, pulmones, cerebro, heces frescas, hisopados de cloaca
Huevos embrionados de 10 días. Saco alantoideo
Muerte de embriones hasta 2do pasaje, con hemorragias. HA del FA. Diferenciar de vIA por IH del fluido alantoideo con suero especifico para ENC o por Kits rápidos de detección de Ag para ENC Patogenicidad: por IPIC o RT-PCR para ver secuencia de AA en punto de corte de proteína F
ELISA, HI,
Virus relativamente
inestable en
ambiente. Inactivado
por calor y desinfect,
pero protegido por
secreciones nasales
y heces que
resistencia a la inact.
Quím. y física.
Laringotraqueitis
infecciosa
Herpesvirus
ADN sd
Latencia
Pollos.
Reservorios: Aves
enfermas, recuperad o
vacunadas c/v. viva
(riña y postura)
P.I:6 a 12
días.Transmisión
horizontal por vía
ocular y respiratoria,
fuentes: aves
portadoras, muertas,
equipo, ropas,
vehículos, cama
contaminada.
Transporte de aves
vivas. Chacras,
guano de brote.
Lenta diseminación
Variables, según
Patogenicidad viral,
Enfermedad respiratoria
Conjuntivitis, lagrimación,
ronquera, disnea y
muerte por oclusión de
tráquea. producción de
huevos, Aves
recuperadas son
portadoras
Laringe: Placas
diftéricas.
Tráquea: Moco
excesivo,,
desprendimiento de
tejido necrótico, c/s
sangre en el lumen.
Oclusión traqueal.C.
inclusión intranucl.en
tráquea, conjuntiva
solo estadios iníciales.
Tráquea,
conjuntiva,
Nervio
trigémino
Huevos
embrionados de 11
días. MCA
alantoidea hasta 2do
pasaje, Placas en
membrana. C. de
inclusión en tráquea
o MCA.
PCR directo de
raspado traqueal o
de trigémino.
ELISA:
Kits comerciales
variable sensibilidad
Sensible a agentes
físicos y químicos.
Sobrevive en cama de
3 a 20 días y heces bajo
jaulas por 3 días de 11
a 24.5 oC. Inactivación
por calor y compostaje.
Bronquitis
infecciosa
ARN ss+
Muchos serotipos
Cepas con
afinidad por tracto
respiratorio
(Mass, Conn, Del,
Ark) o renal
(Gray,
Australiana).
Infecta solo pollos, P.I:18 a 36 horas.
Transmisión
horizontal. rápida
diseminación en el
lote vía respiratoria,
Problemas por
crianza de múltiple
edad, vacunación
desuniforme
reacciones cíclicas
del virus vacunal
Ronquera, estornudos,
descarga nasal,
lagrimación,
En adultos producción
de huevos, huevos
deformes, con cascara
delgada o rugosa.
Cepas renales: No signos
respiratorios y alta
mortalidad
Pollos: Exudado
seroso, catarral o
caseoso en tráquea y
senos. Sacos aéreos:
espuma, opacos o
caseum amarillento.
Pollitos: tapón
bronquial. Adultas:
peritonitis por huevo.
Renal: urolitiasis.
Tráquea,
pulmón,
tonsilas
cecales
Huevos
embrionados de 10
días. Saco
alantoideo Hasta 5
pases, Enanismo y
encurvamiento
Identificación
serotipo RT-PCR,
RFLP o curva
melting en PCR
tiempo real.
ELISA
HI
Virus fácilmente
destruido por agentes
físicos y químicos.
Inactivado por calor y
mayoría de
desinfectantes.
Síndrome de
Cabeza Hinchada
Metapneumovirus
Virus ARN ss-
Subtipos A,B ,C,D
Múltiples especies pero
enfermedad solo en
pavos y pollos.
Reservorios
aves silvestres.
P.I:18 a 36 horas.
Transm. horizontal
Diseminación
rápida. Contacto
directo, aerosol,
Aves infectadas,
Agua, personas,
vehículos, equipo
aire. Persiste no +
de 8-10 días p.i.
Pollos: Celulitis facial.
Severidad por
temperatura, ventilación,
densidad, polvo,
amoniaco, VBI, E. coli,
otros agentes.
Torticolis. producc.
Pavos: Severa enfermed.
Respiratoria hinchazón
de senos,
Pollos: Exudado
edematoso o caseoso
en subcut de cabeza.
Osteítis.
Peritonitis huevo.
Pavos: pericarditis ,
aerosaculitis con
caseum.
Cornetes
nasales,
hisopados de
cornetes,
hendedura
palatina,
traquea.
Aislamiento difícil
corto periodo para
aislamiento o
detección viral.
Cultivo de órganos
traqueales.
Detección o
subtipos: RT-PCR
ELISA indirecto o
competitivo.
Virus fácilmente
destruido por agentes
físicos y químicos.
Difteroviruela
Avipoxvirus
ADN
Virus muy grande
32 genes
Pavos, pollos palomas,
canarios, psitácidas.
P.I:4 a 10 días.
Transmisión
mecánica:
Accidental al
conducto lagrimal o
heridas o insectos
como vector.
Diseminación lenta.
Forma cutánea ,
diftérica o mixta.
Signos varían según
huésped.
Forma diftérica:
complicación respiratoria.
Nódulos o costras
periorbital, cresta
barbillas.
Difterica: nódulos
hiperplasicas en mucosa
oral, glotis, hendidura
palatina.
Lesiones
cutáneas o
diftéricas.
Huevos embrión. 11
días.MCA
alantoidea Placas
en membr.
C. de inclusión en
epitelio o MCA.
AGP, ELISA pero
comúnmente no
usadas
Variable resistencia,
sobrevive en costras
descamadas por meses
a años
Infección por
Mycoplasma
gallisepticum
(MG)
Actividad
hemoaglutinante
Pollos y pavos.
Paseriformes.
Fácilmente inactivado
fuera del huésped..
P.I:6 a21 días.
Transm. Vertical y
horizontal lenta y
persistente.
Aerosol, contacto
directo, aves
infectadas, o
fómites.
Mas frecuente en
ponedoras
comerciales.
En pollos y pavos::
enfermedad respiratoria
crónica.
Pavos sinusitis
infecciosa.
Severidad variable,
triada clásica:
Pericarditis, perihepatitis
y aerosaculitis.
En pavos sinusitis.
Reproductoras:
Peritonitis por huevo
liquida.
incubabilidad,huevos
picados no nacidos.
Tráquea o
hisopados
traqueales
Cultivo en caldo y
agar PPLO.
PCR
Aglutinación en
placa,
ELISA.
IH
Coriza infecciosa
Avibacterium
paragallinarum
Serovares
A, B, C
Pollos y gallinas
Fácilmente inactiv. por
agentes físicos y
químicos
Fácilmente inactivado
fuera del huésped.
P.I:24 a 48 horas.
Transm. Horizontal
moderada a rápida.
Reservorio: Aves
infect, o portadoras
sanas. En crianza
de múltiple edades
Pollos: Hinchazón de
senos infraorbit. Y
barbillas Severa
depresión, complicación
E. coli.
Ponedoras hinchazón
senos infraorb y
produc, peritonitis por
huevo
Inflamación catarral de
senos. Edema
subcutáneo de barbillas
y región submandibular.
En ponedoras además
peritonitis por huevo y
regresión de ovario.
Senos
infraorbitarios
Cultivo agar sangre,
cepa nodriza Staph
o NAD.
Microaerobio
Serotipificacion por
aglut, HI o PCR.
IH
Colibacilosis
respiratoria
Escherichia coli
Pollos de carne y
pavos.
Bact. oportunista
2rio a virus respira,
manejo de ambien
o inmunosupresión.
Dificultad
respiratoria,
consumo, retraso y
mortalidad.
Tráquea, pulmones, sacos
aéreos engrosados o
exudado caseoso en
superficies serosas.
Sacos aéreos
Cultivo agar
Nutritivo y
selectivos.
Identificación
bioquímica:
No usadas
Forma crónica de
Infección por
Pasteurella
multocida
Más frecuente en
aves reproductoras
pesadas o pavos.
Excreciones
respiratorias
contaminan agua y
ambiente.
Roedores o
acequias cercanas
Hinchazón de
barbillas, articulac. o
almohadilla plantar.
Tortícolis. En reprod.
pesadas muerte
súbita.por Interacc
con To y stress de
inicio de producción
Reproductoras carne:
Congestión general, ovario
hemorrágico.
Pavos: Neumonía,
hemorragia pulmonar,
exudado caseoso en
huesos
Pulmones, sacos
aéreos, hígado.
Cultivo agar
Nutritivo y
selectivos.
Identificación
bioquímica:
Indol y H2S
ELISA pero raramente
usada
Aspergilosis
Aspergillus
fumigatus
Mayoría de especies
Oportunista por
inhalación en p.
incubación o cama
de galpón.
Boqueos, depresión
consumo, retraso
y mortalidad por
gliotoxina,.
Oftalmitis, inf.
sistémica signos
nerviosos
Nódulos blanquecinos en
sacos aéreos, pulmones.
Granuloma micótico.
Material caseoso cámara
anterior del ojo.
Nódulos o
granulomas en
pulmones, sacos
aéreos, ojo o
cerebro.
Cultivo agar
Sabouraud
No usadas
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