Download - Anticuerpos monoclonales
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ANTICUERPOS MONOCLONALES
CONDOR OCHOA, Giancarlos
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Son glucoproteínas especializadas
Producidas por linfocitos
B
Se encuentra 29 anticuerpos monoclonales aprobados por la Food and Drug administration
(FDA –EE.UU)
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Proteína que envuelve una estructura bioquímica compleja
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Involucra el reconocimiento
antigénico
Fracción cristalizable –
media funciones
efectoras como la citotoxicidad
celular
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• La producción de anticuerpos monoclonales se dio con al tecnología creada en 1975 por Georges Kohler y Cesar Milstein
Consistía:
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Una línea celular estable
Secretora de un isotipo
determinado de Ig.
Contra una antígeno especifico
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Técnica de hibridación
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Memoria inmune
Anticuerpos contra
antígenos específicos
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No es secretora de anticuerpos
Deficiente en la encima Hipoxantina-guanina-
fosforribosil-transferasa (HGPRT)
Hipoxantina-guanina-fosforribosil-transferasa
(HGPRT)
Útil en el proceso de selección posterior de
los hibridones
Célula - mieloma
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GENERACIÓN DE ANTICUERPOS MONOCLONALES TOTALMENTE
HUMANOS• Varias técnicas hacen posible la generación de
anticuerpos monoclonales humanos como la expresión de fragmentos de Ig como las fracciones variables de cadena única Fab y ScFv, en bacterias, gracias a las bibliotecas de bacteriófagos que tiene insertado dentro de su ADN tales genes
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• Los receptores ScFv son las candidatas usadas en esta tecnología, por contener los dominios de la Ig.
• Estas construcciones de bibliotecas de genes proveen, entonces, unos repertorios de anticuerpos con alta afinidad para una amplio numero de antígenos.
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ANTICUERPOS HUMANOS GENERADOS EN RATONES
TRANSGÉNICOS
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• Las Ig nativas procedentes de ratones transgénicos a los cuales de les han reemplazado los genes de las regiones variables por humanas en las que los ratones llevan acabo la recombinación de los genes VDJ que son los responsables de la codificación y ensamblaje de las Ig.
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• Se han construido cromosomas artificiales de levaduras (YAC) que albergan fragmentos grandes de los genes de Ig de ambas cadenas pesadas y livianas humanas, los cuales se introducen en una línea germinal de ratones para crear cepas de ratones capaces de producir anticuerpos específicos totalmente humanos, generado ratones con la capacidad de producir Atc. Similares a los humanos, incluidos los procesos de reorganización genética, ensamblaje y diversidad nucleotídica
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La propiedad de los anticuerpo de unirse con alta especificidad y afinidad a una molécula blanco permite su utilización como herramienta esenciales en investigación medica.
Detectar y cuantificar niveles de expresión de genes
Determinar la localización de la expresión de genes a nivel celular, subcelular
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