DEFINICIONES BÁSICAS
BACTERIOSTÁTICOBACTERIOSTÁTICO
BACTERICIDA
BACTERIOLÍTICO
(a) Bacteriostáticos…Inhiben el crecimiento del microorganismo
(b) Bactericidas…Matan a los microorganismos sin necesidad de destruirlos o lisarlos
(c) Bacteriolíticos…Matan a los microorganismos por lisis
ANTIMICROBIANOSANTIMICROBIANOS
ANTISÉPTICOANTISÉPTICO
AGENTE QUÍMICO UTILIZADO SOBRE TEJIDO
VIVO
DESINFECTANTEDESINFECTANTE
AGENTE QUÍMICO UTILIZADO EN LA DESINFECCIÓN
NORMALMENTE SOBRE OBJETOS INANIMADOS
Agente que controla y reduce la presencia de microorganismos potencialmente patógenos sobre piel y/o mucosas
Agente que elimina la carga microbiana de objetos
inanimados
ASEPSIAPROCEDIMIENTO QUE PREVIENE O REDUCE LA TRANSMISIÓN DE MICROORGANISMOS
PROCEDIMIENTO QUE PREVIENE O REDUCE LA TRANSMISIÓN DE MICROORGANISMOS
DESINFECCIÓN
PROCEDIMIENTO QUE CONSIGUE LA REDUCCIÓN DEL NÚMERO DE MICROORGANISMOS PRESENTES PERO NO LA DESTRUCCIÓN TOTAL
PROCEDIMIENTO QUE CONSIGUE LA REDUCCIÓN DEL NÚMERO DE MICROORGANISMOS PRESENTES PERO NO LA DESTRUCCIÓN TOTAL
Importancia del control microbiano
Los microorganismos se eliminan, inhiben o matan por:
- agentes físicos- procedimientos físicos o- agentes químicos
Para:1. Prevenir la trasmisión de la infección y la enfermedad2. Prevenir la contaminación o la proliferación de microorganismos perjudiciales3. Prevenir el deterioro o destrucción de materiales por los microorganismos
Causa daño celular y muerte de muchas bacterias La luz de color rojo, anaranjado y amarillo no son nocivos Las radiaciones >300um: poco poder bactericida (luz
visible, luz infrarroja). Las radiaciones RUV son bactericidas.
Mecanismo - Cuando los fotosensibilizadores absorben luz son
activadas y llevadas a un nivel de mayor energía y cuando transfieren la energía a otro componente celular ocasiona daño en la célula.
ALTAS TEMPERATURAS Mecanismo de acción:
Calor seco: oxidación Calor húmedo: desnaturalización de proteínas
Eficacia: Húmedo>Seco Mayor poder de penetración. Son microbiocidas
BAJAS TEMPERATURAS- Microbiostáticas- Conserva cultivos microbianos, alimentos
OPTIMA TEMPERATURA- Crecimiento
PRESIÓN OSMÓTICAMecanismo de acción:
Inhibición bacteriana por plasmólisis
Usa:
- Elevadas concentraciones de sal: 10-15%
- Elevadas concentraciones de azúcar. 50-70%
Radiaciones no ionizantes
Características:Baja energía, sin poder ionizanteSin poder penetranteSin poder penetranteMáxima eficiencia biocida a 260nmRUV (220 a 300 nm)
Mecanismos de acción:Sitio blanco ADNFormación de dímeros de timina
Usos:Desinfección de superficiesDesinfección de aire y aguaProducir mutantes
Actividad antimicrobiana
RUV
Dímeros de timina
RADIACIONES ionizantes
• Son los rayos X y g,
y los radiosótopos; Co60 y Cs137
• Efectos son letales y mutagénicos.
• Muy penetrantes• Ionizan átomos y
moléculas
Actividad antimicrobiana
ALCOHOLES: ETANOL E ISOPROPANOL• Mecanismo de acción: Desnaturalización de proteínas Alteraciones en la membrana
Desorganiza la estructura fosfolipídica de la membrana
• Escasa toxicidad
• Usos: – Antisépticos cutáneos en
forma de sol. acuosa al 50-70%
– Desinfectantes de objetos semicríticos y no críticos
YODO Y YODÓFOROS: POVIDONA YODADA
• Mecanismo de acción:
• Halogenación de tirosina en las
enzimas
• Inactiva proteínas y enzimas por
oxidación de los grupos –SH a S-S
• Poco tóxicos
• Usos: Antisépticos de mayor uso
(piel intacta, heridas, colutorios,
lavado quirúrgico de manos,...)
R: HSO4 verde brillanteR: Cl verde de malaquita
Violeta de genciana
Bloquean la conversión del ácido UDP-acetilmurámico en UDP acetilmuramil-péptido
INTERFIEREN LOS PROCESOS DE OXIDACION CELULAR
CLORO Y SUS DERIVADOS
Actúan sobre proteínas y acidos nucleicosOxidan grupos –SH y atacan grupos aminos
Forma ácido hipocloroso:
Cl2 + H2O --------- HCl + HClOHClO------------------- HCl + O (oxidante celular)
ETILENO
Agente alquilante de enzimas y proteínasSe une a compuestos con hidrógenos lábiles como los que tienen grupos carboxilos, aminos, sulfhidrilos
H2C------CH2 + Enzima –SH (activa) O
E-S-CH2-CH2OH inactiva
Usa en la esterilización gaseosa en industria farmacéutica
PASTEURIZACIÓN
LHT (Low temperature holding)30 minutos a 62,8ºCHTSHT (high temperature short time) 15 segundos a 71,6ºC
Sólo destruye patógenos (Coxiella burnetti, M. tuberculosis, etc) y reduce la flora de deterioroNO ES UN PROCESO DE ESTERILIZACIONUso: leche, lácteos, jugo de frutas
LHT (Low temperature holding)30 minutos a 62,8ºCHTSHT (high temperature short time) 15 segundos a 71,6ºC
Sólo destruye patógenos (Coxiella burnetti, M. tuberculosis, etc) y reduce la flora de deterioroNO ES UN PROCESO DE ESTERILIZACIONUso: leche, lácteos, jugo de frutas
TYNDALIZACIÓN• 100ºC 30 min, 3 días sucesivos•Proceso discontínuo con períodos de incubación intercaladas•Usos:•Esterilización de productos de baja resistencia térmica, cuando no exista otra opción
Jhon Tyndall
DESECACIÓN
Produce: - Detención de la actividad mecánica - Declinación de la población viable Eficacia - La desecación al aire con 50% de humedad relativa Ejemplos -Muy sensibles : gonococos, meningococos (hrs) -En esputos secos : M. tuberculosis (viable varios meses) -Permanecen viables indefinidamente: esporas Causa de la muerte - Aumento intracelular de sales que conlleva a efectos
tóxicos y desnaturalización de proteínas - Daños por oxidación
LIOFILIZACIÓNDefinición - Es la desecación al vacío de una muestra
congelada. Proceso - Al cultivo bacteriano se adiciona leche o
suero. - Se congela sobre nieve carbónica (-78ºC). - En bomba al vacío se realiza la desecación. - Se guarda en ampollas cerradas de vidrio Usos - En bacterias conserva la viabilidad por años.
Desinfectantes y antisepticos
DESINFECTANTE Productos utilizados para matar microorganismos en
objetos o superficies.
ANTISEPTICO Producto que destruye o inhibe el crecimiento de
microorganismos dentro o en tejidos vivos
Características Actividad antimicrobiana Solubilidad Estabilidad No deberá ser tóxico Homogeneidad No reaccionar con material orgánico extraño capacidad de penetración No deberá corroer ni teñir
MECANISMOS DE ACCIÓN de los desinfectantes
Desnaturalización de proteínas.
Oxidación
Reacciones de sustitución
Alterando la permeabilidad de la membrana
EFICACIA DE LOS DESINFECTANTESMicroorganismos presentes.Condiciones Físico-Químicas:
Tiempo Concentración Temperatura pH
Materia Orgánica
MATERIA ORGANICA
• Puede captar e inactivar al desinfectante (Ej. Derivados del Cl)
• Puede dificultar el contacto del desinfectante con los microorganismos
Imprescindible limpiar material antes de la desinfección!!!
Desinfectantes: ESPECTRO DE Acción
Efectivos frente a bacterias vegetativas.
Eficacia variable frente a virus y hongos.
Ineficaces frente a esporas.
DESINFECTANTES MAS USADOS
1. Alcoholes
2. Agentes oxidantes (Cloro,
Yodo, Ac. Paracético, H2O2)
3. Agentes surfactantes
4. Derivados fenólicos
5. Aldehídos
6. Oxido de etileno
1. Alcoholes
Etanol, Isopropílico, n-popanol contra bacterias, virus y hongos
No son esporicida
Mecanismo -Desnaturalizan las proteínas
-Disuelven los lípidos
-Deshidratantes
Usos-Reducen flora bacteriana de la piel
-Desinfección de termómetros
2. Agentes oxidantes
Yodo: Yodóforos (povidona yodada). Antiséptico Cloro: Lejías: tratamiento de aguas. lecherías utensilios
HIPOCLORITO DE SODIO EN SOLUCION ACUOSA
• Mecanismo de acción: Oxidación
• Alto o bajo nivel (en función de la concentración)
• Muy tóxico y corrosivo
• Usos:
– Tratamiento de aguas
– Desinfección de superficies ambientales en gen
Peróxido de hidrógeno
• Mecanismo de acción: Oxidación
• Potencia variable (en función de la concentración y
Tª)
• Soluciones concentradas son tóxicas y corrosivas
• Usos: – Desinfección de lentes de contacto (3%)– Desinfección de equipos médicos limpios (6%)– Esterilización con PLASMAGAS
3. AGENTES SURFACTANTES:
DERIVADOS DE AMONIO
• Mecanismo de acción: Alteración de la
membrana
• Bajo nivel
• Poco tóxicos
• Uso: Antisépticos
4. DERIVADOS FENOLICOS
• Mecanismo de acción: Alteración de la
membrana y coagulación de proteínas
• Usos:– Descontaminación ambiental
– Antisépticos:
– Hexaclorofeno
– Triclosan
5. ALDEHIDOS: glutaraldehido y formaldehido
• Mecanismo de acción: Agentes alquilantes
• Alto nivel y esterilizantes
• Muy tóxicos y potencialmente
carcinogénicos
• Usos:– Esterilización de materiales no resistentes al
calor (glutaraldehído)
– Desinfección de cabinas de seguridad biológica (formaldehído)
6. OXIDO DE ETILENO• Mecanismo de acción: Oxidación y alquilación
• Alto nivel y esterilizante con rapidez de
efecto
• Muy tóxico (cámara hermética y posterior aireación)
• Usos: Esterilización de materiales no resistentes al calor
ni a la humedad
ANTISEPTICOSClorhexidinaTriclosánHexetidinaSanguinarinaFluoruro de estañoCloruro de cetilpiridonioAceites esenciales (timol, eucaliptol)
ESTERILIZACIÓN
Proceso mediante el cual células vivas, esporas viables y virus son destruídos
AGENTES FÍSICOSCALOR:
Seco Húmedo
RADIACIONES: Luz Ultravioleta Radiaciones Ionizantes
AGENTES MECÁNICOS: Filtración Ultrasonidos
CALOR SECOHorno Pasteur: 160-
170oC; 2-3 horas.
Flameado a la llama.
Incineración.
ESTERILIZACION POR CALOR HUMEDO EBULLICION:
• Pº atmosférica, 100ºC
AUTOCLAVE
• 121ºC, 10-15 min., 1 Atm.
• Vapor de agua a saturación(vapor fluente)
• Más rapido y efectivo que el calor seco
AUTOCLAVE
PUERTA
Fuente de calor
Medio de cultivo
VAPOR DE AGUA
Válvula de drenaje
Resistencia al calor
PrionesEndosporas bacterianasMycobacteriaVirus sin envoltura lipídicaHongosBacteriasVirus con envoltura lipídica
RESISTENCIA
Luz ultravioleta
FILTRACION
Para materiales termolábiles y
sensibles a radiaciones.
- Tamaño del poro: 0.005-1 µ.
- Los virus no son retenidos
Filtros de
membrana
Filtros HEPA
Usos: ciertos medios de
cultivo, azúcares,
soluciones de antibióticos
ULTRASONIDOS - Vibraciones de alta frecuencia
(poca penetración).
- Desnaturalizar las proteínas y
componentes bacterianos.
- Se emplean en un baño de agua
para limpieza de material
AGENTES QUÍMICOSOxido de etileno
EsterilizanteMateriales termosensibles
CONTROL DEL PROCESO DE ESTERILIZACION
- Radiaciones: vigilancia de las lámparas
- Filtración: cambio periódico de filtros
- Calor
1. Indicadores físicos: termómetro y manómetro
2. Indicadores químicos: tiras colorimétricas (Tª, Pº,
T)
3. Indicadores biológicos: (esporas de Bacillus)
CONSERVACION DEL MATERIAL ESTERIL
1. Embalajes apropiados
2. Protección de la envoltura externa
3. Manipulación aséptica
4. Ambiente limpio y controlado
5. Cabina de flujo laminar