-
8/10/2019 A Los Ratones de Laboratorio Se Les Induce Celiaqua (Intolerancia Al Gluten) Usando Larvas de Nippostrnglylus Br
1/5
G u t , 1 9 9 1 ,
3 2 ,
8 7 1 - 8 7 5
A n i m a l
m o d e l
o f
g l u t e n
i n d u c e d
e n t e r o p a t h y
i n
mice
R
T r o n c o n e ,
A
F e r g u s o n
A b s t r a c t
The a i m o f
o u r
e x p e r i m e n t s
w a s
t o
p r o d u c e
a
l o c a l T c e l l m e d i a t e d
i m m u n e
r e s p o n s e
t o
g l i a d i n
i n t h e
m o u s e
s m a l l
i n t e s t i n e
a s a
p o s s i -
b l e
a n i m a l m o d e l
o f
g l u t e n
s e n s i t i v e
e n t e r o p a -
t h y ,
c o e l i a c
d i s e a s e . B A L B / c a n d
B D F ,
m i c e
w e r e
i m m u n i s e d
s y s t e m i c a l l y
w i t h
g l i a d i n
i n
c o m p l e t e
F r e u n d s
a d j u v a n t .
The
j e j u n a l
m u c o s a w a s
c h a l l e n g e d b y
f e e d i n g
a
g l u t e n
c o n t a i n i n g
d i e t ,
a n d v i l l u s
a n d
c r y p t
l e n g t h s ,
c r y p t
c e l l
p r o d u c t i o n
r a t e ,
a n d
i n t r a e p i t h e l i a l
l y m p h o c y t e
c o u n t s w e r e
d e t e r m i n e d
t o
a s s e s s
m u c o s a l
c e l l m e d i a t e d
i m m u n i t y .
I n some
a n i m a l s
p e r m e a b i l i t y
a n d l o c a l
i m m u n i t y
w e r e
m o d u l a t e d b y
c o n c u r r e n t
i n t e s t i n a l
a n a p h y l a x i s
o r a
g r a f t
v e r s u s
h o s t
r e a c t i o n .
T h e r e
w e r e n o
c h a n g e s
i n t h e
j e j u n a l
m u c o s a
o f
B A L B / c m i c e
f ed a
g l u t e n
c o n t a i n i n g
d i e t
a f t e r
h a v i n g
b e e n p a r e n t e r a l l y
i m m u n i s e d .
W h e n ,
h o w e v e r ,
m i c e w e r e
p a r e n t e r a l l y
i m m u n i s e d
w i t h
g l i a d i n ,
f e d a
g l u t e n c o n t a i n i n g d i e t ,
r e n d e r e d
h y p e r s e n s i t i v e
t o
h e l m i n t h
a n t i g e n
b y
i n f e c t i o n w i t h t h e n e m a t o d e
p a r a s i t e N i p p o s -
t r o n g y l u s
b r a s i l i e n s i s ,
a n d
c h a l l e n g e d
i n t r a -
v e n o u s l y
t o
p r o d u c e
i n t e s t i n a l
a n a p h y l a x i s
c r y p t
c e l l
p r o d u c t i o n r a t e
w a s
s i g n i f i c a n t l y
h i g h e r
t h a n
i n
o v a l b u m i n
i m m u n i s e d
c o n t r o l s
a t
1 2
d a y s
a f t e r
p a r a s i t e c h a l l e n g e .
F i n a l l y ,
g r a f t
v e r s u s h o s t r e a c t i o n w a s
i n d u c e d
i n B D F J
m i c e
t h a t
h a d b e e n
p a r e n t e r a l l y
i m m u n i s e d
w i t h
g l i a d i n
a n d
w e r e o n
a
g l u t e n c o n t a i n i n g
d i e t . T wo
w e e k s l a t e r
t h e s e
m i c e h a d
s i g n i f i -
c a n t l y l o n g e r
c r y p t s a n d
a
h i g h e r c r y p t
c e l l
p r o d u c t i o n
r a t e a n d i n t r a e p i t h e l i a l
l y m p h o c y t e
c o u n t
t h a n
c o n t r o l ,
u n i m m u n i s e d
m i c e w i t h
g r a f t
v e r s u s h o s t
r e a c t i o n . We c o n c l u d e
t h a t
a c t i v e i m m u n i s a t i o n
w i t h
g l i a d i n
d o e s
n o t
i n
i t s e l f
p r o d u c e
i n t e s t i n a l c e l l m e d i a t e d
i m m u -
n i t y
t o
g l i a d i n
c o n t a i n e d
i n
t h e
d i e t ,
o r
e n t e r o -
p a t h y .
A d d i t i o n a l
f a c t o r s ,
s u c h a s
t h o s e
o c c u r r i n g
d u r i n g
i n t e s t i n a l
a n a p h y l a x i s
( i n c r e a s e d
i n t e s t i n a l
p e r m e a b i l i t y ) ,
o r
d u r i n g
g r a f t
v e r s u s
h o s t r e a c t i o n
( e n h a n c e d a n t i g e n
p r e s e n t a t i o n ) ,
s e e m t o b e
n e c e s s a r y
f o r t h e f u l l
e x p r e s s i o n
o f a
j e j u n a l
m u c o s a l r e a c t i o n .
G a s t r o i n t e s t i n a l
U n i t ,
U n i v e r s i t y
o f
E d i n b u r g h
a n d W e s t e r n G e n e r a l
H o s p i t a l , E d i n b u r g h ,
S c o t l a n d
R
T r o n c o n e
A
F e r g u s o n
C o r r e s p o n d e n c e
t o:
Dr R
T r o n c o n e ,
D i p a r t i m e n t o
d i
P e d i a t r i a ,
II
F a c o l t a d i
M e d i c i n a ,
v i a S P a n s i n i
5 ,
1 - 8 0 1 3 1
N a p o l i ,
I t a l i a .
A c c e p t e d
f o r
p u b l i c a t i o n
3
S e p t e m b e r
1 9 9 0
C o e l i a c
d i s e a s e
i s
a
permanent
c o n d i t i o n o f
g l u t e n
i n t o l e r a n c e . T h e r e i s a n i n c r e a s i n g
b o d y
o f
e v i d e n c e
f o r a n
i m m u n o l o g i c a l a e t i o l o g y , w i t h
l o c a l c e l l m e d i a t e d
i m m u n i t y t h o u g h t
t o
b e
t h e
m a j o r
cause
o f t h e
m u c o s a l
l e s i o n . I f t h i s
h y p o -
t h e s i s
i s
c o r r e c t ,
a n d
u n l e s s
s p e c i f i c
i m m u n o -
g e n e t i c
f a c t o r s are
c r i t i c a l ,
a n a n i m a l
m o d e l
s h o u l d
r e a d i l y
b e
p r o d u c e d b y
p r i m i n g
t h e
a n i m a l s t o
g l u t e n
a n d t h e n
c h a l l e n g i n g
t h e m
b y
f e e d i n g .
S t u d i e s
i n
r o d e n t s , h o w e v e r ,
h a v e
s h o w n
t h a t
o r a l t o l e r a n c e r a t h e r
t h a n
p r i m i n g
i s
t h e u s u a l
r e s u l t o f
f e e d i n g
a
p r o t e i n a n t i g e n .
U n d e r
s u c h
c o n d i t i o n s ,
m u c o s a l c e l l m e d i a t e d
i m m u n i t y i s
n o t e l i c i t e d , 2 a n d
i n
t h i s r e s p e c t
g l i a d i n
b e h a v e s
i n t h e
s a m e
w a y
a s o t h e r
d i e t a r y
p r o t e i n s . 3
I n
t h i s
s e r i e s
o f e x p e r i m e n t s , o u r a i m w a s t o
i nd u c e m u c o s a l c e l l
m e d i a t e d
i m m u n i t y
t o
g l i a d i n i n
m i c e .
I n i t i a l l y
w e u s e d a n i m a l s
w e a n e d
a n d
m a i n t a i n e d
o n a g l u t e n f r e e
d i e t .
T h e y w e r e
i m m u n i s e d
s y s t e m i c a l l y i n o r d e r t o p r i m e
f o r
c e l l
m e d i a t e d i m m u n i t y t o g l i a d i n , a n d a
n o r m a l
r o d e n t g l u t e n c o n t a i n i n g d i e t w a s
u s e d
t o d e l i v e r
g l u t e n
t o
t h e g u t
o f
t e s t
a n i m a l s .
I n d i r e c t
e v i d e n c e
o f a c t i v e
m u c o s a l c e l l m e d i a t e d
i m m u -
n i t y
w a s
s o u g h t
b y
m e a s u r i n g
v i l l u s a n d
c r y p t
l e n g t h s a n d
c r y p t
c e l l
p r o d u c t i o n r a t e
a n d
b y
p e r f o r m i n g
i n t r a e p i t h e l i a l
l y m p h o c y t e
c o u n t s .
M e t h o d s
ANIMALS
AND
DIETS
F e m a l e
B A L B / c m i c e
w e r e u s e d , a g e d 6 t o 1 0
w e e k s ,
u n l e s s
o t h e r w i s e s t a t e d . T h e y w e r e
f r o m
a
g l u t e n
f r e e
c o l o n y
e s t a b l i s h e d i n
1 9 8 5 a n d m a i n -
t a i n e d
o n a
g l u t e n
f r e e d i e t ( S p e c i a l D i e t S e r v i c e ,
W i t h a m ,
E s s e x ) ;
o n l y
s e c o n d
o r
l a t e r
g e n e r a t i o n
m i c e
w e r e
u s e d
f o r t h e s e
e x p e r i m e n t s .
F e m a l e
B A L B / c
a n d
( C 5 7 B L 6 / J
x
D B A 2 ) F ,
( B D F , )
m i c e
w e r e
a l s o
u s e d ,
m a i n t a i n e d
o n a
s t a n da r d r o d e nt
d i e t
w h i c h c o n t a i n s 2 - 8
g l u t e n
( C R M ( X ) ,
L a b s u r e ,
P o o l e , D o r s e t ) .
T h i s
d i e t w a s
a l s o u s e d
f o r o r a l c h a l l e n g e
w i t h
g l i a d i n .
T h e r e w e r e s i x
m i c e i n
e a c h
e x p e r i m e n t a l g r o u p
SYSTEMIC IMMUNISATION
F o r
s y s t e m i c
i m m u n i s a t i o n
p u r i f i e d g l i a d i n
w a s
u s e d
( k i n d g i f t
o f Dr
H
W e i s e r ,
DFA
f u r
L e b e n s m i t t e l c h e m i e , G a r c h i n g , G e r m a n y ) .
M i c e
w e r e
i m m u n i s e d
w i t h
5 0
[ i g
o f
g l i a d i n
i n
d i s t i l l e d
w a t e r e m u l s i f i e d
i n 5 0
[ 1
F r e u n d s
c o m p l e t e a d j u v a n t ( B a c t o - H 3 7
R a ,
D i f c o ,
W e s t
M o l e s e y ,
S u r r e y ) .
C o n t r o l
m i c e w e r e
i m m u n i s e d
w i t h
1 0 0
[ t g
o v a l b u m i n
( S i g m a ,
P o o l e ,
D o r s e t )
i n
F r e u n d s a d j u v a n t .
I n m o s t
e x p e r i m e n t s
m i c e
w e r e
i m m u n i s e d
i n t r a -
p e r i t o n e a l l y ,
b u t i n s o m e e x p e r i m e n t s
i n t r a f o o t -
p a d
a n d
s u b c u t a n e o u s
i n j e c t i o n s
w e r e
a l s o
u s e d .
IMMUNOMODULATION TR EA TM EN TS
I n t e s t i n a l
a n a p h y l a x i s
i n d u c t i o n
BALB/c
m i c e w e r e
i n f e c t e d
b y
s u b c u t a n e o u s
i n j e c t i o n
o f
1 0 0 0 l a r v a e o f
N i p p o s t r o n g y l u s
b r a z i l i e n s i s . T e n
d a y s
l a t e r
a n a p h y l a x i s
w a s
i n d u c e d
b y
t h e
i n t r a v e n o u s
i n j e c t i o n
o f 4 0 0
worm
e q u i v a l e n t s
o f
N i p p o s t r o n g y l u s
a n t i g e n s .
A n i m a l s
w e r e
s a c r i f i c e d
1 2
d a y s
a f t e r
t h e i n d u c -
t i o n
o f
a n a p h y l a x i s .
8 7 1
-
8/10/2019 A Los Ratones de Laboratorio Se Les Induce Celiaqua (Intolerancia Al Gluten) Usando Larvas de Nippostrnglylus Br
2/5
T r o n c o n e ,
F e r g u s o n
T A B L E
I
D u o d e n a l
m u c o s a l
a r c h i t e c t u r e o f
B A L B I c
m i c e w e a n e d o n a g l u t e n f r e e
d i e t
( G F D )
o r
o n a n o r m a l
g l u t e n
c o n t a i n i n g
d i e t
( N D ) ,
o f ND m i c e a f t e r
s e v e n d a y s o f
GFD
a n d
o f
G FD m i c e
a f t e r
o n e
a n d
s e v e n
d a y s
o f
ND
C r y p t
c e l l p r o d u c t i o n
V i l l u s l e n g t h
( > t m )
C r y p t l e n g t h
( > t m ) r a t e
( m e t a p h a s e s l c r y p t / h ,
A n i m a l
g r o u p
( m e a n
( S D ) )
( m e a n
( S D ) )
a n d c o n f i d e n c e
i n t e r v a l s )
G FD
w e a n e d
m i c e
( n = 6 )
9 7 9
( 5 2 )
1 1 1 ( 5 )
6 - 3
( 5 0
t o 7
7 )
ND
w e a n e d
m i c e
( n = 6 )
9 8 2
( 6 1 )
1 0 7
( 1 0 )
56
( 4 - 3
t o 7
0 )
ND m i c e ( n = 6 )
8 8 1 ( 1 0 1 )
1 0 2
( 7 )
4 - 9
( 3 - 7
t o 6 - 1 )
ND m i c e
a f t e r
7
d a y s
o f
9 0 2
( 7 1 )
1 0 4
( 6 )
4 - 2 ( 2 - 5
t o 5
9 )
G FD ( n = 6 )
G FD
m i c e
( n =
1 2 )
8 5 4
( 7 7 )
1 9
( 1 6 )
3 - 0
( 0 - 6
t o 5 - 5 )
G F D m i c e a f t e r
dayofND
9 2 4 ( 1 7 4 )
1 1 6
( 1 0 )
6 - 3 ( 3 - 2 t o
7 - 2 )
( n =
1 2 )
G FD
m i c e a f t e r
7
d a y s
o f ND
8 4 1
( 8 5 )
1 3
( 7 )
4 - 3
( 2 - 8
t o 5 - 7 )
( n = 1 2 )
I n n o n e o f
t h e s e
e x p e r i m e n t s
w e r e
d i f f e r e n c e s
b e t w e e n
g r o u p s s i g n i f i c a n t .
G r a f t
v e r s u s
h o s t r e a c t i o n
A g r a f t
v e r s u s
h o s t r e a c t i o n
w a s
i n d u c e d b y
t h e
i n t r a p e r i t o n e a l
i n j e c t i o n
o f 6x
1 0 7
C 5 7 B L 6 / J
s p l e e n
c e l l s
i n t o
B D F ,
m i c e . S p l e e n
c e l l s u s p e n -
s i o n s
w e r e
m a d e
w i t h RPMI 1 6 4 0 m e d i u m
( F l o w
L a b o r a t o r i e s ) a n d
t h e
v i a b i l i t y
a s a s s e s s e d
b y 2
T r y p a n
b l u e
e x c l u s i o n
w a s g r e a t e r
t h a n
8 5 .
F o r
d o c u m e n t a t i o n
o f g r a f t v e r s u s
h o s t
r e a c t i o n ,
a t
t h e t i m e
o f
t h e i r
s a c r i f i c e 7 , 1 0 , a n d 1 4
d a y s a f t e r
t h e i n d u c t i o n o f t h e
r e a c t i o n ,
a n i m a l b o d y
a n d
s p l e e n
w e i g h t s
w e r e
m e a s u r e d
a n d
S i m o n s e n s
s p l e e n
i n d e x c a l c u l a t e d . 4
INTESTINAL
MORPHOLOGY AND
EPITHELIAL
CELL
KINETICS
V i l l i
a n d
c r y p t s
L e n g t h s
o f
v i l l i a n d
c r y p t s ,
a n d
c r y p t
c e l l
p r o -
d u c t i o n r a t e s ,
w e r e
m e a s u r e d b y t h e
m e t a p h a s e
a r r e s t a n d
m i c r o d i s s e c t i o n
t e c h n i q u e s . 5
A l l
g r o u p s o f
a n i m a l s
w e r e g i v e n
7 - 5
m g
c o l c h i c i n e
( B D H )
p e r k g b o d y w e i g h t
a n d
k i l l e d
b y
c e r v i c a l
d i s l o c a t i o n
a t
i n t e r v a l s
o f
2 0 - 1 2 0
m i n u t e s
a f t e r -
w a r d s
t o a l l o w a c c u m u l a t i o n
o f
m e t a p h a s e s
i n
i n t e s t i n a l
c r y p t s .
P i e c e s
o f d u o d e n u m w e r e
f i x e d
i n 7 5 e t h a n o l / 2 5 g l a c i a l
a c e t i c
a c i d
a n d
s t a i n e d
i n
b u l k
w i t h
t h e
m o d i f i e d F e u l g e n
s t a i n
( S c h i f f r e a g e n t ,
D i f c o ) .
F o r
e a c h
a n i m a l
t h e
l e n g t h s o f
a t l e a s t 1 5
v i l l i
a n d
1 5
c r y p t s
w e r e
m e a s u r e d
a n d
a c c u m u l a t e d
m e t a p h a s e s
w e r e
c o u n t e d
i n
a t l e a s t 2 0 c r y p t s .
V i l l u s a n d c r y p t
l e n g t h s
a r e
e x p r e s s e d
i n i t m
a n d
t h e
c r y p t c e l l
p r o d u c t i o n
r a t e
a s
t h e
r a t e o f
a c c u m u l a t i o n
o f
m e t a p h a s e s / c r y p t / h o u r .
I n t r a e p i t h e l i a l
l y m p h o c y t e
c o u n t s
P i e c e s
o f
d u o d e n u m
w e r e f i x e d
i n 1 0
b u f f e r e d
f o r m a l i n ,
p a r a f f i n e m b e d d e d ,
c u t
a t 4 i i m ,
a n d
s t a i n e d
w i t h
h a e m a t o x y l i n
a n d e o s i n .
A d i f f e r e n -
t i a l
c o u n t
w a s m a d e u n d e r
o i l i m m e r s i o n
( x
1 0 0 0
m a g n i f i c a t i o n )
o f t h e
c e l l s w i t h i n t h e e p i t h e l i u m
c o v e r i n g
t h e
v i l l i , a n d
t h e i n t r a e p i t h e l i a l l y m p h o -
c y t e
c o u n t s
e x p r e s s e d
a s n u m b e r
o f
i n t r a -
e p i t h e l i a l
l y m p h o c y t e s
p e r
1 0 0 e p i t h e l i a l
c e l l s .
S T A T I S T I C S
S t u d e n t s
t t e s t w a s u s e d
t o
c o m p a r e
v i l l u s a n d
c r y p t l e n g t h s
a n d
i n t r a e p i t h e l i a l
l y m p h o c y t e
c o u n t s . C r y p t
c e l l
p r o d u c t i o n
r a t e
w a s c a l c u l a t e d
f r o m
t h e
l e a s t
s q u a r e s e s t i m a t e
o f t h e
l i n e a r
r e g r e s s i o n
o f
n u m b e r o f
b l o c k e d
m e t a p h a s e s
w i t h t i m e a f t e r
c o l c h i c i n e
i n j e c t i o n .
C r y p t
c e l l
p r o d u c t i o n
r a t e s w e r e c o m p a r e d b y
c o v a r i a n c e
a n a l y s i s .
T h e s t a t i s t i c a l
a n a l y s e s w e r e p e r f o r m e d
u s i n g
t h e
S P S S
( S t a t i s t i c a l
p a c k a g e
f o r s o c i a l
s c i e n c e s )
p a c k a g e .
E x p e r i m e n t s
a n d
r e s u l t s
EFFECTS
O F DI E T ARY
G L U T EN
ON
UNPRIMED
MICE
To
a s s e s s
t h e
e f f e c t
o f
g l u t e n
c o n t a i n e d
i n
t h e
d i e t
o n t h e
m u c o s a l a r c h i t e c t u r e
o f o u r
e x p e r i m e n t a l
m i c e ,
t h r e e d i f f e r e n t
s e t s o f o b s e r v a t i o n s w e r e
m a d e . B A L B / c
m i c e
w e a n e d o n a n o r m a l g l u t e n
c o n t a i n i n g
d i e t o r o n
a
g l u t e n
f r e e d i e t
w e r e
c o m p a r e d
s e v e n
d a y s
a f t e r w e a n i n g , a t t h e a g e
o f
4 w e e k s ;
n o
d i f f e r e n c e s
w e r e
n o t e d
b e t w e e n t h e
t w o
g r o u p s
i n
v i l l u s a n d
c r y p t
l e n g t h s
a n d
i n
c r y p t
c e l l
p r o d u c t i o n
r a t e .
I n a s e c o n d e x p e r i -
m e n t
a d u l t B A L B / c
m i c e
o n a
n o r m a l
g l u t e n
c o n t a i n i n g
d i e t
w e r e
u s e d , a n d
t h e
e f f e c t o f s e v e n
S
8 0 0
-
6 0 0
-
V i l l u s
l e n g t h
[ L m )
4 0 0
-
2 0 0
-
F i g u r e
1 :
M u c o s a l
a r c h i t e c t u r e
l e f t )
a n d
i n t r a e p i t h e l i a l l y m p h o c y t e
( I E L )
c o u n t s
r i g h t )
i n
c o n t r o l
a n d
g l i a d i n
i m m u n i s e d
B A L B I c
m i c e ,
a f t e r
s e v e n
d a y s
o f
a
g l u t e n
c o n t a i n i n g
d i e t .
B a r s
i n d i c a t e
I
S D .
S i x
m i c e
p e r
g r o u p .
0-
C r y p t
l e n g t h
[ t m )
2 0 0
-
2 . 4
N o n - i m m u n i s e d
G l i a d i n
i m m u n i s e d
n m u n i s e d
G l i a d i n
i m m u n i s e d
1 2
-
S
S
0
D
U
a 1 )
w
3 . 3
8
4 -
0
N o n - i n
8 7 2
-
8/10/2019 A Los Ratones de Laboratorio Se Les Induce Celiaqua (Intolerancia Al Gluten) Usando Larvas de Nippostrnglylus Br
3/5
A n i m a l
m o d e l
o f g l u t e n i n d u c e d e n t e r o p a t h y i n m i c e
V i l l u s
l e n g t h
( R m )
C r y p t l e n g t h
( > L m )
8 0 0
-
6 0 0
4 0 0 -
2 0 0 .
2 0 0 . ~
I
K
6 . 9
* p
=
0 . 0 5
*
.
X
1 4 . 0
2 0 c o u n t s
w e r e
s i m i l a r i n n o n - i m m u n i s e d a n d
c o
g l i a d i n i m m u n i s e d m i c e ( F i g 1 ) .
S i m i l a r
r e s u l t s
1 6
a )
w e r e
o b t a i n e d r e g a r d l e s s
o f
t h e r o u t e o f
0
- s
i m m u n i s a t i o n - s u b c u t a n e o u s ,
i n t r a f o o t p a d ,
or
1 2 a )
i n t r a p e r i t o n e a l .
. r _
a )
4 D
w
* 0
O v a l b u m i n G l i a d i n O v a l b u m i n G l i a d i n
i m m u n i s e d i m m u n i s e d i m m u n i s e d i m m u n i s e d
F i g u r e
2 :
M u c o s a l
a r c h i t e c t u r e
l e f t ) a n d i n t r a e p i t h e l i a l
l y m p h o c y t e
( I E L )
c o u n t s
( r i g h t ) 1 2
d a y s a f t e r
t h e
i n d u c t i o n o f i n t e s t i n a l
a n a p h y l a x i s
i n
BALBIc
m i c e o n a g l u t e n c o n t a i n i n g d i e t ,
p r e v i o u s l y
i m m u n i s e d
w i t h
o v a l b u m i n
o r
w i t h g l i a d i n .
B a r s
i n d i c a t e
I
S D . S i x
m i c e
p e r
g r o u p .
d a y s o f
a
g l u t e n
f r e e
d i e t
o n
t h e i r i n t e s t i n a l
a r c h i t e c t u r e w a s
e v a l u a t e d ; a g a i n ,
n o
c h a n g e w a s
o b s e r v e d
i n t h e
p a r a m e t e r s
s t u d i e d .
S i m i l a r l y ,
n o
d i f f e r e n c e s
w e r e n o t e d
i n a d u l t
B A L B / c m i c e
f r o m
a g l u t e n f r e e d i e t c o l o n y t r a n s f e r r e d f o r o n e
o r
s e v e n
d a y s
t o
a
d i e t
c o n t a i n i n g
g l u t e n . T h e
d a t a
a r e
s u m m a r i s e d
i n
T a b l e I .
C o m m e n t
T h e s e
r e s u l t s
t e n d t o e x c l u d e
a n y
e f f e c t o f d i e t a r y
g l u t e n o n t h e
m u c o s a l
a r c h i t e c t u r e o f
n o r m a l ,
u n p r i m e d a n i m a l s ,
w h i c h
m i g h t
h a v e
b e e n
c a u s e d
b y a l e c t i n l i k e
e f f e c t o f
g l u t e n , o r b y a
l o w
g r a d e
i m m u n e
r e s p o n s e
t o
a n
a n t i g e n
n e v e r
e n c o u n t e r e d
b e f o r e .
F i g u r e
3 :
M u c o s a l
a r c h i t e c t u r e
l e f t )
a n d
i n t r a e p i t h e l i a l
l y m p h o c y t e
( I E L )
c o u n t s
r i g h t )
1 4
d a y s
a f t e r t h e i n d u c t i o n
o f g r a f t
v e r s u s
h o s t r e a c t i o n
i n
B D F ,
m i c e o n a
g l u t e n c o n t a i n i n g
d i e t ,
p r e v i o u s l y
i m m u n i s e d
w i t h
o v a l b u m i n
o r w i t h
g l i a d i n .
B a r s
i n d i c a t e I S D .
F i v e
m i c e i n
t h e o v a l b u m i n
i m m u n i s e d
g r o u p ,
s i x i n
t h e
g l i a d i n
i m m u n i s e d .
EFFECTS OF DIETARY
G L U T EN
ON GLIADIN PRIMED
MICE
W i t h
t h e a i m
o f
i n d u c i n g
a n i n t e s t i n a l
c e l l
m e d i a t e d
i m m u n i t y
r e a c t i o n t o
g l i a d i n ,
B A L B / c
m i c e
f r o m t h e
g l u t e n
f r e e
c o l o n y
w e r e
g i v e n a n
i n t r a p e r i t o n e a l i n j e c t i o n
o f
g l i a d i n i n c o m p l e t e
F r e u n d s a d j u v a n t ;
c o n t r o l
m i c e w e r e g i v e n
o n l y
t h e a d j u v a n t . T h r e e w e e k s l a t e r
b o t h
g r o u p s
o f
m i c e
w e r e
s w i t c h e d
t o
t h e s t a n d a r d r o d e n t
g l u t e n
c o n t a i n i n g
d i e t
a n d
s a c r i f i c e d a f t e r s e v e n
d a y s
o n
s u c h
a
d i e t .
L e n g t h s
o f
v i l l i a n d
c r y p t s ,
c r y p t
c e l l
p r o d u c t i o n
r a t e , a n d
i n t r a e p i t h e l i a l l y m p h o c y t e
A
0 -
6 0 0
V i l l u s
l e n g t h
( r i m ) 4 0 0 .
2 0 0
0
C r y p t
l e n g t h
( n m ) 2 0 0
I
7
O v a l b u m i n G l i a d i n
i m m u n i s e d i m m u n i s e d
p
-
8/10/2019 A Los Ratones de Laboratorio Se Les Induce Celiaqua (Intolerancia Al Gluten) Usando Larvas de Nippostrnglylus Br
4/5
T r o n c o n e ,
F e r g u s o n
T A B L E
I I
D u o d e n a l
m u c o s a l a r c h i t e c t u r e
o f BDF
m i c e o n
a g l u t e n c o n t a i n i n g d i e t ,
p r e v i o u s l y
p a r e n t e r a l l y i m m u n i s e d w i t h o v a l b u m i n o r g l i a d i n , a t 7 , 1 0 , a n d 1 4
d a y s a f t e r
t h e
i n d u c t i o n o f g r a f t v e r s u s h o s t r e a c t i o n ( m e a n ( S D ) , a p a r t f r o m v a l u e s f o r c r y p t c e l l
p r o d u c t i o n
r a t e , w h i c h
a r e
p r e s e n t e d w i t h
c o n f i d e n c e
i n t e r v a l s ;
6 m i c e p e r g r o u p )
O v a l b u m i n i m m u n i s e d G l i a d i n i m m u n i s e d
( m e an ( S D) ) ( m e a n ( S D ) ) p
7 d a y s :
V i l l u s l e n g t h
[ r m )
7 9 3 ( 4 5 ) 8 1 2 ( 5 4 ) NS
C r y p t
l e n g t h
( p m )
1 3 2
( 9 )
1 4 5
( 1 1 )
-
8/10/2019 A Los Ratones de Laboratorio Se Les Induce Celiaqua (Intolerancia Al Gluten) Usando Larvas de Nippostrnglylus Br
5/5