dl50 cipermetrinapdf.pdf

“Año de la inversión para el Desarrollo Rural y la Seguridad Alimentaria”

TOXICOLOGÌA AMBIENTAL – INGENIERÌA AMBIENTAL UCSS Página 1

Bioensayo de Ecotoxicidad en Daphnias, realizadas con cipermetrina

Alumnos: Aquino,Militza;Blas,Maritza;Gallo,Yuliana;Palomino,Daniel

Profesor:Chiclla Salazar,Armando

Carrera profesional: Ing.Ambiental- Ciclo 4

RESUMEN:

A continuación se realiza un análisis de los procedimientos empleados para determinar la DL50 en un bioensayo a través del método de Probit, se citan los pasos para determinar la DL50 en Daphnias y bajo condiciones de Cipermetrina al 0.05 % como sujeto de prueba.

PALABRAS CLAVES:

Toxicidad: es la capacidad de cualquier sustancia química de producir efectos perjudiciales sobre un ser vivo.

Cipermetrina: La cipermetrina es un insecticida, no sistémico (no ataca al organismo por completo), no volátil que actúa por contacto e ingestión.

Dosis letal media (DL50): es una forma de expresar el grado de toxicidad de una sustancia.

Piretroide: Son moléculas con actividad insecticida.

INTRODUCCIÓN:

El presente trabajo se refiere que mediante este bioensayo para comprender los efectos producidos con un toxico en una determinada especie, para poder identificar los contaminantes, y la dosis letal que puede resistir un determinado organismo.

El enfoque principal como bien dicho antes es comprender las características físicas y químicas, el efecto de los contaminantes hacia los organismos con pruebas de toxicidad.

La experimentación de este bioensayo se realizó con la finalidad de cómo puede afectar un toxico a una población de daphnias ya sea de organismo, plantas, humanos. Esto permitió identificar la resistencia que puede llegar a tener cada individuo ante un agente contaminante siendo capaz de tolerarlo.

Por otra parte, establecer indicadores de la tasa mortalidad de aquellos organismos que no llegaron a resistir la sustancia tóxica.



La metodología usada fue someter a un grupo de organismos, especie elegida por nosotros, a la dosis letal, que se realizó con todos los instrumentos requeridos para el éxito de este experimento.

El experimento se realizó a la especie de daphnias, siendo separados en vasos descartables con el tóxico determinado siguiendo su desarrollo hasta el día de hoy.

MARCO TEÓRICO:

MATANOX 20 EC:

¿QUÈ ES EL MATANOX 20 EC?

Es un insecticida piretroide que actúa por contacto e ingestión, moderadamente tóxico para el hombre y animales de sangre caliente. Actúa en el parásito en sus diferentes fases de desarrollo (larva, ninfas y adultas), en los parásitos hembras impide la puesta del huevo.

CIPERMETRINA:

Es un Insecticida piretroide de largo efecto residual, amplio espectro de acción y altamente eficaz en el control de insectos, teniendo una baja toxicidad para el hombre.

COMPOSICIÒN/INGREDIENTES:

Nombre común: Cipermetrina 20 EC

Grupo Quìmico: Piretroide

Nombre Quìmico: Alpha-cyano-3-phenoxybenzyl-cis,trans-3-(2,2-dichlorovinyl)-2,2-dimethyl-cyclopropane carboxilate

% Ingrediente activo: Cipermetrina 20%

Fórmula Química: C22H19CL2NO3

PROPIEDADES FÌSICAS Y QUÌMICAS

Estado: Líquido

Color: amarillo claro

Olor: Químico suave

Concentración: 20%



p H: 7

Punto de inflamación: 43 ºC

Totalmente emulsionable en agua

INFORMACIÒN TOXICOLÒGICA:

Toxicidad aguda Oral: LD50>1.070 mg/kg (rata)

Toxicidad aguda tèrmica: LD50>8.000 mg/kg (rata)

INFORMACIÒN ECOLÒGICA:

Los residuos de áreas tratadas puede dar peligros a organismos acuáticos en áreas cercanas. Po ende no se debe aplicar directamente al agua o a áreas donde hay agua superficial.

DATOS TOXICOLÒGICOS:

DATOS ECOTOXICOLÓGICOS:

PROPIEDADES BIOLÓGICAS:

La cipermetrina es un piretroide que afecta los canales de Sodio (NA+ ) en la membrana nerviosa provocando una intensa actividad repetitiva, es decir un bloqueo de la



transmisión del influjo nervioso, y en consecuencia la muerte Tambien inhibe la alimentación.

DAPHNIA o PULGA DE AGUA

Las Daphnia son un género de crustáceos planctónicos del orden Cladocera. Se conocen vulgarmente como dafnias, como lías de agua y también como pulgas de agua, debido a lo pequeñas que son y a su forma de nadar como “saltando”, aunque las pulgas, al ser insectos, están muy alejadas de las daphnias.

El tamaño de las dafnias varía entre 0,2 y 5,0 mm de longitud. Habitan en medios acuáticos, desde charcos hasta ríos, y se alimentan esencialmente de fitoplancton, pudiendo también ingerir microorganismos como protistas y bacterias, así como materia orgánica particulada o disuelta. La división del cuerpo en segmentos no se puede apreciar a simple vista. La cabeza se encuentra fusionada, y está generalmente posicionada hacia abajo, tocando el cuerpo, apreciándose la separación entre el cuerpo y la cabeza. En la mayoría de las especies el cuerpo está cubierto por un exoesqueleto, con una abertura ventral en los 5 ó 6 pares de patas.

El ciclo de vida de las pulgas de agua no excede el año y es altamente dependiente de la temperatura. Por ejemplo, individuos pueden vivir 108 días a 3 °C (37 °F), mientras que otros organismos pueden vivir solamente 29 días a 28 °C (82 °F). Una clara excepción a esto es el invierno, durante el cual las hembras pueden llegar a vivir 6 meses. Estas hembras tienen generalmente una menor tasa de crecimiento, pero son de mayor tamaño que las normales.

CATEGORÍA DE PROTECCIÓN

Las daphnias no están en peligro de extinción, pero cuando se presenta cierto grado de contaminación en arroyos, ríos, lagos, y lagunas tienden a desaparecer.



¿POR QUÈ UTILIZAR DAPHNIAS EN EL ESTUDIO DE TOXICIDAD?

Porque dentro del grupo de los cladóceros, las especies del género Daphnia son las más utilizadas como organismos de prueba o de referencia en pruebas de toxicidad. La amplia distribución geográfica, el importante papel que cumplen al interior de la comunidad zooplanctónica, la facilidad de cultivo en el laboratorio, la reproducción partenogenética (lo cual asegura una uniformidad de respuesta), y el corto ciclo de vida con la producción de un alto número de crías, han hecho de este grupo un ideal para la evaluación de toxicidad, a nivel universal.

El género Daphnia se ubica dentro del orden cladócera de la clase crustácea, y especies como D. magna, D. pulex, y D. similis, son utilizadas extensivamente en pruebas de toxicidad, por lo cual existe una extensa información sobre las técnicas de cultivo, los requisitos de temperatura, luz y nutrientes, así como su respuesta a muchos compuestos tóxicos. Específicamente, los ensayos de toxicidad con D. magna permiten determinar la letalidad potencial de sustancias puras, aguas residuales domésticas e industriales, lixiviados, aguas superficiales o subterráneas, agua potable, y agua de poro de sedimentos, entre otros.

En las pruebas de toxicidad con neonatos menores de 24 horas de edad son expuestos a la muestra o compuesto a probar, por un período de 48 horas, al término del cual se cuantifica el número de organismos muertos. Con estos resultados se establece la proporción o porcentaje de mortalidad producida.

OBJETIVO:

Calcular la DL50 de la Cipermetrina en la población de daphnia.

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA: La contaminación hoy en día asciende con pasos agigantados haciéndose cada vez más visible adoptando más interés en la actualidad. Esta contaminación afecta no solo a los seres humanos sino también a todo organismo viviente por ello, la toxicología le da a entender cómo las substancias químicas afectan adversamente a los organismos vivientes. Debido a la multiplicidad de las substancias y nuestra limitada comprensión sobre cómo funciona el organismo humano.

La experimentación realizada es para un beneficio al conocimiento definiendo el efecto que podría tener alguna sustancia tóxica en los organismos ayudando así al aporte de nuevos componentes que puedan contrarrestar lo mismo, también a la resistencia de los organismos a un determinado tóxico.

Por tanto el experimento puede suministrar respuestas a muchas pregunta que quisiéramos hacer, pero esas respuestas deben ser tomadas con precaución.



Entonces nos genera un beneficio aprovechable a lo largo de los experimentos que haremos, para la identificación de la dosis letal que resista cada organismo, la preparación de un tóxico y la evaluación constante.

Desde el punto de vista teórico, esta investigación generará reflexión y discusión tanto sobre el conocimiento existente del área investigada, como dentro del ámbito de las Ciencias.

Desde el punto de vista metodológico, esta investigación está generando la aplicación de un nuevo método de investigación para generar conocimiento válido y confiable dentro del área estudiada.

DETERMINACIÓN DE LA DL50

Para la determinación de la DL50 el primer paso es el conteo de los organismos muertos en cada extracto y cada blanco, se corrigen las mortalidades mediante la fórmula de Abbott y paralelamente se utiliza otra corrección que se basa en el porcentaje de supervivencia de los individuos, esta corrección es utilizada en algunos procedimientos encontrados. Las fórmulas de estas correcciones son las siguientes:

DONDE:

M = Mortalidad.

me = mortalidad en el extracto.

mb = mortalidad en el blanco.

MÉTODOS:

La sustancia se administrará por vía oral a un grupo de daphnias de experimentación a una de las dosis ya definida.

La sustancia se somete a ser repetida a cada tanto de tóxico en las diferentes muestras siendo necesario un estudio de previa observación inmediata.

Según la ausencia o presencia de mortalidad de los organismos en relación con la sustancia recibida en un fase determinada

b

be

mmmM

1

(Formula de Abbott)



MATERIALES:

Daphnias Probeta Pipetas Agua destilada Cipermetrina(matanox) Agua mineral(san mateo) Vasos descartables 3 Botellas de vidrio

PROCEDIMIENTO:

Preparación de la concentración stock;

Se diluyó 0,1ml del tóxico (CIPERMETRINA) con 999.9ml de agua destilada Se hizo la mezcla correspondiente obteniendo 1L de la concentración stock. Posteriormente se separó 50 ml de la concentración stock, siendo esta la

cantidad de la concentración con la que se trabajará en las daphnias.

Preparación del disolvente (agua):

Se hizo una mezcla entre el 50% de agua mineral (San Mateo) y EL 50 % del agua donde habitan las daphnias.

Preparación de la disolución:

Para la disolución de 100%,(1) se utilizó 20ml de la concentración stock (pura) teniendo 4 réplicas (1A, 1B, 1C, 1D) de dicha disolución.

Para la disolución de 50% (2) se utilizó 10 ml de la concentración stock, más 10 ml de agua, teniendo 4 réplicas (2A, 2B, 2C, 2D).

Para la disolución del 25% (3) se utilizó 10 ml de la disolución 2, más 10 ml de agua, teniendo 4 réplicas (3A, 3B, 3C, 3D).

Para la disolución del 12.5% (4), se utilizó 10 ml de la disolución 3 más 10 ml de agua, teniendo 4 réplicas (4A, 4B, 4C, 4D).

Para la disolución del 6.25% (5) se utilizó 10 ml de la disolución 4 más 10 ml de agua, teniendo 4 réplicas (5A, 5B, 5C, 5D).

Posteriormente se añadieron las daphnias a dichas disoluciones, teniendo en cuenta que para cada disolución con su respectiva réplica se utilizaron 10 daphnias para cada una.

RESULTADOS:



Se proporcionaran los resultados de cada grupo de daphnias que separamos. Se reunirá los resultados en forma de un cuadro que presente cada grupo de ensayo el número de organismo utilizados, el número de organismos hallados muertos durante la prueba ,y el momento de la muerte de los distintos grupos de organismos dependiendo la magnitud de cada toxico separado en 5 grupos, la evolución temporal de los efectos tóxicos

CONTROL:

El control se hizo dentro de 48 horas debido a que según las investigaciones la cipermetrina actúa dentro de 48 horas.

LUNES 23 DE SEPTIEMBRE A LAS 12:30 PM

NÚMERO DE MUERTOS

toxico FILA 1 FILA 2 FILA 3 FILA 4 FILA 5 10 10 10 10 10 10 5 10 10 10 10 10

2.5 5 5 3 4 6 1.25 3 3 4 3 4

0.625 2 1 1 1 1

NÚMERO DE VIVOS

toxico FILA 1 FILA 2 FILA 3 FILA 4 FILA 5 10 NINGUNO NINGUNO NINGUNO NINGUNO NINGUNO 5 NINGUNO NINGUNO NINGUNO NINGUNO NINGUNO

2.5 5 5 7 6 4 1.25 7 7 6 7 6

0.625 8 9 9 9 9

MÈTODO PROBIT

toxico Log.conc.toxica # individuos #muertos %mortalidad

10 1 10 50 0.5%

5 0.70 10 50 0.5%

2.5 0.40 10 23 0.23%

1.25 0.09 10 17 0.17%

0.625 -0.20 10 6 0.06%



REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS

http://www2.inecc.gob.mx/publicaciones/libros/573/cap1.pdf

http://www.gruposilvestre.com.pe/ArchivosProducto/C_SA_127.pdf

CONCLUSIONES:

Uno de los efectos más importantes del tóxico hacia las daphnias fue el daño de su sistema nervioso y de su exoesqueleto translúcido, siendo ésta el provocamiento de su muerte

ANEXOS:

MATERIALES PREPARACIÓN DE LA CONCENTRACIÓN STOCK



CONCENTRACIÓN STOCK PREPARACIÒN DEL AGUA (AGUA DEL HABITAD DE LAS

DAPHNIAS MAS AGUA MINERAL)

DISOLUCIONES

dl50 cipermetrinapdf.pdf

Documents