diametro de ovocitos

UNIVERSIDAD NACIONAL AGRARIA LA MOLINA FACULTAD DE PESQUERIA REPRODUCCIN Y GENETICA DE ORGANISMOS ACUATICOS

CUARTA PRCTICA Estimado de la fecundidad y medida del dimetro de los vulosI. INTRODUCCIN Wydosky y Cooper (1966) definen a la fecundidad como el nmero de vulos producidos por una hembra antes del desove. De ah que se considera fecundidad absoluta como el nmero de ovocitos maduros producidos en una estacin de desove o en un ao, y a la fecundidad parcial como el nmero de vulos producidos por un reproductor parcial en cada desove, en tanto la fecundidad relativa es el nmero de vulos producidos por unidad de peso somtico en una estacin de desove. El nmero de vulos que produce una especie ctica vara ampliamente desde unos pocos miles, como en el pejerrey, hasta varios millones, como en el bonito. En general las altas fecundidades se observan en peces que desovan huevos pelgicos, como en el caso de la caballa, un nmero intermedio (100 a 10 mil vulos) en especies que dejan caer sus huevos al fondo o en la vegetacin, como en la carpa comn, mientras que un bajo nmero de vulos se da en especies que cuidan su prole como la tilapia. La fecundidad puede ser estimada por diferentes mtodos que pueden ser agrupados en mtodos directos e indirectos. Los directos se utilizan en especies con pocos vulos y se realiza un conteo total. Los indirectos se utilizan para especies con alta fecundidad, y se estima el numero de ovocitos a partir de submuestras. Se puede medir el dimetro de los ovocitos de gnadas en fresco disociadas en agua de mar filtrada o agua dulce (de acuerdo con la especie) o en una solucin fisiolgica, Es un mtodo rpido para la confirmacin del estadio de madurez, asimismo el tamao medio caracterstico de cada estadio ya deben ser conocidos a travs de estudios sistemticos realizados anteriormente. Para tales estudios se disocian los ovarios mediante la solucin de Gilson Modificada. Los ovarios son retirados de la cavidad abdominal, sus membranas seccionadas longitudinalmente en toda su extensin y son colocados en la solucin Gilson (proporcin 1:3). Despus de 15 minutos se agita fuertemente el frasco para que ocurra un primer fraccionamiento de la masa de vulos. Se dejan los ovarios en Gilson por un periodo de tiempo suficiente para que, por agitaciones fuertes y sucesivas del frasco, ocurra la completa separacin de los ovocitos. No se dee permitir una completa disociacin de las membranas., o se tendr dificultad en la limpieza del material. Posteriormente los ovarios disociados son transferidos a una placa petri donde son retiradas las membranas (con auxilio de una pinza y un pincel). Toda la masa de ovocitos disociados es transferida a un envase con alcohol al 70%. Se efectuan varios lavados con alcohol y se eliminan los residuos. Los ovocitos pueden ser mantenidos en alcohol al 70%.

Ing. Beatriz E. Angeles E.


Para obtener la distribucin de frecuencias del dimetro de los ovocitos se colecta una muestra de la masa total de ovocitos disociados en una suspencin en alcohol al 70%, con una pipeta Stempel teniendo cuidado de homogenizar muy bien la suspensin en el momento de realizar la colecta de la mestra. Esto tiene la ventaja de permitir obtener una muestra representativa del total de ovocitos existentes en los ovarios. En un estereoscopio con el auxilio de un ocular micromtrico se realiza la medicin y conteo de los ovocitos. Luego se calcula la frecuencia relativa (%) de ovocitos por clase de dimetro (en micras), y se ubican los resultados en grficos (abcisa: clases de dimetro, ordenada: frecuencia relativa por clase) Se debe efectuar tal procedimiento para cada par de ovarios, o sea, para cada individuo. El anlisis de tales grficos nos ofrece informacin sobre el grado de desarrollo de los ovarios (la moda ms avanzada corresponde al grupo de ovocitos ms desarrollados), y sobre el tipo de desove de esta especie (el nmero de modas indica los lotes de ovocitos que estn en desarrollo, en distintas fases). Si la especie es un desovador total tendremos un lote en stock y otro en estado de maduracin (A). Si es un desovador parcial tendremos un stock y dos o ms grupos de ovocitos en maduracin. (B)

S % MDimetro de los ovocitos

S

B

M1

M2

Dimetro de los ovocitos

II. OBJETIVOS Comparar el dimetro de los ovocitos en gnadas en diferentes estadios de desarrollo Determinar el estadio de madurez o tipo de desove a travs de la medicin del dimetro de los ovocitos

III. MATERIALES Y METODOS - Microscopios - Estereoscopios - Equipo de diseccin - Porta y cubre objetos - Placas petri - Pincel - Agua o solucin fisiolgica



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Balanza Papel platina Papel milimetrado

3.1. Procedimiento: Pesar y medir las gnadas Identificar la zona anterior, media y posterior de las gnadas. Cortar tres trozos (uno de cada parte) con un peso similar, ponerlo en papel platina y pesarlos. Ubicar cada trozo en una placa petri e ir separndolos con un pincel y una pipeta Medir los ovocitos de cada muestra (grandes, medianos y pequeos) con el microscopio

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IV. RESULTADOS a) Definir macroscopicamente si es una gonada inmadura, en maduracin, madura o en desove. b) Ingresar los datos de cada una de las muestras tomadas de las gonadas, en una hoja de excel c) Con los datos obtenidos determinar la frecuencia (%) de cada talla (grandes, medianos y pequeos). La Frecuencia es el nmero de ovocitos de cada talla entre el total de ovocitos por 100 c) Graficar en el eje de la X el dimetro de los ovocitos y en el de la Y la Frecuencia (%) d) Indicar si la especie es un desovador total o parcial, y si existe una relacin entre el dimetro de los ovocitos y el estadio de madurez. V. BIBLIOGRAFA Tresierra, A. Culquichicn, Z, y Veneros, B. CONCYTEC. 286 pg. 2002. Biologa Reproductiva en Peces.

Vazzoler, A.E.A. de M. 1982. Manual de metods para estudos biolgicos de populacoes de peixes. Reproducao e crescimento.CNPq. Programa Nacional de Zoologa. Coordenacao Editorial. 108 pg.


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