OBJETIVOSConocer las partes y el manejo de un espectrofotómetro de UV-VIS.Realizar una curva de calibración para cuantificar, por UV-VIS, el contenido de fósforo en una muestra de refresco de cola.

DETERMINACIÓN DE FÓSFORO EN BEBIDAS DE COLA POR ESPECTROFOTOMETRÍA UV-VIS

MATERIAL E INSTRUMENTACIÓN NECESARIOSEspectrofotómetro de UV-Vis con celdas de cuarzo o vidrio. Balanzas analíticas.PROCEDIMIENTOPreparación de soluciones

Preparar 100 mL de una solución stock de 100 ppm de P2O5 a partir de fosfato monobásico de potasio o de fosfato dibásico de potasio.

De la solución de 100 ppm de P2O5 preparar 25 mL de una solución de trabajo de 4 ppm.

Preparar la solución reductora de la siguiente manera:- Pesar 0.156 g de molibdato de amonio y

disolver en 5 mL de agua destilada. - Pesar 0.2112 g de ácido ascórbico y disolver en

10 mL de agua destilada.- Medir 2.2 mL de H2SO4 concentrado y diluir en

15 mL de agua. - Mezclar las tres soluciones anteriores y aforar a

50 mL con agua destilada.

Curva de calibración:

De la solución de trabajo,extraer alícuotas de 1, 2, 3, 4 y 5 mL. Agregar 4 mL de la solución reductora y aforar a 10 mL.Incubar durante 30 minutos a 50º C (baño María).

Preparación de la muestra:Desgasificar aproximadamente 10 mL de la muestra con vacío y agitación constante o en un baño de ultrasonido.Tomar 1 mL de refresco desgasificado y aforar a 50 mL.Tomar una alícuota de 1 mL de la solución anterior, añadir 4 mL de solución reductora y aforar a 10 mL con agua destilada.

Trabajar un duplicado.Incubar durante 30 minutos a 50º C (baño María). Se debe trabajar con un blanco.Análisis espectrofotométricoRealizar un barrido de exploración con el punto de la curva de calibración más concentrado, de 700 a 850 nm. A partir de la longitud de onda en la que se alcanza el máximo de absorción, realizar el análisis de la curva de calibración y las muestras.CÁLCULOSUtilizar la curva de calibración para cuantificar el contenido de fósforo en la muestra. Graficar los valores de absorbancia contra concentración en ppm.