deteccion de acs. clinicamente significativos
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UNIVERSIDAD PERUANA LOS ANDESFACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUDESCUELA PROFESIONAL DE TECNOLOGÍA MÉDICA
INMUNOHEMATOLOGIA Y BANCO DE SANGRE(DETECCION E IDENTIFICACION DE ANTICUERPOS
CLINICAMENTE SIGNIFICATIVOS)
2012- ILic. TM. JUAN CORTEZ ALEJANDRO
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Transfundir ….. o no transfundir
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DETECCION E IDENTIFICACION DE ANTICUERPOS
Área cautivante de inmuno hematología 0.2 a 2% (38%) del tipo de Población Acs: inmunizacion antigenos extraños
embarazos, transfusiones o inyección Detectado por prueba que use suero Necesario identificación : significado
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DETECCION E IDENTIFICACION DE ANTICUERPOS
Base : AGLUTINACION 1ra Técnica: suero + hematíes sol isot. Incubación de la mezcla a 37ºC Resuspensión de hematíe con plasma Utilización sangre citratada en portas Resuspensión de hematíes en albúmina
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Identificación Acs irregulares
Empleo de Células de Genética conocida Cels Pantalla: Estándar, Caliente, otras Cels Panel: A, B y C Uso de Reactivos : Antiglobulina Uso de Potenciadores : Albúmina Bob. 22%
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DETECCION E IDENTIFICACION DE ANTICUERPOS
Polivinilpirrolidona (PVP), Dextrano Prueba de Antiglobulina ( 1942 ) Uso de Enzimas, Tripsina ( 1947 ) Papaina ( 1950 ), Ficina ( 1957 ) Solución L I S S ( 1960 )
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DETECCION E IDENTIFICACION DE ANTICUERPOS
Donantes sangre Candidatos receptor Politransfundidos Evaluación Prenatal Neonatos. EHRN
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DETECCION E IDENTIFICACION DE ANTICUERPOS
Investigación de RHT
Investigacion AHAI Investigacion de PCM
incompatible Discrepancias ABO
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DETECCION DE ANTICUERPOS
Cel. rojas detentoras Ags mas importante Mayor Fza antigénica Estructura Ag. varia
considerablemente 99% Ac sign Clínica
Se realiza variedad condiciones
centrifugación inmed Incubacion Tº Amb. Con/sin Rx estimulo Incubacion a 37ºC Fase Antiglobulina
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REACTIVOS UTILIZADOS PARA LA INVESTIGACION DE ANTICUERPOS
Hematíes Genética Conocida
Células Pantalla Células Panel Células dirigidas ANTIGLOBULINAS Poli- Mono especifico
Rx de Estimulo o Potenciadores
Albúmina bovina LISS Enzimas PEG Polibrene
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DETECCION DE ANTICUERPOS
NCEL
Rh-Hr KELL LEWIS
I
II
D C E c e K k Lea Leb
+ + 0 0 + + 0 + 0+ 0 + + 0 0 + 0 +
Nro
I
IIFase AGH37ºC
Alb Bov
Salino
I I
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Identificación de Anticuerpos
En que fase(s) ocurrió la reacción
Autocontrol Pos / Neg Todas las cels
reaccionaron : igual/dif. fase, fuerza Rx real, hemólisis
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Identificación de Anticuerpos
Determinar su especificidad del Ac (s) Se diseña un protocolo: acorde Cel I-II Evaluar características : Rango térmico,
reactivo en uso, clase Ac, hemólisis, etc. Conocer : antecedentes, Hcl, Dx. Utilizar panel de células A, B y/o C.
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Que Acs Identificamos ?
Acs simples Acs múltiples Acs para Ag baja
frecuencia Acs para Ag alta
incidencia
Acs Fríos Acs alto titulo baja
afinidad Acs para Ag privado Acs ABH adquiridos
pasivamente
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TECNICAS DE IDENTIFICACION
Enzimas Var. Temperatura Modif. del pH Inhibición Ags solub. Absorción y Elución Uso Comp Tiol Cels Rh Nulo
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TIPOS DE PANELES EN IDENTIFICACION DE ANTICUERPOS
Panel con / sin reactivo de estimulo Panel enzimática Panel frío y Caliente Panel Mono especifico Ig G Panel para Ac. concentrado
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TIPOS DE PANELES DE IDENTIFICACION DE ANTICUERPOS
Panel Acidificado (pH) Panel dirigidos para Ags específicos Panel para Anticuerpo inhibido Panel para Ac. Absorbido y/o Eluido
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Modificación de Técnicas de Identificación de Acs. RX DE ESTIMULO Cloruro de sodio Albúmina bovina LISS PEG
CAMBIOS Tº Incubacion a 4ºC Incubacion 12- 24ºC Incubacion a 30ºC Incubacion a 37ºC
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MODIFICACION DE TECNICAS EN IDENTIFICACION DE ACS.
ESPECIFICIDAD AGH Poli especifica AGH Mono específicos Ig
G, Complemento
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USO DE ENZIMAS
+
- -- -
--+
+ + +
+
- --- - -
-- -
---
++
+
+++
+ ++
+ +
++
Tratamiento Enzimático
* PANEL ENZIMATICO* TRATAMIENTO DE CELULAS* FICINA* BROMELINA* PAPAINA
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VARIACIONES DE TEMPERATURA
37C
4C
* PANEL CALIENTE
* PANEL FRIO
* EVALUACION RANGO TERMICO
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VARIACIONES TIEMPO INCUBACION
15 min 60 min* AUMENTO PUEDE SER DE 15 a 60
* DIFERENTES TEMPERATURAS
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INCREMENTO PROPORCION DE SUERO
* PUEDE VARIAR DE 2 gts a 10 gts
* REACCIONES MAS FUERTES
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MODIFICACION DEL pH
--
- -
--
-
--
+++
++ +
+ +
+ +
+++
+
++ + +
-+
-
-+-
pH
PUNTO ISOELECTRICO
8.5
7.0
6.5
7.5
-
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INHIBICION AGS SOLUBLES
+
NO AGLUTINACION
* ORINA : AG Sda* PLASMA: AGS Cha, Rga* LIQ. QUISTE HIDATIDICO: P1* LECHE MATERNA : AG I *SALIVA : SUSTANCIA LEWIS
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Detección de anticuerpos inesperados, tamización de anticuerpos, rastreo de anticuerpos, búsqueda de anticuerpos irregulares.
Condiciones de la reacción: Diferentes temperaturas - diferentes medios (salino, potenciadores -albúmina, LISS, polietilenglicol. Polibreno- antiglobulina, enzimas).
ANTICUERPOS INESPERADOS
PAI Positivo
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DETERMINACIÓN DEL GRUPO RHDETERMINACIÓN DEL GRUPO RH
Determinación del fenotipo Rh.
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Variante D débil Du: Se presenta en individuos que poseen en sus glóbulos rojos pocos determinantes antígenos D o que por causas genéticas se manifiestan débilmente. Para su detección se realiza un coombs indirecto.
Los anticuerpos del sistema Rh, no son naturales, solo se encuentran como resultado de una inmunización por transfusión ó embarazo incompatible.
DETERMINACIÓN DEL GRUPO RH
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ANTICUERPOS INESPERADOSANTICUERPOS INESPERADOS
Celulas I, II, IIICon dotación antigenica conocida.Utilidad conocer la presencia deAnticuerpos inesperados. Panel de células
Utilidad determinar el anticuerpoEspecifico.
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LISS-Coombs
1- PAI 2- PAI
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ANTICUERPOS INESPERADOS
Panel de Glóbulos O con dotación Antigenica conocida.
D ,C, E, c, e, M, N, S, s, P1, Lea,Leb,K, k,Fya , Fyb, Jka, JKb.
Buscar Ag clínicamente significativos
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D C E c e Cw K k Fya Fyb Jka
Jkb
Lea
Leb
P1
M N S s Lua Lub
1 + + 0 + + + 0 + + + 0 + 0 0 + + + + + 0 +
2 0 + 0 0 + 0 + + 0 + 0 + 0 0 0 + 0 0 + 0 +
3 0 + 0 + + 0 0 + 0 0 + + + + + 0 + 0 + 0 +
4 + 0 + + 0 0 0 + + 0 + 0 0 0 + + + 0 + 0 +
5 + + 0 0 + 0 0 + + 0 + 0 0 + + + 0 0 + + +
6 + 0 + + 0 0 + + + + + + + 0 0 0 + 0 + 0 +
7 0 0 0 + + 0 0 + 0 + + + + + + + 0 + 0 + +
8 0 0 + + + 0 0 + 0 + + 0 0 0 + + + + + 0 +
9 0 0 0 + + 0 0 + + + + 0 0 + 0 + + + + 0 +
10 0 0 0 + + 0 0 + + + + 0 0 0 + + 0 + 0 0 +
Rh-hr Kell Duffy Kidd Lewis P MNS Luteran
11 0 0 0 + + 0 + + + 0 + + 0 + 0 + 0 + + 0 +
Fríos IgM
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Fya
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GRACIAS