7/27/2019 Cultivo Puro

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Nombre: Isabel Marfany Medín 

Muestra: Interior de la boca de un perro.Fecha inicio: 15/10/13Fecha finalización: 21/10/13

Material:Placa PetriTubo de ensayoMechero de alcoholRotulador  Asa de siembra curva

Probeta Agua destiladaBalanzaPesasustanciasetc

Cultivo:Muestra Agar nutritivo

Reconstitución del medio de cultivo:Preparamos 50ml de Agar nutritivo para llenar tres placas, de las cuales sóloutilizaré una. (Seguir instrucciones del fabricante para preparar el medio).

23g ….1000mlXg … 50ml x=1,2g de Agar Nutritivo. 

Distribuimos en agar en placas y dejamos que solidifique.

15/10/13 A partir del tubo que obtuvimos en la práctica anterior, “procura de microbios”, hemosdecidido crear un cultivo puro. Para ello, hemos comenzado haciendo una siembra en AN, a partir del mismo, en una placa Petri de 90 mm con asa de siembra curva (Nodebemos olvidarnos de homogenizar previamente la muestra).La siembra la hemos efectuado por tramos, de manera que el segundo tramo tocaráuna sola vez el primero, el tercero una sola vez al segundo, y así sucesivamente. (Nosuperponer las estrías).

Esta es una de las mejores técnicas para obtener colonias aisladas en placa, lo cuales un método muy eficaz para la obtención de un cultivo puro.

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Incubamos la placa, siempre en posición invertida.

Hemos elegido Agar Nutritivo, por ser un tipo de medio general y, de esta manera,podrán crecer en el cualquier tipo de bacterias puesto que no sabemos qué puedecontener nuestra muestra.

18/10/13Tras la incubación, hemos observado los siguientes resultados:

Muestra:Interior de laboca de un

perro.

Tiempo deincubación:

24h

Temperatura:

37ºc

Diámetro Apariencia Borde Elevación Color Número

1-2 mm Circular Liso Plana Blanca 11UFC

<1 mm Puntiforme Liso Nula Amarillenta DCPR

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Observamos las colonias y, al igual que en “Procura de microbios”, como es lógico,hemos obtenido dos tipos de morfología, una blanca y otra amarillenta.Para obtener un cultivo puro de una de las morfologías, he elegido una colonia blanca(señalada en la imagen) que ha quedado bien aislada, y a partir de ésta, he sembradoen un tubo de agar nutritivo en slant o agar inclinado.

La siembra se trata de una estría efectuada con ayuda de un asa de siembra curva,iniciando la inoculación desde el fondo del tubo hacia la boca de éste.Incubamos el tubo en la estufa (tubo con tapón cerrado sólo media vuelta).

21/10/13Tras la incubación, hemos observado los siguientes resultados: 

Muestra: Interior de la boca de un

perro.

Tiempo deincubación: 24h

Temperatura:37ºc

Diámetro Elevación Color Apariencia Número

Indefinido Plana Blanco Siembracontinuada

DCPR

Observamos nuestro cultivo puro, de color blanco,

ya que lo hemos sembrado a partir de una colonia

bien aislada blanca procedente de la placa.

El rastro celular es continuado por lo que nopodemos definir ningún diámetro ni se observancolonias aisladas.Conservamos nuestro cultivo puro en la taquilla.

Observaciones: Durante toda la práctica, tanto siembra en placa como siembra entubo, hemos trabajado en condiciones asépticas utilizando siempre un mechero dealcohol y trabajando por detrás de éste.