UNIVERSIDAD NACIONAL PEDRO RUIZ GALLO

FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGIAS

DECANATO

PROYECTO DE INVESTIGACION

TÍTULO: Evaluación de dos dosis de huevos de Sitotroga cerealella para la crianza de Chrysoperla externa en el laboratorio de biotecnología y control integrado de plagas – Lambayeque

AUTOR (es): Sarmiento Ruiz Thalia Estephany del Pilar

Cruzalegui Jaramillo Juvica

PATROCINADOR: Dra. Bióloga: Calderon Arias Carmen

APROBADO POR:

PRESIDENTE DE JURADO MIEMBRO SECRETARIO

MIEMBRO VOCAL JEFE CENTRO INVESTIGACIÓN

JEFE DEPARTAMENTO DECANO

Lambayeque 30 de julio del 2015

UNIVERSIDAD NACIONAL PEDRO RUIZ GALLO

FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS

DECANATO

PROYECTO DE INVESTIGACIÓN

I. GENERALIDADES 1. Título del Proyecto:

Evaluación de dos dosis de huevos de Sitotroga cerealella para la crianza de Chrysoperla externa en el laboratorio de biotecnología y control integrado de plagas – Lambayeque

2. Personal Investigador:2.1. Autor (s):

Sarmiento Ruiz Thalia Estephany del Pilar

Cruzalegui Jaramillo Juvica Sabina

2.2.Asesora:Dra. Carmen Calderón Arias

2.3 Colaboradores:Ingeniero Agrónomo Jaime Tirado Ruiz

Bachiller, Juan Prada Calderon

3. Carrera Profesional/Especialidad:Biología / Biología General

4. Tipo de Investigación:4.1. De acuerdo al fin que se persigue:

4.1.1. Básica

4.2. De acuerdo a la técnica de contrastación:4.2.1. Descriptiva

5. Régimen de Investigación:5.1. Orientada.

6. Localidad e Institución donde se desarrollará el proyecto.

Laboratorio de Biotecnología y control Integrado de Plagas en

Lambayeque, Perú.

7. Duración del Proyecto:3 meses (Mayo- Julio 2015)

8. Fechas probables de inicio y terminación:8.1. Inicio: 1 de mayo del 2015

8.2. Terminación: 16 de julio del 2015

9. Cronograma de trabajo:CRONOGRAMA DE ACTIVIDADES

ACTIVIDADES2015

MAYO JUNIO JULIOFASE DE PLANEAMIENTO• Revisión bibliográfica• Elaboración del proyecto• Presentación del proyecto• Aprobación del proyecto• Implementación del proyecto.

XXXX

FASE DE EJECUCIÓN• Recolección de muestras• Procesamiento de muestras• Registro de datos• Análisis estadístico de datos

X XXXX

FASE DE COMUNICACIÓN

Análisis e interpretación Elaboración del informe Presentación del informe

X XX

10. Recursos disponibles:10.1. Personal

Se contará con el apoyo del personal profesional y técnico

del Laboratorio de Biotecnología y control Integrado de

Plagas -Lambayeque

Personal docente y administrativo de la Facultad de Ciencias

Biológicas de la UNPRG - Lambayeque.

10.2. Equipos e Instrumentos. Balanza Analítica

Cámara Digital

10.3. Material y Reactivos:

10.3.1. Materiales Tapers de plástico

Libreta

Cartulinas

Baldes de plásticos de 1 galon de capacidad

Mallade platicos,tipo tul.

Pegamento para tubos(PBC)

Papel Kraft

Ligas

Tijera de plástico

Algodón embebido en agua

Bandeja de plástico

Cartulina

Taper de plástico.

Tela holgazana

10.3.2. Material Biológico

Larva de chrysoperla externa

Larva de Sitotroga cerealella

10.4. Local El presente proyecto se ejecutara en el Laboratorio de

Biotecnología y control Integrado de Plagas –

Lambayeque,Perú

11.Presupuesto:

BIENES COSTO UNITARIO

CANTIDAD TOTAL

2.3.15.12 MATERIAL DE ESCRITORIOPapel bond A4 (millar) S/. 12.00 1 S/. 12.00Lapiceros S/. 1.00 10 S/. 10.00Plumones S/. 2.50 10 S/. 25.00Folders S/. 8.00 2 S/. 16.00Cinta masking tape S/. 1.50 1 S/. 1.50Engranpador S/. 10.00 1 S/. 10.00Borrador S/.1.50 2 S/.3.00

2.3.18.21 MATERIAL, INSUMOS E INSTRUMENTOS

Balanza analítica S/. 85.00 1 S/.85.00Camara S/. 500.00 2 S/.5006.00Tapers de plásticos S/. 5.00 8 S/. 40.00Baldes de plastico S/.7.00 10 S/. 70.00Algodón S/. 6.00 1 S/. 6.00Malla o tul S/.5.50xm 4 S/. 22.00Detergente (kg) S/. 5.00 1 S/. 5.00Jabon liquido S/. 10.00 1 S/. 10.00Lejia (L) S/. 6.00 1 S/. 6.00Toallas S/. 3.00 2 S/. 6.00Papel secante (rollo) S/. 10.00 1 S/. 10.00

2.6.32.11 MATERIAL PARA PROCESAMIENTO DE DATO

USB (8gb) S/. 30.00 1 S/. 30.00Impresora Canon S/: 390.OO 1 S/: 390.OOFrigobar S/. 299.00 1 S/. 299.00

SERVICIOS

2.3.21.21 PASAJES Y SUBVENCIONES S/. 100.00 1 S/.100.00TOTAL S/.890.00

12.12. Financiación.12.1. Con recursos universitarios:

El Laboratorio de Biotecnología y control Integrado de Plagas -

Lambayeque, nos brindara el laboratorio de crianza y la ayuda del

personal profesional y técnico.

12.2. Autofinanciación:.El trabajo en parte será autofinanciado por los responsables esta

investigación

II. PLAN DE INVESTIGACIÓN 1. Realidad Problemática}

Chrysoperla es uno de los géneros que tiene mayor importancia dentro

de la familia Chrysopidae), por considerarse a sus especies como

insectos benéficos en el control biológico1.

Las Chrysoperlas denominada vulgarmente como crisopa, es un insecto

de la familia Chrysopidae y está integrada por especies comúnmente

llamadas “alas de encaje”, “moscas de ojos dorados” o simplemente

“leones de áfidos”; y son los más importantes predatores del Orden

Neuroptera. . El género Chrysoperla incluye unas 40 especies y es, sin

duda, el de mayor interés económico, habiéndose utilizado su cultivo en

masa en multitud de programas de control biológico2.

Su distribución geográfica es prácticamente cosmopolita. Se encuentra

en muchas partes de Europa y Asia. Actualmente se consideran los

agentes biológicos decisivos para el control de plagas insectiles,

habiéndose difundido su utilización en cultivos comerciales,

invernaderos o jardines.3

La fauna Peruana de esta familia está conformada por varias especies

en diversos grupos taxonómicos y muchos de los cuales no se

encuentran en otras partes del mundo4.

Chrysoperla externa es una especie peruana, la cual destaca por su

presencia predatora, amplia distribución , presencia de adultos a través

de todo el año, fácil crianza en cautiverio, potencial para adaptarse a

varios ambientes de cultivo y su resistencia a numerosos pesticidas5

Son los controladores biológicos promisorios en el Manejo Integrado de

Plagas (MIP) en cultivos de interés económico como maíz, papa,

algodón, palma aceitera y frutales (cítricos, olivo, manzano, etc), en los

cuales ya se han realizado ensayos exitosos.El manejo de estos

controladores biológicos está orientado a acciones de conservación e

incremento de las especies nativas en existencia y el establecimiento de

programas de liberación inundativa e inoculativas de especies criadas en

insectarios6.

El establecimiento de un módulo de crianza de las especies en mención

con dosis distintas de Sitrotoga cerealella, teniendo como base la

información sobre aspectos básicos de los ciclos biológicos y

comportamientos, facilitará al usuario las disponibilidad de predatores

para su uso de campo o para contribuir de este modo a potencializar su

producción en gran escala.

1.1. Identificación del problema:Evaluación de dos dosis de huevos de Sitotroga cerealella

1.2. Delimitación del problema: Crianza masiva de chrysoperla externa en el laboratorio de biotecnología y control integrado de plagas en Lambayeque

2. Problema:¿Cuál sería el efecto en la producción de adultos, tras la crianza de

Chrysoperla externa con dos dosis distinta de Sitrotroga cerialella?

3. Justificación e importancia

La investigación en nutrición de insectos se ha desarrollado rápidamente

en las tres últimas décadas debido a la importancia que se ha adquirido

la multiplicación de insectos para facilitar las investigaciones en los

campos de la Fisiología, Ecología y Genética; así como en

programas de control biológico e integrado7.

Las Chrysopas verdes son de fácil cría bajo condiciones de laboratorio

y el mayor problema que se tiene cuando se realizan estas crías en gran

escala es el canibalismo y la provisión de un adecuado suplemento de

presas8.

El éxito de este tipo de programa- depende en gran parte de la

adquisición de los insectos presa, los cuales deben proporcionar los

requerimientos nutricionales adecuados, ser de fácil manipuleo y

tener un costo de cría bajo. Lo anteriormente expuesto ha conducido a

modificar o sustituir el alimento natural ya sea parcialmente por

dietas artificiales9.

Actualmente en nuestra Universidad Nacional Pedro Ruiz Gallo

en conjunto con el Laboratorio de Biotecnología y control

integrado de plagas de Lambayeque-Perú, se está criando

artificialmente con la dieta común( a base de levadura de

cerveza y polen)y, esta especie, para la producción y la venta,

útil como controlador biológico; por ende los resultados obtenidos

servirán para determinar una dieta artificial comoda y efectiva sobre la

biología del adulto de la especie (C. externa).

4. Marco Teórico3.1. AntecedentesLa familia Chrysopidae es una de las más extensas del orden

Neuroptera con unas 1.200 especies reconocidas actualmente,

agrupadas en 92 géneros y tres subfamilias: Apochrysinae,

Chrysopinae y Nothochrysinae. De las cuales 40 están presentes en la

península Ibérica10

Chrysopidae es una de las familias de entomófagos más importantes

del orden Neuroptera, debido a que 15 géneros presentan especies

con potencial como agentes de control biológico11.

Las larvas de todas las especies y los adultos de algunos géneros son

depredadores y se alimentan de una amplia variedad de insectos

fitófagos tales como áfidos, cóccidos, mosquitas blancas y otros

insectos de cuerpo blando que se localizan en el follaje. Por esta razón,

algunas especies se reproducen actualmente de manera masiva y se

utilizan exitosamente para el control biológico de plagas agrícolas12.Las especies de la familia Chrysopidae son insectos de tamaño

mediano (6.5-35 mm de longitud de las alas), de color verde a café

claro, ojos verdes o dorados y con una longitud de antenas variable

(0.5-2 veces la longitud del ala anterior)13.

En su ciclo biológico, el periodo de preoviposición abarca entre 3 y 13

días. Los huevos de color verde claro, elípticos y alargados, son

depositados sobre el extremo superior de un filamento hialino o

pedúnculo que trata de impedir el canibalismo y la acción de

depredadores y parasitoides. En función de las especies los huevos

son depositados aisladamente o en grupos, en el envés de las hojas

generalmente. Muchas especies seleccionan para la oviposición áreas

próximas a colonias de las presas ya que de esta forma la hembra

dispone de la melaza como fuente de alimento, y además, se facilita

que las larvas recién emergidas encuentren rápidamente a sus presas.

Las hembras pueden depositar una media de 25 huevos al día. La

coloración del huevo cambia a pardo claro a medida que el embrión se

desarrolla, siendo de color pardo oscuro cuando se encuentra próximo

a la eclosión. A lo largo de aproximadamente 10 días las larvas pasan

por tres estadios larvarios antes de la pupación. La larva se caracteriza

por una alta capacidad de búsqueda, intensa actividad, movimientos

rápidos y por ser muy agresivas. Al emerger inicia inmediatamente la

búsqueda de presas, pudiendo desplazarse hasta 25 metros en busca

de alimento. Cuando la larva de tercer estadio está completamente

desarrollada suspende la alimentación e inicia el tejido de un cocón o

capullo protector en un lugar protegido. El cocón tiene forma esférica y

es de color blanco con apariencia algodonosa.En su interior, la larva se

dispone en forma de “C”, a esta fase del desarrollo se la conoce como

prepupa. El adulto al igual que la prepupa tienen capacidad de

hibernación. La longevidad de los adultos es de 2,5 a 9 meses

dependiendo de si existe o no diapausa. El tiempo de desarrollo de

huevo a adulto varía en función de factores como la temperatura,

humedad relativa, fotoperiodo y dieta de la larva En el caso de

Chrysoperla carnea es de unos 22 días a 27oC y una humedad relativa

entre 50 % y 80 %14.

Tras basarse en su ciclo de vida y morfología de la especie; en

California se realizaron las primeras crías de Chrysopa en volúmenes

comerciales para la liberación masiva en diferentes cultivos

comerciales. Finney, fue el pionero en la producción masiva de

Chrysopa, quien utilizó como alimento natural huevos de S.

cerealella (Oliver) y pequeñas larvas de Phthorimea operculella

(Zeller)15.

Tradicionalmente la base alimenticia de las larvas han sido huevos de

alguna especie que se pueda criar fácilmente, razón por la cual se han

utilizado las posturas de Sitotroga cerealella o de Gno-rimoschema

operculella en los procesos de cría masiva de las Chrysopas16.

Describieron (Hagen y Tassan) un método para alimentar larvas de C.

carnea a base de levadura hidrolizable cubierta con parafina en forma

de pequeñas gotitas, pero el método resultó ser muy tedioso; sin

embargo lograron establecer la importancia que juegan los simbiontes

en la nutrición de las Chrysopas, además en sus investigaciones

lograron establecer los efectos causados en el desarrollo del ciclo de

vida de C. carnea cuando las dietas artificiales tenían deficiencias de

vitaminas, sales y aminoácidos.Consideraron que el encapsulamiento

de la dieta larval podía reducir los costos de las crías masivas17.

Por otro lado se evaluó el desarrolló de una dieta semi-sólida para

larvas de Chrysoperla carnea, dieta artificial constituida por lecitina de

soya y aceite, colina, inositol y ácido ascórbico en agua; se demostró

que la falta de lecitina de soya enzimática hidrolizada y la caseína

reducían la emergencia de los adultos. Con esta dieta el desarrollo

larval tardó en promedio 17 a 20 días y la obtención de adultos fue del

56 al 6 5 %, como alimento para larvas de C. carnea18.

Varias dietas artificiales han sido ensayadas y evaluadas con el objeto

de reducir los costos del alimento y facilitar el manejo de las unidades

de cria, pero hasta el momento el uso de huevos de S. ce-realella no

ha podido ser reemplazado en forma absoluta ya que con las dietas

artificiales, el tiempo de desarrollo (en días) de la larva y la pupa, es

superior a la dieta natural consumiendo por lo tanto mayor cantidad

de alimento y el porcentaje de adultos obtenido, la cantidad de huevos

por hembra en un determinado tiempo (28 días) y la fecundidad de las

posturas es inferior19.

Se han desarrollado dietas artificiales para adultos de Chrysoperla

carnea constituidas por proteína enzimática hidrolizada de levadura de

cerveza, logrando obtener 786 huevos por hembra durante 21 días, en

comparación con 391 huevos por hembra cuando se les suministró solo

polen y miel natural20.

Tres investigadores evaluaron adultos de C. carnea alimentándolos con

levadura; mencionan que entre las dietas más importantes para la

producción de huevos de C. carnea se encontraron aquellas

compuestas con sucrosa y levadura. Se determinó que la sucrosa más

levadura logró un incremento del 38 % de huevos por día por hembra

en comparación al alimento natural21.

Se ha evaluado a los adultos de Chrysoperla externa con dietas

artificiales, levadura de cerveza, proteínas hidrolizada y levadura ,as

polen, a dicionandole a todos estos componentes agua destiladas y

miel de abeja, obteniéndose una mayor capacidad de oviposción y más

alta fertilidad con dieta a base de levadura22.

3.2. Bases teóricas- Dieta Se conocen dietas especializadas con las cuales se han logrado

buenas condiciones para sostener las poblacciones de adultos y lograr

rangos óptimos de oviposición y fecundidad. Dentro de esas

formulaciones el Food WheastR es la que mejores resultados ha

arrojado y que mayor utilización tiene entre las entidades que

realizan cría masiva de estos benéficos. El 58% - 60% de las

proteínas en el producto Wheast provienen de dos fuentes, un 40%

de la forma inactiva de la levadura seca Saccharoyces fragalis y el

18% - 20% restante de la albúmina de la leche, producida por el

sustrato de levaduras del suero de queso casero.Se está utilizando

en forma rutinaria y exitosa en la cría masiva de Chrysopa23 .

- Factores Ecológicos Incidentes

Clima: Es la variable más importante en los procesos de adaptación

de una especie. La influencia desbalanceadora del clima induce

procesos fisiológicos como en el caso de la escasa oviposición ob-

servada en las primeras crías de C. carnea, donde la desadaptabilidad

al fotoperíodo largo provocó la infertilidad, factor que fué corregido

manteniendo luz artificial en las noches. Así mismo las Chrysopas

poseen las características de tener una diapausa facultativa de tal

forma que altas o bajas temperaturas aceleran estos procesos

fisiológicos. Por ejemplo: altas temperaturas 3 3o -3 5 ° se reflejan en

infertilidad, debido a una hipe-ractividad de las Chrysopas que se

traduce en cópula constante, haciendo que con el movimiento no se

produzca la fertilización deseada. Con temperaturas de 28° - 29°C se

ha corregido esta anormalidad. Las altas humedades relativas 80 -

90% a nivel de laboratorio provocan desarrollo de hongos en las dietas

y ablandamiento de los pedicelos de los huevos lo que dificulta la

recolección. Humedades de 50 - 70% son óptimas para trabajo de

laboratorio.

Macroclima se refiere,el verano reduce notoriamente las poblaciones

de Chrysopidos y el invierno reduce notoriamente las poblaciones de

las presas. Lo cual hace que las fluctuaciones sean de alta

variabilidad24.

5. Hipótesis, variables y obejtivos4.1. Hipótesis

4.1.1. Formulación de la hipótesisLa Crianza de Chrysoperla externa con dos dosis distinta de

Sitrotroga cerearella, ayudaría a maximizar la producción de

insectos benéficos bajo condiciones de laboratorio.

4.2. Variables4.2.1. Operacionalizacion de variables

OBJETIVOSESPECIFICOS

VARIABLES DEFINICIONOPERACIONAL

DIMENSIONES INDICADORES UNIDADES

Crianza de Chrysoperla externa en el laboratorio

DEPENDIENTEEl número de individuos y porcentaje de huevos ovipositados.

Numero

proporcional de

natalidad en

población o tiempo

determinado

medido en relación

con el total de una

población,

mediante el índice

Determinación

de un numero

de población

Producción

Efecto de dieta

donde se observara la mayor cantidad de

Numero de

individuos

Viabilidad de

los huevos

Cuantitativa

o

procentaje

Dos dosis

distinta de

Sitrotroga

cerearella,.

de natalida, que

inidca el número de

nacidos

registrados.

huevos ovipositados, como efecto de una de las dietas artidiciales

Capacidad de

oviposición

INDEPENDIENTEEvaluacion con

dos dosis

diferentes de

Sitrotroga

ceriarella

Es la capacidad

que tienen unos

individuos para

alimentarse de

aquel sustrato que

le proporcione

suministros

completos para su

desarrollo,

ovoposición.

Influencia

sobre la

capacidad de

ovopisicion de

Chryysoperla

externa.

Nacidos:

.

5. Objetivos 5.1. Objetivo General:

Establecer una máxima producción de C. externa cuya metodología

esté al alcance del productor y que se dé una respuesta positiva en la

producción del predador .

5.1. Objetivos Específicos- Recoger datos biológicos del insecto a nivel de laboratorio

- Desarrollar las condiciones físicas adecuadas para el

establecimiento de la cria a nivel artesanal.

- Comercializar los insectos benéficos producidos en el laboratorio

como Chrysoperla externa.

5. DISEÑO METODOLOGICO: 5.1. Tipo de Estudio y Diseño de contrastación de hipótesis

Diseño de Investigacion Aplicativa

Especie, Chrysoperla externa

5.2. Población, Muestra y Muestreo

La población objetiva de la presente estudio, está constituida por

Chrysoperla externa.

La muestra de estudio estará delimitada por las siguientes coordenadas:

5.3 Métodos, Materiales e instrumentos de recolección de datos,

El método ha utilizarse desde el momento en que se hara el recogido de

la información, así como cuando se trabajará con la Población y con la

determinación de la Muestra, de igual manera para la Elaboración de los

Resultados y Discusión, para la tabulación y elaboración de cuadros

estadísticos de los datos recogidos será determinada por el METODO ESTADISTICO.Para el presente proyecto, la GUIA DE OBSERVACION será utilizada

como instrumento de recolección de datos.

La técnica que utilizaremos será la OBSERVACION.

Para el presente proyecto, la GUIA DE OBSERVACION será utilizada

como instrumento de recolección de datos.

La técnica que utilizaremos será la OBSERVACION, el cual es un

proceso cuya función inmediata nos ayudara a recoger información

sobre el objeto en consideración, está recogida de información implicara

una actividad de codificación para ser transmitida.

5.4. Plan de procesamiento y Análisis de datos. -Excel

- Cuadros estadísticos

REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS

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