colección y evaluación del semen de alpacas huacaya
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COLECCIN Y EVALUACIN DEL SEMEN DE ALPACAS HUACAYA (Vicugna pacos) DE LA FACULTAD DE CIENCIAS VETERINARIAS DE LA UNIVERSIDAD NACIONAL DE CAJAMARCA MEDIANTE EL USO DE UN MANIQU
Ctedra de San. Y Prod. De
Camlidos Sudamericanos
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COLECCIN Y EVALUACIN DEL SEMEN DE ALPACAS HUACAYA
(Vicugna pacos) DE LA FACULTAD DE CIENCIAS VETERINARIAS DE LA
UNIVERSIDAD NACIONAL DE CAJAMARCA MEDIANTE EL USO DE UN
MANIQU
I. INTRODUCCIN
La alpaca es uno de los CSAs ms importantes en nuestro pas desde
el punto de vista social, econmico, cultural y cientfico (VARGAS
2011).
El comportamiento sexual vara de acuerdo a la especie, y en el caso
particular de los camlidos sudamericanos, se presentan
caractersticas muy peculiares (Curie & Ivn 2008). Las circunstancias
de la posicin coital y su temperamento nervioso hacen que la
obtencin de semen presente serias dificultades (Bustinza, 2001) y
esto provoc que durante varias dcadas se investigue una tcnica
ptima para poder extraer este semen y poder manejar los
espermatozoides sin que estos pierdan su capacidad fecundante
(Sols, 1997).
Los primeros trabajos de coleccin de semen en camlidos
sudamericanos se hicieron con el uso de fundas vaginales
(Mogrovejo, 1952), posteriormente se emple la electro eyaculacin
(Fernndez Baca y Caldern, 1965), vagina artificial con una crvix
simulada (Sumar y Leyva, 1981) y recientemente, el uso de un
maniqu equipado con una vagina artificial para la recoleccin del
semen (P. W. Bravo, U. Flores 1997).
II. OBJETIVOS
1. Colectar el semen de alpaca mediante el uso de una vagina
artificial dentro de un maniqu.
2. Evaluar la viabilidad espermtica de la alpaca Huacaya mediante
el uso de microscopa.
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III. REVISION DE LITERATURA
1. Los Camlidos Sudamericanos y su importancia en la
sociedad altoandina
Los CSA constituyen un recurso gentico de gran importancia
social, econmica, cultural y cientfica para nuestro pas. En la
actualidad, constituyen el nico medio de utilizacin productiva de
las extensas reas de pastos naturales de las zonas alto andinas
donde no es posible la agricultura ni la crianza econmica de otras
especies de animales domsticos (FAO, 2005).
La crianza de alpacas en el Per se desarrolla en la regin
altoandina, en mayor proporcin en la sierra sur y central, en
altitudes que van de los 3800 hasta ms de 5000 metros sobre el
nivel del mar (FAO, 2005).
La alpaca es una especie que representa un factor importante de
la economa de nuestro pas, siendo el Per el pas con la mayor
poblacin de alpacas con aproximadamente 3 millones de cabezas
(Esponda et al., 2004).
La produccin alpaquera genera fuentes de ingreso para por lo
menos 1.5 millones de campesinos de ms de 1000 comunidades
de Apurmac, Arequipa, Ayacucho, Cusco, Huancavelica, Junn,
Lima y Puno (Esponda et al., 2004).
2. COLECCIN DE SEMEN EN CAMLIDOS SUDAMERICANOS
2.1. FUNDAS VAGINALES.
Mogrovejo (1952) realiz el primer ensayo de coleccin de
semen en alpacas, utilizando una funda de ltex colocada
intravaginalmente antes de la cpula; despus de la monta
se retiraba la funda que serva de recipiente de semen; con
esta tcnica se logr colectar semen, presentaba algunos
inconvenientes, ya que se interfera con la cpula normal y
alargaba el tiempo de monta ms all de los valores
normales; la colocacin de la funda dentro del tracto genital
y su fijacin ofreca serias dificultades y con frecuencia
provocaban lesiones que inhabilitaban a la hembra para su
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uso posterior; existieron otros intentos de colectar semen
con fundas vaginales, realizadas por Palomino (1962) y
Jhonson, (1989). En 1991, Sucapuca, realiz un estudio
de coleccin de semen en alpacas mediante la tcnica del
preservativo, obteniendo pequeos volmenes y bajas
condiciones espermticas.
2.2. ESPONJAS VAGINALES.
Esta investigacin fue realizada por San Martn (1961) el
cual usa trozos de esponja que se introducen en la parte
anterior de la vagina y que absorbe el semen y otros fluidos
vaginales, sirviendo como contenedores; el inconveniente
de este mtodo es que logra obtener semen muy
contaminado y mezclado con los fluidos del tracto genital
femenino y esto diluye el semen y lo contamina con
bacterias, dificultando as su evaluacin, por lo que no se
recomienda su uso para fines de inseminacin artificial.
2.3. ELECTROEYACULACIN.
En 1966, Fernndez-Baca y Caldern reportaron el uso de
la electroeyaculacin para la coleccin de semen de
alpacas, utilizando un equipo de fabricacin nacional, con
una intensidad mxima de 40 voltios, se obtuvieron
muestras de semen con la ventaja de realizar la coleccin
sin la necesidad de tener hembras en celo, acortar el tiempo
de coleccin y realizarla a lo largo de todo el ao; tambin
se utiliz esta tcnica para obtener semen de vicuas y
pacovicuas (hibrido cruce de alpaca con vicua)
(Fernndez Baca y Novoa, 1968). Los resultados de
electroeyaculacin muestran gran variabilidad entre
animales y aun entre el mismo animal, adems de obtenerse
semen muy diluido con las secreciones de las glndulas
anexas, contaminado con semen y baja concentracin
espermtica; Jhonson (1989) obtuvo semen de llamas
anestesiadas sedadas, se obtuvo pequeas cantidades
(0.1 a 0.5 ml) con alta concentracin pero no todos los
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intentos fueron exitosos. En 1987, Crdenas y Col.
realizaron un estudio comparativo de coleccin de semen
mediante las tcnicas de electroeyaculacin y vagina
artificial, se utiliz un electroeyaculador Plectron,
obtenindose buenos resultados con 60 cargas elctricas de
2 segundos de duracin, 14 voltios, 4 amperios, 25
ciclos/seg. y 2 seg. de descanso entre cada pulsacin, el
semen obtenido por este mtodo tuvo diferentes
caractersticas a las muestras obtenidas mediante vagina
artificial.
2.4. FSTULA URETRAL.
Este mtodo requiere realizar una fstula quirrgica en la
uretra peneana entre el ano y el escroto; el semen es
colectado durante la copula natural, esta tcnica se realiza
utilizando anestesia epidural y anestesia local para colocar
un catter plstico en la uretra desde el pene hasta la vejiga,
el cual sirve para guiar la ciruga y ayuda a identificar la
uretra; la incisin se realiza en la piel, el msculo
bulbocavernoso aislado y se separa la uretra del cuerpo
cavernoso; este mtodo no interfiere en la copula y las
secuelas post operatorias parecen no afectar al animal
(Kubiceck, 1974).
2.5. ASPIRACIN VAGINAL POSTCOITAL.
Muestras de semen pueden ser obtenidas por aspiracin del
fondo de la vagina despus de la cpula, ya que una
pequea cantidad de semen es eyaculada al momento de
llevar el pene de un cuerno al otro, este mtodo no es
invasivo ni tedioso pero la desventaja es que este semen es
incompleto, contaminado y diluido con las secreciones del
tracto genital femenino, se puede utilizar este semen para
realizar la evaluacin de espermatozoides como motilidad,
vitalidad, morfologa; estas muestras frecuentemente se
obtienen con residuos sanguinolentos y se ve de un color
rosado ya que el endometrio se encuentra inflamado y
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lacerado por la cpula; la tcnica es introducir un especulo
por la vulva previamente aseada y con la ayuda de una
fuente de luz se ubica la crvix, inmediatamente se aspira
con una pipeta adosada a una jeringa, la utilizacin de este
tipo de semen para evaluar la fertilidad del macho es muy
cuestionada (Bravo, 2002; Neelly y Bravo, 1995).
2.6. VAGINA ARTIFICIAL.
Esta tcnica fue desarrollada por Sumar y Leyva (1981),
para lo cual construyeron un maniqu en forma de una
hembra sentada en posicin de cpula; la vagina artificial
fue una modificacin de la vagina artificial usada para
vacunos y ovinos, la cual consista en un tubo rgido de 7 cm
de dimetro por 25 cm. de largo con una funda interna de
ltex, un cono de ltex al que envolva un alambre en espiral
simulando la crvix de la alpaca y al final un frasco de
coleccin de semen de ovino un tubo de centrifuga, el
agua a 45 se coloca por una vlvula-espita; los machos
aceptaron el maniqu despus de un corto entrenamiento; la
copula se interrumpa cada 10 minutos aproximadamente
para renovar el agua caliente, el semen colectado vari,
dependiendo del macho, el color del eyaculado,
independientemente del volumen, fue de un blanco lechoso
a blanco claro, este semen no muestra motilidad masal por
lo espeso de su consistencia.
La utilizacin de vagina artificial en combinacin con una
hembra receptiva es la tcnica ms ptima de obtener
semen de buena calidad, el que se puede utilizar para fines
de inseminacin artificial, teniendo en cuenta de usar una
fuente de calor continuo y la caracterstica que imite a la
cervix (Vaughan y Col., 2003).
En un estudio llevado a cabo por Dvalos y Olazbal
(2002), se encontr que utilizando hembra receptiva al lado
del maniqu incrementaba la calidad del eyaculado obtenido
mediante vagina artificial a comparacin de solo utilizar el
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maniqu solo, incrementando el tiempo de cpula de 15.9 a
16.8 minutos. En Bolivia se trat de mejorar la tcnica de la
vagina artificial utilizando un maniqu de grupa, el cual es un
aditamento que se le coloca a la hembra sin necesidad de
contar con un maniqu de cuerpo completo, la tcnica es
similar a la del maniqu con vagina artificial, adems se
evalu otra tcnica, que es la de colocar la vagina artificial
por desviacin del pene en el momento de la penetracin,
tal como se realiza en vacunos, al comparar las tres tcnicas
se tuvo una aceptacin por parte del macho del 20 % para
la tcnica del maniqu completo sin hembra receptiva, 80 %
para la tcnica del maniqu de grupa y un 90 % para la
tcnica de la desviacin del pene al inicio de la cpula,
segn el autor la ltima tcnica es la ms recomendable
pues evita la contaminacin del eyaculado (Delgado y Col.,
2003).
3. FACTORES RELACIONADOS CON LA COLECCIN
3.1. FRECUENCIA DE COLECCIN.
Se realiz un estudio para evaluar el efecto de la repeticin de
coleccin de semen usando el mtodo de la vagina artificial,
realizando hasta tres colecciones diarias por un periodo de 12
das seguidos, los resultados obtenidos indican que las
caractersticas ms afectadas por la frecuencia de coleccin
fueron la concentracin de espermatozoides, la cual desciende
significativamente en la tercera coleccin, as mismo el
porcentaje de anormalidades en la cola se incrementa pero la
motilidad, porcentaje de vitalidad y el porcentaje de
espermatozoides normales no fue afectada, se vio la diferencia
significativa en todas las caractersticas al hacer las
comparaciones entre individuos; pero a partir del da 10 de
coleccin, casi todos los machos tuvieron un descenso en todas
las caractersticas seminales e incluso algunos solo eyacularon
plasma seminal, especialmente en la tercera coleccin diaria
(Bravo y Col., 1997). En otro estudio similar, se trat de evaluar
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el efecto de los intervalos de coleccin a determinadas horas,
cada 2, 4, 12 y 24 horas; la respuesta fue de 65, 85, 100 y 100
% respectivamente, el volumen vari de 0.18, 1.08, 0.19 y 1.64
respectivamente; en la concentracin: 9.2, 44.3, 36.3 y 107
millones/mm3 respectivamente; vitalidad de 4, 43, 55 y 59 %
(Galindo y Garnica, 1995), estos estudios podran indicar que
la frecuencia copulatoria en poca reproductiva podra ser una
causa de baja fertilidad por agotamiento de las reservas
espermticas en los machos.
3.2. DURACIN DE LA CPULA.
Las caractersticas del semen se relacionan con la duracin de
la cpula, esto ha sido descrito desde dos puntos de vista:
Primero el cambio del tubo colector cada 5 minutos y segundo:
La interrupcin de la cpula a 5, 10, 15 y 20 minutos, en general
no existen cambios considerables de volumen del eyaculado
pero si existen cambios substanciales en la concentracin y el
porcentaje de espermatozoides vivos, la concentracin se
increment a los 20 minutos de cpula, sumado a esto, la
interrupcin de la cpula incrementa el porcentaje de
espermatozoides muertos cuando se interrumpe a partir de los
15 minutos, por lo que no se recomienda interrumpir la cpula
ya que la ltima fraccin del eyaculado parece ser la que lleva
la mayor concentracin de espermatozoides vivos (Bravo y
Col., 2002)
3.3. POCA.
Se sabe que la poca as como la alimentacin juegan un papel
importante en la produccin espermtica y en la calidad del
semen colectado de acuerdo a la poca del ao, esto en
condiciones de la sierra sudamericana ya que gracias a la
geografa se presentan estaciones marcadas, problema que no
se presenta en el hemisferio norte por lo que no se orientan
estudios hacia este tema; un reporte de la sierra argentina en
llamas indica que la poca juega un papel importante en la
produccin espermtica, concentracin y porcentaje de
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anormalidades, sobre todo de la cola, tenindose buenas
caractersticas seminales durante el verano y las
anormalidades se incrementa durante el invierno (Giuliano y
Col., 2006), en alpacas no se tiene un reporte escrito, pero se
ha visto que en la coleccin de espermatozoides realizada
mediante la tcnica de la desviacin de los conductos
deferentes, ya que dicha tcnica permite obtener semen a lo
largo del ao, se observ una disminucin en la concentracin
y en la vitalidad de los espermatozoides, sobre todo en los
meses de agosto y septiembre (Prez, 2006, comunicacin
personal).
3.4. EDAD.
En un trabajo realizado en llamas, para evaluar el efecto de la
edad de los animales en las caractersticas seminales
obtenidas mediante la tcnica de la vagina artificial, se utilizaron
llamas machos de 3, 4 y 5 aos de edad, se determin que esta
caracterstica no tiene influencia en las caractersticas
seminales (Fernndez y Col., 2003). En alpacas, la edad tiene
un efecto muy sutil en la produccin espermtica, ya que las
caractersticas mejoran ligeramente de acuerdo aumenta la
edad, pero dicha diferencia no es significativa (Bravo, 2002;
Quispe, 1987).
4. EVALUACION DE SEMEN
4.1. CARACTERISTICAS FISICAS
MACROSCOPICAS.- Las caractersticas macroscpicas del
semen de camlidos sudamericanos, entre las cuales se
consideran volumen, color, aspecto y pH. Estas caractersticas
del eyaculado dependern del tipo de coleccin y de la
manipulacin, as como de las caractersticas fisiolgicas de
cada animal.
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Cuadro 1.- caractersticas macroscpicas del semen de camlidos
sudamericanos.
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MICROSCPICAS.- Las caractersticas microscpicas ms importantes que
se evalan en el semen son concentracin, motilidad, vitalidad y porcentaje
de anormalidades.
Cuadro 2.- caractersticas microscpicas del semen de camlidos
sudamericanos.
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IV. MATERIALES Y METODOS
1. MATERIALES
Maniqu hecho a base de madera y recubierto de espuma
ms lana de oveja.
Vagina artificial de ovino modificada a base de PVC.
Fundas de jebe o caucho.
Microscopio
2. MTODOS
Se utilizar el mtodo de la vagina artificial modificada (Bravo et
al., 1997), que consta de un tubo de PVC de 20 cm de largo por 4
cm de dimetro. La vagina artificial contendr aire a presin y agua
caliente que debe mantenerse entre 38 a 40 C, para permitir que
el macho no interrumpa la cpula.(Virgilio et al. 2012).
La vagina artificial se colocar dentro de un maniqu que ser a
base de madera y alambre. Las alpacas macho sern entrenadas
para que copulen con el maniqu por el lapso de 15 das y si se
presenta algn problema el entrenamiento cesar o ser ms
intensivo.
Una vez extrado el semen, ser llevado inmediatamente al
laboratorio para su estudio tanto a nivel macroscpico como
microscpico.
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El semen ser estudiando en los siguientes aspectos:
V. CRONOGRAMA
RESULTADOS Y DISCUSIN
CONCLUSIONES
RECOMENDACIONES
RESUMEN
FECHA
ACTIV.
18-05-15 29-05-15 20-06-15 25-06-15 30-06-15 5-07-15 10-07-
15
31-07-15
Realizacin del
maniqu
Realizacin de la
vagina artificial
Entrenamiento
Coleccin de
semen
Presentacin de
resultados
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ANEXOS