clase 2 no mecánicos

7/24/2019 Clase 2 No Mecnicos

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Procesos deBioseparacin

Unidad I

RUPTURA CELULARCLASE 3


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Visto anteriormente

Estrategia de Diseo de ProcesoDOWNSTEAM

Composicin de entrada a unacorriente DSPVarios procesos de produccinTabla de Puricacin


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Rompimiento Celular

Precipitacin cidosNucleicos, Proteasas

Concentracin

Purificacin AltaResolucin

Separacin MaterialIntracelular (Desechos)

Caldo de ermentacin

Separacin de C!lulasSin C!lulasC!lulas inmo"ili#adasC!lulas retenidas

Con C!lulas

Prote$nasintracelular

So%renadante

&ratamiento de cuerpos incluidos

Refinamiento

PermiteAltos ni"eles de pure#a'sta%ilidad del producto


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!"u# sabemos acerca un $%rmacobiotecnolgico&

Teraputico Preventivo

Rehabilitatorio

EECT!

Prote"nas reco#binantes$ anticuerpos#onoclonales$ secuencia de %cidos

nucleicos


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Sistemas de e'presin de P(OTE)NAS(ECOM*+NANTES

Bacterias

Levaduras

&irus

Cultivos declulas

ani#ales


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!"u# implica conocer todoesto&

,ocali-acin del producto deinter#s

E'tracelular+ntracelular

RupturaCelular

Antibiticos.en-imas

e'tracelulares.Muc/os polisac%ridos0 ma0or1a deamino%cidos2 Ma0or1a de las prote1nas

producidas pormanipulacin gen#tica de

bacterias 3ue no segreganlas prote1na al medio2


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RupturaCelularRupturaCelularPR!TE'(AS

PR!TE'(ASPR!TE'(ASPR!TE'(AS

,os e3uipos in4olucrados enesta etapa no /an sido

diseados especialmente parael %rea biotecnolgica sino 3ueson prestadas de otras %reas56%rea de alimentos. de pinturas0 pigmentos72

)todos (!

#ec%nicos

)todos #ec%nicos


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RupturaCelular(esistencia

a5Te#peratura)edios alcalinos*eter+entes

En,i#as

Es-uer,os de corte

)todos(!

#ec%nicos)todos

#ec%nicos

La tcnica e#pleadadeter#inar% elta#a.o de los

desechos


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M#todos NO mec%nicos

A+entes

/u"#icosSol4entes org%nicos.detergentes. %lcalis. agua

6s/oc8 osmtico7

A+entes

en,i#%ticosPermeabili-an en $ormaselecti4a las membranas

celularesLiso,i#a

0lucana

sas

)ananasas

,os m#todos no9mec%nicos son -%ciles de escalar. siuno necesita tratar :; 4eces m%s materia org%nica bastacon adicionar :; 4eces m%s reacti4o 3u1mico oen-im%tico2


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M#todos NO mec%nicosTcnicas Principios Stress Costos E1e#plos

Permeabili-aci

n en-im%tica

Permeabili-acin de la pared

celular. lo cual produce el

rompimiento de la pared

celular

Tratamiento deM2l0sodei8ticuscon liso-ima2

S/oc8

osmtico

(uptura osmtica de la

membrana

(uptura deC#lulas de

.

>ipoclorito


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EST?D+O +ND+V+D?A,

Estructura 2

unciones de la

#e#brana celular

0ra# Positivas

(e+ativas

Tipos de

clulas


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Tratamiento En-im%tico

(uptura Permeabili-acin

Teor1a5 En-imas /idroli-an la membrana celular

/asta la permeabili-acin2


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Metodolog1a

Trata#iento En,i#%tico

En-ima @ (eaccin selecti4a deterioro de paredcelular


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S/oc8 OsmticoTeor1a5lu=o osmtico de agua 3ue puede e'istir al interior de lac#lula debido a los solutos 3ue estos contiene2

Se usa para el aislamientode mitocondrias0 cromosomasmitticos2

,a susceptibilidad de las c#lulas es relati4a 0 depende$uertemente de su tipo2


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S/oc8 Osmtico4C#o saber la presin necesaria para

ro#per las clulas5


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Solubili-acin

Teor1a5 Solubili-acin de los l1pidos de la pared o

membrana celular2

Parte >+D(OB*+CA

Parte >+D(O),+CA

Taurocolato desodio

*eter+ente Aninico*eter+ente Catinico

*eter+ente no 6inico 2

polidispersante

l bili i


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Aninicos

Solubili-acin

u0endo los grupos CA(*O+,OS por S?,ATOS se puede superar esa des4enta=


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Catinicos

Solubili-acin

Detergentes m%s sua4es (ompimiento m%s sua4e

(o inicos

Pol1meros solubles en agua


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Solubili-acin

Monto solubili-ado

Acti4idad

monmero

Tensin supercial

Concentracin de*eter+ente

A ba=as concentraciones de detergente no se producedegradacin de los l1pidos. pero a alta concentracin seproduce una degradacin 3ue resulta linealmenteproporcional a la concentracin de detergente2 unto aesta 4ariable tambi#n se altera la tensin supercial de la

solucin2


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uentes de in$ormacin

*elter P2 Cussler E2,2 S/ou >u W2*ioseparations2 DoFnstreamprocessing $or biotec/nolog0G

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