capitulo microscopia

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El microscopio, de micro- (pequeño) y scopio (ver), es un instrumento que permite observar objetos que son demasiado pequeños para ser vistos a simple vista. Es un instrumento óptico, que interpuesto entre el objeto de observación y el ojo del observador agranda significativamente la imagen. La ciencia que investiga los objetos pequeños utilizando este instrumento se llama: Microscopía.

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Page 1: CAPITULO MICROSCOPIA

El microscopio, de micro- (pequeño) y scopio (ver), es un instrumento que permite observar objetos que son demasiado pequeños para ser vistos a simple vista.

Es un instrumento óptico, que interpuesto entre el objeto de observación y el ojo del observador agranda significativamente la imagen.

La ciencia que investiga los objetos pequeños utilizando este instrumento se llama: Microscopía.

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El microscopio fue inventado hacia los años 1610, por Galileo, según los italianos, o por Zacharias Jansen, en opinión de los Holandeses.

La palabra microscopio fue utilizada por primera vez por los componentes de la Academia de Lincei, una sociedad científica a la que pertenecía Galileo y que publicaron un trabajo sobre la observación microscópica del aspecto de una abeja.

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Sin embargo, las primeras publicaciones importantes en el campo de la microscopía aparecen en 1660 y 1665, cuando Malpighi prueba la teoría de Harvey sobre la circulación sanguínea, al observar al microscopio los capilares sanguíneos y Hooke publica su obra Micrographia.

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En 1665 Robert Hooke, observó con un microscopio un delgado corte de corcho y notó que el material era poroso.

Esos poros, en su conjunto, formaban cavidades poco profundas a modo de cajas a las que llamó células.

Hooke había observado células muertas. Unos años más tarde, Marcelo Malpighi, anatomista y biólogo italiano, observó células vivas, fue el primero en estudiar tejidos vivos al microscopio.

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A mediados del siglo XVII un comerciante Holandés, Anthony Van Leeuwenhoek, utilizando microscopios simples de fabricación propia describió por primera vez: Protozoos, bacterias, espermatozoides y glóbulos rojos. El microscopista Leeuwenhoek, sin ninguna preparación científica, puede considerarse el fundador de la: Bacteriología.

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Tallaba él mismo sus lupas sobre pequeñas esferas de cristal, cuyos diámetros no alcanzaban el milímetro (su campo de visión era muy limitado, de décimas de milímetro).

Con estas pequeñas distancias focales alcanzaba los 275 aumentos.

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Observó además el Holandés : Glóbulos de la sangre, bacterias y protozoos; examinó por primera vez los glóbulos rojos y descubrió que el semen contiene espermatozoides.

Durante su vida no reveló sus métodos secretos y a su muerte, en 1723, 26 de sus aparatos fueron cedidos a la Royal Society de Londres.

Page 8: CAPITULO MICROSCOPIA

• Microscopio simple

• Microscopio compuesto

• Microscopio petrográfico

• Microscopio en campo oscuro

• Microscopio de contraste de fase

• Microscopio electrónico de transmisión

• Microscopio electrónico de barrido

• Microscopio virtual

• Microscopio invertido

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Microscopio simple

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M. Compuesto

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M. Petrografico

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M. De Campo Oscuro

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M. De Contraste de Fase

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M. Electronico

De barrido

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M. Electronico

De transmisión

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La lupa construida por una lente biconvexa y tiene la capacidad de ampliar una imagen hasta 250 veces

Microscopio compuesto: Aparte del componente mecánico, este se divide en un sistema óptico y otro de iluminación

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El sistema óptico es el encargado de reproducir y aumentar las imágenes mediante el conjunto de lentes que lo componen. Está formado por los oculares , los objetivos y el condensador

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Están constituidos generalmente por dos lentes, dispuestas sobre un tubo corto. Los oculares generalmente más utilizados son los de: 8X, 1OX, 12.5X, 15X. La X se utiliza para expresar en forma abreviada los aumentos.

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Tiene como función lo siguiente: Recoge los ases luminosos procedentes de los objetvos y los dirige hacia el ojo del observador - ayuda a ampliar la imagen y corrige defectos de los objetivos.

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OBJETIVOS

Se disponen en una pieza giratoria denominada revólver y producen aumento de las imágenes de los objetos y organismos y, por tanto, se hallan cerca de la preparación que se examina. Los objetivos utilizados corrientemente son de dos tipos: objetivos secos y objetivos de inmersión.

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El número de objetivos varía con el tipo de microscopio y el uso a que se destina. Los aumentos de los objetivos secos más frecuentemente utilizados son: 6X, 1OX, 20X, 45X 60X y el húmedo 100X

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El objetivo de inmersión está compuesto por un complicado sistema de lentes.

Para observar a través de este objetivo es necesario colocar una gota de aceite de cedro entre el objetivo y la preparación, de manera que la lente frontal entre en contacto con el aceite de cedro.

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.

Función: Reunir la mayor luminosidad– concentra la luminosidad - amplificar la imagen, a lo anterior se le denomina: Poder de resolución.

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Este sistema tiene como finalidad dirigir la luz natural o artificial de tal manera que ilumine la preparación u objeto que se va a observar en el microscopio. Comprende los siguientes elementos:

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El espejo tiene dos caras: una cóncava y otra plana. Goza de movimientos en todas las direcciones. La cara cóncava se emplea de preferencia con iluminación artificial, y la plana, para iluminación natural (luz solar). Modernamente se prescinde del espejo en la fabricación de microscopios, ya que éstos traen incorporada una lámpara colocada en el eje del microscopio.

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Condensador

El condensador está formado por un sistema de lentes, cuya finalidad es concentrar los rayos luminosos sobre el plano de la preparación. El condensador se halla debajo de la platina. El condensador puede deslizarse sobre un sistema de cremallera mediante un tornillo que determina su movimiento ascendente o descendente.

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PARTES DEL MICROSCOPIO

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Diafragma

Generalmente, el condensador está provisto de un diafragma o iris, que regula su abertura y controla la calidad de luz que debe pasar a través del condensador.

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El haz luminoso procedente de la lámpara pasa directamente a través del diafragma al condensador. Gracias al sistema de lentes que posee el condensador, la luz es concentrada sobre la preparación a observar. El haz de luz penetra en el objetivo y sigue por el tubo hasta llegar al ocular, donde es captado por el ojo del observador

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Se denomina campo del microscopio al círculo visible que se observa a través del microscopio. También podemos definirlo como la porción del plano visible observado a través del microscopio. Si el aumento es mayor, el campo disminuye, lo cual quiere decir que el campo es inversamente proporcional al aumento del microscopio. Para medir el diámetro del campo del microscopio con cualquiera de los objetivos se utiliza el micrómetro, al que se hará referencia en el siguiente punto.

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Microscopio estereoscópico: el microscopio estereoscópico hace posible la visión tridimensional de los objetos. Consta de dos tubos oculares y dos objetivos pares para cada aumento. Este microscopio ofrece ventajas para observaciones que requieren pequeños aumentos.

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Microscopio de campo oscuro

Este microscopio está provisto de un condensador paraboloide, que hace que los rayos luminosos no penetren directamente en el objetivo, sino que iluminan oblicuamente la preparación. Los objetos aparecen como puntos luminosos sobre un fondo oscuro.

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Microscopio de fluorescencia: La fluorescencia es la propiedad que tienen algunas sustancias de emitir luz propia cuando inciden sobre ellas radiaciones energéticas. El tratamiento del material biológico con flurocromos facilita la observación al microscopio.

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Se utiliza básicamente para una prueba serológica, denominada de inmunofluorescencia: Que consiste en enfrentar a un antígeno cualquiera a posible anticuerpo, presente en el suero sanguíneo de una persona o animal y previamente coloreado, además este microscopio posee una fuente de alto poder energético y además la luz pasa por una serie de filtros para evitar serios problemas visuales.

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Microscopio de contraste de fases: Se basa en las modificaciones de la trayectoria de los rayos de luz, los cuales producen contrastes notables en la preparación en fresco.

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Recordemos que este microscopio es exactamente igual al microscopio convencional, difiere inmediatamente en el condensador, este corresponde a varios lentes y cada lente corresponde a cada objetivo así: para el objetivo 10 colocamos al condensador 10 y así sucesivamente, su creador fue el investigador ZernIke.

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El microscopio electrónico

En 1932, Bruche y Johnson construyen el primer microscopio electrónico a base de lentes electrostáticas. Ese mismo año Knoll y Ruska dan a conocer los primeros resultados obtenidos con un microscopio electrónico Siemens, construido con lentes magnéticas. Así nace el microscopio electrónico. Para 1936 ya se ha perfeccionado y se fabrican microscopios electrónicos que superan en resolución al microscopio óptico.

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Estos logros no sólo representan un avance en el campo de la electrónica, sino también en el campo de la Biología, pues son muchas las estructuras biológicas que se han descubierto y que revelan detalles inusitados, al observarlas al microscopio electrónico.

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El microscopio electrónico utiliza un flujo de electrones en lugar de luz. Consta fundamentalmente de un tubo de rayos catódicos, en el cual debe mantenerse el vació.

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El microscopio petrográfico o de polarización se utiliza para identificar y estimar cuantitativamente los componentes minerales de las rocas ígneas y las rocas metamórficas. .

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El microscopio Petrográfico o de Polarización

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Microscopio invertido

Se caracteriza por la distinta colocación delos objetivos, los que se ubican debajo del espécimen, de mucha utilidad para la observación de los cultivos celulares y el efecto que ejercen sobre los virus cuando se cultivan sobre ellos y denominado Efecto Citopatico Viral.

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Microscopio Invertido