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58 Investigación Toxicológica

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Page 1: Capitulo 58 Toxicologia

58

Investigación Toxicológica

Page 2: Capitulo 58 Toxicologia

SumarioIntroducciónAmplitud y Profundidad del Análisis Tiempo aproximado del análisis Interpretación de los resultadosMetabolismo de los tóxicos: Implicaciones AnalíticasGeneralidades Factores que afectan el metabolismo de los

tóxicos Consecuencias analíticas del metabolismo

Page 3: Capitulo 58 Toxicologia

La Muestra para el análisis ToxicológicoPrincipales muestras para el análisis toxicológico Contenido gástrico Sangre Orina Humor Vítreo Hígado Otros tejidos y fluidos BiológicosEnvasado y conservación de las muestrasAlmacenamiento de las muestras. Descomposición

química y biológica Luz Oxidación Hidrólisis Temperatura Descomposición Biológica

Page 4: Capitulo 58 Toxicologia

Contaminación Interferencias causadas por la putrefacción Contaminación procedentes de los envases

Normas para la recogida, preparación y remisión de las muestras

Muestras procedentes de sujeto vivo muestras Muestras procedentes de Autopsia Muestra procedente de una exhumación Muestras procedentes del lugar de los hechos

Page 5: Capitulo 58 Toxicologia

El Análisis Químico- ToxicológicoGeneralidadesOrientación del análisis ToxicológicoInterpretación de los resultados Métodos de Extracción Elección de un método de extracción Cantidad de la muestra Métodos no extractivos Extracción de los tóxicos gaseosos Extracción de los Tóxicos Volátiles Extracción de los Tóxicos Minerales e Inorgánicos

Page 6: Capitulo 58 Toxicologia

Introducción Metabolismo de los tóxicos: Implicaciones Analíticas

La Muestra para el análisis Toxicológico

El Análisis Químico- Toxicológico

Investigación Toxicológica

Alumno

Page 7: Capitulo 58 Toxicologia

Introducción

Amplitud y Profundidad del Análisis

Tiempo aproximado del análisis

Interpretación de los

resultados

INICIO

Investigación ToxicológicaEs el conjunto de procesos analíticos que tienen por objeto el aislamiento identificación y determinación cuantitativa de los tóxicos, tanto in vivo como en el cadáver, con el fin de permitir el diagnostico de intoxicación y el esclarecimiento de los hechos.

Page 8: Capitulo 58 Toxicologia

Metabolismo de los tóxicos: Implicaciones Analíticas

Generalidades

Factores que afectan el metabolismo de los tóxicos

Consecuencias analíticas del metabolismo

INICIO

Page 9: Capitulo 58 Toxicologia

La Muestra para el análisis Toxicológico

Principales muestras para el

análisis toxicológico

Envasado y

conservación de las muestras Contenido gástrico

Sangre Orina Humor Vítreo Hígado Otros tejidos y

fluidos BiológicosContamin

ación

Luz Oxidación Hidrólisis Temperatura Descomposició

n BiológicaNormas para la recogida,

preparación y remisión de las

muestras Interferencias causadas por la putrefacción

Contaminación procedentes de los envases

Almacenamiento de las muestras.

Descomposición química y biológica

Muestras procedentes de sujeto vivo muestras

Muestras procedentes de Autopsia Muestra procedente de una

exhumación Muestras procedentes del lugar de los

hechos

INICIO

Page 10: Capitulo 58 Toxicologia

El Análisis Químico- Toxicológico

Generalidades

Orientación del análisis

Toxicológico

Métodos de Extracción

Interpretación de los resultados

Elección de un método de extracción

Cantidad de la muestra Métodos no extractivos Extracción de los tóxicos gaseosos Extracción de los Tóxicos Volátiles Extracción de los Tóxicos Minerales

e InorgánicosINICIO

Page 11: Capitulo 58 Toxicologia

Amplitud y Profundidad del

Análisis

Tests Generales Métodos cuantitativos fiables

Deben ser sensibles, aunque no necesariamente específicos y detectar

un gran número de sustancias, de modo que los resultados negativos permita centrar la atención en unos pocos grupos, estos test pueden ser

muy variados de acuerdo con el equipamiento, personal, volumen de

trabajo.

Una vez que se sospecha la presencia de una sustancia por los test anteriores, su presencia debe

confirmarse y cuantificarse al menos por dos técnicas analíticas

independientes, basadas en principios químicos diferentes

El toxicólogo forense debe ser capaz de detectar cualquier sustancia

química exógena (xenobiotico) El toxicólogo forense tiene dos tipos de

necesidades en su metodología

inicio

Page 12: Capitulo 58 Toxicologia

Tiempo aproximado del análisis

Se define como el intervalo de llegada la muestra al laboratorio y el momento en

que se puede ofrecer el resultado analítico

Toxicología Forense

Toxicología Clínica

Rara vez se requiere un resultado inmediato, lo que le permite al

analista emplear el tiempo necesario para realizar la

investigación

El análisis toxicológico debe realizarse en el menor tiempo posible para ser útil al

medico en el diagnostico y tratamiento de un intoxicado. Solo en casos

excepcionales como intoxicación por CO se exigirá un análisis inmediato para

evitar mas accidentes

inicio

Page 13: Capitulo 58 Toxicologia

Interpretación de los resultados

La interpretación requiere tener en cuenta todas las circunstancias implicadas en el caso. La resolución del problema debe

hacerse para cada caso en particular por una discusión razonada de todos los

hechos de tal forma que interviene en la investigación medico-legal

inicio

Page 14: Capitulo 58 Toxicologia

Generalidades

Desde el momento que un toxico penetra en el organismo recorre necesariamente un camino

mas o menos intrincable hasta alcanzar los lugares donde se va actuar acabando

finalmente por ser eliminado

Absorción Distribución Biotransformacion

Eliminación

inicio

Page 15: Capitulo 58 Toxicologia

Absorción

La absorción de un tóxico se define como el proceso por medio del cual éste atraviesa

membranas y capas de células hasta llegar al torrente sanguíneo. El mecanismo de ingreso del tóxico al organismo usa los mismos mecanismos

de transporte diseñados para movilizar compuestos de estructura similar.

Inicio

Page 16: Capitulo 58 Toxicologia

Distribución

Se entiende por distribución de un tóxico su localización y concentración en los diferentes tejidos. La distribución no es la acción de transportar el tóxico. Por ejemplo, cuando se dice que un compuesto se distribuye en los órganos A, B y C, no se refiere a como el compuesto se desplazó desde la superficie de absorción hasta los órganos A, B y C, sino al hecho de que el tóxico aparece en esos órganos con una concentración a, b y c respectivamente. Una vez que el tóxico ha llegado al torrente sanguíneo, se puede transportar a distintos destinos: • sus sitios de acción uno o varios almacenes de depósito.• Los almacenes de depósitos son los sitios donde se puede acumular el

compuesto y que no es su sitio de acción. Ejemplos de almacenes de depósito son el hígado, los riñones, el tejido adiposo y el tejido óseo

• diversos órganos para su biotransformación

Inicio

Page 17: Capitulo 58 Toxicologia

Biotransformacion

Al conjunto de caminos metabólicos por medio de los cuales los tejidos incrementan la polaridad de un tóxico se le denomina biotransformación. Podemos decir que

la biotransformación de un tóxico consiste fundamentalmente en convertir un xenobiótico no polar en un compuesto soluble en agua. Este es el

mecanismo más común que usan los organismos para eliminar los tóxicos ambientales.

Inicio

Page 18: Capitulo 58 Toxicologia

Eliminación

El tóxico abandonará nuestro organismo por una de estas dos vías:Vía renal: Es una vía de eliminación muy importante. El inconveniente fundamental radica en un deficiente funcionamiento de los riñones. Normalmente, los tóxicos tienen un tamaño demasiado grande para ser correctamente filtrados por los riñones, y se quedan acumulados en ellos.Vía digestiva: La bilis que segrega el higado es un gran agente metabolizante de los tóxicos, y el propio hígado, actúa como filtro de la sangre eliminando gran parte de ellosOtras vías: existen otras vías de excreción pero hay que tener en cuenta que son casos muy particulares:-La saliva-El sudor

Inicio

Page 19: Capitulo 58 Toxicologia

Factores que afectan el metabolismo de los tóxicos

1.Via de entrada 3.-Excreción Extra renal

2. pH Urinario

inicio

Page 20: Capitulo 58 Toxicologia

1.Via de entrada

El metabolismo de un toxico depende a veces de la vía de entrada, en particular cuando la administración se hace por vía oral o intravenosa.Un toxico administrado por vía oral puede seguir una ruta metabólica distinta que el administrado parenteralmente y en especial por vía intravenosa. La razón esta en que, al administrarse oralmente el toxico, se va a encontrar con:a) Acidez gástrica que puede modificar algunos compuestosb) Enzimas gastrointestinales secretadas al intestino c) Flora intestinal, que pueden metabolizar algunos xenobioticos d) Enzimas de la mucosa gastrointestinal durante la absorción. En la administración intravenosa el compuesto llega al torrente circulatorio directamente y evita el metabolismo en el tracto gastrointestinal al menos que sea excretado por la bilis.

Inicio

Page 21: Capitulo 58 Toxicologia

2. pH Urinario

Algunos tóxicos originan productos de conjugación muy polares, como glucoronicos, sulfatos y derivados de aminoácidos, que son ácidos fuertes, casi totalmente ionizados al ph corporal y fácilmente excretados por el riñón por una combinación de filtración glomerular secreción tubular activa y poca o nula reabsorción pasiva.

Inicio

Page 22: Capitulo 58 Toxicologia

3.-Excreción Extra renal

Puede ser un factor muy importante. No es extraño que la recuperación en la orina de ciertas sustancias, administradas por vía oral, sea incompleta, apareciendo grades cantidades en heces. La excreción abundante en heces de muchos tóxicos es consecuencia normalmente de su excreción biliar.Hay algunas implicaciones peculiares de la vía biliar-fecal.Consecuencia de la excreción biliar, un toxico y sus metabolitos

pueden perdura en el organismo en virtud del ciclo entero hepático ej. estrógenos sintéticos eritromicina THC.

Los glucoronicos excretados por bilis son hidrolizados frecuentemente en el tracto gastrointestinal por la β-glucurinidasa bacteriana y, en consecuencia, el toxico aparecerá en forma libre en heces.

Inicio

Page 23: Capitulo 58 Toxicologia

Consecuencias Analíticas del Metabolismo

¿Que Buscar? ¿Donde Buscar? ¿Cómo Buscar?

Ejemplos

Fenotiacinas Heroína

En función de la intensidad y tipo de

metabolismo. Un toxico puede aparecer en su forma original o transformado. En caso de varios metabolitos es importante saber

cual es el mas representativo.

Las propiedades fisicoquímicas de los

tóxicos pueden ser muy distintas. Ello determina

una distribución característica según los casos ej. Sangre, orina,

bilis etc.

Una vez que se sabe que compuestos

hay que investigar y donde realizar la

búsqueda se puede elegir las

condiciones optimas para su extracción:

medio acido, básico, disolvente, técnica

de extracción

inicio

Page 24: Capitulo 58 Toxicologia

Fenotiacinas

Los derivados de la fenotiacida son objeto de un metabolismo intenso y rápido la eliminación de esta sustancia es muy lenta y los meta bolitos han sido identificados en la orina de pacientes bastante tiempo después de interrumpir la medicación. Las vías mas comunes de biotransformacion: son la conversión, a sulfoxidos, probablemente con perdida de actividad; des metilación, igualmente con reducción de la actividad, hidroxilacion, para dar un metabolito activo. En términos generales , del 40-60% de las dosis es eliminada por la orina en 24 horas.α metabolitos poco polares (20%) extraíbles por el dicloro metanoβ metabolitos polares (80%) en hidroxilados y conjugados, extraíbles por disolventes orgánicos polares

Inicio

Page 25: Capitulo 58 Toxicologia

Heroína

Es rápidamente metabolizada en sangre a 6-monoacetilmorfina y posteriormente es hidrolizada a morfina. Tras la administración intravenosa, el 45% de los metabolitos aparece en la orina en un periodo aproximado de 40 horas, con la siguiente distribucion:morfina(4.2%), morfina conjugada (38.3%), monoacetilmorfina (1.3%), heroína (0.1%)Las concentraciones en hígado, bilis, riñón , y orina son mas representativas de un consumo habitual de la droga, mientras que la concentración de sangre es probablemente la mejor indicación de consumo reciente de heroína. Las concentraciones de morfina en cerebro se correlacionan muy bien con las concentraciones sanguíneas

Inicio

Page 26: Capitulo 58 Toxicologia

Principales muestras para el análisis

toxicológico

Deben recogerse teniendo en cuenta las condiciones

particulares para cada caso.

Contenido Gástrico

Hígado

Sangre Orina

Humor Vítreo Otros tejidos y fluidos Biológicos

El aspirado gástrico, liquido del lavado

(primeros 500 ml) o bien vomito que son muestras

que deben ser remitidas al laboratorio. Se pueden encontrar capsulas o

tabletas enteras

Es una de las muestras mas útiles. Se utiliza para el screening de tóxicos

ácidos y neutros. La conveniencia de obtener sangre para muestras ( vena

femoral). Se recomienda el uso de sangre recogida en la autopsia de

cavidades abiertas. La mayor parte de los tóxicos orgánicos van disueltos en

el plasma o unidos a proteínas

Las mayores ventajas es que la concentración de los tóxicos

fluidos pueden llegar a ser hasta 100 veces mayor que en el de la

sangre. Una de las ventajas es que esta exenta de proteínas. Una desventaja que muchos

tóxicos se eliminan casi en su totalidad como metabolitos

Fácil de acceder volumen suficiente (2 ml en cada ojo),

no contener demasiadas proteínas, estar protegidas de la circulación genera, poseer pocas enzimas y resistente a contaminación, útil, para el análisis de alcohol y otras

drogas.

Es el lugar donde se lleva a cabo la biotransformacion de la mayoría de los tóxicos y de

hecho los niveles de tóxicos en este tejido son en general

superiores al los de la sangre. Al extraer del hígado es

importante evitar la contaminación por bilis, al igual

que cualquier tipo de contaminación

Otros tejidos muy utilizados son cerebro y riñón. El cerebro es muy útil

cuando se trata de muerte por inhalación de solventes (tolueno,

cloroformo etc.) también es una buena muestra para análisis de alcohol. El

riñón es usado para determinar metales y oros tóxicos. La bilis para

sustancias como opiáceos . El pelo es de gran utilidad para tóxicos minerales

así como drogas de abusoinicio

Page 27: Capitulo 58 Toxicologia

Envasado y conservación de

las muestras

Todas estas muestras deben ser introducida en recipientes adecuados a ser posible de un solo uso, para evitar la contaminación, de no ser así deben de estar perfectamente limpios y secos. Las muestras liquidas (sangre, orina, bilis) deben recogerse en tubos o envases de vidrio o plástico con tapón o cierre de PTFE .Deben evitarse el uso de tapones de goma o material similar, ya que pueden absorber algunas sustancias o contaminar las muestras ej, plastificantes.Las muestras solidas (hígado, riñón) pueden disponerse en envases de plástico provisto de boca ancha. El tamaño del recipiente debe estar en constancia con el de la muestra con el objeto de que el recipiente quede lleno.

inicio

Page 28: Capitulo 58 Toxicologia

Almacenamiento de las muestras.

Descomposición química y biológica

Luz

Un toxico presente en una muestra biológica puede descomponerse durante el almacenamiento por lo que ya no

será detectado en el análisis. Son muchos los tóxicos que pueden descomponerse en las muestras de sangre o hígado

a 4 0C ej. Benzodiacepina, cocaina, isoniacida lisergia metadona, metilfenidato, morfina, paracetamol, procaina.

Oxidación Hidrolisis

Temperatura Descomposición biológica

inicio

Page 29: Capitulo 58 Toxicologia

Luz

Algunas sustancias toxicas como los alcaloides del cornezuelo del centeno y las fenotiazidas son

fotolabiles. Aunque en muestras sólidas (hígado) u opacas (sangre), suelen estar protegidas, como norma general deben protegerse de la luz. Las muestras de orina y las soluciones acuosas de tóxicos fotolabiles

son muy sensibles a la luz, se recomienda recubrir con papel de aluminio los envases e incluso los recipientes

utilizados durante el análisis.

Inicio

Page 30: Capitulo 58 Toxicologia

Oxidación

Para aquellos compuestos facilmente oxidables (catecolamidas, tio barbituricos) los envases deben

estar llenos y perfectamente cerrados para excluir el oxigeno atmosférico. Los compuestos fenolicos

(paracetamol, morfina) se oxidan fácilmente a 40C y aquellos que contienen azufre son también oxidados in

vitro en medio alcalino.Otro factor importante en los procesos oxidativos es la

presencia de iones metálicos, que actúan como catalizadores.

Inicio

Page 31: Capitulo 58 Toxicologia

Hidrolisis

Muchos tóxicos son esteres (anestésicos locales, diacetilmorfina o heroína) pueden ser fácilmente

hidrolizados durante el almacenamiento a temperatura ambiente e incluso a bajas temperaturas

por las esterasas presentes en la sangre y tejidos. También el PH alcalino durante la extracción puede

promover la hidrólisis de algunos compuestos

Inicio

Page 32: Capitulo 58 Toxicologia

Temperatura

Las bajas temperaturas favorecen la conservación de las muestras para el análisis toxicológico. Se recomienda almacenar las muestras a 4 ºC siempre que vayan a ser analizadas en pocos días. Si van a ser analizadas

por mas tiempo se deben congelarse a -20ºC pero teniendo la precaución de descongelarlas una sola vez

antes de ser analizadas

Inicio

Page 33: Capitulo 58 Toxicologia

Descomposición biológica

La putrefacción causa por microorganismos puede ejercer efectos muy importantes en la conservación de

muestras con vistas al análisis toxicológico. Algunos tóxicos pueden ser destruidos por la actividad microbiana por el contrario se pueden generar

sustancias como alcohol. Sulfuro de hidrogeno y acido cianhídrico, que pueden dificultar la interpretación de

un resultado analítico

Inicio

Page 34: Capitulo 58 Toxicologia

Contaminación

Consiste en le paso de compuestos durante la putrefacción de los tejidos y de

los envases donde se disponen las muestras

Interferencias causadas por putrefacción

Contaminantes procedentes de los envases

Un caso típico es la fenetilamina, base putrefactiva que aparece en

tejidos, sangre y orina. Esta sustancia se detecta en

cromatografía en capa fina y puede confundirse con metenfelamina.

Otras sustancias que se detectan en cromatografía en capa fina son

la tiramina y triptamina.

Son plastificantes tipo ftalatos, procedentes de los envases de plásticos o de los tapones

de los recipientes que contienen las muestras. También pueden tener impurezas de los disolventes utilizados para la extracción

Es conveniente conocer las posibles interferencias del material utilizado, algunos contaminantes pueden ser eliminados por

tratamientos especiales del extracto.inicio

Page 35: Capitulo 58 Toxicologia

Normas para la recogida, preparación y remisión de las

muestras

Muestras procedentes de sujeto vivo muestras

Muestras procedentes de Autopsia

Muestra procedente de una exhumación

Muestras procedentes del lugar de los hechos

inicio

Page 36: Capitulo 58 Toxicologia

Muestras procedentes de sujeto vivo muestras

1. Establecer el diagnostico de enfermedades que interesan con fines judiciales.

2. Comprobar un estado toxico y su pronostico o circunstancias.3. Detectar el consumo de drogas de abuso.

1. Sangre total sin coagular:a) Agente conservante.- 2 gotas de heparina o de solución al 10 %

de fluoruro sódico o EDTA-K2 por cada 5 ml de sangre.b) Cantidad.- como mínimo 20 ml para la investigación

toxicológica general (screening) y la posterior confirmación y cuantificación del toxico.

2. Orina:a) Agente conservante.- No se debe añadirse ningún conservante o en caso,

azida sódica (1% p/v). Conservar en frio.b) Cantidad.- Un mínimo de 50 ml para el screening general de tóxicos y posibles

determinaciones especiales. En general no se requiere orina de 24 horas.

Page 37: Capitulo 58 Toxicologia

3. Sangre para alcoholemia y toxico volátiles.a) Instrumental.- La extracción de la sangre venosa se realizará con

jeringa de un solo uso.b) Desinfección de la piel.- Se efectuará con solución acuosa de cloruro

mercúrico, agua con jabón o agua destilada.c) Cantidad de sangre que hay que extraer.- Unos 5 ml con los cuales

pueden llevarse a cabo varias determinaciones paralelas.

d) Frasco para permitir la muestra.- Debe utilizarse un frasco pequeño de los empleados para antibióticos o los utilizados para toma de muestras clínicas, perfectamente lavado absolutamente secos, y con tapa hermético.

e) Aditivos Conservantes.- Es recomendable adicionar a cada frasco 50 mg de fluoruro sódico sólido para los 5 ml de muestra indicados; mezclar bien y tapar.

f) Documentación.- Estas muestras deberán ir acompañadas con un orificio certificativo, firmado por el facultativo que realiza la extracción, si la extracción y preparación se verificaron de acuerdo a las normas, además indicar el nombre de la persona de quien se extrajo la sangre y la hora y fecha de al extracción.

Inicio

Page 38: Capitulo 58 Toxicologia

Muestras procedentes de Autopsia

En los casos en que se desconocen totalmente la naturaleza del toxico que hay que investigar es preciso

remitir al laboratorio las muestras que se detallan a continuación:

Un recipiente con estomago y su contenido además de vomito y lavados gástricos

Un frasco seco con sangre 50ml Un frasco de orina Un recipiente con 100g de cerebro Un recipiente con 100g de hígado Un recipiente con vesícula biliar Un recipiente con 100g de cuña renal Un recipiente con 100g de pulmon Muestras de cabello uñas y huesos cuando se

sospechan intoxicaciones con As, Tl, Cd, Be, Sr, U, F, y drogas.

Inicio

Page 39: Capitulo 58 Toxicologia

Muestra procedente de una exhumación

Si han trascurrido un tiempo dilatado desde la muerte e inhumación, los procesos de descomposición cadavérica estarán muy avanzados por lo que se hace imposible recoger muestras. En tal caso se recogen en frascos separados restos visibles de viseras.

Aun cuando haya tenido lugar a la esquelitizacion del cadáver la investigación de venenos minerales pueden dar positivo, se recogerán: caneo 5 o 6 vertebras 1tibia 1 fémur y 1 hueso iliaco.

Es aconsejable remitir muestras del revestimiento de ataúd y de la tierra que cubre o rodea 100g de tierra de encima y 100g de tierra debajo .

Inicio

Page 40: Capitulo 58 Toxicologia

Muestras procedentes del lugar de los hechos

Todos los elementos que puedan contribuir a esclarecer los problemas judiciales deberán ser buscados en el lugar de los hechos y ser remitidos al laboratorio así

se trate de partículas u objetos pequeños ej. comprimidos se introducirán en bolsas o recipientes

adecuados Cuando se requiera de la investigación de sustancias toxicas difundidas en el aire se puede hacer la detección en situ mediante el empleo de

papeles o tubos reactivos. Recolección sobre filtros de soportes sólidos Recolección mediante frascos lavadores cargados con

líquidos absorbentes específicos para cada toxico. Tubos de carbón activado donde queda absorbido el

toxico.Inicio

Page 41: Capitulo 58 Toxicologia

Generalidades

Se conozca la naturaleza del toxico implicado

Que el toxico sea desconocido

Métodos directos específicos para la

identificación y cualificación

Se sigue una metodología

Completa y complejaFases del Analisis

Toxicologico

Separación o extracción del toxico de la muestra

Deteccion e Identificaciondel Toxico

Cuantificacion del Toxico

Aislamiento del ToxicoPurificacion del Toxico

Se requiere de Métodos sensibles y que abarquen el mayor # posibles de toxicos.

Para detector e identificar el toxico exacto

Poseen diferente toxicidad un barbitúrico:Acción larga (fenobarbital)Acción intermedia(amobarbital)Acción corta(secobarbital)Acción ultracorta(tiopental)

Se emplean técnicas analíticas Idóneas para su valoración cuantitativa

inicio

Page 42: Capitulo 58 Toxicologia

Orientación del análisis

Toxicológico

Es necesario proporcionar al perito todos los datos q facilitan su trabajo

Antecedentes sumariales Datos anatomapatologicos Sintomatologia con q curso la intoxicacion Diagnostico clínico medico Tratamiento instaurado Hallazgo del lugar en q se encontró la victima Declaraciones de familiares,compañeros, vecinos del

presunto implicado

inicio

Page 43: Capitulo 58 Toxicologia

Interpretación de los resultados

Si no se detecta al toxico Si se detecta el toxico

Debe de comparase los niveles del toxico detectado con los valores terapéuticos y letales existentes en las bibliografías

Se presentan discrepancias por las sgts causas· Insf. De reports estadisticos.

· Diferencias entre los valores de conc. Toxicas en las diferentes muestras.

Sangre total Suero Plasma Hígado

· Diferencia individuales en la sensibilidad a un toxico por:

Causas genéticas Causas Metabólicas Causas circunstanciales

· Interaccion entre toxicos Sinergismo

Antagonismo· Diferencia de sensibilidad y exactitud en la

técnica analiticas empleadas.

· Defecto del metodo analitico:

Mal extraccion del toxico.

Detaccion con tecnicas poco sensbles· Descomposicion del toxico

Mal almacenamiento· Toxico eliminado antes de

producirse la muerte y recoger la muestra

Por ejemplo el PARAQUAT

inicio

Page 44: Capitulo 58 Toxicologia

Métodos de Extracción

Elección de un método de extracción

Métodos no extractivos

Extracción de los Tóxicos Volátiles

Extracción de los tóxicos gaseosos

Cantidad de la muestra

Extracción de los Tóxicos Minerales e Inorgánicos

Desde el punto de vista analítico se pueden dividir en las siguientes

categoríasTóxicos GaseososTóxicos Volátiles

Tóxicos InorgánicosTóxicos Orgánicos

inicio

Extracción de los Tóxicos Orgánicos

Page 45: Capitulo 58 Toxicologia

Elección de un método de extracción

Para esto se debe tener en cuenta los siguientes factores: Determinación analítica que se precisa; diferenciar entre

dosis toxicas o terapéuticas, entre el fármaco sin transformar y metabolizado

Tipo de muestra; cantidad y calidad Posibilidades del laboratorio; de instrumentación y personal Naturaleza del toxico; conocido desconocido, esta solo o

en mezcla.

Cuando no se dispone información sobre le toxico que puede contener una mezcla, hay que recurrir a métodos generales de extracción.

Inicio

Page 46: Capitulo 58 Toxicologia

Cantidad de la muestra

Estará en función esperada del toxico: Tóxicos cuya concentración sea aproximadamente 1mg/ lt

analizar 50 ml de sangre u orina o 50 gr de tejido Tóxicos cuya concentración sea aproximadamente 10 mg/ lt

analizar 5 ml de sangre u orina o 5 gr de tejido Tóxicos suya concentración sea 10 mg/lt analizar 1 ml de

sangre u orina y 1g de tejido

Estas cantidades suponen que el método de extracción es eficiente solo en un 50% y tan solo 1/5 del residuo obtenido se utiliza para su detección por un método capaz de detectar 5ug

Inicio

Page 47: Capitulo 58 Toxicologia

Métodos no extractivos

Técnicas inmunoquimicas

Análisis directo por E. de masas

C.L.A.R

G.L.C. y E.A.A.

Inicio

Page 48: Capitulo 58 Toxicologia

Extracción de los tóxicos gaseosos

Se procede extrayendo los gases de la sangre y se hace por leyes físicas como la solubilidad y la temperatura Existen dispositivos especiales para este tipo de operaciones, como la trompa de mercurio. También se pueden extraer los tóxicos gaseosos mediante técnicas que se utilizan para tóxicos volátiles

Inicio

Page 49: Capitulo 58 Toxicologia

Extracción de los Tóxicos Volátiles

Microdifusion: detección de forma rápida y fácil. El

dispositivo mas utilizado es la celula de Conway

Destilación

D. básica: anfetaminas

anilinas y gases solubles en agua

D. acida: tóxicos minerales y tóxicos

orgánicos

Técnica espaciado de cabeza: es la técnica mas

sencilla y mas usada aquí el

dispositivo usado es la cámara de

aire

Inicio

Page 50: Capitulo 58 Toxicologia

Extracción de los Tóxicos Minerales Inorgánicos

Vía Seca Vía Húmeda

Estos tóxicos se encuentran en el organismo firmemente unidos albumina, lípidos, o glúcidos. La

destrucción de esta materia orgánica y la consiguiente liberación del toxico se consigue mediante un proceso

conocido como mineralización del cual existen dos modalidades:

Calcinación Tratamiento con oxidantes enérgicos por ej. Mezcla sulfo-nitro-perclorica

Inicio

Page 51: Capitulo 58 Toxicologia

Extracción de los Tóxicos Orgánicos

Con disolvente polar: clásica técnica de Stas

Otto

Extracción con disolventes apolar

Extracción directa

Extracción con disolventes organicos

Aplicable solo a muestras biológicas limpias d ejm. Orinas y en el caso de vísceras para la extracción de tóxicos orgánicos de tipo acido

Previa purificación de la muestra ya que la muestra a analizar contiene un gran numero de sustancias como proteínas y lípidos que van a interferir en el análisis para estos se debe hacer un tratamiento con agentes precipitantes de proteínas como son: sulfato amónico (básicos); acido tungstico (acidos y neutros); acido tricloroacetico; acido clorhídrico diluido(digestión acida); diasedtion enzimatica

Inicio

Page 52: Capitulo 58 Toxicologia

Manuel Saldaña A.

INICIO