INDICE

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1.- OBJETIVO………………………………….……………………...2

2.- FUNDAMENTO TEORICO…………….………………………….2

3.- EQUIPO UTILIZADO……………………………..…..…..……….4

4.- PROCEDIMIENTO…….……………….………..…...……….……5

5.- CUADRO DE DATOS………..……………………..……..……….6

6.- OBSERVACIONES………..…..…………………..………...……..9

7.- CONCLUSIONES………..……..……………………..……...…….9

8.- RECOMENDACIONES……………………………..……..………..9

9.- BIBLIOGRAFIA……………………………………………………...10

10.-CUESTIONARIO………………………….………………………...10

1.- OBJETIVOS

USO DEL MICROSCOPIO

Medir dimensiones en un microorganismo. Calibrar de manera efectiva el micrómetro ocular respecto al de platina de

manera que el rango de error que posea este dentro del permitido. Determinar el error de medición y asimismo el de error de calibración.

2.- FUNDAMENTO TEORICO

EL MICROSCOPIO

El microscopio compuesto es un instrumento óptico que se emplea para aumentar o ampliar las imágenes de objetos y organismos no visibles a simple vista. El microscopio óptico común está conformado por tres sistemas:

1.-El sistema mecánico está constituido por una serie de piezas en las que van instaladas las lentes que permiten el movimiento para el enfoque.

2.- El sistema óptico comprende un conjunto de lentes dispuestas de tal manera que produce el aumento de las imágenes que se observan a través de ellas

3.- El sistema de iluminación comprende las partes del microscopio que reflejan, transmiten y regulan la cantidad de luz necesaria para efectuar la observación a través del microscopio.

En los siguientes puntos describiremos cada uno de los sistemas nombrados, a fin de tener un conocimiento completo del microscopio.

Campo del Microscopio

Se denomina "campo del microscopio" al círculo visible que se observa a través del microscopio. También podemos definirlo como la porción del plano visible observado a través del microscopio.

Si el aumento es mayor, el campo disminuye, lo cual quiere decir que el campo es inversamente proporcional al aumento del microscopio. Para medir el diámetro del campo del microscopio con cualquiera de los objetivos se utiliza el micrómetro, al que se hará referencia en el siguiente punto.

A) Calibración del micrómetro ocular:

Un micrómetro ocular es un disco de vidrio que encaja en un ocular de microscopio que tiene una escala que se utiliza para medir el tamaño de los objetos magnificados. La longitud física de las marcas en la escala dependerá del grado de ampliación. Como es en el caso de este laboratorio, donde se utiliza 10x, y 43x como grados.

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Micrómetro Ocular para Microscopio

Micrómetro de Platina

Un micrómetro es simplemente un portaobjetos de microscopio con una finamente divididoescala marcada en la superficie. En este laboratorio, nuestra platina tenía 10 divisiones donde cada una medía 0.1mm.

Micrómetro de platina

Entonces según el Laboratorio Nacional de Física, del Instituto Nacional de Medida del Reino Unido, los factores que pueden influir en la calibración de este micrómetro son:

Cualquier inexactitud inherente de las lentes del objetivo Las variaciones en el sistema óptico en sí (como la longitud efectiva del

tubo) Las imprecisiones en la escala del retículo. Error personal de medida.

Estos errores combinados deben ser tenidos en cuenta y cuantificar si las mediciones tomadas con el microscopio se consideran precisas dentro de los límites definidos de incertidumbre

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3.- EQUIPO UTILIZADO

Microscopio N°15

Lámpara

Micrómetro de platina

Muestra de Algas

Micrómetro de ocular

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4.- PROCEDIMIENTO

a) Colocar el micrómetro de platina en la Platina y el micrómetro del ocular en el ocular.

b) Coincidir las divisiones del micrómetro de platina con las divisiones del micrómetro de ocular.

- Calibración del micrómetro del ocularDeterminar cuántas divisiones del micrómetro o del ocular coinciden con las divisiones del micrómetro de platina. Con objetivo de 10X y 43X

Nombramos: X = división de platina ; Y = división del ocular

- Medición de los microorganismos

Con el micrómetro del ocular, se realiza la medida de microorganismos; objetivo de 10X y 43X.

c) Graficar los datos

d) Realizar la tabla

MICROSCOPIO CALIBRACIÓN MEDICIÓN ERROR DE MEDICIÓN

ERROR DE CALIBRACIÓN

10X mm

43X mm

10X mm

43X mm

Numero Y <>X Y <> X L = L =

Y = Y = A = A =

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5.- CUADROS DE DATOS

CALCULOS:

Sabemos que 1X=0.1mm

Para 10x

13 división de platina <> 20 divisiones de ocular 13X <> 20Y Y <> 65 μm

Realizando la medición del alga con el objetivo de 10X tenemos que:

Longitud = 5Y =0.65 μm

Ancho = 0.01Y = 325 μm

Para 43x

NO SE PUDO APRECIAR DEBIDO A QUE EL MICROSCOPIO ESTA EN MAL ESTADO

.

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Calibración

Medición

Error Error

MICROSCOPIO

Obj. 10x Obj. 43x Obj. 10x Obj. 43x Calibración%

Medición%

Ancho Largo Ancho Largo2 1x < > 7y

y= 14.3 um

1x < > 27yy= 3.7 um

1.5y21.45um

4y57.2um

6y22.2um

15y55.5um

Ancho = 3.38%Largo = 2.97%

4 1x <> 7yy=14.28u

1x<>29yy=3.4u

y

14.28u5y

71.4u5y

17u22y

74.8uAncho = 16%Largo = 4.5%

1x <> 7yY=14.29u

1x<>28yY=3.57u

28.58u 71.45u 28.56u 60.69u Ancho = 0.07%Largo = 17.73%

6 1X = 7Y 1X = 28Y 1Y 4Y 6Y 20Y Ancho = 33.3%Largo = 20%

1x < > 6yy= 16.67 um

1x < > 27yy= 3.70 um

16.6u69.72u Obj40X

17.76Obj40X64.75u

Largo = 2.97%

1x <> 7yy=14.3u

1x<>28yy=3.57u

14.3u 42.9u 17.85u 57.12u Ancho = 24.82%Largo = 33.14%

1x < > 6yy= 16.67 um

1x < > 26.5yy= 3.77 um

1.5y25 um

5y83.33 um

6.3y23.75 um

19.7y74.27 um

Ancho = 5.32%Largo = 12.19%

101x < > 6yy= 16.67 um

1x < > 28yy= 3.57 um

1y16.67 um

3y50 um

5y17.85 um

15y55.55 um

Ancho = 6.61%Largo = 6.63%

12 1x < > 7yy= 14.3 um

1x < > 30yy= 3.33 um

5y71.43 um

1.5y21.43 um

19y63.33 um

7y23.33 um

Ancho = 11.33%Largo = 8.16%

111x < > 8yy= 12.5 um

2x < > 30yy= 3.12 um

2y25 um

5y62.5 um

7y21.84 um

21y65.52 um

Ancho = 12.64%Largo = 4.61%

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11 1x < > 7yy= 14.3 um

1x < > 32yy= 3.1 um

0.042mm

O,084.

mm

0.0403mm

0.0806mm

Ancho = 4.048%Largo = 4.047%

13 1 < > 10y = 10 μm

1 < > 42y = 2.38 μm

2y20 μm

6y60 μm

9y21.42 μm

28y66.64 μm

Ancho = 7.1%Largo = 11.06%

GRÁFICA : MEDIDA EN MM (U) VS. UNIDADES DEL OCULAR

10X 43X 0 5 10 15 20 25

X 14.2900 2.9400 0 71.45 142.90 214.35 285.80 357.25Y 100 100 0 14.70 29.40 44.10 58.80 73.50

Solo es necesario usar algunos puntos para obtener aproximadamente la grafica

Calculo del error

Se tomará como base el objetivo de 10x como valor real:

error .medición=[e(10 x )−e( 43 x )] x 100 %

e(10 x )

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0 50 100 150 200 250 300 350 4000

5

10

15

20

25

30 MEDICION DE MICROORGANISMOS

10X43X

DIMENSION REAL EN μm

UNID

ADES

DEL

OCU

LAR

Error largo =?

Error ancho =?

6.- OBSERVACIONES

El microscopio 15, se encuentra en buen estado la mira de 10x, mientras que la mira de 43x no se observa bien por este motivo no se puede saber el error

El laboratorio solo cuenta con una platina, por lo que hubo demora en la práctica de laboratorio.

El error encontrado de medición de muchos de los microscopios es mucho mayor a 2%.

7.- CONCLUSIONES

Los errores de mediciones fueron mayores al rango admisible, el error del largo fue notable con un 17.73% respecto al valor tomado como real, mientras que por el ancho, el error fue casi mínimo con 0.07%

El gráfico muestra una pendiente elevada, por parte del objetivo de 43x. A mayor sea el objetivo, menor será la medida de una división del micrómetro ocular

Conocer el tamaño de los microorganismos nos dan a entender el comportamiento que presentan en su desarrollo.

Conocer el tamaño de los microorganismos nos permite saber con qué tipo de filtro trabajar.

8.- RECOMENDACIONES

Tener cuidado con el uso del microscopio y su respectiva limpieza utilizando el papel lente.

Tomar medidas de seguridad en el laboratorio, ya que se observó que había lámparas con los cables pelados y alguno de ellos no presentaba el enchufe.

Hacer más mediciones de calibración entre el micrómetro ocular y el de platina, con el fin de obtener mayor comparación y observar el error que se da entre ellos.

Para poder medir un error de calibración necesitamos una microscopio patrón así podremos realizar esta medición

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9.- BIBLIOGRAFIA

Libro Microbiología Sanitaria, autor : Pelczar,

Libro de Biologia de los microorganismos/ Brock

www.alihuen.org.ar/preguntas-frecuentes-faq-/que-son-las-algas.html - 49k

www.asturnatura.com/algas/algas.html - 17k

bc.inter.edu/facultad/yserrano/MICROPROtozoarios.htm - 13k

http://www.pysersgi.com/images/thumbnails/Graticules/Stage%20Micrometers%20web.pd

http://www.npl.co.uk/

http://www.mailxmail.com/curso-microscopio/partes-microscopio-optico

http://www.alihuen.org.ar/preguntas-frecuentes-faq-/que-son-las-algas.html

10.- CUESTIONARIO

1) Indique el tamaño relativo de los microorganismos

2) Describa las principales caracteristicas de los siguientes microorganismos: virus, bacterias, algas, protozoarios, hongos, rotiferos, microcrustaceos.

BACTERIAS

El primer nombre de una bacteria corresponde al género y el segundo l a especie.

Las bacterias en un principio se clasificaron por su forma, la tinción Gram y por sus necesidades de oxígeno, lo que se complementaba con los caracteres bioquímicos y serológicos. En la actualidad se utiliza la genética para establecer relaciones fundamentales.

Las bacterias son procariotas, con ADN circular libre, ribosomas, sin mitocondrias y una pared celular de peptidoglucano.

La estructura bacteriana incluye:Estructura interna: material nuclear, ribosomas, membrana nuclear.

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Pared celular: peptidoglucano (más espacio periplasmático y en membrana externa en bacterias gramnegativas).Estructuras externas: cápsulas, Pili, flagelos.

Las esporas están metabólicamente inertes en una capa protectora.

ALGAS

Aunque su naturaleza de habitantes indígenas del suelo es discutida, lo cierto es que se encuentran en casi todos los suelos de cualquier continente o isla.

Son fotosintéticas y requieren acceso a la luz pero no solo se encuentran en las primeras capas de la superficie.

Las algas terrestres son más pequeñas y estructuralmente más simples que las acuáticas.

Se dividen en cuatro grupos: Clorofíceas de color verde, Cianofíceas de color azul-verdoso, Bacilariofíceas o diatomeas y Xantofíceas de color amartillo-verdoso.

El pH limita grandemente la población de algas. Las cianofíceas se desarrollan mejor a valores de pH comprendidos entre 7 y 10, desapareciendo cuando se baja de 5. Lo mismo ocurre a las diatomeas, pero las verdes no son apreciablemente modificadas y por tanto dominan la flora de algas en ambientes ácidos, debido a la ausencia de las otras formas.

Al aumentar la humedad se aumenta generalmente el desarrollo de las algas. En los suelos agrícolas la humedad no suele ser suficiente y la población sigue las incidencias del clima lluvioso o seco o del riego.

PROTOZOARIOS

Los protozoos incluyen parásitos intestinales y genitales, por ejemplo, Entamoeba histoytica y Tricomonas vaginalis y parásitos de la sangre y los tejidos por ejemplo Toxoplasma gandii y parásitos del paludismo.

Los protozoos son unicelulares y tienen estructuras celulares eucariotas. Todos tienen una etapa de trfozoito frágil y la mayoría tienen una forma quística resistente.

Todos tienen signos vitales fuera del huésped humano y la mayoría puede multiplicarse en el ser humano. La infección es por ingestión, por inhalación, por picaduras de insectos o por el contacto sexual.

Sus ciclos de vida varían desde la transmisión directa del trofozoito durante el coito (Trichomonas) o la eliminación de quistes en las heces y la ingestión

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subsiguiente (Entamoeba y otros protozoos intestinales) hasta la alternancia compleja de generaciones en diferentes huéspedes (paludismo).

La inmunidad protectora no está bien desarrollada en la mayoría de las infecciones por protozoos, los cules son muy comunes y pueden ser múltilples.

HONGOS

La estructura es eucariota y, por ende, a diferencia de las bacterias procariotas, los hongos tienen un núcleo con una membrana nuclear, y el citoplasma contiene mitocondrias, aparato de Golgi, lisosomas y retículo endoplasmático.

La morfología consiste en pequeñas levaduras redondas o mohos filamentosos con un micelo de hifas. Algunos hongos son dimorfos con una forma de levadura en los tejidos y una forma miceliar en el medio ambiente.

Todos los hongos se reproducen en forma asexuada con células haploides que se dividen mediante mitosis para formar esporas.

Los hongos imperfectos, en los que sólo se conoce la replicación asexual, incluyen algunos microorganismos patógenos humanos.

La reproducción sexual mediante meiosis constituye la base de la clasificación y la denominación definitiva.

Los microorganismos patógeno primarios son hongos que pueden infectar a huéspedes anormales.

Los microorganismos patógenos oportunistas sólo pueden infectar a huéspedes anormales con las defensas alteradas.

Los hongos producen enfermedad mediante micotoxinas, hipersensibilidad o infección invasiva con lesión hística.

ROTÍFEROS

Filo de invertebrados acuáticos, pluricelulares, de tamaño pequeño, generalmente microscópicos, provistos en la cabeza de una corona de cilios que parece una rueda girando al moverse los cilios.

El nombre rotíferos, que significa ‘portadores de ruedas’, proviene precisamente de ese aparato rotador.

Son de las primeras formas de vida microscópicas que se estudiaron, y se les conocía como animálculos rueda. Oscilan entre 40 µm y 3mm y comprenden unas 1.500 especies.

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Los rotíferos son muy numerosos en todo el mundo y se encuentran principalmente en ecosistemas dulceacuícolas, como charcas o lagos de agua dulce, aunque también hay algunas especies marinas o terrestres.

Se alimentan de otros microorganismos y unas pocas especies son parásitas. Los rotíferos presentan sexos separados, aunque los machos son escasos y salvo en condiciones adversas se desarrollan por partenogénesis.

Clasificación científica: los rotíferos constituyen el filo Rotíferos (Rotifera), formado por 3 clases: Seisonáceos, Bdeloideos y Monogonontos.

VIRUS

Los virus constan de un genoma central de ARN o ADN y una coraza de proteína que es la cápside (que en conjunto forman la nucleocápside).

Los virus son entidades no celulares de muy pequeño tamaño (normalmente inferior al del más pequeño procariota), por lo que debe de recurrirse al microscopio electrónico para su visualización.

Son agentes infectivos de naturaleza obligadamente parasitaria intracelular, que necesitan su incorporación al protoplasma vivo para que su material genético sea replicado por medio de su asociación más o menos completa con las actividades celulares normales, y que pueden transmitirse de una célula a otra.

Cada tipo de virus consta de una sola clase de ácido nucleico (ADN o ARN, nunca ambos), con capacidad para codificar varias proteínas, algunas de las cuales pueden tener funciones enzimáticas.

Otras son estructurales, disponiéndose éstas en cada partícula virásica (virión) alrededor del material genético formando una estructura regular (cápsida); en algunos virus existe, además, una envuelta externa de tipo membranoso, derivada en parte de la célula en la que se desarrolló el virión y en parte de origen virásico (proteínas).

3) Explique ¿porque es importante conocer el tamaño de los microorganismos?

El tamaño microscópico de los microorganismos está determinado genéticamente, y de las condiciones ambientales. Por lo general, a más tamaño hay una mayor complejidad en su estructura, y por lo tanto mayor función. Además determina algunas propiedades biológicas, de su ecología y su evolución.

Entre ellos tenemos a las bacterias, virus y protozoarios.

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A su vez, el tamaño de los microorganismos es importante para los filtros que los logran retener por medio del tamaño separándolos unos de otros, por medio de poros que permiten el paso.

El tamaño de los microorganismos está muy relacionado con la relación superficie- volumen. O sea, cuanto menor sea el radio mayor será esta relación. Esto significa que el pequeño tamaño de las bacterias condiciona un mayor contacto directo con el medio ambiente inmediato que las rodea, lo que se traduce en que reciben las influencias ambientales de forma inmediata.El pequeño tamaño condiciona una alta tasa de crecimiento. La velocidad de entrada de nutrientes y la de salida de productos de desecho es inversamente proporcional al tamaño de la célula, y a su vez, estas tasas de transporte afectan directamente a la tasa metabólica. Por lo tanto, en general, las bacterias crecen (se multiplican) de forma rápidaEl tamaño también es importante para determinar la velocidad de sedimentación.

4) Describa las aplicaciones prácticas referente a la informacion sobre la medicion de los microorganismos

a) Procesos de filtracion en las plantas de tratamiento de agua

En el proceso de filtración el agua residual es roseada sobre la piedra y se deja que se filtre a través del lecho, este filtro consiste en un lecho formado por un medio sumamente permeable al que los microorganismos se adhieren y a través del cual se filtra el agua residual. El tamaño de las piedras de que consta el medio filtrante está entre 2.5 – 10cm de diámetro, la profundidad de estas varía de acuerdo al diseño particular, generalmente de 0.9 – 2.4m con un promedio de profundidad de 1.8m.

b) Proceso biologico de tratamiento de aguas residuales: filtro percolador, wetland

- Plantas de filtros percoladores"El concepto del filtro percolador nació del uso de los filtros de contacto, que eran estanques impermeables rellenos con piedra machacada. En su funcionamiento, el lecho de contacto se llenaba con el agua residual desde la parte superior y se dejaba que se pusiese en contacto con el medio durante un corto período de tiempo. El lecho se vaciaba a continuación y se le permitía que reposase antes de que se repitiese el ciclo. Un ciclo típico exigía 12 horas de las cuales había 6 horas de reposo. Las limitaciones del filtro de contacto incluyen una posibilidad relativamente alta de obturaciones, el prolongado período de tiempo de reposos necesario, y la carga relativamente baja que podía utilizarse"

En el filtro percolador el agua residual es roseada sobre la piedra y se deja que se filtre a través del lecho, este filtro consiste en un lecho formado por un medio

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sumamente permeable al que los microorganismos se adhieren y a través del cual se filtra el agua residual. El tamaño de las piedras de que consta el medio filtrante está entre 2.5 – 10cm de diámetro, la profundidad de estas varía de acuerdo al diseño particular, generalmente de 0.9 – 2.4m con un promedio de profundidad de 1.8m. Ciertos filtros percoladores usan medios filtrantes plásticos con profundidades de 9 – 12m.

- Wetland

La importancia de los wetland ha variado con el tiempo. Los wetland son zonas de transición entre el medio ambiente terrestre y acuático y sirven como enlace dinámico entre los dos. El agua que se mueve arriba y abajo del gradiente de humedad, asimila una variedad de constituyentes químicos y físicos en solución, ya sea como detritus o sedimentos, estos a su vez se transforman y transportan a los alrededores del paisaje.

Los wetland proveen sumideros efectivos de nutrientes y sitios amortiguadores para contaminantes orgánicos e inorgánicos. Esta capacidad es el mecanismo detrás de los wetland artificiales, también denominados wetland, para simular un humedal natural con el propósito de tratar las aguas residuales de empresas y municipios.La solución biotecnológica consiste en la instalación de wetland artificiales que actúan como filtros naturales. Ubicados entre la planta y los recursos acuáticos (ríos, lagos, lagunas), estos sistemas, además de no necesitar mantenimiento ni consumir energía eléctrica, cuestan menos que la cuarta parte de un sistema de tratamiento tradicional.

Ventajas:

1. Las plantas pueden ser utilizadas como bombas extractoras de bajo costo para depurar aguas contaminadas.

2. Algunos procesos degradativos ocurren en forma más rápida con plantas que con microorganismos.

3. Es un método apropiado para descontaminar superficies grandes o para finalizar la descontaminación de áreas restringidas en plazos largos.

Limitaciones:

1. El proceso se limita a la profundidad de penetración de las raíces o aguas poco profundas.

2. Los tiempos de proceso pueden ser largos.

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3. La biodisponibilidad de los compuestos o metales es un factor limitante en la captación.

c) Método de filtro de membrana (determinacion de coliformes)

Los filtros de membrana con profundidad ordinaria contienen poros tortuosos que capturan microorganismos atrapándolas de forma aleatoria. El resultado es que se capturan fracciones de microorganismos en el interior (intersticios) de la membrana y por tanto, no se puede utilizar para su observación en superficie por microscopía de luz o microscopía electrónica de barrido.

En contraste, los filtros de policarbonato contienen poros cilíndricos uniformes, preferencialmente embebidos en la membrano, permitiene así una distribución uniforme de la muestra en un plano a través de la superficie completa de la membrana. Por tanto, todas las muestras son capturadas en una superficie plana, uniforme y sin defectos. La precisión en el tamaño de los poros en una estrecha distribución asegura una separación adecuada, o fracción de las muestras por su tamaño.

Al estar libres de contaminantes, estas pantalllas microporosas son biológicamente inertes, ofreciendo excelente resistencia química y estabilidad térmica. Proveen una resistencia superior y adsorción del sustrato prácticamente nula. Estos factores combinados con las capacidades únicas de las membranas de policarbonato, las hacen ideales para una serie de aplicaciones en LM y SEM, tales como: Análisis de partículas en el aire (incluyendo asbestos), quimiotaxis, citología, histología, paleontología, parenterales y análisis de aguas para asbestos y otros agentes inorgánicos en suspensión.

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