bioquimica metabólica natalia buitrago - johana olmos (autoguardado)

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1 UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA –UNAD Escuela de Ciencias Agrícolas, Pecuarias y del Medio Ambiente-ECAPMA Programas: Zootecnia; Agronomía; Ingeniería Agroforestal LABORATORIOS DE BIOQUÍMICA METABÓLICA-LBM Prof: Jairo Granados., MSc PRÁCTICA 1 Determinación de Actividad Ureásica (AU) en suelos, pastos y Forrajes INTEGRANTES DEL GRUPO NATALIA ROCÍO BUITRAGO RAMOS COD. 1049617604 [email protected] GLORIA JOHANA OLMOS COD. [email protected] Grupo de plataforma: 352001_23 DIRECTOR DE CURSO GRANADOS MORENO JAIRO / jairo . granados @unad.edu.co CEADTUNJA PROGRAMA INGENIERÍA AGROFORESTAL 16/05/2015

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Programas: Zootecnia; Agronomía; Ingeniería Agroforestal

LABORATORIOS DE BIOQUÍMICA METABÓLICA-LBMProf: Jairo Granados., MSc

PRÁCTICA 1

Determinación de Actividad Ureásica (AU) en suelos, pastos y Forrajes

INTEGRANTES DEL GRUPO

NATALIA ROCÍO BUITRAGO RAMOS

COD. 1049617604

[email protected]

GLORIA JOHANA OLMOS

COD.

[email protected]

Grupo de plataforma: 352001_23

DIRECTOR DE CURSO

GRANADOS MORENO JAIRO / jairo . granados @unad.edu.co

CEADTUNJA

PROGRAMA INGENIERÍA AGROFORESTAL

16/05/2015

RESUMEN

La ureasa es una exoenzima que cataliza la reacción de hidrólisis de la urea, el principal producto celular nitrogenado de la degradación de las proteínas y los ácidos nucleicos, el cual es más fácil de eliminar que otras formas de nitrógeno (como el amoniaco) porque es soluble en agua y menos

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tóxico (Science in School, 2008). En dicha reacción, la urea se rompe para formar dióxido de Técnicas para el análisis de actividad enzimática en suelos 21 carbono y amonio, como se describe en la siguiente reacción (Quintero-Lizaola et al., 2005):

H2NCONH2 + H2 O ------ 2NH3 + CO2

La ureasa se encuentra principalmente en semillas, microorganismos e invertebrados. En las plantas, es un hexámero (consiste en seis cadenas idénticas) y se encuentra en el citoplasma. Su pH óptimo es 7.4, y su temperatura óptima 60 °C (Kandeler y Gerber, 1988). Se midió la actividad enzimática de la ureasa en muestras de suelo y forraje. La metodología consistió básicamente en extraer con NaCl mediante centrifugación el sobrenadante el cual se tituló posteriormente con HCl e indicador de tashiro que viro a color verde esmeralda. Los resultados arrojaron que la actividad Ureásica medida para muestras de suelo y forraje fue de 980 y 755 micromoles de urea/ g. min respectivamente. Siendo mayor la actividad metabólica de esta enzima superior en suelos con respecto a la actividad en forrajes.

PALABRAS CLAVES: Actividad Ureásica, forraje, suelo, urea, enzimas.

ABSTRACT

Urease Is A exoenzyme that catalyzes the hydrolysis reaction of the urea, the main cell product nitrogen degradation of proteins and nucleic acids, which is easier to remove than other forms of nitrogen (as ammonia) is why Less soluble in water and toxic (Science in School, 2008). In this reaction, the urea breaks para train dioxide techniques for the analysis of soil enzyme activity 21 Carbon and ammonium, as described in the following reaction (Quintero-Lizaola et al., 2005):

H2NCONH2 + H2 O ------ 2NH3 + CO2

Urease is found mainly in seeds, micro-organisms and invertebrates. In plants, it is hexamer UN (consists of six identical chains) and is located in the cytoplasm. Optimum pH is 7.4 and its optimum temperature 60 ° C (Kandeler and Gerber, 1988). The enzymatic activity of urease in soil and forage samples was measured. The methodology consisted basically removing NaCl by centrifugation the supernatant which is itself subsequently with HCl title and Tashiro indicator Viro an emerald green color. The results showed that the activity of urease paragraph Measure soil and forage samples WAS 980 and 755 micromoles of urea / g. min respectively. Being mayor of the metabolic activity of soil enzyme in excess esta regarding the activity in fodder.

KEYWORDS: urease activity, feed, soil, urea, enzymes.

INTRODUCCIÓN

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La calidad y la salud de los suelos se miden a través de distintos indicadores que evalúan su funcionamiento (Doran et al., 1999). Para medir la calidad, se considera qué tan adecuadas son sus propiedades físicas y químicas para permitir el intercambio de gases, la retención de humedad y de nutrientes, la penetración de raíces, entre otros. En este contexto, uno de los indicadores que se ha utilizado es la magnitud de la actividad enzimática de la ureasa involucrada en los procesos antes mencionados. La mayoría de las enzimas actúan dentro de las células, pero algunas son extracelulares. La actividad enzimática del suelo es importante porque refleja el estado en el que se encuentran sus poblaciones microbianas (Doran, 2002; Gianfreda y Ruggiero, 2006). Dado a la elevada tecnificación empleada para uso con monocultivos se ha producido un rápido deterioro de los suelos. En vista de esta problemática, en los últimos años se han planteado investigaciones dirigidas al establecimiento de sistemas de manejo conservacionista de suelos, estos han vinculado la tasa de mineralización de los mismos con sus propiedades bioquímicas, tales como: el contenido de N (Bending et al., 1998), la relación C/N (Rivero y Paolini, 1995), contenido de lignina (L) y celulosa (Fioretto et al., 2005), contenido de polifenoles (PP) (Palm y Sánchez, 1991), las relaciones L/N, PP/N y (L+PP)/N (Palm y Sánchez, 1991; Singh et al., 2007). Dentro de este marco, la actividad enzimática es considerada como una de las características más dinámicas del suelo, ya que responde rápidamente a los cambios en las prácticas de manejo dentro de un sistema. Se utiliza la medición de la actividad de distintas enzimas del suelo, como por ejemplo la ureasa, para seguir la dinámica de la mineralización del N, ya que permite evaluar los cambios producidos en las transformaciones de este elemento esencial en los suelos, como efecto del uso de residuos orgánicos de distintos orígenes, debido a su participación como enzimas hidrolíticas en la descomposición de residuos. El objetivo de este trabajo fue evaluar la actividad enzimática de la ureasa en algunas muestras biológicas.

1. FUNDAMENTACIÓN TEÓRICA

1.1 MAPA CONCEPTUAL

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CONCEPTO CONCEPTO

Ureasa Enzima amidohidrolasa

Lizosomas Células animales y vegetales

Sustrato Urea

RBE hidrólisis H2N-CO-NH2 + H2O NH4OH + CO2

Cinética Michaeliana Rumiantes

Coenzima Apoenzima

NNP Amonio

Parámetros Cinéticos Km y Vmáx

1.2 Con base en la revisión detallada de los videos relacionados con actividad enzimática y mostrados en los siguientes link:

http://www.youtube.com/watch?v=CpYWD7AQEjchttp://www.youtube.com/watch?v=GTTgS-xf7XIhttp://www.youtube.com/watch?v=UZI15VqFAq8

Deben elaborar un diagrama de flujo que integre los temas relacionados allí.

2. MATERIALES Y MÉTODOS

2.1 LISTA DE MATERIALES Y EQUIPOS UTILIZADOS

Cuadro 1. Lista de materiales y equipos utilizados en la práctica

Material ó equipo(marca)

Aplicación (Operación

unitaria)

Capacidad y Precisión

Fotografía Real

Balanza analítica Ohaus

Pesada(Gravimetría)

210g;0,0001g

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Tubos de ensayo con gradilla

Depósito de las muestras

-

Pinzas para bureta Sostenimiento -

Erlenmeyer Volumétrica 125 ml

Pipetas Volumétrica 5 y 10 ml

Matraz aforado Volumétrica 100 ml

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Baño termostato Mantenimiento de temperatura

-

Beaker Volumetría 400 ml

Bureta Volumetría 25 ml

Soporte universal Base -

2.2 LISTA DE REACTIVOS UTILIZADOS

Cuadro 2. Reactivos utilizados en la práctica

Reactivo (nombre) Fórmula MolecularPeso

Molecular (g/ concentración

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mol)

Urea H2N-CO-NH2 60 0,25M

Ureasa en búfer fosfato de pH 7

- - 0.1%

Cloruro de mercurio

HgCl2 271.6 1%

Ácido clorhídrico HCl 36.5 0.1 N

Indicador de tashiro

C15H14N3O2Na + C16H18N3SCl ----

3H20 + C2H60291.29 5 gotas

2.3 PROCEDIMIENTOS

2.3.1 Protocolos de muestras analizadas

MUESTRA LUGAR DE MUESTREO

CONDICIONES DESCRIPCIÓN

Forraje (kikuyo)(pennisetm Clandestinum)

Los mismos orígenes que para Suelo se aplican para el forraje. Muestras tomadas en la finca el Molino, de propiedad del señor Carlos López

Iguales condiciones que para el suelo.

Textura suaveOlor hierba frescaColor verde intensoSabor agradable al paladarSe tomaron 300 gramos para la realización del laboratorio de Bioquímica

Suelo Belén Boyacá, coordenadas geográficas de Belén, Latitud: 5.98957, Longitud: -72.9134, localizado en la cordillera oriental provincia del tundama al norte del departamento de Boyacá en la ruta, Tunja, Duitama, Santa Rosa, Cerinza Belén 

En Belén existen tres climas bien marcadosClima frio húmedo, entre los 2.500 a 3.000 m.s.n.mClima frio subparamo seco, terrenos que están entre los 3.000 y 3.600 m.s.n.m Clima de paramo seco entre los 3,600 y 3.800. m.s.n.mCon una temperatura

Color pardo rojizoTextura, franco arcillosoAcidez ph 5.8Olor no característico

Sabor ligeramente a tierra

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promedio de 14ºC y una altitud de 2.630 m.s.n.m.

2.3.2 Flujograma general de los procedimientos desarrollados.

Tomar 1g de forraje , suelo y depositarlo en la centrifuga

Adicionar a la centrifuga 10 mL de NaCl 1%

Agitar durante 3 minutos

Centrifugar a 3500 rpm durante 5 minutos

Tomar el sobrenadante (Fase liquida)

Descartar el precipitado (Fase solida)

Medir el sobrenadante en una probeta y adicionar NaCl hasta 25

Agitar durante 30 segundos

Rotular

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3. RESULTADOS Y DISCUSIÓN

3.1 TABLAS DE DATOS

MuestraWm (g) VHCL(ml)

Alistar el montaje de titulación: lavar, purgar ,cargar y enrasar la bureta con HCl 0,1N

Colocar el Erlenmeyer que contiene la solución blanca, agregar 5 gotas del indicador tashiro, debajo la bureta y adicionar lentamente el HCl, hasta que aparezca y

permanezca un color verde esmeralda. Esto indica que los equivalentes-gramo del hidróxido de amonio fueron neutralizados por los equivalentes-gramo del ácido

clorhídrico.

Registrar en su tabla de datos, los mL de HCl gastados en la titulación del blanco.

Repetir el procedimiento anterior, con el tubo St y anotar los mL empleados de HCl

Continuar el proceso con los tubos 1, 2, 3 y 4 ; registrar los mL gastados de HCl en la tabla de

datos.

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suelo 1.0200gr 1.4

forraje 1.0800gr 1.3

estándar - 1.2

blanco - 0.2

3.2. Cálculos

3.2.1 Actividad Ureásica en el tubo estándar

AU=(mLHCl St−mL HClB )×0,1×1000 µmol

2×t(min)× Fd

Fd=50mL5mL

3.2.2. Actividad Ureásica del suelo

AU=(mLHCl para tubo1−mL HClB )×0,1×1000 µmol

2×t(30min)× Fd

Fd= 50mLV f (mL)

×100gW Suelo

3.2.3 Actividad Ureásica del forraje

AU=(mLHCl para tubo2−0,2 )×0,1×1000µmol

2×t (min)×Fd

Fd= 50mLV f (mL)

×100 gW Forraje

3.3TABLA DE RESULTADOS

Tabla 2. Actividad Ureásica de las muestras biológicas

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TUBO TIPO DE MUESTRA AU(µmolurea /g .min ¿

1 Estándar 16.6

2 Suelo 980

3 Forraje 755

3.3.1 GRÁFICAS

estándar suelo forraje0

200

400

600

800

1000

1200

Grafica 1. Actividad ureasa en mues-tras biologicas

mic

rom

oles

de

urea

/g.

min

3.4 DISCUSIÓN DE RESULTADOS

En la gráfica podemos observar que la actividad de la enzima fue mayor en la muestra de suelo que en la muestra de forraje. La mayoría de las técnicas empleadas en la determinación de la ureasa cuantifican la liberación de amonio de un suelo incubado. Varias de ellas difieren en el uso de soluciones tampón o de tolueno. Otros métodos utilizan la urea residual para estimar la propia hidrólisis de este compuesto (Douglas y Bremner, 1970). Es claro que la mayor transformación de urea en subproductos, en las muestras analizadas está determinada por su interacción con el medio ambiente y factores que influyen sobre la actividad de ureasa como cantidad de materia orgánica,

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humedad cerca de capacidad de campo, mayor temperatura, pH de suelo cercano a la neutralidad, mayor aportación de residuos al suelos.

4. CONCLUSIONES

La mayor Actividad Ureásica del suelo, se puede atribuir a una alta presencia de Materia Orgánica en el mismo y a la gran actividad de la Fijación Biológica del Nitrógeno (FBN).

5. BIBLIOGRAFÍA

BENDING, G.; M. TURNER Y I. BURNS. 1998. Fate of nitrogen from crop residues as affected by biochemical quality and the microbial biomass. Soil Biol. Biochem. 30:2055-2065

Doran, J.W., Jones, A.J., Arshad, M.A., Gilley, J.E. 1999. Determinants of soil quality and health. En: Rattan, L. (editor). Soil quality and soil erosion. CRC Press, Florida, EUA.

Doran, J.W. 2002. Soil health and global sustainability, translating science into practice. Agriculture Ecosystems and Environment. 88, 119-127

Douglas, L.A., Bremner., J.M. 1970. Extraction and colorimetric determination of urea in soils. Soil Science Society of American Proceedings. 34, 859-862

Gianfreda, L., Ruggiero, P. 2006. Enzyme activities in soil. En: Nannipieri, P., Smalla., K. (editores). Nucleic acids and proteins in soil. Capítulo 12. Springer Publishing Company. Alemania

Kandeler, E., Gerber, H. 1988. Short-term assay of soil urease activity using colorimetric determination of amonium. Biology and Fertility of Soils. 6, 68-72.

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Quintero-Lizaola R., Ferrera-Cerrato R., Etchevers-Barra J.D. 2005. Manual para la medición de actividades enzimáticas en compost y vermicompost. Colegio de Postgraduados. Campus Montecillo. México

RIVERO, C. Y J. PAOLINI. 1995. Efecto de la incorporación de residuos orgánicos sobre algunas propiedades químicas de dos suelos en Venezuela. Venesuelos 3:24-30.

Science in School, 2008. http://www.scienceinschool.org/print/1074. Consultado en octubre de 2010.

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PRÁCTICA 2

Carbono Orgánico y Capacidad Amortiguadora de suelos

RESUMEN

(Redactar en máximo 10 líneas, en un solo texto: Qué se hizo, cómo se desarrolló, qué resultados se encontraron, cómo se interpretaron estos resultados, qué se

concluyó):

PALABRAS CLAVES: (Escribir 5):

ABSTRACT

(This text is based on that described in the above summary)

(Paragraph 5 lines)

Key Words: (Write 5)

INTRODUCCIÓN

(se debe escribir en 18 líneas)

Consultar el siguiente link para tener información de apoyo

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http://www.exactas.unlpam.edu.ar/academica/catedras/edafologia/practicos/mo-04.htm

1. FUNDAMENTACIÓN TEÓRICA

1.1 MAPA CONCEPTUAL (Con base en los conceptos mostrados , elaboren un mapa conceptual, en este espacio)

CONCEPTOS CONCEPTOS

Suelo Actividad Microbiana

Aminoácidos Carbono orgánico

Grupos Funcionales Fases

Fertilidad Mezcla heterogénea

Ácidos Orgánicos Enzimas

Componentes Bioquímicos Humus

Materia inorgánica Materia orgánica

Reacciones Bioquímicas Enzimáticas (RBE)

Sales Minerales

pH Nitrógeno total

Equilibrio ácido-base Carbohidratos

1.2 MENTEFACTO CONCEPTUAL (Con base en los conceptos mostrados , elaboren un mentefacto conceptual, en este espacio)

Fertilidad pHMicroorganismo

sBases

intercambiables

PotenciometríaTécnicas analíticas

Titulación REDOX

Gravimetría

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Composición Bioquímica

Volumetría Materia orgánicaConductividad

eléctrica

Espectrofotometría CIC Sales Minerales Carbono orgánico

Características Fisicoquímicas

Amonio (NH4+) FBN Suelo

1.3 Con base en la revisión detallada de los videos relacionados con análisis de suelo y mostrado en los siguientes link:

http://www.youtube.com/watch?v=Gm4Be6qHCRMhttp://www.youtube.com/watch?v=5eo-Fiuf1rY

http://www.youtube.com/watch?v=lXOAwkG_D2I

Deben elaborar un diagrama de flujo que integre los temas relacionados allí.

1.4 En este espacio, deben elaborar un Diagrama UVE heurístico, relacionado con el artículo científico anexo, denominado: Evaluación de parámetros de calidad para la determinación de carbono orgánico en suelos., J,García Galvis y Ballesteros, M (2005), Revista Colombiana de Química

2. MATERIALES Y MÉTODOS

2.1 LISTA DE MATERIALES Y EQUIPOS UTILIZADOS (completar el cuadro)

Cuadro 1.lista de materiales y equipos utilizados en la práctica

Material ó equipo(marca)

Aplicación(Operación

unitaria)

Capacidad y Precisión

Fotografía Real

Balanza analítica OhausPesada

(Gravimetría)210g;

0,0001g

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2.2 LISTA DE REACTIVOS UTILIZADOS (Completar el cuadro)

Cuadro 2.Reactivos utilizados en la práctica

Reactivo(nombre) Fórmula MolecularPeso Molecular

(g/ mol)Concentración

Sulfato ferroso 1N

Dicromato de potasio 1N

2.3 PROCEDIMIENTOS (Completar el cuadro)

Cuadro 3.Técnicas analíticas utilizadas en el análisis fisicoquímico de suelos

VARIABLE(INDICADOR) EVALUADA(O)

TÉCNICA ANALÍTICA UTILIZADA

pH Método potenciométrico

Carbono Orgánico(CO) %Método de titulación (Walkey-

Black)

Carbono Orgánico(CO) %

Capacidad Amortiguadora

Nitrógeno total (NT) %

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Materia Orgánica(MO) %

2.3.1 Protocolos de muestras analizadas (Elaborar una ficha ó formato que muestre la información fundamental sobre el origen de cada una. Por ej: especie, nombre científico, lugar de muestreo, datos agroclimatológicos)

2.3.2 Flujograma general de los procedimientos desarrollados que puede incluír: Video ó fotografías que sustentan los procesos desarrollados ( en Word : hacer click en insertar, formas y diagrama de flujo)

3. RESULTADOS Y DISCUSIÓN

3.1 TABLAS DE DATOS

*Incluír aquí las enviadas al profesor.*

3.2 ECUACIONES DE CÁLCULO

%Carbono Orgánico, Método de titulación volumétrica

%CO = (V FeSO4−B ¿×N FeSO4¿

W m

×0,003× Fd

Dónde:%CO= porcentaje de carbono orgánicoVFeSO4= Volumen(mL) de sulfato ferroso B = Volumen del sulfato ferroso gastado en el blanco= 0,4 mLN = normalidad del sulfato ferroso0.003= peso miliequivalente del carbono en gramos Wm= peso de la muestra en gramo Fd=Factor dedilución :10

Materia Orgánica (%MO)

%MO= %CO ×1,724

Dónde: %MO = Materia orgánica%CO= porcentaje de carbono orgánico1,724= constante de Van Bemmelen

Nitrógeno Total ( %NT)

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%NT= %MO/20Donde:

%NT= Nitrógeno total %MO = Materia orgánica

Carbono Orgánico por método colorimétrico-espectrofotométrico

%CO=[ Am+0,00170,0111 ]×[ 2,88

Wm×M S ]Donde:

Am=Absorbancia de lamuestra desuelo

Wm=Pesode lamuestrade suelo

M S=PesoMolecular de la sacarosa

Sacarosa: C12H22O11

Capacidad amortiguadora (β), Método Potenciométrico

Capacidad Amortiguadora(β ) Con respecto a NaOH, para muestras de suelos:

β=mLNaOH ×0,1×40

(pH 2−pH 1 )×Wm×1000mEq

Capacidad Amortiguadora(β ) Con respecto a NaOH, para muestras de agua y solución buffer

β=mLNaOH ×0,1×20

( pH 2−pH 1 )×Vm×1000mEq

Vm :Volumende lamuestra¿

3.3 TABLAS DE RESULTADOS (Completar)

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Tabla 1.Resultados obtenidos en el análisis fisicoquímico

VARIABLE EVALUADA

DESCRIPCIÓN Valor obtenido por:

TitulaciónEspectrofotomet

ria

MOMateria orgánica

(%)

NT Nitrógeno total (%)

COCarbono

orgánico(%)

pH Potencial de Hidrógenos

Capacidad

Amortiguadora

3.3.1 GRÁFICAS (*POR EJEMPLO*)

PH CE(dS/m) CO(%) MO(%) NT(%) Ai (%meq)0

0.51

1.52

2.53

3.54

4.55 4.44 4.66

2.36

4.06

0.2

2.3

Gráfica 1.Resultados análisis Fisicoquímico de suelo

Indicadores Fisicoquímicos

Val

ore

s p

orc

entu

ales

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Programas: Zootecnia; Agronomía; Ingeniería Agroforestal

LABORATORIOS DE BIOQUÍMICA METABÓLICA-LBMProf: Jairo Granados., MSc

3.4 . DISCUSIÓN DE RESULTADOS

*EN ESTE ESPACIO SE DEBE REALIZAR UN ANÁLISIS INTERPRETATIVO Y COMPARATIVO DE LOS RESULTADOS OBTENIDOS, TRATANDO DE CONFRONTAR LOS VALORES CON LA FUNDAMENTACIÓN TEÓRICA Y CON LA LITERATURA*

4. CONCLUSIONES

(Escribir mínimo Cinco)

ESTAS SE DERIVAN DE LA DISCUSIÓN DE RESULTADOS

5. BIBLIOGRAFÍA

(UTILIZADA Y CONSULTADA, MÍNIMO 6 REFERENCIAS EN NORMAS APA)

PRÁCTICA 4

Actividad Catalítica de Catalasa (ACAT) en muestras de origen Biológico

RESUMEN

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(Redactar en máximo 10 líneas, en un solo texto: Qué se hizo, cómo se desarrolló, qué resultados se encontraron, cómo se interpretaron estos resultados, qué se

concluyó):

PALABRAS CLAVES: (Escribir 5):

ABSTRACT

(This text is based on that described in the above summary)

(Paragraph 5 lines)

Key Words: (Write 5)

INTRODUCCIÓN

(Se debe escribir en 18 líneas, Incluír breve revisión de literatura)Consultar el siguiente link para tener información de apoyo)

http://www.scielo.cl/scielo.php?pid=S0718-27912006000200004&script=sci_arttext

1. FUNDAMENTACIÓN TEÓRICA

1.1 MENTEFACTO CONCEPTUAL (elaboren un mentefacto conceptual, en este espacio, con base en los siguientes conceptos)

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CONCEPTO CONCEPTO

Desdobla el Radical H2O2 Actividad catalítica

El sustrato es el peróxido pH y T óptimos

Óxido-reductasa Catalasa (CAT)

El sustrato es la úrea Peroxidasa

Peroxisoma Produce H2O y O2

Cinética enzimática de Michaellis-Menten

Parámetros cinéticos(Km y Vmáx)

Impide la acumulación de peróxido

Participa en la foto-respiración

Es amidohidrolasa RBE REDOX

1.2 MAPA CONCEPTUAL (Con base en los siguientes conceptos claves elaboren un mapa conceptual en este espacio, utilizando conectores adecuados)

CONCEPTO CONCEPTO

Catalasa(CAT) Enzima óxido-reductasa

Familia peroxidasas Células animales y vegetales

Peroxisoma Peroxidación lipídica

RBE REDOX H2O2 H2O + O2

Cinética Michaeliana Permanganometría

Coenzima Apoenzima

Grupo Hemo(Fe+3) Proteína cuaternaria

Homotetramérica Grasas

Mitocondria Oxidación

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1.3 Con base en la revisión detallada de los videos relacionados con actividad enzimática y mostrados en los siguientes link:

http://www.youtube.com/watch?v=WOAcp15VLJ0http://www.youtube.com/watch?v=0Jr7gxy3bKI

Deben elaborar un diagrama de flujo que integre los temas relacionados allí.

1.4 En este espacio, deben elaborar un Diagrama UVE Heurístico relacionado con el artículo científico anexo, denominado: Catalasa, Peroxidasa y Polifenoloxidasa en pitaya amarilla (acanthocereus pitajaya): maduración y senescencia

2. MATERIALES Y MÉTODOS

2.1 LISTA DE MATERIALES Y EQUIPOS UTILIZADOS(completar el cuadro)

Cuadro 1. Lista de materiales y equipos utilizados en la práctica

Material ó equipo(marca)

Aplicación(Operación

unitaria)

Capacidad y Precisión

Fotografía Real

Balanza analítica OhausPesada

(Gravimetría)210g;

0,0001g

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2.2 LISTA DE REACTIVOS UTILIZADOS(Completar el cuadro)

Cuadro 7. Reactivos utilizados en la práctica

Reactivo(nombre) Fórmula MolecularPeso Molecular

(g/ mol)Concentración

Peróxido de hidrógeno

H2O2 0,05M

2.3 PROCEDIMIENTOS

2.3.1 Protocolos de muestras analizadas (Elaborar una ficha ó formato que muestre la información fundamental sobre el origen de cada una. Por ej: especie, nombre científico, lugar de muestreo, datos agroclimatológicos, animales, etapa productiva, alimentación etc.)

2.3.2 Flujograma general de los procedimientos desarrollados que puede incluír : Video ó fotografías que sustentan los procesos desarrollados ( en Word : hacer click en insertar, formas y diagrama de flujo)

3. RESULTADOS Y DISCUSIÓN

3.1 TABLAS DE DATOS (Completar)

INCLUÍ AQUÍ LAS ENVIADAS AL PROFESOR

3.2 CÁLCULOS

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Calcular la actividad catalítica de la catalasa (ACAT) de cada una de las muestras trabajadas; ver la ecuación en el documento: protocolo de prácticas; tener en cuenta lo siguiente:

mL de KMnO4 gastados en el blanco= 4,7 mL

3.3 TABLAS DE RESULTADOS (Completar)

Tabla 5. Valores de actividad de catalasa en las muestras estudiadas

Tubos Muestras Analizadas ACAT (µmoles de H2O2 / min)

1

2

3

4

3.3.1 GRÁFICAS

(Realizarlas en Excel y luego importarlas a Word en este documento)

3.4 . DISCUSIÓN DE GRÁFICAS Y RESULTADOS

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4. CONCLUSIONES

(Escribir mínimo Cinco)

*ESTAS SE DERIVAN DE LA DISCUSIÓN DE RESULTADOS

5. BIBLIOGRAFÍA

(UTILIZADA Y CONSULTADA, MÍNIMO 6 REFERENCIAS EN NORMAS APA)