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BIOMARCADORES DE ESTRÉS Y BIENESTAR ANIMAL DURANTE EL PRESACRIFICIO Y SU RELACION CON LA CALIDAD DE LA CARNE BOVINA UNIVERSIDAD DE CALDAS FACULTAD DE CIENCIAS AGROPECUARIAS DOCTORADO EN CIENCIAS AGRARIAS Estudiante: Marlyn Hellen Romero Peñuela Código 2271022299 Director: DMV. PhD. Luis Fernando Uribe Vásquez Comité Tutorial: MV. PhD. Carmen Gallo MV. PhD. Néstor Tadich B.

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BIOMARCADORES DE ESTRÉS Y BIENESTAR ANIMAL DURANTE

EL PRESACRIFICIO Y SU RELACION CON LA CALIDAD DE LA

CARNE BOVINA

UNIVERSIDAD DE CALDAS

FACULTAD DE CIENCIAS AGROPECUARIAS

DOCTORADO EN CIENCIAS AGRARIAS

Estudiante: Marlyn Hellen Romero Peñuela

Código 2271022299

Director: DMV. PhD. Luis Fernando Uribe Vásquez

Comité Tutorial: MV. PhD. Carmen Gallo

MV. PhD. Néstor Tadich B.

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1. INTRODUCCIÓN

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1.1 ANTECEDENTES

El bienestar animal se ha convertido en un tema de interés en el comercio

internacional de la carne bovina, debido a su importancia y contribución para la

sanidad animal y la productividad de la ganadería, motivo por el cual la

Organización Mundial de Sanidad Animal (OIE 2012), ha recomendado que los

servicios veterinarios de control oficial establezcan principios de bienestar en su

legislación (Rojas y col 2005; Stockman y col 2011). En Colombia, la nueva

legislación sanitaria promulgada por los Ministerios de Agricultura y Desarrollo

Social y el de la Protección Social, han incluido los aspectos de bienestar animal

en la producción primaria (ICA 2007), durante el transporte hacia las plantas de

beneficio (ICA 2006; ICA 2007) y en el proceso de faenado (ICA 2007; MPS

2007a), siendo necesario, por lo tanto que la cadena cárnica colombiana adapte

sus sistemas productivos a los requerimientos legales.

En Suramérica la implementación de prácticas de BA en las cadenas productivas

cárnicas no es una prioridad, debido a situaciones socio-económicas y culturales

(Gallo y col 2008a); sin embargo, los principales países exportadores de carne:

Brasil, Argentina y Uruguay, han encontrado en el BA un elemento diferenciador

para la comercialización de sus productos y como una oportunidad para incluir

estos aspectos en sus programas de aseguramiento de la inocuidad (Gallo y

Tadich 2005).

La integración del concepto de BA a la cadena cárnica bovina colombiana es

importante desde cuatro puntos de vista: 1)Aspectos éticos: Colombia cuenta con

un estatuto nacional de protección animal (Ley 84 de 1989) que promulga el deber

de los ciudadanos a evitar el sufrimiento innecesario de los animales; así mismo,

los médicos veterinarios y/o zootecnistas en el código de Ética profesional (Ley

576 de 2000) se comprometen a apoyar y fomentar los principios de bienestar en

las especies animales; 2) Exigencias reglamentarias: La nueva legislación

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sanitaria promulgada por los Ministerios de Agricultura y Desarrollo Rural y el de la

Protección Social, han incluido los aspectos de BA en la producción primaria,

durante el transporte y en el proceso de faenado (MPS 2007a; MPS 2007b; ICA

2007); 3) Calidad de la carne: el manejo de los bovinos durante el presacrificio les

provoca estrés, que conlleva a cambios de tipo metabólico y hormonal en el

animal vivo, produciendo efectos adversos en las características de la carne en

variables como el pH, color, textura y la capacidad de retención de agua (Gallo y

col 2003a); 4) Pérdidas económicas: El transporte, embarque y desembarque

inadecuados, la privación de agua y/o alimento y el manejo de los bovinos,

generan pérdidas económicas relacionadas con decomisos por contusiones de

diferente grado, mortalidad animal y bajo rendimiento de la canal, entre otros

aspectos (Broom 2003; 2005).

Colombia tiene un sistema de comercialización del ganado bovino, que requiere

trasladar los animales desde las zonas productoras hacia las centrales de

beneficio, siendo necesario recorrer grandes distancias, lo cual implica tiempos de

transporte y de ayuno prolongado, factores que repercuten en la calidad de la

carne debido a que se constituyen en agentes que desencadenan estrés

(Buckhan Sporer y col 2008a). Se considera que el estrés es un indicador de la

pérdida de BA; su aparición está relacionada con el cambio del comportamiento

fisiológico de algunos bioindicadores hormonales como el cortisol y variables

sanguíneas como glucosa, creatinfosfoquinasa, urea, entre otros (Buckhan Sporer

y col 2008b). El transporte, desembarque, insensibilización y sangría, son etapas

que generan altos niveles de estrés en el bovino, provocando cuantiosas pérdidas

económicas, relacionadas con decomisos por contusiones de diferente grado,

mortalidad animal, bajo rendimiento de la canal y modificación de las variables

organolépticas de la carne, entre otros aspectos (Broom 2003).

El corte oscuro es uno de los problemas de calidad de carne que es provocado por

el estrés crónico previo al faenado. El estrés agota las reservas de glucógeno

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muscular y disminuye la formación de ácido láctico, motivo por el cual el pH

después de la muerte permanece alto (≥5,8) (Amtmann y col 2006). Se ha

determinado una relación directa entre estrés y la presentación de carnes tipo

DFD (Dark, firm, dry), o “cortes oscuros” (Gallo 2008b), las cuales por mostrar un

aspecto oscuro y consistencia dura y seca, son utilizadas para procesos

industriales, disminuyendo su valor comercial. En algunos países esta carne es

decomisada ya que supone un riesgo sanitario por la emigración de

microorganismos intestinales a las masas musculares internas (Varela y col 2007).

Numerosas investigaciones (Gallo y col 2003a; Amtmann y col 2006, Cockram y

col 2007; Buckham Sporer y col 2008) realizados en Suramérica, Europa y

Estados Unidos, han demostrado que largos períodos de transporte están

relacionados con la disminución entre el 1.5 y 9 % del peso de los animales, se

incrementan los riegos de caídas, muerte y contusiones, hay aumento de pérdidas

económicas por eliminación de tejido contuso, menor rendimiento en canal y

descenso en la categoría de tipificación de las canales (Gallo y col 2003a, Minka y

Ayo 2007). Se ha descrito además que el transporte prolongado aumenta el

riesgo de contacto con animales infectados o sus secreciones, incrementando la

susceptibilidad a las infecciones (Cockram y col 2007).

Teniendo en cuenta la importancia del BA en el comercio internacional de la carne

bovina y de los desafíos que tiene que afrontar la cadena cárnica colombiana para

implementar estos lineamientos, el presente trabajo pretende evaluar las prácticas

de BA durante el presacrificio en tres zonas ganaderas colombianas, identificar

puntos críticos en la cadena cárnica bovina y evaluar biomarcadores de estrés

como predictores de la calidad de la carne obtenida, a fin de fortalecer este

importante tema incluido en la legislación sanitaria.

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1.2 OBJETIVOS

El objetivo general del trabajo fue asociar la relación entre el Bienestar Animal

durante el transporte y etapas previas al sacrificio, con la calidad de la carne

bovina.

Los objetivos específicos fueron:

o Caracterizar el perfil de los cambios fisiológicos asociados con el estrés,

sufridos por los animales durante el transporte, mediante la cuantificación

de biomarcadores como hormonas esteroides (cortisol), proteínas que

alteran el metabolismo (albúmina, creatinina y proteína total), y otras

variables sanguíneas como glucosa, lactato, ß-Hidroxibutirato, VGA y úrea,

determinando sus valores basales y variaciones durante el transporte.

o Analizar el efecto de los manejos presacrificio realizados sobre la

presentación de carne DFD (Dark, Firm, Dry), mediante la cuantificación de

pH24 en el músculo Longissimus dorsi y evaluación colorimétrica.

o Cuantificar y categorizar las contusiones sufridas por los bovinos durante el

transporte y manejo pre-sacrificio, e identificar factores de riesgo asociados

con su presentación.

o Determinar el nivel de cumplimiento de la normatividad vigente sobre

transporte de animales, con el fin de detectar los puntos críticos del sistema

logístico que puedan afectar la calidad de la carne y el bienestar animal.

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2. REVISION DE LITERATURA

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2.1 ESTRÉS Y BIENESTAR ANIMAL

El concepto de BA está basado en la relación armoniosa del animal con el

medio; en esta relación entran a jugar un papel muy importante su estado físico

y psicológico (Broom 2005). Se han descrito como condiciones básicas que

aseguran el bienestar de los animales cinco componentes que se han

denominado “las cinco libertades”: 1) Libre de hambre, sed o un nivel de

nutrición insuficiente; 2) No presentar dolor, heridas o enfermedad; 3) Libre de

temor o angustia; 4) No presentar incomodidad; 5) Libre de manifestar un

comportamiento natural, las cuales deben regir el BA (Cockram y col 2004). El

concepto de calidad de vida de los animales no sólo incluye la ausencia de

sufrimiento, sino también la calidad de las relaciones de éstos con el ambiente

de manera que puedan satisfacer sus necesidades preferenciales (Stockman y

col 2011).

Las actividades pre-sacrificio incluyen las prácticas y condiciones aplicadas al

bovino durante el período comprendido entre la movilización y el transporte

desde la granja hasta su ingreso al cajón de insensibilización en la planta de

sacrificio (Ferguson y Warner 2008). Durante este período los animales son

sometidos a factores desencadenantes de estrés que incluyen: 1) incremento

del manejo, recolección y arreo con elementos punzantes o con tábano

eléctrico; 2) mezcla de animales de diferente procedencia y contacto con

personal extraño; 3) transporte y desafíos físicos como rampas, superficies

resbaladizas, densidad de carga, movimiento, ruido y vibración del vehículo; 4)

contacto con ambientes nuevos y no familiares; 5) privación de alimento y

agua; 6) cambios en la estructura social; 7) cambios en las condiciones

climáticas como temperatura, radiación y humedad; 8) imposibilidad de

descanso, entre otros aspectos (Grandin 2003; Minka y Ayo 2007; Ferguson y

Warner 2008; de Witte y col 2009). Estos factores desencadenan reacciones

inevitables en el animal que se traducen en estrés físico, fisiológico y

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psicológico (Fisher y col 2009). El primero se genera por el esfuerzo físico del

animal durante el arreo, el cargue y descargue del camión, así como el intento

para mantenerse en píe durante el movimiento del vehículo. El estrés

fisiológico puede ser medido en términos de cambios de la homeostasis del

animal, por la privación de alimento y agua, la capacidad de utilizar sus

reservas en el mantenimiento de la temperatura corporal y actividad física, o

para superar alguna lesión o enfermedad. El psicológico, es el percibido por la

conciencia animal, siendo por lo tanto difícil de medir objetivamente (Gupta y

col 2007; Minka y Ayo 2009).

El estrés ha sido utilizado como indicador de la pérdida de BA (Broom 2003) y

es definido como la acción de estímulos nerviosos y emocionales provocados

por el ambiente sobre los sistemas nervioso, endocrino, circulatorio y digestivo

de un animal, produciendo cambios medibles en los niveles funcionales de

estos sistemas, en especial altera la homeostasis interna induciendo cambios

en la actividad del sistema nervioso autónomo y el eje hipotálamo-pituitaria-

adrenal-HPA (Broom 2005). Se ha denominado “Diestrés”, cuando la repuesta

del animal al factor estresante pone realmente en riesgo su bienestar y su vida

(Mormède y col 2007).

De acuerdo con la duración y sus efectos el estrés puede ser agudo

(transitorio) o crónico (de largo efecto) (Trevisi y Bertoni 2009). En cualquier

caso, una vez que el sistema nervioso central percibe una amenaza, se

desarrolla una respuesta que consiste en una combinación de las cuatro

respuestas generales de defensa biológica: comportamiento, sistema nervioso

autónomo, inmune y neuroendocrino. A pesar de que los cuatro sistemas

biológicos de defensa están disponibles para que el animal responda a un

factor estresante, no todos los cuatro son necesariamente utilizados contra

todos los factores de estrés. En particular, la homeostasis se mantiene cuando

sólo los dos primeros mecanismos están involucrados; por el contrario, cuando

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los cuatro mecanismos de defensa han sido implicados, algunas de las

funciones biológicas pueden verse modificadas adversamente y los animales

estarán en peligro (diestrés) (Trevisi y Bertoni 2009).

Dentro de la respuesta neuroendocrina tienen vital importancia los sistemas

simpático-suprarrenal-SS y el HPA, donde la activación de cualquiera de los

dos depende del factor estresante que está produciendo el estímulo (Herskin y

col 2004; Gupta y col 2007). En la activación del primero denominado

“Síndrome de emergencia”, el organismo se prepara para hacer frente a

peligros súbitos generando una respuesta de carácter rápida y breve, que

conlleva a la activación neuronal del hipotálamo y la liberación de adrenalina y

noradrenalina desde la médula adrenal, encargadas de poner al animal en

estado de alerta, preparándolo para luchar o huir, provocando un aumento de

la frecuencia cardiaca, vasoconstricción periférica, glicemia, dilatación pupilar,

hiperventilación y aumento del volumen sanguíneo (Lay y Wilson 2001). En el

eje HPA se presenta la liberación del Factor Liberador de Corticotropina (CRH)

y la vasopresina en el hipotálamo, que actúan sobre la hipófisis anterior

estimulando la liberación de la Hormona Adenocorticotrópica (ACTH), la cual

es liberada al torrente sanguíneo para estimular la síntesis y secreción de

glucocorticoides (GC), especialmente cortisol desde la corteza adrenal.

Simultáneamente se estimula la liberación de catecolaminas (adrenalina,

noradrenalina y dopamina) desde la médula adrenal, así como hormonas

tiroideas (Borell 2001; Trevisi y Bertoni 2009). Por su parte, el cortisol aumenta

la disponibilidad de energía y las concentraciones de glucosa en la sangre,

porque estimula la proteólisis, lipólisis, la gluconeogénesis en el hígado, e

inhibe la liberación de insulina (Lay y Wilson 2001; Trevisi y Bertoni 2009). En

esta compleja respuesta fisiológica se presenta un proceso de

retroalimentación negativa, permitiendo que el cortisol actúe sobre el

hipotálamo y la hipófisis disminuyendo la producción de CRH y ACTH (Lay y

Wilson 2001). En esta etapa el organismo intenta adaptarse o afrontar la

presencia de los factores que percibe como amenaza, en donde se presenta

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una normalización de los niveles de corticoesteroides, y por ende, la

desaparición del estado de estrés, etapa que se ha denominado “de resistencia

o relajación” (Mormède y col 2007) (Figura 1).

El estrés crónico consiste en un estado de activación fisiológica en curso, que

se presenta cuando el cuerpo experimenta estrés por varios factores o la

exposición repetida a los mismos estresores agudos, etapa en la cual el

sistema nervioso autónomo rara vez tiene la oportunidad de activar la

respuesta de relajación. En este caso, se presenta una sobreexposición a las

hormonas del estrés, que produce un costo biológico suficiente para alterar las

funciones biológicas y producir diestrés. El estrés crónico coincide con un

estado de larga duración del animal, como un problema de salud grave, que no

permite su recuperación satisfactoria, en donde la intensidad y duración del

sufrimiento contribuye a la severidad de la respuesta del animal. Por lo tanto,

el estrés crónico es una condición de mala adaptación que puede estar

asociada con una reducción directa en el nivel de bienestar. Por otra parte,

esta condición puede afectar la susceptibilidad a las enfermedades o favorecer

su progresión (Trevisi y Bertoni 2009).

Aunque la respuesta al estrés es muy variable y dependiente de la capacidad

de cada animal para responder, resulta evidente que si el agente estresante

actúa por largo tiempo (transporte y ayuno prolongado), el efecto encontrado

será mayor, sea alta o baja la capacidad de respuesta de cada animal. Por

ello, mientras más largos son los tiempos de transporte y ayuno, mayores

probabilidades existen de presentar estrés, afectando negativamente el

bienestar de los animales, aumentando las pérdidas de peso de la canal,

mayor presencia de contusiones y efectos negativos en la calidad de la carne

(Amtmann y col 2006).

3.

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2.2 BIENESTAR ANIMAL Y PRESACRIFICIO

En Suramérica el transporte de los animales desde la granja a las plantas de

beneficio se efectúa generalmente por vía terrestre (Gallo 2008a), sin embargo,

en la mayoría de los países esta actividad es realizada por personal poco

especializado o no capacitado en el transporte de bovinos (Minka y Ayo 2007;

Schwartzkopf-Genswein y col 2008).

Estudios realizados en Chile reportan que la duración del transporte se

encuentra entre 1 a 12 h, pero ocasionalmente puede incluir hasta 60 h (Gallo

y Tadich 2005). Los incrementos en el tiempo de viaje se deben a las malas

condiciones de mantenimiento de las vías y vehículos, características

geográficas, variaciones climáticas, o a la cadena de intermediarios en la

comercialización del ganado (Gallo 2008a). El tiempo de transporte prolongado

aumenta las pérdidas de peso vivo (PV) que pueden estar entre el 1,5 y 9%,

incrementa los riesgos de caída, muerte y contusiones de los bovinos, que se

traducen en pérdidas económicas por eliminación de tejido contuso, menor

rendimiento en canal y descenso en la categoría de tipificación de las canales

(Villarroel y col 2001; Gallo y col 2003a). Sin embargo, se ha reportado que

durante las primeras 18 a 24 horas de transporte se pueden presentar pérdidas

de PV entre el 3 y 11 %, debido principalmente a la evacuación del intestino.

Las pérdidas de peso en canal se incrementan siguiendo una tendencia lineal

de acuerdo al tiempo de transporte, reportándose rangos entre <1 y el 8%

sobre las 48 horas (Knowles y Warriss 2006).

Las contusiones o traumatismos producidos durante el transporte o en la

estadía en la planta, son otro factor que incrementa las pérdidas económicas.

Los hematomas y las marcas de elementos punzantes, palos, picanas

eléctricas y otros elementos de arreo inadecuados, se observan fácilmente en

el proceso post-mortem, en forma de hemorragias petequiales en las canales y

lesiones de distinta forma, profundidad y extensión; que son un reflejo de

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deficientes condiciones de manejo de los animales y pobre BA (Gallo 2008b).

Las contusiones o traumatismos producidos durante el transporte se pueden

clasificar en 3 categorías: Tipo 1, cuando sólo se compromete el tejido

subcutáneo; Tipo 2, tejido subcutáneo y muscular, y Tipo 3, tejido subcutáneo,

muscular y óseo (Gallo y col 2001). En Chile han descrito una relación

directamente proporcional entre la frecuencia de presentación de las lesiones y

el tiempo o distancia del transporte (Gallo y col 2001). Las lesiones más

frecuentes fueron clasificadas como tipo 1 y aunque las grado 2 se presentaron

en menor proporción, éstas estuvieron presentes en los animales caídos en los

viajes de 12 y 24 h y fueron objeto de decomisos, generando pérdidas

económicas para el productor (Gallo 2008b). Otros trabajos realizados en

África Occidental evaluaron los tipos de lesiones más frecuentes en bovinos

cebú comercial (Bos indicus), estableciendo que las heridas, contusiones y

laceraciones localizadas a nivel de abdomen y tórax fueron las de mayor

presentación, siendo menos significativas las fracturas, dislocaciones y la

hernia abdominal (Minka y Ayo 2007). Estas lesiones pueden llevar al

decomiso de tejidos superficiales y profundos que representan en promedio

entre un 1 y 3,2 % del peso de la canal (Minka y Ayo 2007). Diferentes

estudios han reportado que los altos porcentajes de lesiones de los bovinos

durante el transporte están relacionados con la presencia de animales con

cuernos; los golpes proferidos por los operarios con elementos contundentes;

malas prácticas de conducción; mal diseño y mantenimiento de la carrocería de

los vehículos, y la falta de sistemas de protección contra cambios climáticos,

entre otros aspectos (Minka y Ayo 2007; Strappini y col 2010; Strappini y col

2012).

En casos extremos, el transporte puede producir la muerte de los animales,

siendo mayor la mortalidad en cerdos y aves, en tanto que los bovinos son más

resistentes o son sometidos a mayores cuidados teniendo en cuenta su mayor

valor comercial (Gallo y col 2005). Entre las causas de mortalidad tenemos:

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sobrecarga, pisoteo por caídas, asfixia por malas condiciones de ventilación,

fiebre de embarque y deshidratación principalmente (Gallo 2008a).

Los bovinos durante el transporte pierden agua a través de la respiración,

micción, heces y evaporación por termorregulación (Gallo y col 2005). En los

viajes prolongados (≥ 18 h) se hace necesaria la provisión de agua y alimento

en el vehículo, así como de paradas que garanticen el descanso de los

bovinos, prácticas que son poco frecuentes en los países latinoamericanos y

que están incluidas en algunas legislaciones sanitarias (Gallo 2008a). La

ausencia de consumo de agua reduce el PV y la pérdida de peso en canal

(Knowles y Warriss 2006).

La disponibilidad de espacio permitida a los bovinos en los camiones, es otro

factor que incide en el bienestar animal (Maria y col 2003; Ferguson y Warner

2008). Las altas densidades de carga, dificultan los movimientos de

adaptación para mantener el equilibrio en el vehículo en desplazamiento,

reportándose que a menor espacio asignado por animal es mayor la incidencia

de contusiones, se incrementa la tasa cardíaca y aumentan los movimientos

del animal en el vehículo, lo que favorece las caídas y lesiones de los bovinos

(Maria y col 2003; Ferguson y Warner 2008). Se ha recomendado asignar

áreas que varían entre 0,7 y 1,7 m2 por animal, dependiendo de la raza, peso,

localización geográfica, temperatura, entre otros aspectos (Gallo y col 2005;

Minka y Ayo 2007).

El cargue y descargue de los bovinos son actividades que pueden generar más

estrés que el mismo transporte, sin embargo, no existen criterios claros que

definan las condiciones apropiadas o el tiempo límite para estos

procedimientos (Maria y col 2004). Algunos estudios han sugerido que el

cargue presenta mayores efectos adversos al bienestar animal comparado con

el descargue, haciendo énfasis en que la falta de capacitación del personal y el

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desconocimiento del comportamiento animal, serían uno de los factores que

más inciden en estas etapas (Van de Water y col 2003; Maria y col 2004;

Broom 2005).

Se ha recomendado que el ganado tenga un período de descanso en la planta

previo al sacrificio de por lo menos 2 h, a fin de que los bovinos se recuperen

del estrés producido por el transporte, facilitar la evisceración y reducir la

posibilidad de que las canales se contaminen con contenido intestinal

(Ferguson y col 2007; Gallo 2008b). La legislación sanitaria colombiana ha

establecido un tiempo mínimo de 6 h (MPS 2007a; MPS 2007b). Los estresores

físicos presentes en esta etapa están relacionados con las condiciones de

manejo y aislamiento, en donde participan factores como el hambre, sed,

cansancio, ruido, miedo y cambios repentinos en la temperatura ambiental, que

pueden contribuir a reducir la calidad de la canal y de la carne magra (Gallo y

col 2005). Se ha descrito además que más del 50 % de las contusiones

sufridas por los animales se presentan después de haber ingresado a la planta

faenadora (Ferguson y Warner 2008). Se ha sugerido que tiempos cortos de

descanso inferiores a 6 h pueden contribuir a reducir la incidencia del corte

oscuro y mejorar la palatabilidad de la carne; sin embargo, puede favorecer la

contaminación cruzada de la carne con ingesta (Ferguson y col 2007).

2.3 RELACIÓN ENTRE BIENESTAR ANIMAL-ESTRÉS-CORTE OSCURO

El estrés es una inevitable consecuencia del proceso de presacrificio. El

efecto del estrés crónico sobre la reducción de glucógeno muscular ha sido

muy bien documentada, al igual que su asociación con la presentación de

carne de corte “oscuro” o carne DFD (Dark, firm, dry) (Mounier y col 2006;

Ferguson y Warner 2008). Se ha establecido una relación directa entre el

estrés y la presentación de carnes tipo DFD, o “cortes oscuros” (Warner et al.,

2007). La carne DFD se presenta especialmente en bovinos y se observa en

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las primeras horas después del sacrificio (Terlouw y col 2008). El estrés agota

las reservas de glucógeno muscular y disminuye la formación de ácido láctico,

motivo por el cual el pH después del sacrificio permanece alto (≥ 5,8) (Warner y

col 2007). Un animal vivo, obtiene la energía requerida para la actividad

muscular del glucógeno que se encuentra almacenado en el tejido muscular

esquelético, y en mayor proporción en el hígado, en donde alcanza un valor del

2 al 10 % del peso total del órgano (Edge y col 2009). En un animal sano y

descansado, el nivel de glucógeno muscular es alto (75 - 120 mmol/Kg), pero

puede descender a valores críticos (45 - 57 mmol/Kg), y aun así se puede

alcanzar un pH en la canal con un valor entre 5,6 y 5,8, el cual se considera

como óptimo para el proceso de maduración de la carne (Edge y col 2009).

Cuando el animal es sacrificado, se interrumpe el suministro de sangre a los

tejidos y por lo tanto de oxígeno y de nutrientes (Muchenje y col 2009). El

músculo intenta mantener el aporte de energía, activando las vías anaerobias

que son insuficientes para cubrir la demanda energética, dando como resultado

el consumo del glucógeno muscular y la posterior acumulación de ácido láctico

en el espacio intra y extraceluar. La acumulación de hidrogeniones

provenientes del ácido láctico es directamente responsable del descenso del

pH (Ferguson y Warner 2008) y cesa hasta llegar al pH último (pHu), el cual se

alcanza cuando se agotan las reservas de glucógeno, o se pierde la actividad

enzimática por desnaturalización de las enzimas glucolíticas, proceso que

ocurre en el músculo bovino entre las 18 y 36 horas post-mortem (Muchenje y

col 2009). En el ganado bovino los valores bajos de glucógeno durante el pre-

sacrificio se asocian a factores físicos y agentes estresantes (Edge y col 2009),

dentro de los cuales se reportan: el tiempo de transporte (Minka y Ayo 2009);

tiempo de espera en la planta (Hambrecht y col 2005); alteraciones sociales en

la manada (Pipek y col 2003); actividad física y fatiga; traumatismos

(Hambrecht y col 2005), entre otros; así como a factores inherentes al individuo

como género (Mach et al., 2008), raza, peso, y la alimentación (Ferguson y

Warner 2008). El color oscuro del músculo está relacionado con el mal

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sangrado de los bovinos y la baja oxigenación de la mioglobina muscular

(Mach et al., 2008); la sequedad se presenta por la elevada capacidad de

retención de agua por parte de las proteínas sarcoplasmáticas (King y col

2006). Estas carnes por su aspecto oscuro y consistencia dura y seca, son

utilizadas para procesos industriales (elaboración de productos cárnicos),

disminuyendo su valor comercial (Amtmann y col 2006). En algunos países

durante la inspección post-mortem, son decomisadas porque debido al estrés

suponen un riesgo sanitario por la migración de microorganismos intestinales a

las masas musculares profundas y posterior crecimiento microbiano (Gallo y

col 2005), disminuyendo de esta forma la vida útil del producto (Jeleníková y

col 2008). De otra parte, las carnes con elevado pH limitan las posibilidades de

exportación y no son aptas para el empacado al vacío (Warner y col 2007).

2.4 BIENESTAR Y SU RELACIÓN CON LA CALIDAD DE LA CARNE

El transporte puede producir efectos adversos en las características de la canal

en variables como el pH, color, textura y la capacidad de retención de agua

(King y col 2006). El pH a su vez influye en el color, la textura, el sabor, la

capacidad de retención del agua y la vida útil de la carne; siendo el color de la

carne una de las más importantes características que orientan la decisión de

compra de los consumidores (Villarroel y col 2001).

Los tiempos de transporte superiores a 16 h y tiempos de espera prolongados

reducen de manera marcada la calidad de las canales de novillos, aspecto que

se evidencia por un incremento de aproximadamente un 10 % en la aparición

de carnes clasificadas como corte oscuro (pH≥ 5,8) y la disminución de peso

de la canal (Gallo y col 2003).

El color de la carne está influenciado por el nivel de glucógeno muscular antes

del sacrificio y éste se reduce cuando los animales han sufrido ayuno,

produciendo carnes con pH alto y color oscuro, característica que se ve

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afectada además, cuando se incrementan las interacciones sociales de los

bovinos (monta, embestida, empujones, confrontaciones, entre otros) durante

el transporte y la estadía en la planta (Villarroel y col 2001; Partida y col 2007).

Sin embargo, se ha sugerido que transportes hasta de 6 h pueden afectar

significativamente el pH, la textura, la jugosidad y el color de la carne (Van de

Water y col 2003).

La terneza o textura de la carne es considerada como el factor más

determinante de la satisfacción del consumidor (Jeleníková y col 2008). Esta

cualidad organoléptica depende de factores biológicos como la especie animal,

la edad, el sexo y el tipo de músculo; así como de factores ambientales como

la nutrición, el estrés ante-mortem, las condiciones de sacrificio y refrigeración,

entre otros aspectos. De otra parte, está asociada con la tasa de glucólisis, la

disminución de la temperatura post-mortem y el pHu en los músculos bovinos

(Maria y col 2004). El máximo valor de dureza de la carne se encuentra en

rangos de pH entre 5,8 y 6,3 (King y col 2006). Se ha reportado el aumento de

la terneza en carnes con pH mayores a 6, atribuibles a la actividad de las

enzimas calpainas; lo mismo se reporta con pH menores, pero relacionado con

la acción proteolítica del músculo bovino (Mach y col 2008). Varios autores

han evaluado la relación entre el tiempo de transporte y la calidad de la carne,

sugiriendo una relación indirecta, es decir a mayor tiempo menor terneza; así

mismo, se ha indicado que cuando las condiciones de manejo durante el

transporte son adecuadas, los animales son del mismo sexo, raza y el

ambiente social se mantiene estable, no se afecta la calidad instrumental de la

carne, pero estas condiciones no son las que predominan en las plantas de

beneficio comerciales (Van de Water y col 2003; Partida y col 2007).

2.5 BIOMARCADORES DEL ESTRÉS

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Existe una variedad de parámetros de comportamiento, fisiológicos,

bioquímicos, inmunológicos y patológicos que han sido propuestos para

evaluar la capacidad de respuesta de los animales ante el estrés agudo (Tabla

1). Dentro de los biomarcadores descritos sobresalen la medición de cortisol y

progesterona, las concentraciones de albúmina plasmática, úrea, globulina,

proteínas totales, la actividad de creatin-fosfoquinasa (CK), ß-Hidroxibutirato

(ß-HB), haptoglobina, fibrinógeno, el volumen celular aglomerado (VGA) o

hematocrito y el conteo de leucocitos (Buckham Sporer y col 2008). Amtmann

y col (2006) reportan que las anteriores variables se utilizan como indicadores

de estrés, especialmente cuando se están comparando valores previos y

posteriores a un determinado manejo que se cree induce estrés (Tabla 1).

El cortisol es uno de los biomarcadores de estrés más utilizados, aunque el

aumento de su concentración sólo sería un indicador neuroendocrino primario

(Tadich y col 2005). Las mediciones de los niveles de cortisol basal y de su

variación después de la exposición a un factor estresante, son buenos

biomarcadores de estrés. Se puede encontrar aumentado en procesos de

estrés agudo, mostrando variaciones antes y durante el diestrés,

relacionándose con mala-adaptación, especialmente cuando se presentan

fallas para restablecer la homeostasis o tras un estrés repetido. La

interpretación de los niveles basales de cortisol se dificulta porque se afecta

por múltiples factores, incluyendo los siguientes: el ritmo circadiano, el

muestreo, la restricción de movimiento, la lactancia, el coito, el ordeño, el grado

de habituación, otras hormonas (p.e. la vasopresina puede potenciar la

secreción de ACTH), las infecciones, así como las endotoxinas (Trevisi y

Bertoni 2009). Teniendo en cuenta estas dificultades en especial cuando el

análisis de cortisol se realiza en sangre, se han propuesto diferentes muestras

biológicas para su análisis como heces, orina y saliva; sin embargo, su

interpretación se puede dificultar porque los niveles de cortisol en estos

materiales pueden ser más bajos que en sangre (p.e. cerca de 10 veces

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menos en saliva), la hormona puede ser conjugada antes de la excreción (p.e.

en orina y heces), o puede ser transformada por bacterias en el intestino. Sin

embargo, se ha considerado promisorio la evaluación de cortisol en heces

acompañada de otros biomarcadores fisiológicos y de comportamiento, porque

proporciona una medición integrada de la producción de hormonas durante un

período de tiempo prolongado (Möstl y Palme 2002). La medición del cortisol

es dependiente del tiempo porque toma entre 10 y 20 minutos para alcanzar

valores máximos y tiene una vida media de 60 minutos, eliminándose

principalmente por el hígado (Buckham Sporer y col 2008b; Trevisi y Bertoni

2009).

El volumen celular aglomerado (VGA) es el porcentaje del volumen sanguíneo

ocupado por células, principalmente eritrocitos; el excedente está conformado

por fluido; la diferencia permite tener una aproximación del volumen

plasmático. Sin embargo, algunas especies tienen reservas de glóbulos rojos

en el bazo que son fácilmente liberadas en respuesta a una excitación o factor

estresante. Se ha descrito como valioso el uso de la proteína total y de

albúminas plasmáticas en relación con el VGA cuando se desea evaluar los

niveles de hidratación. Se supone que la cantidad de proteína total presente

en el plasma sigue siendo la misma, por lo tanto, las proteínas totales y

albúmina plasmáticas deben mostrar el mismo tipo de cambio, si éste se debe

a la deshidratación y no a un efecto de la dieta. El aumento de VGA durante el

ayuno se puede deber al movimiento de fluidos fuera del compartimiento

vascular y a la contracción esplénica durante el estrés (Tadich y col 2005;

Knowles y Warriss 2006).

El peso vivo, el ß-OHB, los ácidos grasos libres y el glucógeno muscular son

indicadores de ayuno. Una vez el animal es privado de alimento y agua,

recurre a sus reservas de energía, que se encuentran principalmente en forma

de lípidos, especialmente triacilglicerol o triglicéridos, a partir de los cuales se

obtienen glicerol y ácidos grasos libres o no-esterificados, éstos últimos son

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transportados unidos a proteínas a la sangre. Los triglicéridos son sintetizados

principalmente en el hígado, tejido adiposo e intestino delgado. Si la cantidad

de grasa movilizada excede la capacidad de oxidación del hígado se produce

un incremento de los cuerpos cetónicos como el ß-OHB, acetona y acetato.

Estos cuerpos cetónicos funcionan como sustitutos energéticos aportando un

60 a 80% de la energía de la dieta de los rumiantes (Tadich y col 2005;

Knowles y Warriss 2006). Durante el ejercicio la glucosa, los cuerpos

cetónicos y los ácidos grasos libres son usados totalmente. Después de este

proceso, la oxidación de cetona muscular se reduce y se aumentan los niveles

de de ácidos grasos libres y ß-OHB hasta seis veces por encima de los valores

previos al ejercicio, sin embargo, unos minutos inmediatamente después del

ejercicio intenso estos valores pueden disminuir momentáneamente como un

ajuste metabólico (Knowles y Warriss 2006).

Debido a la acción de las catecolaminas (adrenalina y noradrenalina) liberadas

desde las glándulas adrenales hacia la circulación sanguínea durante la

respuesta inicial al estrés, se incrementa la frecuencia cardíaca y la presión

sanguínea, y se estimula la gluconeogénesis hepática, lo cual incrementa la

disponibilidad de glucosa plasmática (glicemia) en minutos. Este proceso

también es producido por el cortisol y por hormonas específicas que participan

en la regulación de la glucosa, como el glucagón y la insulina. Dentro de la

respuesta al estrés los niveles de cortisol activan la glicólisis hepática, la

gluconeogénesis e incrementa el catabolismo de las proteínas libres (Tadich y

col 2005; Knowles y Warriss 2006). Por lo anterior se ha descrito que la

concentración de glucosa es un buen indicador indirecto de estrés (Tadich y col

2005).

Otro biomarcador utilizado para evaluar estrés es la concentración plasmática

de la enzima creatinfosfoquinasa (CK). Esta enzima muscular cataliza la

reacción para obtener Adenosin trifosfato (ATP) a partir del Adenosin difosfato

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(ADP) más el Fosfato de Creatinina en la mitocondria (Knowles y Warriss

2006). El transporte prolongado es un factor extenuante; los bovinos tienen que

mantener el balance y el contacto entre animales produce fatiga y contusiones,

que afectan la permeabilidad de la membrana celular y la liberación de CK

hacia el torrente sanguíneo (Tadich y col 2005). Es utilizada como indicador de

actividad física y daño muscular, siendo ampliamente evaluada porque es

órgano-específica, es decir permite identificar el tejido que la está produciendo,

debido a que presenta cuatro isoformas diferentes (Knowles y Warriss 2006).

Una vez el músculo esquelético entra en estado de hipoxia durante el ejercicio

o la fatiga, se activa la vía anaerobia de la glicolisis interrumpiéndose la

entrada del Piruvato al ciclo de Krebs para la obtención de ATP y se desvía

hacia la formación de lactato o ácido láctico que satura el ciclo de Cori

produciendo una ácidos de origen metabólico dentro de la fibra muscular. Por

lo anterior, la concentración plasmática de lactato es utilizada como indicador

de actividad física y agotamiento durante el presacrificio (Kaneko y col 2008).

Los niveles de úrea se incrementan como respuesta al estrés, ya que se

aumenta el catabolismo proteico y los grupos amino desechados por este

proceso son transformados en úrea por el hepatocito para ser eliminados

posteriormente por filtración glomerular y excretados por medio de la orina. La

concentración plasmática de úrea es indicadora de privación de alimento

(Kaneko y col 2008).

Se ha descrito una estrecha relación entre el perfil de leucocitos y el nivel de

glucocorticoides plasmáticos durante el estrés fisiológico (Gupta y col 2007).

Estas hormonas pueden actuar incrementando el número y el porcentaje de

neutrófilos (neutrofilia), mientras que decrecen los linfocitos (linfopenia o

linfocitopenia) (Figura 2). Teniendo en cuenta que el número de estos

leucocitos son afectados por el estrés en direcciones opuestas, los

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investigadores usan la relación neutrófilos/linfocitos como una medida

complementaria de la respuesta al estrés, siendo relacionado con la magnitud

del estresor y con la concentración de glucocorticoides circulantes (Davis y col

2008; Stockman y col 2011). Los neutrófilos son fagocitos primarios que

proliferan en la circulación como respuesta a infecciones, inflamaciones y al

estrés. Por otra parte, los linfocitos tienen una variedad de funciones

inmunológicas como la producción de inmunoglobulinas y la modulación de la

respuesta inmune (Davis y col 2008; Buckham Sporer y col 2008b). La

proporción de cada tipo de células blancas (neutrófilos, basófilos, linfocitos,

monocitos y eosinófilos), usualmente obtenida al observar al microscopio de

luz extendidos de sangre teñidos es lo que se denomina “perfil de leucocitos” o

“hemograma” (Davis y col 2008). Como respuesta al incremento de los

glucocorticoides durante el estrés, los linfocitos circulantes se adhieren a las

células endoteliales que cubren las paredes de los vasos sanguíneos y

posteriormente, pasan de la circulación a otros tejidos como los ganglios

linfáticos, médula ósea, bazo y piel, donde son secuestrados, produciendo por

lo tanto una reducción del número de linfocitos circulantes. Así mismo, los

glucocorticoides estimulan el flujo de neutrófilos desde la médula ósea hacia la

sangre y atenúan el paso de éstos hacia otros compartimentos. Estos cambios

aseguran que los diferentes tipos de células sean dirigidas a los tejidos donde

se requieran durante el estrés (Davis y col 2008).

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Figura 1. Esquema de la respuesta general del estrés.

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7.

8. Figura 2. Hemograma. Véase un neutrófilo (izquierda) y un linfocito

(derecha).

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Tabla 1. Principales indicadores de estrés agudo en bovinos que permiten

evaluar el Bienestar animal durante el transporte (Adaptado de Knowles y Warriss 2006).

Indicadores Índices Referencia

Comportamiento Vocalización, agitación, lucha, dejar de avanzar, erizamiento y temblor

Grandin 2001 Herskin y col 2004

Broom 2003; 2005; 2006 Stockman y col 2011

Fisiológicos Hipertermia-hipotermia: Incremento y variabilidad

de tasa cardiaca, presión sanguínea, tasa respiratoria, transpiración, temperatura corporal

Broom, 2003 Mounier y col 2006

Stockman y col 2011

Estrés fisiológico: mortalidad Debilidad: aumento vasopresina Marcadores de miedo/excitación: Aumento tasa cardiaca

Desempeño Reducción del rendimiento de leche, interferencia con la deyección láctea

Lay y Wilson 2001

Medidas endocrinas Incremento de cortisol, oxitocina, catecolaminas (epinefrina y norepinefrina), CRH, ACTH, vasopresina, ß-endorfinas

Mounier y col 2006

Marcadores bioquímicos

Indices de privación de alimento: Incremento de Ac. Grasos no esterificados, ß-hidroxibutirato, urea. Disminución de glucosa

Broom 2003

Amtmann y col 2006 Gupta y col 2007

Cooke y Bohnert 2010 Stockman y col 2011

Indicadores de deshidratación,y/o hemoconcentración: Incremento de la osmolaridad,

VGA, proteína total, albúmina índices de esfuerzo físico: Incremento de CK, lactato, lactato deshidrogenasa Indices de miedo/excitación y la liberación de catecolaminas: Aumento VCP, glucosa, urea, ß-HOB

Indicadores de ayuno: peso vivo, ß-HOB, Ac. Grasos libres, glucógeno muscular

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3. EFECTO DEL MANEJO PRESACRIFICIO SOBRE ALGUNOS

INDICADORES FISIOLOGICOS DE ESTRÉS EN GANADO BRAHMAN

COLOMBIANO

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.1 INTRODUCCION El transporte de animales y las operaciones presacrificio son un componente

esencial de la industria ganadera mundial (Ljungberg y col 2007). En América del

Sur, el transporte de los bovinos desde los sistemas productivos a las plantas de

sacrificio se efectúa por vía terrestre, requiriendo por lo general largos tiempos de

transporte, porque los centros productivos se encuentran localizados en áreas

distantes de los centros de consumo (Gallo 2008). El manejo y el transporte son

eventos generadores de estrés que afectan el bienestar de los animales

(Ljungberg y col 2007). Además, de los aspectos éticos, el trato humanitario de

los bovinos tiene implicaciones en la calidad e inocuidad de la carne (Lambooij y

col 2012), y en la productividad, debido a las pérdidas económicas representadas

en mermas de peso, menor rendimiento en canal, decomisos de carnes contusas,

disminución del valor comercial de los cortes y carnes de menor calidad, entre

otros aspectos (Romero y col 2012a).

En Colombia, la producción ganadera se realiza en condiciones de pastoreo

extensivo, siendo el quinto mayor productor de carne bovina de América Latina,

con un rebaño comercial de 25 millones de cabezas (MADR, 2010). Los avances

en tecnologías incorporadas, menores costos de mano de obra y un gran mercado

interno han fomentado el desarrollo de grandes operaciones en el procesamiento

de la carne bovina (Estévez-Moreno y col 2009). El sector ganadero se encuentra

actualmente en un proceso de modernización selectiva de las condiciones de

producción y de la logística del pre sacrificio. Sin embargo, la ganadería bovina

presenta una alta dispersión geográfica, cerca del 70% del ganado de carne es

sacrificado en plantas ubicadas en centros de consumo, con la participación de un

alto número de intermediarios (comisionistas y acopiadores, colocadores y

subastas), haciendo necesario el traslado de los bovinos desde los centros

productivos, a través de vías de montaña, con tiempos de transporte superiores a

10 h, por medio de una infraestructura poco especializada y con prácticas

deficientes en bienestar animal (Romero y col, 2011a; 2012a). Una de las

estrategias planteadas para fortalecer la competitividad de la cadena cárnica

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bovina es la modernización y la regionalización de las plantas de sacrificio, con el

fin de aumentar la capacidad de sacrificio instalada, disminuir intermediarios, evitar

tiempos extras de transporte y manejo de los animales, entre otros (MADR 2010).

Existen variables sanguíneas que son influenciadas por el presacrificio y que

pueden ser usadas como indicadores de estrés, entre las cuales se encuentran los

valores sanguíneos de cortisol, glucosa, ß-hidroxibutirato (ßHB), lactato,

creatinfosfoquinasa (CK), proteína total, creatinina y úrea (Tadich y col 2009).

Además, se han propuesto indicadores hematológicos como el volumen globular

acumulado (VGA) o hematocrito, el conteo de eritrocitos y la relación

neutrófilos/linfocitos (N/L) (Ekiz y col 2012). Los estresores producen cambios

físicos y neuroendocrinos, que han sido valiosos para evaluar la influencia del

presacrificio sobre el bienestar de los bovinos (Miranda-de la Lama y col 2012).

No obstante, en Colombia, hay poca información disponible sobre el impacto del

transporte de corta duración y las operaciones presacrificio sobre el bienestar de

bovinos, especialmente en plantas de sacrificio localizadas en los centros de

producción. La información obtenida puede ayudar a establecer los beneficios

desde el punto de vista biológico, de contar con plantas de sacrificio regionales,

localizadas en los principales centros productivos de ganado. El objetivo de este

estudio fue evaluar la respuesta fisiológica de novillos Brahman transportados y

manejados durante el presacrificio de acuerdo con los requisitos de la legislación

sanitaria, en una de las principales regiones ganaderas de Colombia. Se

estableció como hipótesis del estudio que el bienestar de los bovinos

transportados por vía terrestre hacia plantas de sacrificio localizadas en las zonas

productivas, con tiempos de transporte inferiores a 4 h, no se ve comprometido a

causa del viaje y del manejo presacrificio. Se usaron indicadores fisiológicos para

cuantificar el grado de estrés de los animales y su habilidad para enfrentar las

condiciones del transporte y de estadía en la planta de sacrificio.

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3.2 MATERIAL Y MÉTODOS El presente estudio se llevó a cabo en el Departamento de Córdoba (Norte

colombiano, región Caribe), durante el mes de Julio de 2011 en una planta de

sacrificio localizada en Ciénaga de Oro (8º 45′0″ N, 75º 53′ 0″ W), la cual cumplía

con los requerimientos sanitarios del Decreto 1500 de 2007, por el cual se

establece el reglamento técnico a través del cual se crea el Sistema Oficial de

Inspección, Vigilancia y Control de la Carne e instaura los requisitos sanitarios y

de inocuidad que se deben cumplir en su producción primaria, beneficio, desposte,

desprese, procesamiento, almacenamiento, transporte, comercialización,

expendio, importación o exportación (MPS 2007). Ciénaga de Oro presenta un

clima característico del bosque húmedo tropical, con una pluviosidad promedio de

1.156 mm y una temperatura promedio de 28ºC.

DESCRIPCIÓN DEL ESTUDIO

Se evaluaron 65 bovinos machos castrados (novillos), con características similares

en cuanto a raza (cruces comerciales de ganado Brahman), edad (18 a 24 m),

peso vivo (445,4±0,7 kg) y procedencia (municipio de Ayapel, Córdoba). Los

novillos fueron criados en la granja bajo condiciones extensivas, alimentados en

pasturas naturales y suplementados con sal mineralizada. Los bovinos fueron

seleccionados aleatoriamente, embarcados en grupos de 14 animales (n=5 viajes)

y transportados en viajes individuales, bajo las mismas condiciones climáticas y de

manejo. Fue necesario excluir 5 novillos del estudio, porque no cumplían con las

condiciones generales del grupo ya descritas. En la granja de origen, los bovinos

fueron arreados con caballo desde los potreros hasta el área de embarque (Figura

3). Se extrajeron muestras de sangre por venopunción coccígea en el brete de

embarque, una con anticoagulante (ácido etilen-aminotetracético, EDTA) y otra

con fluoruro de sodio (NaF) (glucosa y lactato). A continuación los animales

ingresaron al camión, sin el uso de tábano o picana eléctrica. Los animales fueron

transportados durante 4 horas, a una velocidad promedio de 60 km/h, recorriendo

una distancia aproximada de 140 km (30 km=vía sin pavimentar y 110 km= vía

pavimentada). Durante este tiempo no consumieron alimento, ni bebieron agua. El

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personal de la planta realizó el desembarque con la ayuda de palmas y sin el uso

de otros elementos persuasivos. Inmediatamente después del desembarque, en

un brete de sujeción, se extrajeron muestras de sangre por venopunción yugular a

todos los novillos. Una tercera muestra sanguínea fue obtenida durante la

sangría.

CONDICIONES DE TRANSPORTE Y EN LA PLANTA DE SACRIFICIO

Se utilizó un camión característico para el transporte terrestre de ganado en

Colombia (con aforo de 14 novillos), vehículo de dos ejes con chasis rígido

(combinado con madera y acero), provisto de ventilación pasiva, techo con carpa

de lona y con una capacidad para 10 ton. La densidad de carga promedio

manejada fue 355,2±2,2 Kg/m2. La planta de sacrificio evaluada operaba de

lunes a sábado (0600-1400 horas), con una capacidad de sacrificio de 500-600

bovinos/día (40-45 animales/hora). La rampa de descargue era de concreto, con

una pendiente de 20% (1 m de alto con 4 m de largo), con piso antideslizante

provisto de peldaños de una altura de 10 cm y una profundidad de 40 cm. Esta

conectaba con una serie de corredores hasta los corrales de recepción, que tenían

un área de 260 m2 (3,65 m de ancho X 20 m de longitud), con pisos

antideslizantes de concreto y techados con una película de polietileno de alta

densidad. Los bovinos fueron pesados a la llegada a la planta. No se efectuó la

mezcla de animales de diferentes lotes, por tanto, el grupo transportado en cada

camión fue alojado en corrales separados, con una disponibilidad de espacio de 2

m2/animal, acorde con los requerimientos de la legislación sanitaria (MPS 2007).

Se suministró agua potable ad libitum, pero no alimento. Después de 20,2±0,21 h

de estadía en la planta de sacrificio, los bovinos fueron conducidos por un corredor

de concreto curvo (sin el uso de tábano eléctrico), desde los corrales hasta el

cajón de insensibilización (1,80 m de alto X 0,90 m de ancho X 2,53m de longitud),

provisto de un sistema de sujeción de cabeza, una puerta de acceso tipo guillotina

y una puerta lateral de salida giratoria, ambas de acero inoxidable. Los bovinos

fueron insensibilizados con una pistola neumática de proyectil no penetrante,

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izados, sangrados y transferidos a la línea de producción para iniciar las

actividades posteriores (figura 3).

ANÁLISIS DE LAS VARIABLES SANGUÍNEAS

La determinación del volumen globular acumulado (% VGA) se estableció por la

técnica de microhematocrito. El perfil de leucocitos se realizó mediante la

observación microscópica de extendidos sanguíneos teñidos con el colorante

Wright. Las concentraciones de cortisol plasmático (µg/dl) se determinaron por la

técnica Radioinmunoanálisis (RIA) en el Laboratorio de Endocrinología de la

Facultad de Medicina Veterinaria de la Universidad Nacional, Sede Bogotá. El

coeficiente de variación inter-ensayo fue 9,31%. Las concentraciones sanguíneas

de glucosa(mmol/L), úrea (mmol/L), proteína total (g/L), creatinina (mmol/L) y la

actividad plasmática de la enzima CK (U/L) se realizó usando el kit comercial de

Biosystem®. Las concentraciones sanguíneas del β-hidroxibutirato (βHB) (mmol/L)

y el lactato (mmol/L), se establecieron usando el kit comercial de Randox. Todas

las lecturas se realizaron en el espectrofotómetro BTS-330 (Biosystem®).

ANÁLISIS ESTADÍSTICO

El análisis se efectúo utilizando el programa Stata Versión 12.0 (College Station,

Texas, EU, Licencia Serial 30120546473). Se estableció la distribución normal de

las variables indicadoras de estrés por medio del análisis de los residuales. La

actividad de la CK, el lactato, βHB, úrea, creatinina y glucosa, no presentaron una

distribución normal, siendo transformadas en su logaritmo natural y el VGA en su

valor cuadrado; estos valores fueron utilizados en los análisis posteriores. Cada

animal tuvo tres observaciones, una antes del transporte en la granja, la segunda

a la llegada a la planta de sacrificio y la última durante la sangría. Se calcularon

los promedios y los intervalos de confianza (IC 95%) de las variables respuesta en

cada uno de los tres momentos del muestreo. Se usaron modelos lineales mixtos

para corregir la correlación entre las observaciones repetidas en cada animal con

varias estructuras de covarianzas.

3.3 RESULTADOS

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En el presente estudio, el transporte con una duración menor de 4 h tuvo efectos

moderados sobre el metabolismo proteico de los bovinos, como lo demuestran las

concentraciones plasmáticas de creatinina, úrea, proteína total y albúmina, que a

pesar que aumentaron al compararse con los valores basales obtenidos en la

granja (P 0˂,05), estuvieron acordes con los valores de referencia. Sin embargo,

se observaron cambios significativos en las concentraciones séricas de cortisol,

glucosa y CK (figura 4). No se evidenciaron cambios en las concentraciones

plasmáticas de βHB en las tres etapas del muestreo (figura 4). Durante la sangría

los valores sanguíneos de cortisol, VGA, lactato y proteína total aumentaron;

mientras que la concentración plasmática de creatinina disminuyó, al confrontarse

con los valores obtenidos durante el muestreo a la llegada a la planta de sacrificio

(tabla 2). Los recuentos leucocitarios no mostraron un patrón consistente. Los

bovinos presentaron un recuento más alto a la llegada a la planta de sacrificio y

disminuyó durante la sangría. Este mismo patrón se observó en la relación N/L

(figura 5). El coeficiente de correlación (rho) indica que existe una baja correlación

entre las variables sanguíneas evaluadas en la granja, a la llegada a la planta y

durante la sangría (tabla 2).

3.4 DISCUSIÓN

Los resultados obtenidos en el presente trabajo muestran que el estrés producido

por el transporte de bovinos hacia una planta localizada en la misma zona

productiva, no afectó considerablemente el metabolismo, ya que a pesar de que

se evidenciaron cambios en las concentraciones plasmáticas del VGA, úrea,

creatinina y albúmina, éstas se encontraron en los rangos considerados como

normales para la especie bovina. En cuanto a la proteína total, los valores

estuvieron levemente por encima de éstos (Kaneko 2008). El hematocrito (VGA)

permite evaluar la alteración de electrolitos y fluidos, siendo considerado como un

indicador moderadamente bueno de estrés (Tadich y col 2003). El transporte, el

ayuno y la baja ingesta de agua producen un aumento del hematocrito, teniendo

en cuenta que el valor promedio para bovinos es de 28 a 38% (Knowles y Warriss

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2006). En el estudio se evidenciaron aumentos significativos (P ˂ 0,05) de los

valores de VGA en cada uno de los muestreos, pero dentro de los valores

considerados como normales para la especie, posiblemente por la exposición a

estresores presentes en el presacrificio, que indujeron una respuesta rápida y

breve, que llevó a la activación neuronal del hipotálamo y la liberación de

adrenalina desde la medula adrenal, así como, noradrenalina de las fibras

nerviosas del locus coeruleus (LUC-NE), región localizada en el tronco cerebral y

responsable de la respuesta al miedo y al estrés (Herskin y col 2004). Estas

catecolaminas son las encargadas de poner al bovino en estado de alerta,

provocando taquicardia, vasoconstricción periférica e hiperglicemia (Borell 2001).

El incremento de VGA observado durante la sangría, pudo deberse a la

movilización de eritrocitos por la contracción esplénica en respuesta a la acción de

las catecolaminas liberadas durante la insensibilización y la sangría, que genera

gran estrés en los animales (Möstl y col 2002; Ekiz y col 2012), aspecto que ha

sido evidenciado en plantas de sacrificio colombianas, en donde es frecuente

observar baja eficiencia de la insensibilización, que genera una alta proporción de

animales que recobran la consciencia durante la sangría, ocasionando problemas

en el bienestar animal (Romero y col 2012b; Romero y col 2012c). De otra parte,

indican que el transporte y la estadía en la planta no alteraron el metabolismo de

las proteínas y no se presentó deshidratación de los bovinos evaluados, teniendo

en cuenta las altas temperaturas ambientales de la región ganadera estudiada. A

pesar que se ha descrito que los bovinos tienen dificultad de acceso al agua de

bebida en las plantas de sacrificio, por factores como el tamaño, la localización y

la capacidad de los bebederos y que en ocasiones no están familiarizados con los

sistemas de suministro instalados (Ferguson y Warner 2008), en el estudio no se

evidenció deshidratación de los bovinos después de una estadía promedio de

20,2±0,21 h, lo cual refuerza la importancia de contar con una infraestructura y

condiciones de estabulación apropiadas.

El incremento de las concentraciones plasmáticas de glucocorticoides como el

cortisol, es un indicador neuroendocrino del estrés agudo (Odore y col 2011;

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Miranda de la Lama 2010). Sin embargo, la relación directa entre la secreción

excesiva de glucocorticoides y el cambio metabólico no ha sido ampliamente

dilucidada, porque los factores que activan la respuesta endocrina producen

efectos diferentes (Mormède y col, 2007; Early y col, 2012). El muestreo inicial de

los bovinos en la granja, previo al embarque en los camiones, mostró que las

concentraciones de cortisol fueron similares a los valores de referencia

(0,61±0,07µg/dl), que sugiere que este proceso no fue un estresor para los

animales, ya que se agruparon en lotes de 14 bovinos y la toma de muestras se

realizó inmediatamente. Por otra parte, los valores plasmáticos de cortisol

aumentaron y fueron diferentes significativamente (P ˂ 0,05), inmediatamente

después del descargue y durante la sangría, superando los valores basales

iniciales por el estímulo estresor. Estudios realizados por Tadich y col (2003); Van

de Water y col (2003) y Odore y col (2011), sugieren que el transporte de corta

duración ( 4˂ h)es un factor de estrés para el ganado, que provoca un amplio

rango de cambios fisiológicos, como el incremento de las concentraciones de

cortisol, especialmente durante el arreo, el embarque y las etapas iniciales de

éste; aspecto que pudo incidir en la investigación, teniendo en cuenta que el

camino que comunicaba la granja con la vía principal no era asfaltada, aspecto

que favorecía los movimientos vibratorios del camión, considerado un factor

estresor (Van de Water y col 2003; Miranda-de la Lama y col 2011). Sin embargo,

es importante no desestimar que existen otros factores adicionales al transporte

como tal, que pudieron influir en el incremento de las concentraciones séricas de

cortisol como el desembarque, el manejo, la novedad del ambiente y el

procedimiento del muestreo, que podrían enmascarar el efecto real del agente

estresor en el estudio (Tadich y col 2009). Es importante resaltar que, los bovinos

evaluados fueron levantados en condiciones extensivas y pertenecían a cruces de

ganado cebú. Se ha reportado sin excepción que el ganado Bos indicus y sus

cruces, son más excitables que los bovinos Bos taurus y que el contacto con el

hombre, desencadena una respuesta de estrés agudo o crónico (del Campo y col

2010). Así mismo, los animales jóvenes, como los evaluados en el estudio, son

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naturalmente de temperamento más excitable que los animales adultos

(Waritthitham et al. 2010), factores que pudieron contribuir a una mayor respuesta

al estrés.

Las células sanguíneas mantienen el equilibrio fisiológico entre las condiciones

ambientales y el organismo del animal, mediante la restauración de la

homeostasis (Miranda-de la Lama y col 2010). Existe una estrecha relación entre

el perfil de leucocitos y el nivel de glucocorticoides plasmáticos durante el estrés

(Gupta y col 2007). Como respuesta al estímulo estresor, los linfocitos circulantes

se adhieren a las células endoteliales que cubren las paredes de los vasos

sanguíneos y, posteriormente, pasan de la circulación a otros tejidos, donde son

secuestrados, produciendo una reducción de su número (linfopenia). Así mismo,

los glucocorticoides estimulan el flujo de neutrófilos desde la médula ósea hacia la

sangre y atenúan el paso de éstos hacia otros compartimentos, generando

neutrofilia, que consiste en un incremento del número de los neutrófilos maduros e

inmaduros en la circulación (Buckham Sporer y col 2008). Se ha utilizado la

relación N/L como una medida complementaria, útil para evaluar la magnitud del

estresor (Gupta y col 2007). El promedio de leucocitos encontrados en los novillos

en este estudio a la llegada a la planta fue superior a los rangos de la especie (4 –

12.000 mil/µl). En esta etapa se observó además neutrofilia (figura 3), que sugiere

que el transporte, el descargue o el proceso de toma de muestras aumentaron los

niveles de adrenalina, provocando un aumento de los leucocitos y la relación N/L

(Blanco y col 2009). El descenso de los leucocitos a los valores basales de la

especie y de la relación N/L durante la sangría, indican que los cambios en las

poblaciones celulares diferenciales fueron a corto plazo (12 h).

La hiperglicemia observada inmediatamente después del desembarque y la

sangría, pudo ser un efecto secundario de la producción de cortisol (tabla 2), o el

resultado del aumento de la producción de glucosa por el hígado

(gluconeogénesis), debido a la mayor actividad simpático-adrenal por el estrés

presacrificio mediado por la adrenalina (Minka y Ayo 2009; Ekiz y col 2012).

Además, el cortisol favorece la síntesis de enzimas implicadas en la conversión de

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aminoácidos, glicerol y lactato en glucosa, incrementando la movilización de los

aminoácidos desde el músculo (Muchenje y col 2009). Se ha descrito que,

después del estrés del transporte de corta y larga duración, se presenta un

incremento de la glucosa plasmática, que indica un agotamiento metabólico

asociado con la movilización de las reservas energéticas del animal (Miranda-de la

Lama 2011). La hiperglicemia al momento de la sangría, indica que hubo un efecto

de los estresores presacrificio en los bovinos, el cual podría estar asociado con la

estadía en la planta. Estos resultados también pudieron estar relacionados con un

pico en la producción de adrenalina y glucagón en el momento de la

insensibilización, los cuales son reguladores de la glucogenólisis hepática y

muscular (Tadich y col 2009).

El transporte es un factor extenuante; los bovinos tienen que mantener el balance

y el contacto entre co-específicos produce fatiga y contusiones, que afectan la

permeabilidad de la membrana celular y favorecen la liberación de CK hacia el

torrente sanguíneo (Munhoz y col 2008). La actividad de CK es considerada como

un indicador sensible de trauma, altos niveles de actividad física y fatiga muscular

(Yu y col 2007; Ekiz y col 2012), como ha sido reportado en cerdos (Hambrecht y

col 2005); bovinos (Early y col 2012); corderos (Miranda-de la Lama y col 2012) y

en cabras (Ekiz y col 2012). En el estudio, la actividad de CK aumentó

drásticamente de forma significativa en los tres momentos del muestreo (P ˂0,05),

superando los valores promedio de referencia (7,4±2,4 U/L) (Kaneko y col 1997).

El incremento en la actividad enzimática reductora de CK en la granja pudo estar

relacionado con la conducción de los bovinos desde los potreros hasta el corral de

embarque y desde éste a los camiones. Durante el transporte, con un incremento

de la permeabilidad de la membrana o daño de las células musculares (Early y col

2011), debido al esfuerzo de los bovinos para mantener el equilibrio durante el

viaje o producto de las colisiones de los animales contra la carrocería del camión

(Knowles y Warriss 2006), aspecto que ha sido descrito como un factor que

aumenta la incidencia de las contusiones localizadas en las tuberosidades

isquiática y coxal en ganado colombiano (Romero y col 2011b). De otra parte, en la

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planta a pesar de que no se presentó ruptura de la estructura social de los lotes en

los corrales, es posible la presencia de encuentros antagónicos entre los bovinos,

aspecto que ha sido considerado como la principal causa de contusiones en

ganado chileno (Strappini y col 2013), lo que causaría daño de los músculos

esqueléticos y por tanto, liberación enzimática (Kannan y col 2003).

La concentración plasmática de lactato es considerada un indicador de estrés

agudo, relacionado con las condiciones de manejo de los animales, especialmente

de ejercicio físico, agotamiento y daño muscular (Hambrecht y col 2005). En el

estudio los valores promedio de lactato plasmático presentaron marcadas

diferencias entre los animales y fueron disímiles estadísticamente en los tres

momentos del muestreo (P ˂ 0,05), pero se encontraron en los rangos

considerados como normales para la especie bovina (0,56 – 2,22 mmol/L)

(Kaneko y col 1997). Estos resultados indican que el estrés del transporte y de la

estadía en la planta no fue suficiente para inducir una glicólisis anaeróbica rápida y

la excesiva liberación de lactato (Hambrecht y col 2005).

Durante el ejercicio la glucosa, los cuerpos cetónicos y los ácidos grasos libres

son usados totalmente. Después de este proceso, la oxidación de la cetona

muscular se reduce y se aumentan los niveles de βHB, por lo cual han sido

utilizados como indicadores de privación prolongada de alimento o inanición

(Knowles y Warriss 2006). En este estudio, se confirmó que el βHB no es un buen

indicador de estrés agudo en bovinos (Tadich y col 2005), porque éste es usado

como fuente energética para muchos tejidos extra hepáticos cuando se han

reducido los niveles séricos de glucosa y las reservas de glucógeno (McCue

2010). El no haber encontrado diferencias en los valores de este cuerpo cetónico

en la granja, a la llegada a la planta de sacrificio y durante la sangría, indica que la

privación de alimento por un corto período de tiempo (24 h) fue contrarrestada por

el βHB aportado por el rumen, siendo necesario varios días para que los bovinos

alcancen un estado de ayuno fisiológico (Tadich y col 2003).

Los cambios observados en las concentraciones plasmáticas de cortisol, glucosa,

leucocitos y la relación N/L, podrían ser una respuesta a la adaptación de los

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bovinos al medio. De igual forma, la fisiología del estrés no es simple, ni

constante, sino que depende de la duración e intensidad del estímulo y de la

experiencia de los animales. Con los resultados obtenidos se concluye que el

transporte terrestre de cruces comerciales de ganado Brahman hacia plantas

localizadas en la misma zona productiva, no afectó el metabolismo proteico, ni se

presentó deshidratación. Sin embargo, el incremento del cortisol, VGA, CK y el

recuento de células sanguíneas, indican que el presacrificio fue un evento

generador de estrés que afectó moderadamente el bienestar animal e incrementó

algunos de los biomarcadores evaluados, que se encontraron en los límites

considerados como normales para la especie bovina. De igual forma, se deben

considerar otras variables como el embarque, las condiciones de la vía, el

descargue, la raza, el temperamento, la edad de los animales y el muestreo;

siendo necesario emplear indicadores conductuales para dilucidar estos aspectos.

Los resultados obtenidos pueden ayudar a evaluar la importancia de contar con

plantas modernas y ajustadas a la legislación en las zonas productivas, una

infraestructura de transporte apropiada, la planeación de los viajes y unas

condiciones de manejo basadas en criterios conductuales, para evitar su impacto

sobre el bienestar del ganado de carne en Colombia.

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3.5 RESUMEN El objetivo del estudio fue determinar el efecto de manejos ante-mortem sobre

indicadores plasmáticos de estrés (cortisol, lactato, creatinina, úrea, albúmina,

glucosa, ß-hidroxibutirato, creatinaquinasa, células blancas, hematocrito y la

relación neutrófilos/linfocitos), de novillos sacrificados en una planta moderna

localizada en el departamento de Córdoba. Para esto se seleccionaron

aleatoriamente 65 novillos Brahman representativos en cuanto a tipo, peso y

conformación, del ganado sacrificado en Colombia. Estos fueron transportados

durante 4 h en el mismo camión, en diferentes días, bajo las mismas condiciones

de manejo. Se obtuvieron muestras de sangre por venopunción coccígea o

yugular en la granja, en la planta de sacrificio y durante la sangría. Los resultados

sugieren que el transporte de 4 h y el sacrificio efectuado en una planta

tecnificada, no influyeron negativamente sobre los parámetros fisiológicos y

hematológicos de estrés. El incremento significativo (P< 0,05) de las

concentraciones de cortisol, glucosa y relación N/L inmediatamente después de la

llegada del ganado a la planta, podría estar relacionado no sólo con el estrés del

transporte, sino con otras variables como el embarque, las condiciones de la vía,

el descargue, la raza, el temperamento, la edad de los animales y el muestreo;

siendo necesario emplear indicadores conductuales para dilucidar estos aspectos.

Palabras clave: bienestar animal, estrés, ganado de carne, presacrificio.

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3.6 ABSTRACT The aim of this study was to determine if the farm management, transport by road

or lairage of steers slaughtered in a modern slaughterhouse located in a productive

area had an effect on plasma stress indicators (cortisol, lactate, creatinine, urea,

albumin, glucose, ß-hidroxibutirate, creatinekinasa, white blood cells, hematocrit

and neutrophil lymphocyte N/L ratio). A total of 65 Brahman steers representative

of the most common type, weight and conformation slaughtered in Colombia were

randomly selected, and transported during 4 h by the same truck, in different days,

under similar conditions of management. Cattle were bled by coccigeous or

yugular venopuction at the farm, at the slaughterhouse and during exsanguination.

The results suggest that transport of 4 h and the slaughtering at a technical plant,

had not a negative influence on physiological and hematological stress

parameters. The significant (P< 0.05) increase of cortisol concentrations, glucose

and N/L ratio, immediately after cattle arrival at the plant, could be related not only

to transport stress, but with other variables as loading, road type, unloading, breed,

temperament, age of the animals and sampling, being necessary to use behavioral

indicators to elucidate these aspects.

Key words: animal welfare, stress, beef cattle, pre-slaughter.

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Figura 3. Características de la Cadena bovina evaluada: Granja (a), camión típico

para el transporte de ganado colombiano (b), área de descargue en la planta de

sacrificio (c), corrales de espera (d), canal de conducción curvo en concreto que

comunica los corrales de espera con el área de insensibilización (e) y cajón de

insensibilización con sistema de fijación de cabeza (f).

a b c

d e f

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Figura 4. Promedios de las concentraciones sanguíneas de cortisol (µg/dL), VGA,

glucosa (mmol/L), lactato (mmol/L), β-hidroxibutirato (βHB), creatinquinasa (CK)

(U/L), proteína (g/L), creatinina (mmol/L) y albúmina (G/L), con un 95% de IC en

novillos en la granja, a la llegada a la planta y durante la sangría. a,b,cLas

diferencias entre las etapas de muestreo son representadas por distintas letras

(p 0˂,05).

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Figura 5. Conteo leucocitario (miles/µl) y relación neutrófilos/linfocitos de las

muestras sanguíneas bovinas durante las tres etapas del muestreo. a,b,cLas

diferencias entre las etapas de muestreo son representadas por distintas letras

(p 0˂,05).

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Tabla 2. Resultados de los modelos de regresión lineal mixtos para los valores

sanguíneos de cortisol, hematocrito (VGA), leucocitos, glucosa, lactato, β-

hidroxibutirato (βHB), creatinquinasa (CK), úrea, proteína, creatinina y albúmina,

de los novillos evaluados.

Variable Planta Sangría EE rho

Cortisol 0,97a 2,1

b 0,19 0,14

VGA 258,4a 448,9

b 56,4 0,12

Leucocitos -0,0007a 0,0010

b 0,0002 0,16

Glucosa 0,36a 0,39

b 0,04 0,008

Lactato 0,24a 0,79

b 0,079 0,06

β-HB -0,058 -0,028 0,06 0,13 CK 0,71

a 0,93

b 0,13 0,16

Úrea 0,05 1,11a

0,07 0,34 Proteína 2,6 4,8 2,04 0,07 Creatinina 0,13

a 0,03

b 0,02 0,20

Albúmina 0,09a

0,11b

0,03 0

*a-b variable significativamente diferente (p 0˂,05) entre cada momento del muestro en la misma fila

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4. EVALUACIÓN DEL BIENESTAR ANIMAL MEDIANTE INDICADORES

FISIOLOGICOS, CONDUCTUALES Y DE CALIDAD DE LA CARNE EN

NOVILLOS BRAHMAN

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4.1 INTRODUCCION El término estrés se refiere al estado conductual, fisiológico y emocional del animal

frente a una situación que percibe como una amenaza, en relación con el correcto

funcionamiento de su cuerpo o su estado mental (Terlouw y col 2005), con

posibles repercusiones negativas en el bienestar y la salud (Cafazzo y col 2012).

Los procedimientos durante el presacrificio son complejos y frecuentemente son

causas potenciales de estrés, que pueden ser expresadas en los animales

mediante cambios fisiológicos y conductuales específicos (Buckham Sporer y col

2008a). Las condiciones y duración del transporte, la privación de alimento, los

cambios de la estructura social, el contacto con ambientes extraños, la relación

hombre-animal, el manejo, entre otros, son factores que generan miedo,

incrementan la reactividad de los bovinos y afectan su condición fisiológica

(Grignard y col 2001). La insensibilización previa al sacrificio tiene como finalidad

evitar el sufrimiento y estrés a los animales (OIE, 2012). En los casos en que no

se logra la inconsciencia, los bovinos durante el izado y la sangría, pueden

experimentar ansiedad, dolor, sufrimiento o angustia, generando incomodidad

física y psicológica (Bourguet y col 2011). Si los factores genéticos y ambientales

(cría y manejo) son controlados, el metabolismo muscular post-mortem, refleja

parcialmente el estrés presacrificio y el esfuerzo físico (Maria y col 2003; Gallo y

col 2003a).

Aunque la respuesta al estrés es muy variable y depende de la capacidad del

animal de afrontar su entorno, los estresores agudos, típicos de los procesos

presacrificio, requieren de una respuesta rápida (Ferguson y Warner 2008). Esta

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respuesta puede conducir a una disminución del glucógeno muscular al momento

del sacrificio, que conlleva a un incremento del pH muscular (Stockman y col

2012). De acuerdo con la magnitud de la respuesta, los estresores producen

consecuencias negativas en la calidad de la carne, disminuyen la vida útil de los

cortes y generan pérdidas económicas importantes a la industria cárnica (Page y

col 2001; Leyva-García y col 2012). La carne con pH ≥ 5,8 se ha definido como

corte oscuro o carne DFD (dark, firm, dry, por sus siglas en inglés), siendo

considerada de menor calidad (Mach y col 2008). La cuantificación de corte oscuro

o carne DFD en la industria, puede ser utilizada como una medida objetiva del

estrés presacrificio (Warren y col 2010).

Estudios previos han encontrado que las respuestas conductuales de los bovinos,

observadas inmediatamente antes del sacrificio, están relacionadas con las

respuestas fisiológicas y con los atributos de calidad de la carne (Miranda-de la

Lama 2010; Stockman y col 2012). En Colombia, la normatividad sanitaria adoptó

lineamientos de bienestar animal durante el presacrificio (MPS 2007; ICA 2007),

pero su nivel de implementación es bajo (Romero y col 2011). Así mismo, las

plantas de sacrificio se encuentran en el proceso de modernización de su

infraestructura e implementación de buenas prácticas de manufactura, dentro del

plan gradual de cumplimiento, para lo cual tienen plazo hasta el año 2016 (MPS

2007; MPS 2012). En este contexto, es relevante establecer si las condiciones del

presacrificio bajo lineamientos comerciales, generan estrés y afectan la calidad de

la carne. El objetivo del presente trabajo consistió en evaluar el bienestar de

novillos Brahman durante el transporte, descargue, conducción y sacrificio,

mediante indicadores fisiológicos, conductuales y de calidad de la carne, así como

la interacción hombre-animal, en dos plantas de sacrificio colombianas. Esta

información pude ser útil para proponer cambios en etapas específicas del

presacrificio, incluyendo además, el diseño de las instalaciones y las prácticas de

manejo bovino, a fin de plantear mediciones sencillas y prácticas, para ser

implementadas en las plantas comerciales.

4.2 MATERIAL Y METODOS

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El estudio fue aprobado por el Comité de ética para la experimentación con

animales de la Institución. Este se llevó a cabo en dos plantas de sacrificio

localizadas en los Departamentos de Antioquia y Caldas (Centro colombiano),

durante los meses febrero a julio de 2012, las cuales cumplían con los

requerimientos sanitarios exigidos por la legislación colombiana (MPS 2007a,

2007b).

DESCRIPCIÓN DEL ESTUDIO

Se evaluaron 522 bovinos machos castrados (novillos) manejados bajo

condiciones comerciales (Planta A=285; Planta B=237), con características

similares en cuanto a raza (cruces comerciales de ganado Brahman), edad (24 a

36 m) y peso vivo (429,9±29,3 kg). Los novillos fueron levantados en las granjas

bajo condiciones extensivas, alimentados en pasturas naturales y suplementados

con sal mineralizada. Los animales que cumplieron con los criterios descritos,

fueron seleccionados aleatoriamente en las plantas de sacrificio, se identificaron

en el lomo con pinturas acrílicas y se mantuvieron en los mismos lotes de origen

hasta el sacrificio. Durante el descargue, la conducción y la permanencia en el

cajón de insensibilización, se registraron los eventos conductuales de los animales

y la interacción hombre animal. Así mismo, se evalúo la efectividad de la

insensibilización y se tomaron muestras de sangre durante la sangría, una con

anticoagulante (ácido etilen-aminotetracético, EDTA) y otra con fluoruro de sodio

(NaF) (glucosa y lactato). El tamaño muestral se calculó usando una comparación

de medias mediante una distribución de t no central, por medio del comando

Sampricti de Stata Versión 12.0 (College Station, Texas, EU), usando un poder del

90% y un error de 0,01.

CONDICIONES DE TRANSPORTE Y EN LA PLANTA DE SACRIFICIO

Se utilizaron camiones característicos para el transporte terrestre de ganado en

Colombia (con aforo de 14 novillos), vehículo de dos ejes con chasis rígido

(combinado con madera y acero), provisto de ventilación pasiva, techo con carpa

de lona y con una capacidad para 10 ton. Las plantas de sacrificio evaluadas

operaban de lunes a sábado (0600-1400 horas), con una capacidad de sacrificio

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de 500-600 bovinos/día (40-45 animales/hora). La planta A contaba con una

infraestructura moderna, rampa de descargue de concreto, con pisos

antideslizantes, que conectaban con una serie de corredores hasta los corrales de

recepción, que tenían un área de 57,8 m2 (5,9 m de ancho X 9,8 m de longitud),

con pisos antideslizantes de concreto y techados (Figura 1a). La planta B, con

infraestructura tradicional, rampa de descargue en concreto, con pisos

antideslizantes, corrales de recepción con un área de 35,9 m2 (6,9 m de ancho X

5,2 m de longitud), con pisos en regular estado y desprovistos de techo (figuras 6

y 7). Se suministró agua potable ad libitum, pero no alimento. Después de

permanecer durante toda la noche en las instalaciones de las plantas, los bovinos

fueron conducidos por un corredor de concreto curvo sólido en la planta A y curvo

en 90°, de paredes discontinuas en la planta B, hasta los cajones de

insensibilización de similares dimensiones (1,80 m de alto X 0,90 m de ancho X

2,53 m de longitud), provisto de un sistema de sujeción de cabeza y no de cuerpo

en la planta A y sin sujeción de cabeza y cuerpo en la planta B (Figuras 6 y 7,

respectivamente), con puertas de acceso tipo guillotina y una puerta lateral de

salida giratoria, ambas de acero inoxidable. Los bovinos fueron insensibilizados

con pistolas neumáticas de proyectil no penetrante, izados, sangrados y

transferidos a la línea de producción para iniciar las actividades posteriores.

MEDICIÓN Y CALIFICACIÓN DE LOS EVENTOS CONDUCTUALES

Los eventos conductuales de los bovinos durante el descargue en la planta de

sacrificio y la conducción se registraron por lote (tabla 3). Se consideró como

descargue, las actividades comprendidas entre la apertura de la puerta del camión

en la rampa de descargue, hasta el ingreso del último bovino al corral de

recepción. En esta etapa se obtuvo un índice de acuerdo con los lineamientos

descritos previamente por Maria y col (2004). Los eventos conductuales fueron

valorados basados en su efecto sobre el bienestar animal. Las puntuaciones más

altas fueron asignadas a los comportamientos que constituían un mayor riesgo

para el bienestar animal (tabla 3). Se calculó el total de eventos conductuales por

grupo transportado y su promedio correspondió al total de eventos por animal

Page 52: BIOMARCADORES DE ESTRÉS Y BIENESTAR ANIMAL DURANTE EL ... · El bienestar animal se ha convertido en un tema de interés en el comercio internacional de la carne bovina, debido a

(ECA), valor al cual se asignó una puntuación de 1 a 6 (tabla 4). A continuación,

se calculó el índice compuesto (IC), el cual establece una calificación del

descargue, que integra el tiempo de descargue y el puntaje de eventos

conductuales por animal, mediante la yuxtaposición de la letra que caracterizó el

tiempo de descargue (T, R, A, N, S) y esta última calificación ECA (tabla 4). Se

estableció como punto de corte para definir un índice de descargue aceptable, la

puntuación T y R; las restantes (A, N y S), se consideraron indicadoras de

problemas de BA (Maria y col 2004).

EVALUACION DE LA INTERACCION HOMBRE-ANIMAL

Durante el descargue, la conducción y la permanencia de los bovinos en el cajón

de insensibilización se evaluaron las interacciones entre los manejadores y los

bovinos, por lote y por animal, registrando el número de eventos como empujar,

golpear, palmear, hablar, silbar, aplaudir, la emisión de sonidos artificiales, ondear

objetos como bolsas, cortar los animales con objetos punzantes, uso de picana o

tábano eléctrico y arrastrar por la cola (Grandin 2010b; Hemsworth y col 2011).

Las mediciones las realizaron tres observadores previamente entrenados, sin

interferir con la rutina de trabajo normal, para controlar sesgos de información.

EVALUACION DE LA INCONSCIENCIA

Se evalúo individualmente la presencia/ausencia de los signos de sensibilidad

(reflejo corneal, intento de incorporarse, vocalizaciones y respiración rítmica), e

indicadores operativos: efectividad de la insensibilización (% de animales

insensibilizados en el primer intento), el retraso en la insensibilización (intervalo de

tiempo entre la entrada del animal al cajón de insensibilización y el momento en el

que recibe el primer disparo), localización del disparo en el lugar correcto, número

de disparos e intervalo entre el primer disparo y la sangría (Grandin 2010c;

Bourguet y col 2011). La presencia de reflejo corneal, respiración rítmica y/o

vocalizaciones, se consideraron como indicadores de poca profundidad de la

conmoción cerebral (Gregory 2007). La presencia de conmoción cerebral

profunda y el intervalo entre insensibilización y la sangría ˂60 seg, definieron la

insensibilización como efectiva.

ANÁLISIS DE LAS VARIABLES SANGUÍNEAS

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La determinación del volumen globular acumulado (% VGA) se estableció por la

técnica de microhematocrito. El perfil de leucocitos se realizó mediante la

observación microscópica de extendidos sanguíneos teñidos con el colorante

Wright. Las concentraciones de cortisol plasmático (µg/dL) se determinaron por la

técnica Radioinmunoanálisis (RIA) en el Laboratorio de Endocrinología de la

Facultad de Medicina Veterinaria de la Universidad Nacional, Sede Bogotá. El

coeficiente de variación inter-ensayo fue 9,31%. Las concentraciones sanguíneas

de glucosa (mmol/L), úrea (mmol/L), proteína total (g/L), creatinina (mmol/L) y la

actividad plasmática de la enzima CK (U/L) se realizó usando el kit comercial de

Biosystem®. Las concentraciones sanguíneas del β-hidroxibutirato (βHB) (mmol/L)

y el lactato (mmol/L), se establecieron usando el kit comercial de Randox. Todas

las lecturas se realizaron en el espectrofotómetro BTS-330 (Biosystem®), en el

laboratorio clínico veterinario de la Universidad de Caldas.

MEDICIÓN DEL pH24 Y EL COLOR

Se efectuó la medición del pH24 en el músculo Longissimus dorsi (LD) entre la 14ª

y 15ª costilla, en el lado derecho a 4 cm de profundidad, con un potenciómetro de

punzón (IQ150 pH/Mv/medidor de temperatura; IQ Scientific Intruments). El

equipo fue calibrado cada cinco muestras, usando dos soluciones estándar de pH

4 y 7; se efectúo lavado con agua destilada después de cada medición (Gallo y col

2001; Mach y col 2008).

La evaluación del color se realizó sólo en la planta B, de acuerdo al espectro de la

reflectancia cada 10 nm desde 400 hasta 700 nm, por medio de un reflectómetro-

colorímetro X-Rite. Las mediciones se hicieron sobre la superficie del corte del

músculo Longissimus dorsi, 24 h post-enfriamiento a 4 ºC, incluyendo un

componente especular, el iluminante D65 y un observador estándar de 10º.

Después de 10 minutos de exposición al aire, para permitir la oxigenación de la

mioglobina, se registraron los valores de la luminosidad (L*; 0≤ L*≤ 100),

intensidad de rojo (a*) y de amarillo (b*), por medio del sistema CIELab (Houben y

col 2000; Tapp y col 2011). Los valores de saturación del color (Croma, C*) y el

ángulo de matiz (h*), fueron calculados como C*= (a*2 + b*2) y h*= tan-1(b*/a*),

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respectivamente. Las lecturas se hicieron en cinco diferentes sitios de la muestra

y se determinó el promedio. La carne se clasificó como DFD, cuando cumplió los

siguientes criterios: pH24 ≥ 5,8, L* ˂ 40 y C* ˂30 (Leyva-García y col 2012).

ANÁLISIS ESTADÍSTICO

El análisis se efectúo utilizando el programa Stata Versión 12.0 (College Station,

Texas, EU, Licencia Serial 30120546473). Se estableció la distribución normal de

las variables evaluadas en el estudio, por medio del análisis de los residuales.

Todas las variables sanguíneas que no presentaron una distribución normal, se

transformaron en su logaritmo natural, valores que fueron utilizados en análisis

posteriores. Todas las estimaciones en escala logarítmica fueron transformadas

nuevamente, para ser presentadas en su escala natural como media±DE. Las

asociaciones entre los indicadores de estrés y las variables independientes

(tiempo de transporte, estadía en planta, densidad de carga en el camión,

disposición de espacio en el corral, peso, pH, índice de descargue y efectividad de

la insensibilización), se determinaron utilizando modelos de regresión múltiple. El

ajuste de los modelos estuvo basado en la varianza explicada, representada en el

coeficiente de determinación ajustado (R2) y comprobada al graficar los valores

predichos contra los valores observados y graficar los valores residuales de la

varianza estandarizada.

Las variables conductuales y las interacciones hombre-animal obtenidas durante

el descargue y la conducción se evaluaron por lotes, en el análisis se compararon

las medias por medio de una prueba t-Student y de correlación de Pearson. Los

resultados fueron expresados como media (±EE). Los eventos observados

durante la insensibilización fueron presentados como proporciones y las

diferencias por medio del coeficiente de Pearson.

Para evaluar el pH, se realizó un análisis de regresión logística multivariada que

asumió como variable de respuesta binomial el pH24, de donde 0 correspondió a

las carnes con pH24 < 5,8 consideradas como carnes de calidad normal y 1

aquellas con pH24 ≥ 5,8, como carnes de menor calidad. El modelo general fue:

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Donde Y es la probabilidad de presencia de carne con pH> 5,8; β0 el intercepto,

β1 los coeficientes de correlación y Xi el vector de las variables independientes

incluidas en el análisis. Se realizaron análisis individuales para cada variable

predictora, para explorar la información. A continuación, se ejecutó el modelo

completo con las variables predictoras seleccionadas, para estimar sus efectos y

grado de significancia. Las variables que no presentaron significancia fueron

removidas una por una del modelo, comenzando por aquellas que presentaron un

valor de P > 0,05. Los modelos se volvieron a ejecutar para identificar las variables

de confusión, por medio de la comparación de las estimaciones del nuevo modelo,

con las estimaciones del modelo anterior. Finalmente, se realizó la prueba de

bondad de ajuste del modelo por medio del estadístico de Hosmer y Lemeshow.

Los efectos de las variables predictoras sobre la aparición de corte oscuro se

expresaron por medio de las razones de disparidad (OR) y sus respectivos

intervalos de confianza del 95%. Una razón de disparidad (OR) mayor (menor)

que 1 indica que la presencia de carne con pH24 ≥ 5,8 es más (menos) probable

de estar presente en la categoría específica de la variable predictora, comparada

con la categoría de referencia.

Se estableció la correlación entre los valores colorimétricos y el pH24. Todos los

valores de P ˂0,05, fueron considerados como significativos.

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4.3 RESULTADOS Los resultados presentados en la tabla 5 referentes a los tiempos de transporte, la

estadía en la planta, la densidad de carga, la disponibilidad de espacio en el corral

y el peso de los bovinos, evidencian la homogeneidad de los bovinos comparados

en las dos plantas (P> 0,05).

Los valores sanguíneos de cortisol (µg/dL), creatinina (mmol/L), úrea (mmol/L) y

CK (U/L) presentaron diferencias significativas entre plantas (P ˂ 0,05).

EVENTOS CONDUCTUALES DURANTE EL DESCARGUE Y LA CONDUCCION

El 97,32% de los bovinos evaluados (n=508/522) obtuvo índices de descargue

considerados como aceptables, con una duración promedio por lote de 3,7±0,35

min (Planta A: 3,1± 0,4 min y planta B: 4,7±0,7 min; P˂ 0,01). Las índices

considerados como no aceptables desde el punto de vista del bienestar animal

(4,91%; n=14), se evidenciaron en la planta A (P ˂0,05). Los eventos

conductuales más frecuentes durante el descargue fueron: resbalarse (50%);

saltar (50%); reversar (39,5%); las caídas (32,4%) y las vocalizaciones (25,8%).

La conducción de los bovinos desde los corrales hacia el cajón de insensibilización

produjo mayor reactividad y manifestaciones conductuales, al compararse con el

descargue (tabla 6). Se encontraron diferencias significativas entre las plantas en

las resbaladas, las caídas y las vocalizaciones (P ˂0,05). Los tiempos de

conducción por animal fueron estadísticamente diferentes en las plantas

evaluadas (4,7±0,9 Vs 2,8±0,3 min; P ˂0,05) y estuvieron asociados

positivamente con la frecuencia de las interacciones como golpear, silbar y la

emisión de sonidos artificiales; así como con las respuestas conductuales de los

animales (rebalones y caídas) (P ˂0,01).

Las interacciones hombre-animal durante la conducción se incrementaron

considerablemente (tabla 6). En el descargue las interacciones acústicas (silbar y

hablar) fueron prevalentes. Las interacciones negativas presentaron diferencias

estadísticamente significativas en las plantas estudiadas (P ˂ 0,05). El uso de

picana o tábano eléctrico y las conductas abusivas (colocar este dispositivo en las

partes sensibles del animal, como cara, genitales y recto), fueron prácticas

comunes en las dos plantas y se aplicaron principalmente durante la conducción.

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El uso de sonidos artificiales como golpear las estructuras metálicas de las

instalaciones, se observó con mayor frecuencia en la planta B (P ˂ 0,05). Otras

prácticas observadas durante el descargue, realizadas por los conductores y

ayudantes, fueron la utilización de navajas para cortar la piel de los bovinos; así

como torcer la cola, con el fin de acelerar su descenso del camión (tabla 6).

EVALUACION DE LA INSENSIBILIZACION

La insensibilización fue efectiva en el 38,6% de los animales en la planta A y en el

23,6% en la planta B (P˂ 0,05). La totalidad de los animales de la planta B

recibieron un impacto; en la planta B, el 11,4% (n=37) requirió más de un disparo

(P ˂ 0,05) y el 1,4% (n=4) recibió el impacto en la articulación atlanto-occipital. Se

observaron diferencias significativas en el retraso de la insensibilización, en los

intervalos de tiempo entre la insensibilización y el inicio de la sangría, además en

la presencia de signos de consciencia en las plantas estudiadas (P˂ 0,05). El

intervalo fue aceptable (˂60 seg) sólo en el 3,6% de los 522 bovinos evaluados

(tabla 7). A pesar de que una alta proporción de animales colapsó con el primer

disparo (89,5% y 100%), los disparos no se localizaron en el lugar correcto (tabla

7); siendo desplazados hacia la derecha en la planta B (26%) y hacia la izquierda

en la planta A (34%). La proporción de vocalizaciones, caídas y saltos de los

bovinos en el cajón de insensibilización no presentaron diferencias significativas

entre plantas (P> 0,05) (tabla 7).

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INDICADORES FISIOLÓGICOS DE ESTRÉS

Los modelos de regresión múltiple de las variables fisiológicas estudiadas (tabla

8), muestran en este estudio que el cortisol, el VGA, la creatinina, el ß-HB y el

conteo de leucocitos fueron moderados indicadores de estrés por transporte,

estadía en la planta e insensibilización, con un coeficiente de determinación

ajustado (R2) bajo (14%, 11%, 21%, 12% y 13%, respectivamente). Las

concentraciones plasmáticas de cortisol (µg/dL), glucosa (g/L), proteína (g/L), úrea

(mmol/L) y CK (U/L), estuvieron por encima de los valores de referencia para la

especie (Kaneko y col, 1997). El ß-HB (mmol/L), el lactato (mmol/L), la creatinina

(mmol/L), la albúmina (g/L), el conteo de leucocitos (miles/µl) y la relación N/L,

presentaron valores basales (tabla 5).

Los coeficientes de correlación de Pearson entre las concentraciones de cortisol

post-sacrificio y las variables conductuales de los bovinos en el cajón de

insensibilización, no evidenciaron asociaciones significativas. A diferencia, los

niveles de cortisol sérico estuvieron correlacionados significativamente con haber

recibido descargas eléctricas con el tábano, con el retraso de la insensibilización y

con la presencia de respiración rítmica antes de la sangría (P ˂0,01).

INFLUENCIA DEL PRESACRIFICIO SOBRE EL METABOLISMO MUSCULAR POST-MORTEM

La prevalencia de carne con pH24≥ 5,8 fue 69% y presentó diferencias

significativas entre plantas (56,9% versus 83,1%; P ˂0,01). Sin embargo, al

definir como punto de corte el pH24≥ 6,0, las diferencias en las prevalencias entre

las dos plantas no fueron tan marcadas (27,7% y 35,4%; P= 0,058). Los valores

promedio (±EE) del pH24 muscular a diferentes horas de transporte fueron

significativamente (P ˂ 0,01) mayores en la planta B. Después de 10 h de

transporte el pH24 presentó una tendencia ascendente en las dos plantas (figura

8). La planta de sacrificio se consideró como un factor de riesgo para la

presentación de carne con corte oscuro en el estudio (P˂ 0,01) (tabla 9).

A medida que aumentó el tiempo de transporte se incrementó el riesgo de

presentar carnes con corte oscuro (OR> 1; P ˂ 0,01). Los animales transportados

entre 10 y 12 h, tuvieron 6 veces más probabilidad de presentar carne con pH24≥

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5,8, al compararse con bovinos transportados durante menor tiempo (tabla 7); esta

misma tendencia se observó en los bovinos transportados por tiempos superiores

a 12 h. Así mismo, la insensibilización no efectiva incrementó 1,6 veces el riesgo

de encontrar carne con pH≥ 5,8 (tabla 9). El transporte de los bovinos a

densidades de carga en el camión comprendidas entre 300 y 400 Kg/m2 disminuyó

el riesgo de presentación de corte oscuro, al compararse con los bovinos que

fueron transportados a menores densidades.

Los análisis colorimétricos del músculo Longissimus dorsi en la planta B,

discriminaron como carne DFD las mismas muestras obtenidas con el criterio de

pH24. La proporción de carne DFD fue 83,1% (n= 197/237). Se observaron

correlaciones negativas entre los valores colorimétricos instrumentales y el pH

muscular. El pH24 estuvo asociado con el índice de amarillo (b*) (P< 0,01); el

croma C* (P< 0,05) y parcialmente con la luminosidad L* (P=0,08). La

luminosidad (L*) presentó valores promedio ˂ 40 (31,7±4,0), el croma (C*) ˂ 30

(12,3±2,0) y el ángulo de matiz (h*) ˂50 unidades en la totalidad de las muestras

del músculo Longissimus dorsi analizadas, independientemente del tiempo de

transporte (figura 9). Los índices de rojo y amarillo presentaron valores bajos

(9,4±1,6; 8,0±1,0, respectivamente).

4.4 DISCUSION El estudio se realizó bajo condiciones comerciales controladas (novillos Brahman,

de la misma edad, sistema de producción extensivo y tipo de vehículo), que

presentó como ventaja, la posibilidad de investigar las características reales del

presacrificio.

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EVENTOS CONDUCTUALES DURANTE EL DESCARGUE Y LA CONDUCCION

Los resultados de las actividades de comportamiento evaluadas por lotes en el

presente estudio, sugieren que la conducción de los novillos hacia el área de

insensibilización fue un evento más aversivo y estresante que el descargue,

porque están más expuestos al ruido, al manejo o el forcejeo, eventos que son

considerados como el mayor estresor para el ganado (Ferguson y Warner 2008).

El tiempo de descargue promedio fue 3,8±0,4 min por lote, resultado concordante

con los obtenidos por otros investigadores en España (Maria y col 2004), Francia

(Bourguet y col 2011), México (Miranda-de la Lama y col 2012) y Uruguay

(Huertas y col 2010). Los cortos tiempos de descargue pueden estar relacionados

con el comportamiento de huida de los bovinos al enfrentarse a los ambientes

nuevos de la planta de sacrificio y con las interacciones humanas acústicas (silbar

y hablar, emisión de sonidos artificiales), utilizadas para agilizar el descenso de los

bovinos de los camiones, prácticas muy frecuentes en las plantas evaluadas, que

son generadoras de miedo (Hemsworth y col 2011), las cuales adicionalmente,

incrementaron la presencia de resbalones y saltos durante el descargue (P˂0,01).

Los saltos y los resbalones pudieron estar relacionados también, con la presencia

de infraestructura inadecuada o con personal poco calificado (Maria y col 2004;

Miranda-de la Lama y col 2012).

La actitud y el comportamiento de los manejadores de los animales es la

característica que más impacta la interacción hombre-animal (Waiblinger y col

2006). En la presente investigación, se observaron prácticas durante el descargue,

realizadas por los conductores y ayudantes, como retorcer la cola, arrastrar los

bovinos incapacitados y cortar la piel de los animales con navajas, que se

encuentran catalogadas como abusivas y son inaceptables bajo cualquier

circunstancia (Grandin 2010a). Sin embargo algunas de ellas (retorcer la cola),

están arraigadas a la cultura popular y son difíciles de cambiar, siendo por tanto

necesario fortalecer la capacitación del recurso humano.

La conducción de los bovinos por los corredores hacia el cajón de insensibilización

en Colombia, se realiza con la ayuda del tábano o picana eléctrica. La OIE (2012)

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recomienda que, el tábano eléctrico debe usarse sólo en casos extremos y no de

manera rutinaria. En las plantas de sacrificio evaluadas se observó el uso excesivo

de este elemento de arreo, sobrepasando los niveles aceptables (˂ 25%)

propuestos por Grandin (2010c) y estuvo relacionado significativamente con las

vocalizaciones (P˂ 0,05). Los resultados de estos indicadores permiten sugerir

que existen problemas de los equipos, diseño o de manejo inapropiado

(Manteuffel y col 2004; Grandin 2010c). Otras interacciones negativas observadas

fueron golpear a los novillos con palos y varillas de hierro (planta A), hablar fuerte

y silbar (plantas A y B), que generan reacciones de miedo (Waiblinger y col 2006);

aumentan el riesgo de contusiones en las canales (Minka y Ayo 2007; Romero y

col 2011a); incrementan los accidentes ocupacionales (Paranhos da Costa 2000);

dificultan la movilización del ganado al provocar una mayor reactividad de los

mismos, e incrementan los movimientos de escape o huida (Grignard y col 2001).

Estas mismas interacciones negativas fueron reportadas recientemente en

Colombia, donde fue evidente el uso de métodos cruentos para levantar los

animales caídos durante el transporte (Romero y col 2011c).

La marcha hacia atrás o reversar fue un comportamiento de alta frecuencia en el

estudio, el cual está relacionado con el diseño de los corredores de conducción, el

ruido generado por los equipos neumáticos del área de sacrificio, la falta de

iluminación del cajón de insensibilización y a las conductas aversivas del personal

durante el arreo (Grandin 2006; Miranda-de la Lama y col 2010).

EVALUACION DE LA INSENSIBLIZACION

El ingreso de los bovinos al cajón de insensibilización es un procedimiento difícil

para el personal de las plantas de sacrificio, porque es una de las etapas más

estresantes del presacrificio, que genera miedo y cambios conductuales en los

animales (Bourghet y col 2011), aspecto que se evidenció en el estudio. De

acuerdo con Grandin (2006), desde el punto de vista del bienestar animal, el 75%

de los animales sacrificados deberían ingresar al cajón de insensibilización sin el

uso del tábano eléctrico, lineamiento que no se cumplió en la planta A, la cual no

contaba con un sistema de sujeción del animal, y requirió el uso de este elemento.

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Adicionalmente, como ha sido descrito por otros investigadores (Muñoz y col

2012), el tábano eléctrico se utilizó con fines de restricción de movimiento en el

cajón de insensibilización, para facilitar la sujeción de los bovinos y la aplicación

de la pistola de aturdimiento en el lugar correcto. El uso de la puerta de guillotina

para golpear a los bovinos e incentivar su ingreso al cajón, observada en las dos

plantas, es una práctica que representa un riesgo potencial para la presencia de

contusiones en el lomo y genera pérdidas económicas importantes a la industria

cárnica (Strappini y col 2012).

Las vocalizaciones son un indicador del estatus de bienestar animal fácil de medir

y eficiente para identificar problemas de los equipos o de manejo inapropiado

(Manteuffel y col 2004; Grandin 2010c). La prevalencia de vocalizaciones en el

cajón de insensibilización en el estudio superó los niveles de puntuación

aceptables (3-5%) (Grandin, 2010b). El incremento de las vocalizaciones pudo

estar relacionado con problemas de calibración de las pistolas, las cuales en las

plantas no se programaban de acuerdo con el tamaño de los bovinos; falta de

mantenimiento, deficiente capacitación del personal, presencia de bovinos muy

excitables, alta proporción de bovinos que recuperaron la consciencia y la presión

excesiva del sujetador de cabezas, la cual adicionalmente en la planta B, era

colocada en lugares diferentes al cuello (Grandin 2001; Romero y col 2012). Se

presentó una correlación significativa entre el retraso de la insensibilización y las

vocalizaciones; así como con los niveles séricos de cortisol (P˂ 0,01), lo cual

evidencia que es un factor de estrés y miedo en los bovinos, siendo necesario

realizar la insensibilización sin demora (Muñoz y col 2012). Los otros indicadores

conductuales evaluados (resbalarse, reversar, las caídas y los saltos), están

relacionados con el diseño de los cajones de insensibilización y con

manifestaciones de miedo por parte de los animales (Gallo y col 2003b; Romero y

col 2012).

El signo de sensibilidad más frecuente fue la respiración rítmica y ésta estuvo

correlacionada significativamente con los niveles de cortisol sérico. La presencia

de este signo, denota que la función medular fue parcialmente afectada,

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reduciendo las probabilidades que ocurra falla cardiopulmonar y generando un

mayor riesgo para que los bovinos recuperen la consciencia (Gregory y col 2007;

Bourguet y col 2011). Otros signos de consciencia que se observaron con menor

frecuencia fueron el reflejo palpebral e intentos de incorporarse. El primero, es

considerado un importante indicador de inconsciencia (Muñoz y col 2012), que

involucra circuitos que viajan a través de la protuberancia y el bulbo raquídeo,

hasta el núcleo espinal del trigémino (Bourguet y col 2011). El segundo es

catalogado como uno de los indicadores más fiables de retorno a la sensibilidad

(Grandin 2010c). A pesar de que la planta A contaba con un sistema de sujeción

de cabeza y con un protocolo para el mantenimiento preventivo de la pistola, la

efectividad de la insensibilización no superó los límites aceptables (90 – 94%)

(Gallo y col 2003; Grandin 2010a).

El operario cumple un papel fundamental en el proceso de insensibilización,

porque debe conocer donde realizar el disparo, la posición y la dirección que debe

llevar la pistola (Gallo y col 2003b). La posición y dirección del impacto son

importantes para evitar que los bovinos recobren la sensibilidad (Gregory y col

2007). En las dos plantas se constataron fallas en la precisión del impacto. Los

operarios se localizaron por encima del animal, lo que dificultó maniobrar

fácilmente e impidió tener una buena visualización del sitio de impacto. El bajo

porcentaje de aciertos en el blanco se puede deber a la ausencia de un sistema

eficiente para sujetar la cabeza, así como por la escasa capacitación de los

operarios. Por el otro lado, el 1,8% de los bovinos evaluados en la planta A,

recibieron el impacto en la articulación atlanto-occipital, que no garantizó la

insensibilización y produjo parálisis del animal, pero sin la pérdida de la

consciencia (Gregory 2008).

Respecto al intervalo de tiempo entre el primer disparo y la sangría se hallaron

tiempos superiores a 60 segundos en las dos plantas, lo cual favorece la

recuperación de la consciencia de los animales y el sufrimiento durante la sangría

(Appelt y Sperry 2007). De acuerdo con las observaciones de los autores en las

plantas evaluadas, los factores que pudieron contribuir a retrasar el inicio de la

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sangría fueron: falta de coordinación entre los operarios responsables de la

insensibilización y la sangría, dificultad de expulsar los animales del cajón de

insensibilización por fallas de diseño, pobre entrenamiento y capacitación del

personal, cansancio del personal por sobrecarga de funciones, especialmente en

la planta A, donde el personal participaba adicionalmente, en el sacrificio de

porcinos y en las labores de higiene y desinfección de las instalaciones. Estos

problemas han sido identificados también por otros investigadores (Gallo y col

2003b; Bourguet y col 2011; Miranda-de la Lama y col 2012). Grandin (2003)

encontró en auditorias de plantas comerciales en Estados Unidos, que las

principales causas de retorno de la consciencia en los bovinos insensibilizados

con pistolas de perno cautivo fueron: a) falta de mantenimiento del equipo de

acuerdo con las recomendaciones de los fabricantes, b) diseño no ergonómico de

la pistola, c) métodos inapropiados de inmovilización del ganado y d) uso de

cartuchos húmedos.

Estudios realizados en Chile y Francia recientemente, han descrito la utilización

excesiva del tábano eléctrico, los golpes con la puerta de guillotina para acelerar la

entrada de los bovinos al cajón de insensibilización y la utilización del tábano

eléctrico como sistema de sujeción del animal, para facilitar la colocación de la

pistola, lo cual refleja que son problemas generalizados y no sólo de las plantas

colombianas (Bourguet y col 2011; Muñoz y col 2012), haciendo evidente que la

insensibilización es una etapa que requiere de mayor investigación.

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INDICADORES FISIOLÓGICOS DE ESTRÉS

Los biomarcadores estudiados en el presente estudio, fueron moderados

indicadores de estrés del presacrificio comercial de novillos Brahman. Se observó

incremento de los valores sanguíneos de cortisol durante la sangría, por la

activación del eje hipotálamo-pituitaria-adrenal (HPA), como respuesta al estrés

agudo (Tadich y col, 2005). El incremento del cortisol no estuvo relacionado en

este estudio, con el tiempo de transporte, pero mostró una asociación significativa

(P˂0,05) con la estadía en la planta y la insensibilización efectiva. Los resultados

de los niveles de cortisol al momento de la sangría, reflejaron las condiciones

comerciales de manejo en las plantas de sacrificio (estadía en planta, conducción

e insensibilización) y no del transporte (Tadich y col 2005; Ekiz y col 2012),

teniendo en cuenta que la medición del cortisol depende del tiempo, porque tarda

entre 10 a 20 min para alcanzar valores máximos y tiene una vida media de 60

minutos (Buckham Sporer y col 2008). La elevación de la glucosa plasmática es

precedida por un incremento de las concentraciones séricas de cortisol (Kannan y

col, 2003). El cortisol secretado por la glándula adrenal juega un papel importante

en la gluconeogénesis, estimulando en el hígado la conversión de lípidos y

proteína en metabolitos intermedios, que son finalmente convertidos en glucosa

(Miranda-de la Lama y col 2012), aspecto que pudo explicar la hiperglicemia y el

incremento de la úrea plasmática; este último relacionado con un aumento del

catabolismo proteico y la formación de grupos amino que son transformados en

úrea por el hepatocito y eliminados posteriormente por la orina (Kaneko y col

1997).

El aumento del hematocrito o VGA pudo estar relacionado con la deshidratación

de los bovinos o por la contracción esplénica inducida por la actividad nerviosa

simpática o por la circulación de catecolaminas (Tadich y col 2005; Averós y col

2008). Los bovinos Brahman estudiados, no consumieron agua durante el

transporte, porque los vehículos colombianos no están dotados con sistemas de

suministro (Romero y col 2011); sin embargo, tuvieron la oportunidad de

rehidratarse durante la estadía en las plantas. Se ha reconocido que existen

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limitaciones de acceso al agua de bebida en las plantas de sacrificio, relacionadas

con el tamaño, la localización y la capacidad de los bebederos y que en

ocasiones, los bovinos no están familiarizados con los sistemas de suministro

instalados (Ferguson y Warner 2008). De otra parte, como las muestras de

sangre se obtuvieron durante la sangría, el incremento del hematocrito pudo estar

relacionado con el estrés agudo producido durante el izado y la incisión de los

grandes vasos, ya que una alta proporción de animales no tuvieron una

insensibilización efectiva y se presentaron signos de consciencia, aspecto que

pudo activar la respuesta neuronal del hipotálamo y la liberación de adrenalina

desde la medula adrenal y de noradrenalina de las fibras nerviosas del locus

coeruleus (LUC-NE) (Herskin y col 2004).

Tadich y col (2002), no encontraron diferencias significativas en la actividad

enzimática reductora del CK en muestras tomadas durante el presacrificio y

después de la insensibilización, lo que sugiere que los altos valores de CK

encontrados en este estudio, no estuvieron relacionados con el sacrificio

(insensibilización y sangría), sino con manejos previos durante el cargue,

transporte, descargue, estadía en planta y conducción, que afectaron la

permeabilidad de la membrana celular y favorecieron la liberación de CK hacia el

torrente sanguíneo (Ekiz y col 20012). La actividad de CK es considerada como

un indicador sensible de trauma, altos niveles de actividad física y fatiga muscular

(Yu y col 2007; Ekiz y col 2012).

INFLUENCIA DEL PRESACRIFICIO SOBRE EL METABOLISMO MUSCULAR POST-MORTEM

La prevalencia de corte oscuro en carne bovina ha sido variable en las diferentes

investigaciones, reportándose frecuencias entre 4 y 50% (Miranda-de la Lama y

col 2010, Leyva-García y col 2012). En el estudio, la prevalencia de carne con

pH≥ 5,8 (69%) fue superior a la reportada por otros investigadores en Chile

(Amtmann y col 2006, Strappini y col 2010), España (Mach y col 2008), Francia

(Mounier y col 2006) y Canadá (Warren y col 2010). El tiempo de transporte influyó

sobre la calidad de la carne obtenida en términos de pH24, aspecto que ha sido

estudiado por otros investigadores en bovinos de carne (Gallo y col 2003a; Earley

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y col 2012), porcinos (Guárdia y col 2011) y ovinos y caprinos (Miranda-de la

Lama, 2012). Existen muchos factores que generan estrés durante el transporte

de los bovinos hacia las plantas de sacrificio y por tanto, se espera que a mayor

tiempo de transporte, mayor presentación de carne con pH ≥5,8, aspecto que se

evidenció en el estudio. En Colombia, la comercialización de ganado de carne

tiene varios intermediarios y cada municipio cuenta con su infraestructura de

beneficio, siendo necesario transportar al ganado desde los centros productivos

hacia las plantas de sacrificio, por lo general por vías con diferentes características

y condiciones geográficas cambiantes (Estevez-Moreno y col 2009). Así mismo,

investigaciones realizadas en ganado cebú comercial en Colombia han encontrado

que el ganado con frecuencia tiene que hacer recorridos hasta de dos horas,

desde los potreros hasta los corrales de embarque en las granjas, así mismo, las

granjas no cuentan con embarcaderos adecuados, el transporte no es

especializado y durante éste, los animales no tienen acceso al consumo de agua,

los manejadores del ganado no tienen capacitación y adiestramiento en

comportamiento bovino y la interacción hombre-animal en ocasiones es negativa,

factores que en conjunto pudieron provocar un alto gasto de energía, que los haría

más susceptibles a presentar carnes de menor calidad (Romero y col 2011a,

Romero y col 2011b, Romero y col 2012).

Los bovinos transportados con densidades de carga en el camión entre 300 y 400

Kg/m2 estuvieron relacionados con la presencia de carne con pH ≥ 5,8, porque tal

vez, al contar con una mayor disponibilidad de espacio, los animales gastaron

mayor energía para mantener el equilibrio en el camión durante el viaje, lo cual

disminuye las reservas de glucógeno y la formación de ácido láctico en el músculo

(Dunne y col 2011). Las bajas densidades de carga, favorecieron también, la

mayor presentación de contusiones en canales bovinas en un estudio reciente en

Colombia (Romero y col 2011).

Existen otros factores como el tipo de alimentación, el estado nutricional, el

temperamento y la edad de los bovinos, que afectan la concentración de

glucógeno muscular (Mach y col 2008, Muchenje y col 2009ª). El ganado cebú

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evaluado fue mantenido bajos condiciones extensivas en pastoreo. Se ha descrito

que la alimentación basada en pasturas favorece la aparición de corte oscuro y los

animales manejados bajo condiciones extensivas son más susceptibles al estrés,

porque han tenido menor experiencia con el hombre y mayores oportunidades de

gasto energético debido a la relación actividad física/ejercicio (Murchenje y col

2009a,b, Probst y col 2012). De otro lado, existe una estrecha relación entre el

temperamento, el estrés y el comportamiento (Solano y col 2004). Se ha

reportado sin excepción que el ganado Bos indicus y sus cruces, son más

excitables que los bovinos Bos taurus y que el contacto con el hombre,

desencadena una respuesta de estrés agudo o crónico (Del Campo y col, 2010;

Hemsworth y col 2011). Así mismo, los animales jóvenes, como los evaluados en

el estudio, presentan más alta incidencia de corte oscuro, porque son

naturalmente de temperamento más excitable que los animales adultos

(Waritthitham y col 2010). Estos factores en conjunto pudieron favorecer la alta

prevalencia de carne con pH ≥ 5,8 en el estudio.

Al discriminar el análisis por el tipo de planta, los bovinos sacrificados en la planta

B tuvieron mayor riesgo de presentar corte oscuro (OR=4,5; P ˂0,01), a pesar que

correspondió a una planta con instalaciones modernas y autorizada para la

exportación de carne. Sin embargo, al evaluar los resultados de la interacción

hombre-animal durante la conducción, se encontraron diferencias significativas en

todas las interacciones negativas (P˂0,05), siendo superiores en este

establecimiento. El incremento de las reacciones de estrés previo al sacrificio,

conlleva a un aumento pronunciado de la glucólisis ante-mortem, dando por

resultado un incremento del pH muscular (Stockman y col 2012). Estas

reacciones pudieron potencializarse durante la insensibilización, porque la mayor

proporción de animales de la planta B no presentó una insensibilización efectiva y

el 55,7% de los bovinos fue sangrado después de dos minutos de haber sido

noqueado, aspecto que no garantiza la inconsciencia e incrementa el dolor, la

angustia y el estrés (Gregory y col 2007; Bourguet y col 2011).

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La insensibilización inefectiva fue un factor de riesgo para la presentación de

carne con pH ≥ 5,8 en el estudio (OR=1,6; P˂0,01); estos mismos hallazgos

fueron reportados por Önenç y Kaya (2004), al comparar bovinos insensibilizados

con pistolas de perno cautivo, sin insensibilizar e insensibilizados eléctricamente,

quienes confirmaron que la insensibilización efectiva en bovinos minimiza el

agotamiento del glucógeno antes del sacrificio y mejora los parámetros de calidad

de la carne, como la textura. Sin embargo, otros autores no encontraron

diferencias significativas en el pH último de ovinos y porcinos insensibilizados y

no insensibilizados, así como entre los métodos de noqueo utilizados (Vergara y

Gallego 2000; Channon y col 2002; Velarde y col 2003).

Pocos estudios han considerado el efecto del transporte sobre el color de la carne

en bovinos. Los resultados de color de las muestras del músculo Longissimus

dorsi medidos a las 24 h en el estudio, estuvieron en el rango de valores

considerados como de baja calidad (L*=31,7; a*=9,4; b*=8,0) (Maria y col 2003;

Ribeiro y col 2012). Los bajos valores de ángulo de matiz de las muestras

evaluadas, sugieren que el color de la carne tuvo una tendencia hacia la

coloración verde o azul (Page y col 2001; Tapp y col 2011). Aunque las

comparaciones entre los estudios son difíciles de interpretar, debido a que las

variables evaluadas no son idénticas y producen resultados variables, el tiempo de

transporte superior a 7 h afectó considerablemente el color de la carne, como ha

sido descrito por Gallo y col (2005) en Chile. Estos resultados no concuerdan con

los encontrados por Maria y col (2003a) en España en ganado Bos taurus, por

Warren y col (2010) en Canadá y por Page y col (2001) en Estados Unidos en

ganado Brahman. El pH tuvo un efecto sobre el desarrollo del color de la carne

fresca, porque los análisis usando parámetros colorimétricos discriminaron

perfectamente la presencia de carne DFD, como ha sido descrito por otros autores

(Abril y col 2001; Węglarz 2011).

La correlación negativa entre los valores colorimétricos y el pH24 encontrados en

este estudio están relacionados con las características del color en el tejido

muscular (Page y col 2001). El color en el tejido muscular se basa en la

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reflectancia de la luz en el agua libre y en la oxigenación de la mioglobina. Cuando

el músculo alcanza altos valores de pH, el estado físico de las proteínas puede

estar por encima de su punto isoeléctrico, uniéndose con más fuerza con el agua

y reduciendo el agua libre. Cuando las proteínas se unen al agua, las fibras

musculares se hinchan y decrece la distribución espacial de los miofilamentos

(Abril y col 2001). Por lo tanto, la carne presentará un color más oscuro, porque

hay menos agua libre para reflejar la luz. Además, a un pH muscular superior, las

enzimas que utilizan el oxígeno son más activas, dando por resultado menos

oxigenación de la mioglobina superficial y un color más oscuro (Page y col 2001;

Oliveira y col 2011).

4.5 CONCLUSIONES E IMPLICACIONES

El estrés presacrificio de ganado Brahman comercial afectó moderadamente el

estatus fisiológico de los bovinos evaluados, pero tuvo un impacto negativo en el

comportamiento y en la calidad de la carne, en términos de pH y color. A pesar de

que la ocurrencia de corte oscuro no puede ser eliminada y controlada

completamente, la alta prevalencia de carne con pH≥ 5,8 en el estudio, representa

un alto impacto económico en la industria cárnica bovina colombiana. El tiempo de

transporte, la densidad de carga del camión, el tipo de planta y la insensibilización

inefectiva, se identificaron como factores de riesgo, que incrementaron la

probabilidad de presentación de carne de menor calidad en el ganado evaluado.

Se hace necesario adoptar medidas de intervención encaminadas a fortalecer la

infraestructura del transporte terrestre de ganado, disminuir la duración del

transporte, implementar programas de entrenamiento y capacitación, mejorar la

eficiencia de la insensibilización; así como, la adopción de infraestructura

adecuada para evitar carnes con altos valores de pH. La falta de protocolos

estandarizados en Colombia para evaluar la calidad de la carne bovina, sugieren

la necesidad de realizar estudios complementarios a fin de establecer la línea

base que permita caracterizar la calidad de la carne fresca comercializada.

Los resultados de la evaluación conductual de los bovinos durante el descargue,

la conducción y la insensibilización, pueden ser usados para predecir el bienestar

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de los animales durante el presacrificio, teniendo como ventajas que no son

invasivos y que permiten la auditoría y el mejoramiento continuo. El estudio de los

cambios de comportamiento de los bovinos relacionados con las interacciones con

el hombre, se sugieren como una herramienta importante para identificar riesgos

operacionales en las plantas de sacrificio y para orientar la adopción de prácticas

de manejo más eficientes, contribuyendo de esta forma a garantizar estándares

mínimos de BA en el presacrificio.

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4.6 RESUMEN El objetivo del estudio fue evaluar el bienestar de novillos Brahman durante el

presacrificio, mediante indicadores fisiológicos, conductuales y de calidad de la

carne. Se evaluaron 522 novillos (429,9±29,3 kg de peso vivo y 36 m de edad)

manejados bajo condiciones comerciales en dos plantas de sacrificio colombianas.

Se calculó un índice compuesto por el tiempo de descargue y el comportamiento

de los bovinos en esta etapa. Así mismo, se registró la interacción hombre-animal

durante el descargue, la conducción y la insensibilización. Se tomaron muestras

de sangre durante la sangría para la medición de cortisol sérico, lactato, glucosa,

creatinquinasa (CK), proteína total, creatinina, ß-hidroxibutirato, úrea y recuentos

hematológicos. Se midió el pH24 y el color en el músculo Longissimus dorsi. El

estrés presacrificio afectó moderadamente el estatus fisiológico de los bovinos,

pero tuvo un impacto negativo en el comportamiento y en la calidad de la carne,

en términos de pH y color. El modelo de regresión logística mostró que la

densidad de carga de los camiones, el tiempo de transporte, la planta y la

insensibilización inefectiva estuvieron asociados con la prevalencia de carne DFD

(P˂ 0,01). La alta prevalencia de carne con pH≥ 5,8 en el estudio, representa un

importante impacto económico para la industria cárnica bovina colombiana.

Palabras clave: corte oscuro, estrés, presacrificio, insensibilización

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4.7 ABSTRACT

The goal of this study was to assess the welfare of Brahman steers during pre-

slaughter by physiological, behavioural and meat quality indicators. A total of 522

steers (live weight of 429.9±29.3 kg, and 36 months old) managed under

commercial conditions were evaluated at two Colombian slaughterhouses. A

composed score by the unloading time and the cattle behaviour was calculated in

this stage. The human-animal interaction during unloading, conduction and

stunning was recorded. Blood samples were taken during the exsanguination to

measure serum cortisol, lactate, glucose, creatine kinase (CK), total protein,

creatinine, ß-hidroxibutirate, urea, and hematological counts. pH24 and color were

measured on Longissimus dorsi muscle. The pre-slaughter stress moderately

affected physiological status of cattle, but had a negative impact on the behavior

and meat quality in terms of pH and color. The logistic regression model showed

that stocking density, transport time, the slaughterhouse, and inefficient stunning

were associated with the prevalence of DFD meat. The high prevalence of meat

with pH≥ 5.8 in the study, representing an important economic impact on the

Colombian bovine meat industry.

Key Words: dark cutting, stress, pre-slaughter, stunning.

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Figura 6. Características de la planta A: camión típico para el transporte de

ganado colombiano (a), corral de recepción de los novillos, sin techo (b), canal de

conducción en ángulo de 90° en concreto, que comunica los corrales de espera

con el área de insensibilización (c), cajón de insensibilización sin sistema de

sujeción de cabeza, ni cuerpo (d), tomas de muestras durante la sangría (e) y

medición del pH24 (f).

a b c

d e f

Page 75: BIOMARCADORES DE ESTRÉS Y BIENESTAR ANIMAL DURANTE EL ... · El bienestar animal se ha convertido en un tema de interés en el comercio internacional de la carne bovina, debido a

Figura 3. Características de la planta B: camión típico para el transporte de

ganado colombiano, con dos divisiones internas (a), corral para el descanso del

ganado (b), canal de conducción curvo en concreto que comunica los corrales de

espera con el área de insensibilización (c), cajón de insensibilización con sistema

de sujeción de cabeza (d), evaluación de la efectividad de la insensibilización (e) y

medición instrumental del color (f).

a b c

d e f

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Figura 8. Media (±EE) de los valores de pH24 del músculo Longissimus dorsi

después del sacrificio de bovinos, transportados comercialmente por más de 7 h.

5

5,2

5,4

5,6

5,8

6

6,2

6,4

7 8 9 10 11 12 13 14

pH

mu

scu

lar

Tiempo de transporte (h)

Planta A

Planta B

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Figura 9. Media (±EE) de los valores de luminosidad (L*), croma (C*), ángulo de

matiz (h*), índice de rojo (a*) e índice de amarillo (b*) del músculo Longissimus

dorsi después del sacrificio comercial de bovinos transportados por más de 7 h.

0

10

20

30

40

50

60

7 8 9 10 11 12 13

An

ális

is c

olo

rim

étr

ico

s (

un

ida

de

s)

Tiempo de transporte (h)

h*

L*

C*

a*

b*

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Tabla 3. Eventos conductuales indicadores de pérdida de bienestar animal y

puntuación respectiva.

Eventos conductuales Definición Puntuación

Caídas Alguna parte del animal, diferente a las pezuñas, toca el suelo

1

Reversar Cambio de dirección y caminar en sentido contrario del grupo

1

Agresividad Comportamientos agresivos entre animales 1

Montas El bovino monta a otro animal 2

Resistirse Se detiene la marcha por completo durante más de 10 segundos

1

Saltos El bovino salta 1

Resbalarse El animal pierde el equilibrio temporalmente, interfiriendo con su marcha natural

1

Micciones Orina y defecación 0,5

Vocalizaciones Intencionales (excluye jadeos, suspiros o gemidos). 0,5

Uso de tábano eléctrico 2

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Tabla 4. Información necesaria para calcular el índice de descargue del ganado,

basado en el tiempo y los eventos observados durante esta etapa.

Tiempo Eventos

Tiempo de descargue (minutos/animal)

Letra para la puntuación del tiempo

Eventos conductuales por animal

Puntuación de eventos

<0,5 T 0 1 0,5 – 1 R 0 – 0,5 2 1 – 1,5 A 0,5 – 1 3 1,5 – 2 N 1,0 – 1.5 4

>2 S 1,5 – 2 5 >2 6

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Tabla 5. Medias (±DE) de las condiciones de manejo y de los indicadores

fisiológicos de los bovinos evaluados en el estudio.

Variables Media (±DE) Planta A n=285

Planta B n=237

Media (±DE)

Tiempo de transporte (h) 9,4 (1,9) 9,9 (1,7)

8,8 (1,8)

Estadía en planta (h) 21,3 (1,3) 15,3 (1,3)

16,6 (1,5)

Densidad de carga (Kg/m2) 336,4 (20,3) 330,7 (20,1) 343,3 (20,5)

Espacio en corral (animal/m

2)

0,41 (0,13) 0,33 (0,09) 0,5 (0,11)

Peso (Kg) 429,3 (21,3) 439,7 (20,5) 418,2 (22,3)

Indicadores fisiológicos

Cortisol (µg/dl) 5,3 (2,17) 5,8 (2,2)a

4,7 (1,9)b

VGA (%) 47,4 (5,2) 46,2 (5,6) 48,6 (4,7) Glucosa (g/L) 6,93 (2,1) 7,0 (2,3) 6,8 (1,8) Proteína (g/L) 80,6 (12,1) 78,2 (14,5) 83,5 (7,6) Albúmina (g/L) 35,3 (4,1) 36,5 (4,1) 33,7 (5,2) Creatinina (mmol/L) 156,6 (25,7) 168,2 (24,4)

a 142,6 (19,4)

b

Lactato (mmol/L) 5,38 (2,1) 5,5 (2,4) 5,2 (1,8) Úrea (mmol/L) 8,0 (2,9) 7,7 (3,6)

a 8,4 (1,8)

b

CK (U/L) 900,1 (1.035) 970,6 (841,5)a

815,3 (937,1)b

βHB ((mmol/L) 0,38 (0,2) 0,36 (0,2)

0,39 (0,15)

Conteo de leucocitos (miles/µl)

11.191 (4.043) 10.801 (4.528) 11.658 (3.317)

N/L 0,73 (1,1) 0,77 (1,4) 0,7 (0,3)

a-b: Variables significativamente diferentes (P ˂ 0,05) en la misma fila.

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Tabla 6. Eventos conductuales por lote (Planta A= 53 lotes, 771 novillos; Planta

B= 20 lotes, 510 novillos) y la interacción hombre-animal (Media±EE) observados

durante el descargue y la conducción de los bovinos en las plantas evaluadas.

Descargue Conducción Eventos

conductuales Planta A Planta B Planta A Planta B

Promedio ± EE Promedio ± EE

Deslizarse 3,0 0,4a

7,1 0,6b

4,33 ± 0,4a

13,8 ± 2,3b

Caídas 0,7 0,2

0,7 0,2

2,4 ± 0,4a

8,8 ± 1,6b

Reversar 1,1 0,8

0,7 0,3

26,3 ± 2,2 25,5 ± 4,0

Vocalizaciones 0,5 0,2

0,5 0,1

10,0 ± 1,08

a 19,7 ± 4,1

b

Resistirse 0,05 0,04

0,06 0,04

1,2 ± 0,4

1,0 ± 0,4

Saltar 0,84 0,2

0,52 0,2

5,3 ± 0,6

4,5 ± 1,1

Montar 0,03 0,03

0,07 0,03

0,9 ± 0,2

0,7 ± 0,2

Agresividad 0,2 0,1

0,1 0,08

- -

Interacción Hombre-Animal

Comprimir 0 0 0 0 4,4 ± 0,5a

18,2 ± 3,5b

Golpear 5,4 2,1a

10,3 2,4b

0,5 ± 0,3a

27,1 ± 11,1

b

Conductas abusivas

3,6 1,5

5,8 1,1

3,7 ± 0,7a 9,7 ± 3,4

b

Ondear 1,1 0,5

0,6 0,2

2,6 ± 0,5a 5,4 ± 1,3

b

Silbar y hablar 35,0 5,2

35,3 2,8

57,4 ± 4,1a 68,1 ± 5,3

b

Picana 0 0 0 0 66,9 ± 4,1a

152,4 ± 25,1

b

Sonidos artificiales

7,3 1,3a

0,7 0,3b

0,4 ± 0,1a

20,5 ± 8,5b

Cortar la piel y torcer cola

5,8 1,4

3,6 1,5

- -

a-b: Variables significativamente diferentes (P ˂ 0,05) en la misma fila.

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Tabla 7. Evaluación de los indicadores de inconsciencia y el comportamiento

animal (expresado en proporciones) durante la insensibilización y la sangría

(n=522 bovinos). Se presentan sólo las variables influenciadas por el tipo de

planta.

Eventos Planta A n=285

Planta B n= 237

Retraso en la insensibilización (seg)* 30,7±1,0a 18,3±1,0

b

Disparo correcto 58a 28b

% bovinos insensibilizados en perdieron la posición tras el primer impacto

89,5a 100b

Intervalo Disparo – sangría (seg) ˂60 4,8a 1,0b

60 – 120 74,4a 43,2b

>121 20,8a 55,7b

Reflejo palpebral (si) 2,5a 0b

Respiración rítmica (si) 33,0a 67,0b

Intentos de incorporarse (si) 1,41a 0a

Cajón de insensibilización Deslizarse 17,6

a 31,7

b

Reversar 17,5a

31,6b

Caídas 7,7

8,8

Vocalizaciones 11,2

9,7

Saltar 9,5

9,3

Uso de picana 41,8a

0b

Golpear con la puerta 68,7a

34,6b

* Los datos son presentados como media (desviación estándar). a-b: Variables significativamente diferentes (P ˂ 0,05) en la misma fila.

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Tabla 8. Resultados de los modelos de regresión lineal múltiple para los valores transformados de cortisol,

hematocrito (VGA), ß-hidroxibutirato (ß-HB), creatinina y conteo de leucocitos medidos en los novillos.

Variables Cortisol VGA Creatinina ß-HB Leucocitos R

2 =0,14 R

2 =0,11 R

2 =0,21 R

2 =0,12 R

2 =0,13

ß Error P ß Error P ß Error P ß Error P ß Error P

Planta

-0,4 0,05 ˂0,01 - - - -0,2 0,02 ˂0,01 0,44 0,05 ˂0,01 0 0 0

Tiempo de transporte (h)

0 0 0 -0,01 0,002 ˂0,01 -0,01 0,004 ˂0,01 0,04 0,011 ˂0,01 -0,06 0,009 0,02

Densidad en el camión (kg/m

2)

0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0

Estadía en planta (h)

0,009 0,003 ˂0,01 0,004 0,0006 ˂0,01 0,004 0,002 ˂0,01 0,03 0,004 ˂0,01 0 0 0

Espacio en el corral animal/m

2

0 0 0 0 0 0 0,20 0,001 ˂0,01 0 0 0 0,52 0,13 ˂0,01

pH canal

0,15 0,07 0,04 -0,03 0,017 0,04 0 0 0 0 0 0 -0,15 0,06 0,02

Insensibilización efectiva

0,003 0,0007 ˂0,01 -0,02 0,01 0,03 0 0 0 0 0 0 -0,26 0,1 0,02

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Tabla 9. Factores de riesgo para la presencia de carnes con pH≥ 5,8 en

ganado cebú colombiano evaluados por el análisis de regresión logístico

multivariado (n=522).

Variable

Categoría OR*

ES Valor P

Planta A 1,0 Ref.

B 4,5 0,9 ˂0,01

Tiempo de transporte (h)

7 - 10 1,0 Ref.

10,1 - 12 6,6 2,8 ˂0,01

12,1 - 15 7,0 3,7 ˂0,01

Densidad de carga en el camión (kg/m

2)

˂ 300 1,0 Ref.

300 – 350 0,14 0,1 ˂0,01

351 – 400 0,12 0,9 ˂0,01

Insensibilización Efectiva 1,0 Ref.

No efectiva 1,6 0,4 ˂0,01

*OR: Razones de dispariedad. Ref: Categoría considerada como referencia.

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5. FACTORES DE RIESGO PARA LA PRESENTACIÓN DE

CONTUSIONES Y CARNE DE CORTE OSCURO EN GANADO

BOVINO COLOMBIANO TRANSPORTADO POR CORTO TIEMPO

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5.1 INTRODUCCIÓN

El presacrificio es un término que incluye las actividades y prácticas aplicadas a

los bovinos en el período comprendido entre la movilización y el transporte

desde la granja, hasta su ingreso al cajón de insensibilización en la planta de

sacrificio (Ferguson y Warner 2008). Existen diversas investigaciones que

reportan la asociación entre el manejo presacrificio, la presencia de

contusiones en las canales y la aparición de corte oscuro (Huertas y col 2010,

Strappini y col 2010; Strappini y col 2012). Durante el presacrificio los bovinos

son expuestos a varias condiciones asociadas a manejo brusco, impacto

violento contra estructuras agudas de camiones e instalaciones y ruptura de la

estructura social, encuentros antagónicos entre los animales, así como altas

densidades de carga durante el transporte, malas prácticas de conducción,

condiciones geográficas adversas, entre otros factores, los cuales en conjunto

favorecen la aparición de contusiones, producen estrés y agotamiento de las

reservas de glucógeno muscular, afectando el bienestar animal (BA) y la

calidad de la carne (Weeks y col 2002; Minka y Ayo 2007).

Las contusiones son alteraciones en la canal que evidencian un inadecuado

manejo de los bovinos o deficientes instalaciones en el presacrificio, siendo

utilizadas como un indicador de la pérdida de BA (Weeks y col 2002; Gallo y

Tadich 2005). El estudio de las características de las contusiones mediante el

uso de protocolos estandarizados que registren la localización de la lesión en la

canal, forma, severidad, número, color y tamaño, pueden ayudar a relacionar la

causa y fuente de la contusión durante el presacrificio (Strappini y col 2009,

Strappini y col 2012). La causa de la contusión puede estar relacionada con el

grado de daño en la canal, siendo posible sugerir los eventos traumáticos a los

cuales fueron sometidos los animales vivos. Por ejemplo, una canal con

contusiones extensas y profundas en diferentes regiones anatómicas, sugieren

que el animal fue pisoteado en el camión (Grandin 2000). La forma permite

deducir con qué objeto se pudo haber ocasionado la contusión, es el caso de la

contusión puntilleada, en donde se observan lesiones individuales agrupadas,

sugieren que la presión debió haber sido aplicada en varios puntos, como las

producidas por el uso de elementos punzantes durante el arreo de los bovinos,

como palos o los electrodos del tábano o picana eléctrica (Gallo 2009).

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El efecto del estrés sobre la reducción de glucógeno muscular durante el

presacrificio ha sido bien documentado, al igual que su asociación directa con

la presentación de carne de corte “oscuro” o carne DFD (Dark, firm, dry), que

se presenta especialmente en bovinos y se observa en las primeras horas

después del sacrificio (Ferguson y Warner 2008). El estrés agota las reservas

de glucógeno muscular y disminuye la formación de ácido láctico, motivo por el

cual el pH después del sacrificio permanece alto (≥5.8) (Immonen 2000, Mach y

col 2008). En bovinos los valores bajos de glucógeno durante el presacrificio

se asocian a factores físicos y agentes estresantes (Immonen 2000), dentro de

los cuales se reportan: el tiempo de transporte (Edge y Barnett 2009), tiempo

de espera en la planta (Minka y Ayo 2009), cambios en la estructura social

(Edge y Barnett 2009), actividad física y fatiga, traumatismos (Gupta et al.

2007), entre otros; así como factores inherentes al individuo como género,

raza, peso y la alimentación (Ferguson y Warner 2008). La relación entre la

presencia de contusiones y la presencia de carne DFD en canales bovinas no

ha sido ampliamente estudiada; sin embargo, es relevante considerarla, así

como las pérdidas económicas relacionadas con su aparición (Strappini y col

2010).

Un estudio reciente en Colombia demostró que el transporte de bovinos no es

una actividad especializada y que durante el presacrificio los animales son

sometidos a manejos inapropiados que afectan el BA (Romero y col 2011). El

objetivo del presente trabajo consistió en identificar factores de riesgo de

contusiones relacionados con el transporte y manejo presacrificio, describir las

principales características de los contusiones y la aparición de corte oscuro en

la carne, en una planta comercial certificada en buenas prácticas y en el

Sistema de Análisis de Riesgos y Control en los Puntos Críticos HACCP (por

sus siglas en inglés), localizada en la principal zona ganadera de Colombia.

5.2 MATERIAL Y MÉTODOS

El estudio se realizó durante los meses de julio, agosto y septiembre de 2011

en una planta de sacrificio de Colombia (Sur América), localizada en el

departamento de Córdoba. Esta planta como política gerencial ha

implementado prácticas de BA en el manejo de los animales y en su

infraestructura. Durante el estudio se evaluaron 1.179 bovinos cebú comercial

(Bos indicus), manejados bajo condiciones extensivas en pasturas naturales.

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RECOLECCIÓN DE LA INFORMACIÓN

Los bovinos fueron embarcados, desembarcados y transportados bajo

condiciones comerciales y alojados en la planta de sacrificio en corrales

individuales por lotes de 14 o 15 animales, con una densidad promedio de 2,5

m2/animal (Decreto 1500 de 2007), sometidos a ayuno, con disponibilidad de

agua potable ad libitum. Al arribo se registró el tiempo de transporte (h),

densidad de carga (kg/m2), procedencia, paradas durante el viaje (h) y tiempo

de estadía en planta (tiempo en horas, desde la llegada a la planta hasta el

ingreso al cajón de insensibilización). Los animales fueron conducidos por

personal de la planta a través de corredores curvos hasta el cajón de

insensibilización. La insensibilización se realizó con una pistola de perno

cautivo no penetrante, inmediatamente fueron izados y sangrados.

Los animales se clasificaron como novillos (machos castrados entre 1 a 3

años), toretes (machos enteros entre 1 a 3 años), toros (machos usados como

reproductores mayores de 3 años), novillas (hembras de carne entre 1 a 3

años) y vacas (hembras de descarte mayores de 3 años).

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PROTOCOLO DE EVALUACIÓN DE CONTUSIONES

Se consideraron contusiones las lesiones traumáticas con ruptura de los vasos

sanguíneos, con acumulación de sangre y suero; sin discontinuidad cutánea

(Strappini y col 2010). En este estudio el término canal hace referencia al

cuerpo de un bovino después de haber sido sacrificado, degollado, desollado,

eviscerado quedando sólo la estructura ósea y la carne adherida a la misma sin

extremidades (Decreto 1500 de 2007). El protocolo de evaluación post-mortem

de las contusiones se basó en el sistema de evaluación australiano (ACBSS),

la norma oficial chilena sobre canales de bovinos y otros criterios que

permitieron registrar la totalidad de las contusiones, que se clasificaron

mediante inspección visual de acuerdo con la localización, severidad, tamaño y

forma, de acuerdo al protocolo descrito por Gallo et al. (2001), Strappini y col

(2009a) y Strappini y col (2012). Para cada canal se registró inicialmente la

presencia o ausencia de las contusiones. Cuando las contusiones estaban

presentes, se anotó el número total por canal y por región anatómica afectada.

A continuación, se caracterizó cada contusión de acuerdo con el sitio

anatómico, severidad, forma y tamaño, mediciones efectuadas en las dos

medias canales.

Severidad: se clasificó en tres categorías de acuerdo al daño o destrucción de

los tejidos: Grado 1- tejido subcutáneo, Grado 2- tejido subcutáneo y muscular,

Grado 3- tejido muscular y óseo (Gallo y col 2001).

Localización: Se tuvieron en cuenta ocho regiones anatómicas (figura 10)

(Strappini 2009a):

1. Cuarto trasero: cuarto trasero distal, músculos glúteo biceps, glúteo medio y

semitendinoso.

2. Abdomen: músculos oblicuos abdominales externos y transversos

abdominales

3. Costilla: músculos intercostales externos, transversos torácicos.

4. Cuarto delantero: Músculos trapecio, infra espinoso, supra espinoso,

deltoides y dorsal ancho.

5. Lomo: la columna vertebral y los músculos adyacentes desde el cuello, hasta

el extremo de la cola.

6. Tuberosidad isquiática: inserción de los músculos semitendinosos y glúteo

biceps

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7. Tuberosidad coxal: inserción de los músculos glúteos profundos y tensores

de la fascia lata.

8. Cuando una contusión abarcó más de una de las regiones anteriormente

descritas (Figura 10).

Tamaño: la extensión fue determinada según el diámetro aproximado del área

afectada: pequeña: ≥ 2 and ≤ 8 cm; mediana: > 8 and ≤ 16 cm; grande: > 16 cm

(Strappini et al. 2009a).

Forma: se clasificaron de acuerdo con las pautas descritas por Strappini y col

(2012) en circular, lineal, línea de tren, punteada e irregular (Figura 11).

Irregular (i) sin forma definida y bordes desiguales

Ovalada (o) oval o redondeada

Lineal (l) en línea, más larga que ancha

Línea de tren (t) dos contusiones lineales paralelas, separadas por un

área sin daño (más clara)

Puntillar (p) contusión circunscrita puntiforme

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MEDICIÓN DEL PH24

Se efectuó la medición del pH24 en el músculo Longissimus dorsi (LD) entre la

14ª y 15ª costilla, en el lado derecho a 4 cm de profundidad, con un

potenciómetro de punzón (IQ150 pH/Mv/medidor de temperatura; IQ Scientific

Intruments). El equipo fue calibrado cada cinco muestras, usando dos

soluciones estándar de pH 4 y 7; se efectúo lavado con agua destilada entre

cada medición. Las canales con pH24 < 5,8 fueron clasificadas como

“normales”; aquellas con pH24 ≥ 5,8 como corte oscuro (DFD) (Gallo y col

2001).

ANÁLISIS ESTADÍSTICO

Se realizó un análisis de regresión logística multivariada que asumió como

variable de respuesta binomial la presencia/ausencia de lesiones usando el

programa Stata Versión 12.0 (College Station, Texas, EU). Las contusiones

(grado 1 y 2) fueron fusionadas en una sola categoría, sin considerar su

extensión. El modelo general fue:

Donde Y es la probabilidad de presencia de contusiones, β0 el intercepto, βi los

coeficientes de correlación y Xi el vector de las variables independientes

incluidas en el análisis. Adicionalmente, otro modelo fue llevado a cabo con los

registros que incluían la información sobre el pH, considerando dos categorías:

canales con pH ˂5,8 y canales con pH≥ 5,8. Se seleccionó el mejor modelo y

se ejecutó con las variables predictoras seleccionadas, para estimar sus

efectos y grado de significancia e identificar las variables de confusión, por

medio de la comparación de las estimaciones del nuevo modelo, con las

estimaciones del modelo anterior. Finalmente, se realizó la prueba de bondad

de ajuste del modelo por medio del estadístico de Hosmer y Lemeshow. Los

efectos de las variables predictoras sobre la aparición de contusiones se

expresaron por medio de las razones de disparidad (OR) y sus respectivos

intervalos de confianza del 95 %.

5.3 RESULTADOS

MANEJO DE LOS BOVINOS

El 74,4% (877/1.179) de los bovinos evaluados correspondían a machos y el

25,6% (302/1.179) restante a hembras, procedentes de 23 fincas (n=1.006;

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85,3%) y 4 ferias ganaderas (n=173; 14,7%), localizadas en doce municipios de

los departamentos de Córdoba y Sucre (Norte de Colombia). El 38,8% (n=458)

fue clasificado como toretes, el 34% (n=400) como novillos, el 20,3% (n=239)

como vacas, el 5,3% (n=63) novillas y el 1,6% (n=19) como toros. El tiempo de

transporte promedio fue 1,97±0,04 h. La densidad de carga estuvo acorde con

los requerimientos de la legislación sanitaria vigente (87,2%), que contempla

como densidades aceptables entre 344 y 400 kg/m2, de acuerdo con el peso de

los bovinos (ICA 2007). El tiempo de estadía en planta superó las 12 horas

(18.9±0,13 h) (MPS 2007b). La información detallada sobre las condiciones

presacrificio evaluadas se presentan en la tabla 10.

PREVALENCIA Y CARACTERÍSTICAS DE LAS CONTUSIONES

El 37,5% (442/1.179) de las canales presentó contusiones, con un promedio de

2,71 contusiones/canal (1.198/442). El 85,3% (1.006/1.179) de los bovinos

provenían de la finca directamente, mientras que el 14,7% restante (173/1.179)

de feria. No se observaron diferencias significativas en la prevalencia de

contusiones de acuerdo con la procedencia de los bovinos, siendo 38,6% para

los primeros (388/1.006) y 31,2% (54/173) para los bovinos procedentes de

feria (P> 0,05). Se observaron diferencias significativas (P ˂ 0,01) en la

proporción de contusiones entre machos (41,2%) y hembras (26,5%).

Predominaron las lesiones de tamaño pequeño, localizadas principalmente en

las tuberosidades isquiática y coxal, afectando en mayor proporción el tejido

muscular (Contusión grado 2). Las formas de las contusiones frecuentes

fueron la oval e irregular principalmente (tabla 11).

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FACTORES DE RIESGO

La variable sexo no fue evaluada en el análisis multivariado debido a la

colinearidad con la variable tipo de animal. Las estimaciones de las razones de

disparidad (OR) con sus respectivos intervalos de confianza del 95%, indican

que la densidad de carga del camión, las paradas durante el transporte y el

tiempo de estadía en planta, incrementaron el riesgo de contusiones en las

canales en el presente estudio (tabla 12). A pesar que las densidades de carga

en el camión se ajustaron a la legislación colombiana, éstas incrementaron el

riesgo de contusiones en los bovinos evaluados (P ˂ 0,01). La estadía en

planta durante 18 a 24 horas incrementó la prevalencia de contusiones en 2,1

veces, al compararse con estadías entre la 12 y 18 h.

APARICIÓN DE CORTE OSCURO

El pH24 se registró a 1.176 canales. El 37,3% (440/1.176) de las canales

presentó un pH ≥ 5,8. Las canales de los bovinos procedentes de feria

presentaron un pH mayor a las procedentes de finca (5,8 ± 0,4 Vs 5,7 ± 0,04,

respectivamente; P=0,02). El tipo de bovino tuvo un efecto significativo sobre

el pH (P ˂0,01, figura 13). Las novillas (OR=2,5), los toretes (OR=2,5), toros

(OR=1,2) y vacas (OR=2,4), mostraron mayor riesgo de presentar corte oscuro

que los novillos. Las paradas de los vehículos durante el transporte de los

bovinos presentaron una relación directamente proporcional con la presencia

de corte oscuro (P ˂0,01). La mayor densidad de carga de los bovinos en el

camión incrementó el riesgo de aparición de corte oscuro (OR> 1,0, P ˂0,01)

(tabla 13).

5.4 DISCUSIÓN

Colombia inició un proceso de modernización de la legislación sanitaria con un

enfoque de la granja a la mesa, integrando los lineamientos de BA en la

producción primaria y el presacrificio de bovinos y bufalinos (Romero y col

2011b). Así mismo, el Consejo Nacional de la Cadena Cárnica Bovina

Colombiana (2010) ha divulgado el Acuerdo de competitividad para los años

2010-2019, considerando las buenas prácticas de BA como imperativas para

obtener materias primas inocuas y de excelente calidad. A pesar de que la

legislación colombiana ha definido requerimientos de BA durante el

presacrificio, su nivel de implementación es bajo, la capacitación y

entrenamiento del personal es pobre, el transporte no es especializado y el

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diseño de las plantas de beneficio no tiene en cuenta criterios de

comportamiento animal, entre otros aspectos (Romero y col 2011a). El

presente estudio es el primer reporte sobre las características del presacrificio y

su relación con la prevalencia de contusiones y la calidad de la canal en

bovinos sometidos a transporte de corta duración en Colombia. Teniendo en

cuenta que la planta evaluada es la primera certificada por cumplir con la

normatividad actualizada, ha implementado principios de BA durante el

presacrificio y es la más moderna de Colombia, los resultados pueden proveer

una primera aproximación de los principales problemas que debe afrontar la

industria para estar acorde con los requerimientos legales y de exportación.

PREVALENCIA Y CARACTERÍSTICAS DE LAS CONTUSIONES

Las contusiones pueden ser un indicador de problemas de bienestar animal

durante el transporte terrestre (Miranda-de la Lama y col 2011a), accidentes de

tránsito (Miranda-de la Lama et al. 2011b), comercialización del ganado

(Weeks y col 2002), cargue y descargue (Minka y Ayo 2007) y la

insensibilización (Chandra y Das 2001). La prevalencia de contusiones del

37,5% de las canales evaluadas en el presente estudio, puede ser considerada

moderada, teniendo en cuenta que los bovinos estudiados pertenecen a cruces

comerciales de cebú manejados bajo condiciones extensivas, criados con

escaso contacto con el hombre, caracterizados por tener temperamento más

excitable y responder agresivamente ante novedades durante el presacrificio,

siendo más susceptibles a las lesiones y contusiones (Solano y col 2004).

Estudios realizados en Brasil en bovinos Bos indicus (Raza Nelore) manejados

bajo condiciones comerciales, encontró prevalencias de contusiones más altas

(84,5 % y 94,3 %); sin embargo, en estos casos los bovinos fueron sometidos a

tiempos de transporte superiores (> 12 h), a condiciones de transporte fluvial y

se observaron un menor número de canales (n=88 y 209, respectivamente)

(Andrade y col 2008; Andrade y col 2009). Otras investigaciones realizadas en

bovinos Bos taurus en Chile, Uruguay y México han encontrado prevalencias

de contusiones más altas, sin embargo, coinciden en demostrar su importancia

económica y el impacto en el BA (Strappini y col 2010; Huertas y col 2010;

Miranda-de la Lama y col 2011b). Los resultados encontrados en el presente

estudio podrían deberse a varios factores: 1) Implementación de principios de

BA en la planta evaluada. Se ha descrito que la capacitación y entrenamiento

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del personal, el compromiso gerencial y la auditoria de las prácticas de manejo,

son factores que inciden positivamente en el BA y disminuyen las pérdidas

económicas en las plantas de beneficio; políticas que la planta ha adoptado

(Gallo y col 2003; Grandin 2006; Paranhos da Costa y col 2012). 2) Diseño de

instalaciones acorde con principios de comportamiento bovino. La planta

contaba con rampas apropiadas para el descargue, canales de conducción

sólidos y curvos, pisos antideslizantes, corrales de recepción individuales por

lote que evitaban encuentros antagónicos y cajón de insensibilización con

sujeción de cabeza y cuerpo, factores que pudieron minimizan el riesgo de

contusiones y estrés en los bovinos (Minka y Ayo 2007; Miranda-de la Lama

2010, Romero y col 2011). 3) Interacción hombre-animal positiva. La planta

sólo utilizaba el tábano o picana eléctrica en los casos que realmente lo

requirieran y aplicado en partes poco sensibles, evitando riesgos

ocupacionales, miedo, estrés, caídas, resbalones y vocalizaciones del ganado

y probablemente disminuyendo el riesgo de contusiones en las canales

(Manteuffel y col 2004; Warner y col 2007).

La comercialización del ganado en píe en Colombia se realiza bajo dos

modalidades: adquirido directamente en la finca o a través de ferias,

clasificadas como subastas o mercados ganaderos. La diferencia entre las

subastas y los mercados ganaderos consiste en que las subastas cuentan con

instalaciones más apropiadas para el manejo de los bovinos y en éstas, se

comercializan los animales de mayor valor comercial. Sin embargo, en estos

dos tipos de mercados, los bovinos son sometidos a mayores manejos,

transportes adicionales, condiciones climáticas adversas, porque los corrales

no son cubiertos e imposibilidad de descansar, entre otros aspectos. De

acuerdo con estas condiciones, en el presente estudio se esperaría que los

animales provenientes de las ferias hubiesen tenido un mayor riesgo de

contusiones, aspecto que ha sido demostrado en otras investigaciones (Weeks

y col 2002; Strappini y col 2010). Se requiere por tanto, conducir un estudio

más detallado, que considere un tamaño de muestra mayor, para establecer el

impacto de la comercialización del ganado en ferias ganaderas sobre el

bienestar animal, utilizando indicadores fisiológicos, físicos y conductuales.

Los machos presentaron mayor proporción de contusiones que las hembras

(41,2% vs 26,5%), estos hallazgos no son concordantes con estudios

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realizados en Chile (Strappini y col 2010; Strappini y col 2012). Sin embargo

teniendo en cuenta que la mayor proporción de machos que sufrieron

contusiones estaban conformados por toretes y toros (54,1%), es decir por

animales enteros, esta característica los hace más reactivos y susceptibles de

participar en encuentros antagónicos con otros machos, en especial cuando se

rompe la estructura social, siendo recomendable mantener los mismos grupos

conformados durante la ceba, hasta la transferencia a la planta de sacrificio

(Mounier y col 2005). Es de resaltar que las contusiones en los bovinos

provenientes de finca y feria, se localizaron principalmente en las

tuberosidades isquiática y coxal. La localización en las tuberosidades puede

ser atribuida a golpes contra estructuras como esquinas, salientes y carrocerías

de los vehículos en malas condiciones de mantenimiento, lo cual es

congruente, teniendo en cuenta que una investigación en Colombia demostró

que los vehículos no son especializados para el transporte de animales, los

conductores no están acreditados en el manejo de bovinos y durante el viaje

cuando observan animales caídos, procuran levantarlos usando métodos

cruentos (Romero y col 2011b). De otra parte, la severidad de las lesiones que

las clasificó como grado 2, se puede deber al hecho que esta región anatómica

se caracteriza por tener menor cobertura grasa, grosor y densidad del tejido

(Strappini y col 2009b). Respecto a la forma oval o circular, ésta predominó en

las tuberosidades coxal e isquiática, debido a la conformación de los músculos

en estas áreas. Las contusiones lineales y puntillares se localizaron

principalmente en el lomo, pero su presencia fue baja en la investigación, lo

cual indica que el uso de palos y picana eléctrica para la movilización de los

bovinos es poco usual en el área de estudio, debido a que es un requisito

establecido por la planta a sus proveedores y usuarios, resultados que son

concordantes con el trabajo realizado por Strappini y col (2012) en Chile.

Desafortunadamente, la evaluación de las contusiones irregulares es más

compleja y se requieren investigaciones adicionales para dilucidar su origen e

interpretación.

FACTORES DE RIESGO DE CONTUSIONES

Varios estudios realizados en Uruguay, Chile y México, han sugerido que el

tiempo de transporte, la densidad de carga en el camión, la procedencia de los

animales (finca o feria) y el tiempo de permanencia en planta, son factores que

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aumentan el riesgo de contusiones en las canales bovinas (Huertas y col 2010;

Strappini y col 2010; Miranda de- la Lama y col 2011b; Strappini y col 2012).

Con relación a los tiempos de transporte, estos fueron cortos (1,97±0,04 h) y

no aumentaron el riesgo de contusiones (OR=0,94; P= 0,4). Se atribuye un

aumento en la presencia de las contusiones y en la pérdida de peso vivo a

viajes superiores a 12, 24 y 36 h (Gallo y col 2001; Gallo y col 2003). Sin

embargo, en un estudio realizado en Uruguay en 12 plantas de sacrificio de

exportación, se encontró que el 60% del ganado presentó por lo menos una

lesión, a pesar de que los animales fueron conducidos por tiempos de

transporte y distancia cortos (Huertas y col 2010). Similares resultados fueron

reportados en México, en donde se encontró una prevalencia del 92% de

contusiones, en animales cuyo tiempo de transporte no superó una hora y los

vehículos usados fueron diseñados para el transporte de ganado (Miranda-de

la Lama y col 2011b). Por lo anterior, es importante considerar que la presencia

de contusiones es un problema multicausal, participando factores de riesgo

relacionados con las prácticas de manejo deficientes, la falta de capacitación y

entrenamiento del personal, instalaciones mal diseñadas, la velocidad de la

línea, las condiciones propias del transporte, estado de las vías, la ruptura de

los grupos sociales, factores del animal, experiencias de manejo previas, entre

otros factores (Strappini y col 2009; Marahrens y col 2011; Miranda de- la Lama

y col 2011b).

A pesar de que las densidades de carga de los camiones cumplieron con los

requerimientos de la legislación sanitaria colombiana (ICA 2007), esta variable

aumentó el riesgo de contusiones (P ˂0,01). En Colombia, el transporte de los

bovinos se realiza en vehículos de dos ejes con chasis rígido (combinado con

madera y acero), provisto de ventilación pasiva, techo con carpa de lona y con

una capacidad para 10 ton (con aforo de 14 o 15 bovinos). Los bovinos son

separados en dos grupos, por una estaca generalmente de madera o metálica,

que divide el camión en dos compartimentos (Romero y col 2011a). Durante la

investigación se observó con frecuencia, que los animales localizados en el

compartimiento posterior del camión presentaban mayor susceptibilidad de

caídas durante el viaje, posiblemente debido al exceso de espacio de los

animales durante el transporte, favoreciendo la pérdida de equilibrio, las

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caídas, los golpes contra la carrocería y los pisotones (Weeks y col 2002). A

diferencia, estudios efectuados en Chile, en donde se manejan mayores

densidades de carga (sobre 450 kg/m2), han sugerido que a mayores

densidades de carga, mayor número de contusiones (Gallo y col 2003), lo cual

nos permite inferir que la presencia de las lesiones están relacionadas tanto

con altas, como con bajas densidades, siendo conveniente, manejar

densidades promedio de acuerdo al peso de los bovinos a transportar, como

las sugeridas por la legislación colombiana (ICA 2007).

En Colombia es usual que los bovinos sean sometidos a largos tiempos de

espera en las plantas (Romero y col 2011a). En el estudio, los tiempos

promedio de permanencia en planta fueron altos (18,9±0,13), los bovinos no

fueron reagrupados y se alojaron en instalaciones apropiadas para un

adecuado descanso, sin embargo esta variable fue identificada como un factor

de riesgo de contusiones. En las plantas de beneficio colombianas es común el

reagrupamiento de los bovinos durante la permanencia en corrales, lo cual

incrementa los encuentros antagónicos entre los animales y por tanto la

probabilidad de contusiones, motivo por el cual se considera conveniente

adelantar estudios complementarios que evalúen indicadores conductuales y

fisiológicos bajo diferentes condiciones de manejo presacrificio. Las paradas

de los camiones durante el viaje fueron consideradas factor de riesgo para la

presencia de contusiones en el estudio. En Colombia, los conductores

acostumbran hacer paradas durante el viaje, tanto en tramos largos como

cortos, con el fin de consumir alimentos y revisar el ganado (Romero y col

2011a). Sin embargo, como la capacitación en términos de manejo y bienestar

animal es baja, se desconoce si durante este período de tiempo (que

generalmente fluctúa entre media hora, para los viajes cortos y de una hora

para los mayores de 6 h), los vehículos son estacionados en áreas sombreadas

y se garantiza el suministro de agua para evitar la deshidratación, teniendo en

cuenta que en el área de estudio las temperaturas son altas (promedio 35 ºC) y

los bovinos por lo general, son transportados en las horas de mayor radiación

solar. Con relación al reagrupamiento social de diferentes lotes antes del

transporte, se ha demostrado que este procedimiento se debe realizar entre 2 y

4 semanas previas al viaje, para evitar efectos negativos en el BA y la calidad

de la carne (Colditz y col 2007).

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APARICIÓN DE CORTE OSCURO

El análisis de la información demostró una relación positiva entre el pH24 post-

mortem y la presencia de contusiones. Se observaron diferencias significativas

en el pH de acuerdo con el tipo de animal, encontrándose pH superiores en los

toretes. Las condiciones de manejo, la duración del transporte, tiempos

prolongados de ayuno y daños físicos, como las contusiones, son factores

estresores que producen el agotamiento de las reservas de glucógeno antes

del sacrificio (Gallo y col 2003). Se ha sugerido una asociación fuerte entre las

condiciones de estrés, las contusiones y el pH de las canales (Strappini y col

2010). La densidad de carga y las paradas durante el transporte fueron

factores de riesgo que aumentaron la probabilidad de la presencia de corte

oscuro en el presente estudio (P ˂ 0,01). La aparición de corte oscuro se

observó en el 37,3% de las canales evaluadas, resultados muy cercanos a los

reportados en México (47,63%) (Leyva-García y col 2012), pero superiores a

los encontrados en Chile (Amtmann y col 2006). El problema de corte oscuro

ha sido poco evaluado en Colombia, porque cada planta de sacrificio maneja

sus propios criterios de evaluación, los procedimientos operativos para la

medición de esta variable no están estandarizados y existe una gran diversidad

de condiciones de manejo presacrificio, que en ocasiones puede hacer

incomparables los resultados.

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5.5 CONCLUSIONES E IMPLICACIONES

El presente estudio basado en la evaluación de ganado Bos indicus sacrificado

bajo condiciones comerciales en Colombia revela que:

- Los machos enteros tuvieron dos veces más riesgo de presentar

contusiones que los novillos, las novillas y las vacas. Así mismo,

presentaron un mayor riesgo de presentar carne de corte oscuro. Este

aspecto debe ser considerado, para fortalecer las condiciones de

manejo durante el presacrificio.

- Las contusiones de los bovinos procedentes tanto de finca como de feria

se localizaron principalmente en las tuberosidades coxal e isquiática,

pudiendo ser atribuidas a golpes contra estructuras agudas de la planta

de sacrificio y/o carrocerías de los vehículos en malas condiciones de

mantenimiento.

- El tiempo de transporte ≤ 4 h no estuvo relacionado con la presencia de

contusiones y la aparición de corte oscuro en las canales evaluadas.

Se hace evidente la necesidad de fortalecer la infraestructura del transporte,

disminuir los tiempos de espera en las plantas de sacrificio, fortalecer la

capacitación y entrenamiento del personal responsable del manejo animal en la

cadena logística bovina, fortalecer la enseñanza del bienestar animal en todos

los niveles académicos, así como la investigación. Teniendo en cuenta las

implicaciones sanitarias y económicas de la presencia de corte oscuro, se hace

imprescindible evaluar con mayor profundidad esta problemática, para valorar

su impacto real en la cadena.

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5.6 RESUMEN

Las contusiones del ganado detectadas en las canales proveen información

acerca de su origen, y son un indicador de bienestar animal deficiente. El

objetivo del estudio fue describir las características generales de las

contusiones en ganado cebú comercial e identificar factores de riesgo. El

número de contusiones y su distribución, así como la severidad y tamaño,

fueron evaluadas en la inspección post-mortem en una planta de sacrificio en

Colombia. La prevalencia de contusiones fue 37,5 % (442/1.179), con un

promedio de 2,71 contusiones/canal (1.198/442). Las tuberosidades isquiática

(tuber isquiadicum) y coxal (tuber coxae) y el lomo, fueron las áreas donde se

observaron contusiones con mayor frecuencia (32,8%, 25,1 % y 21,%,

respectivamente). Predominaron las lesiones que afectaron el tejido muscular

(grado 2) (54.3%), de tamaño pequeño (≥ 2 y ≤ 8 cm). Las contusiones de

forma circular fueron las más frecuentes (61.3 %, 734/1.198), seguidas por la

irregular (32.9%, 394/1.198), lineal (3.1 %, 37/1.198), puntillar (1.9, 23/1.198) y

línea de tren (0.8 %, 10/1.198). Las contusiones puntillares se localizaron

predominantemente en el lomo, y pueden ser causadas por palos agudos o el

tábano eléctrico. El modelo de regresión logística mostró que la densidad de

carga de los camiones, la estadía en la planta y las paradas de los camiones

durante el viaje estuvieron asociadas con la presencia de contusiones (P ˂

0,01). El tiempo de transporte no fue considerado un factor de riesgo para la

presencia y severidad de las contusiones (P> 0,01). La presencia de lesiones

localizadas más frecuentemente en las tuberosidades, sugiere que las

contusiones son infringidas por el manejo rudo e inadecuado diseño de los

camiones e instalaciones. La infraestructura del transporte debe ser mejorada

en el área estudiada, así como el entrenamiento del personal, las prácticas de

bienestar animal deben ser promovidas en todas las etapas de la cadena

cárnica y fomentar el desarrollo de la investigación en esta área particular.

Palabras clave: bienestar animal, contusiones, factor de riesgo, ganado

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Abstract

Bruises in cattle detected on carcasses at slaughterhouses provide information

about their cause, and they are an indicator of poor animal welfare. The goal of

this study was to describe the gross characteristics of bruises in commercial

Zebu cattle and describe risk factors. The number of bruises and their

distribution on the carcass, as well as their severity, shape and size were

assessed post mortem at Colombian slaughterhouse. The prevalence of bruises

was 37.5% (442/1.179), mean 2.71 bruises/carcass (1.198/442). The pin (tuber

isquiadicum), the hip (tuber coxae) and the loin were the places where bruises

were more frequently observed (32.8 %, 25.1 % and 21.3 %, respectively).

Bruises with muscle tissue affected (grade 2) were more prevalent (54.3%);

however, the bruises were small (≥2 and ≤8 cm). Circular shaped bruises were

most frequent (61.3 %, 734/1.198), followed by irregular (32.9 %, 394/1.198),

linear (3.1 %, 37/1.198), mottled (1.9, 23/1.198) and trainline shaped bruises

(0.8 %, 10/1.198). Mottled shaped bruises were located predominantly in the

loin, and can be caused by electric prod or pointed sticks. The model of logistic

regression showed that stocking density and lairage time were associated with

the presence of bruising (P ˂0.01). Duration of transport was not considered a

risk factor for the presence and severity of bruises (P> 0.1). The presence of

bruises located more frequently in the pin and the hip suggest that bruises are

inflicted by rough handling and inadequate design of the trucks and facilities.

Cattle transport infrastructure must be improved in the area being studied, as

must driver training; animal welfare practices must be promoted in all links of

the meat chain and research developed in this particular area.

Key words: bruises, cattle, risk factor, welfare.

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Figura 10. Esquema de evaluación de la canal. Los números indican las

regiones anatómicas evaluadas. 1. cuarto trasero, 2. abdomen, 3. costilla, 4.

cuarto delantero, 5. lomo, 6. tuberosidad isquiática, 7. tuberosidad coxal.

Fuente: Strappini y col, 2012.

5

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Oval Lineal Línea de tren Irregular Puntillar

Figura 11. Clasificación de las contusiones de acuerdo con la forma.

Fuente: Strappini y col, 2012.

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Figura 12. Distribución de los pH promedios (media±ES) por tipo de animal evaluado.

5,62 0.05

5,72 0.12

5,79 0.05

5,75 0.019

5,71 0.06

5,45

5,5

5,55

5,6

5,65

5,7

5,75

5,8

5,85

5,9

Novillo Novilla Torete Toro Vaca

pH

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Tabla 10. Variables continuas independientes evaluadas por sexo (n=1.179),

usadas en el análisis.

Sexo

Variable Media (±ES)

Escala Total Machos Hembras

n (%) n (%) n (%)

Tiempo de transporte (h)

1,97±0.04 1-2 854 (72,4) 659 (75,1) 195 (65,6) 2-4 325 (27,6) 218 (24,9) 107 (34,4)

Distancia (km) 85±2.4 1-50 393 (33,3) 294 (38,5) 99 (32,8)

51-100 453 (38,4) 360 (41,0) 93 (30,8) 101-150 313 (26,5) 222 (25,3) 91 (30,1) 151- 200 20 (1,7) 1 (0,1) 19 (6,8)

Densidad de carga (kg/m

2)

352,9±2.0 ˂ 300 120 (10,2) 3 (0,3) 117 (38,7) 300-350 259 (22,0) 129 (14,7) 130 (43,0) 350- 400 769 (65,2) 714 (81,4) 55 (18,2) ˂ 401 31 (2,6) 31 (3,5) 0 (0,0)

Estadía en planta (h)

18,9±0,13 12-18 522 (44,3) 352 (40,1) 170 (56,3) 18- 24 642 (54,5) 510 (58,2) 132 (43,7) ˂ 24 15 (1,3) 15 (1,7) 0 (0,0)

Peso vivo a la llegada a la planta (kg)

454,17±3,1 455,83±3,15 451,71±2,6

Peso canal caliente (kg)

250,01±2,4 251,65±2,4 249,13±2,6

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Tabla 11. Características de las contusiones de acuerdo con el tipo de los

animales y la procedencia de los bovinos sacrificados (n=1.198 contusiones).

Variable

Categoría

Finca Feria

Total n (%)

n (%) n (%)

Localización Lomo 255 (21,3) 205 (23,0) 50 (16,3) Cuarto Trasero 104 (8,7) 92 (10,3) 12 (3,9)

Cuarto delantero 43 (3,6) 30 (3,4) 13 (4,2) Costilla 83 (6,9) 60 (6,7) 23 (7,5)

T. Isquiática 393 (32,8) 286 (32,1) 107 (34,9) T. coxal 301 (25,1) 205 (23,0) 96 (31,3)

Abdomen 12 (1,0) 11 (1,3) 1(0,3) Múltiple 7 (0,6) 2 (0,2) 5 (1,6)

Severidad Grado 1 547 (45,7) 366 (44,6) 181 (48,0)

Grado 2 651 (54,3) 455 (55,4) 196 (52,0)

Tamaño Pequeño 833 (73,7) 693 (78,0) 190 (61,5) Mediano 232 (19,3) 155 (17,4) 77 (25,0) Grande 83 (7,0) 41 (4,6) 42 (13,5)

Forma Irregular 394 (32,9) 295 (33,3) 99 (31,8)

Oval 734 (61,3) 532 (60,0) 202 (65,0) Lineal 37 (3,1) 32 (3,6) 5 (1,6)

Puntillar 23 (1,9) 19 (2,1) 4 (1,3) Línea de tren 10 (0,8) 9 (1,0) 1 (0,3)

Tipo de Novillo 291 (24,3) 275 (31,0) 16 (5,1) animal Novilla 142 (11,9) 65 (7,3) 77 (24,7)

Torete 237 (19,8) 237 (26,8) 0 (0,0) Toro 11 (0,9) 0 (0,0) 11 (3,5) Vaca 517 (43,1) 309 (34,9) 208 (66,7)

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Tabla 12. Coeficientes, error estándar (ES), intervalo de confianza (IC) y

probabilidad (P) de las variables incluidas en el modelo de regresión logístico

multivariado.

Variable

Categoría OR*

ES IC 95 % Valor P

Densidad de carga (kg/m2) ˂ 300 1,0 Ref. Ref.

300-350 4,9 1,4 2,8-8,9 ˂ 0,01

350- 400 3,9 1,08 2,3-6,8 ˂ 0,01

˂ 400 3,9 1,8 1,5-10,1 ˂ 0,01

Estadía en planta (h) 12-18 1,0 Ref Ref.

18- 24 2,1 0,3 1,6-2,7 ˂ 0,01

˂ 24 0,7 0,4 0,2-2,3 ns

Paradas durante el transporte

No 1,0 Ref. Ref.

Si 1,5 0,19 1,2-1,9 ˂ 0,01

*OR= Razones de disparidad; Ref: categoría considerada como referencia

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Tabla 13. Factores de riesgo para la aparición de corte oscuro en ganado cebú

colombiano (n=1.176) evaluados en el análisis de regresión logístico.

Variable

Categoría OR*

ES IC 95 % Valor P

Tipo de bovino Novillo 1,0 Ref. Ref.

Novilla 2,5 0,9 1,2-5,4 0,01

Torete 2,5 0,4 1,8-3,5 ˂ 0,01

Toro 1,2 0,6 0,4-3,1 0,7

Vaca 3,4 0,8 2,2-5,3 ˂ 0.01

Densidad de carga ˂ 300 1,0 Ref. Ref.

(kg/m2) 300-350 2,1 0,6 1,2-3,7 ˂ 0,01

350- 400 2,4 0,7 1,3-4,4 ˂ 0,01

˂ 400 1,3 0,4 0,1-4,2 0,7

Paradas durante el transporte

Si 1,6 0,2 1,2-2,1 ˂0,01

No 1,0 Ref. Ref.

*OR= Razones de disparidad; Ref: categoría considerada como referencia.

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1. DISCUSIÓN GENERAL

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Las actividades presacrificio incluyen las prácticas y condiciones aplicadas al

bovino durante el período comprendido entre la movilización y el transporte

desde la granja hasta su ingreso al cajón de insensibilización en la planta de

sacrificio (Ferguson y Warner 2008). Esta etapa ha sido considerada como un

estresor importante para los bovinos, que tiene efectos en el bienestar animal y

en la calidad de la carne, siendo considerada como un punto crítico en la

cadena cárnica bovina (Grandin 2003; Minka y Ayo 2007; Schwartzkopf-

Genswein y col 2012).

En Colombia, la producción ganadera se realiza en condiciones de pastoreo

extensivo (MADR, 2010). El sector ganadero se encuentra actualmente en un

proceso de modernización selectiva de las condiciones de producción y de la

logística del pre sacrificio. Sin embargo, la ganadería bovina presenta una alta

dispersión geográfica, cerca del 70% del ganado de carne es sacrificado en

plantas ubicadas en centros de consumo, con la participación de un alto

número de intermediarios (comisionistas y acopiadores, colocadores y

subastas), haciendo necesario el traslado de los bovinos desde los centros

productivos, a través de vías de montaña, con tiempos de transporte superiores

a 10 h, por medio de una infraestructura poco especializada y con prácticas

deficientes en bienestar animal (Romero y col, 2011a; 2012a). Una de las

estrategias planteadas para fortalecer la competitividad de la cadena cárnica

bovina es la modernización y la regionalización de las plantas de sacrificio, con

el fin de aumentar la capacidad de sacrificio instalada, disminuir intermediarios,

evitar tiempos extras de transporte y manejo de los animales, entre otros

(MADR 2010). A continuación, se presenta una síntesis de los principales

resultados derivados del trabajo, que evalúo el presacrificio de cruces de

bovinos Brahman sacrificados bajo condiciones comerciales en tres plantas de

sacrificio colombianas.

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TRANSPORTE

Muchos investigadores han evaluado los efectos del transporte del ganado en

relación con la distancia recorrida y la duración del viaje, debido al impacto

económico por las pérdidas de peso vivo, aumento de los decomisos de carne

contusa, mayor proporción de carne DFD y disminución del valor comercial de

la canal y los cortes de carne, entre otros aspectos (Villarroel y col 2003; Gallo

y col 2003; Warren y col 2010). En el estudio, el transporte terrestre de bovinos

bajo condiciones comerciales, tanto por lapsos de tiempo de 4 h y superiores a

éste, fue una experiencia estresante para los animales, que causó cambios

significativos en las concentraciones sanguíneas de cortisol, glucosa y CK,

pero no afectó el metabolismo proteico y la deshidratación de los bovinos. Los

niveles sanguíneos de lactato, creatinina y recuento leucocitario fueron

moderados indicadores de estrés. El ß-HB no fue un buen indicador de estrés

agudo, como ha sido reportado por otros investigadores (Tadich y col 2003;

2005). Los bovinos transportados durante más de 7 h y mantenidos en la planta

durante aproximadamente 24 h, no alcanzaron niveles de ß-HB altos, lo que

sugiere que la privación de alimento fue contrarrestada por las reservas de este

cuerpo cetónico en el rumen, siendo necesario varios días para que los bovinos

alcancen un estado de ayuno fisiológico (Tadich y col 2003).

La legislación colombiana exige que la duración del viaje continuo de los

bovinos no exceda 10 h (MPS 2007b). Los resultados del estudio sugieren que

este lapso de tiempo máximo, exigido por la legislación puede ser apropiado,

siempre y cuando las condiciones del viaje sean óptimas. Sin embargo, sería

conveniente contar con plantas regionales en las áreas productivas para

disminuir la duración del viaje. La duración del viaje superior a 10 h, afectó

negativamente la calidad de la carne en términos de pH y color, porque el 69 %

de los bovinos evaluados (360/522) presentó carne con pH≥ 5,8. El riesgo de

presentar carne DFD aumentó en la medida que la duración del viaje fue

superior a 10 h (OR=6,0; P˂ 0,01). Los factores que pudieron incidir para que

se presentara un agotamiento de las reservas de glucógeno en el momento del

sacrificio y una disminución en la formación de ácido láctico muscular, pueden

estar relacionados con problemas detectados por Romero y col 2011a, 2011b,

2012 en Colombia, entre los cuales se encuentran: largos recorridos del

ganado desde los potreros hasta los corrales de embarque en las granjas, que

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en ocasiones pueden ser de dos horas; las condiciones montañosas de las vías

que provocan un gasto de energía del ganado al procurar mantener el equilibrio

durante el viaje; la privación de alimento y agua, los manejadores del ganado

no tienen capacitación y adiestramiento en comportamiento bovino y la

interacción hombre-animal en ocasiones es negativa, factores que en conjunto

pudieron provocar un alto gasto de energía, que los haría más susceptibles a

presentar carnes de menor calidad.

A diferencia, el tiempo de transporte entre 1 y 4 h, no fue considerado como un

factor de riesgo para la presencia de contusiones en las canales y para la

obtención de carne con pH24≥ 5,8, en 1.179 canales bovinas evaluadas. Sin

embargo, las paradas del camión para permitir el consumo de alimentos por

parte de los conductores incrementaron el riesgo de contusiones y la presencia

de carne con pH24≥ 5,8 (P ˂ 0,01), lo cual pudo estar relacionado con un

aumento de actividad y de encuentros antagónicos, debido al estrés del

ambiente nuevo, aumento de la temperatura interna del vehículo y las

condiciones propias del camión, entre otros aspectos (Nanni Costa y col 2002).

DENSIDAD DE CARGA

La densidad de carga es otro factor relevante para asegurar el bienestar

animal. En Colombia, no se tiene en cuenta el número y el peso de los bovinos

para establecer el tamaño del lote a transportar y definir el espacio disponible

dentro del vehículo para cada animal; esta decisión está sujeta a las

necesidades comerciales del propietario del ganado. La densidad promedio de

carga en el estudio fue 352,9 Kg/m2, acorde con las exigencias sanitarias (350

Kg/m2) (ICA 2007). Sin embargo, se observaron densidades inferiores a 300

Kg/ m2, las cuales favorecieron la presencia de contusiones y carnes con pH24≥

5,8. Los bovinos transportados a densidades muy bajas, requieren gastos

energéticos adicionales, por el esfuerzo para mantener el equilibrio, que se

traducen en alteraciones del pH de la carne; además, cuentan con mayor

disponibilidad de espacio, lo que favorece las caídas y las colisiones contra la

carrocería del camión y entre los coespecíficos (Gallo y col 2005). Sin

embargo, las densidades de carga altas (>400 Kg/m2) se asociaron

significativamente (P˂ 0,01) con la presencia de corte oscuro y con la

prevalencia de las contusiones, lo cual sugiere que tanto las altas, como las

bajas densidades de carga, afectan el bienestar de los bovinos transportados,

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siendo conveniente, manejar densidades promedio de acuerdo al peso de los

bovinos a transportar (Romero y col 2012a).

DESCARGUE

El cargue y el descargue son etapas poco evaluadas durante el presacrificio.

Algunos autores han considerado que pueden ser más estresantes que el

mismo viaje (Maria y col 2004; Minka y Ayo 2007; Miranda-de la Lama y col

2012). En el estudio, los índices de descargue fueron aceptables en las dos

plantas y las interacciones más utilizadas por el personal fueron las auditivas

(silbar y hablar). Se evidenció el uso de elementos corto-punzantes como

navajas, para acelerar la salida de los bovinos del camión, que no había sido

reportado por otros autores, la cual se considera como inaceptable desde el

punto de vista del BA, al igual que retorcer la cola del animal. Se sugiere

fortalecer la capacitación y el adiestramiento en comportamiento y bienestar

animal, del personal responsable del manejo de los bovinos.

TIEMPO DE PERMANENCIA EN LA PLANTA

El tiempo de permanencia de los bovinos en la planta en ausencia de alimento

es considerado uno de los puntos críticos que afectan el BA de los bovinos

durante el presacrificio (Tadich y col 2005). En este estudio, el tiempo de

estadía promedio fue 18,9±0,13 h, acorde con los requerimientos sanitarios que

establece que este período no debe ser superior a 48 h y en el caso que

supere las 24 h, se debe proveer alimento a los bovinos (MPS 2007b). Esta

variable no estuvo relacionada con la presencia de carne con pH24≥ 5,8; a

diferencia de los hallazgos encontrados en otros estudios (Gallo y col 2003;

Muchenje y col 2009). Los factores que pudieron incidir para que esta etapa no

representara un factor de estrés importante para los bovinos evaluados,

estarían relacionados con el mantenimiento de los lotes de origen desde la

granja durante la estabulación en la planta y por tanto, ausencia de la ruptura

de la estructura social de los animales, el acceso de agua ad libitum y las

condiciones de la infraestructura de las plantas. Sin embargo, en la medida que

aumentó el tiempo de estabulación, se incrementó el riesgo de aparición de

contusiones en la canal (P˂ 0,01). Strappini y col (2013) encontraron que la

estadía en la planta de sacrificio es un evento que genera una baja proporción

de contusiones en las canales, en especial cuando los bovinos pertenecen al

mismo grupo social, porque a pesar de que se presentan encuentros

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antagónicos, éstos son menos severos. Sin embargo, de acuerdo con

hallazgos de estudios previos realizados en Colombia, el ganado de descarte,

conformado en especial por hembras de razas lecheras, pueden permanecer

hasta diez días en las plantas de sacrificio y son varias veces reagrupadas

antes de ser sacrificadas (Romero y col 2012a, 2012b), lo cual resalta la

necesidad de evaluar en detalle esta etapa y el manejo efectuado a los bovinos

de menor valor comercial.

CONDUCCION E INSENSIBILIZACIÓN

La conducción fue un evento más estresor que el descargue en el presente

estudio. La interacción más utilizada para movilizar el ganado fue el tábano

eléctrico y las prácticas abusivas (colocar este dispositivo en partes sensibles

del animal), fueron prevalentes en las dos plantas analizadas.

La insensibilización fue una etapa generadora de estrés y miedo en el estudio,

porque se asoció significativamente con los niveles de cortisol sérico y con las

vocalizaciones de los bovinos (P˂ 0,01). La insensibilización inefectiva

incrementó la prevalencia de corte oscuro (OR=1,6; P˂ 0,01). En las dos

plantas se constataron largos intervalos entre la insensibilización y la sangría,

factor que incidió para que los bovinos recuperaran la consciencia durante la

sangría. Es necesario implementar indicadores basados en el animal para

evaluar esta etapa, fortalecer la cultura de la auditoria del bienestar animal en

las plantas de sacrificio, desarrollar infraestructura que garantice el manejo de

los bovinos siguiendo su comportamiento natural (Gallo y col 2003; Gregory y

col 2007; Grandin, 2012) y evaluar en detalle los sistemas de insensibilización,

porque se ha confirmado que es una etapa crítica en el presacrificio

colombiano (Romero y col 2012b, 2012c).

PRACTICAS DE MANEJO

Algunos investigadores han descrito el efecto del manejo y las actitudes

aversivas del personal de las plantas de sacrificio, sobre la calidad de la carne

bovina y porcina (Coleman y col 2003; Hemsworth y col 2011). En el estudio

se evaluaron tres plantas de sacrificio: la planta A, caracterizada por una

infraestructura tradicional, con instalaciones antiguas; planta B, planta

moderna, con corrales independientes para la estabulación de los bovinos por

lotes, corredores curvos para la movilización del ganado y sistema de

insensibilización con sujeción de cabeza; planta C, con las mismas condiciones

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de la planta B, a excepción del sistema de insensibilización con sujeción de

cabeza y cuerpo, y la capacitación del personal en bienestar animal; así como

el compromiso gerencial para implementar un manejo humanitario de los

bovinos. Es de resaltar que, la mayor prevalencia de carne con pH≥ 5,8 se

presentó en la planta B, en donde se observaron con mayor frecuencia las

interacciones negativas para manejar el ganado, como el uso excesivo de

tábano eléctrico, el cual ha sido descrito como generador de estrés y miedo en

el ganado (Hemsworth y col 2011). Adicionalmente, en esta planta se

observaron los altos lapsos de tiempo entre la insensibilización y la sangría,

con las implicaciones ya descritas.

Estos resultados sugieren que la infraestructura de la planta es importante,

pero que la actitud del personal responsable del ganado y la calidad del

manejo, son factores relevantes para garantizar el bienestar animal en las

plantas de sacrificio, porque existe una estrecha relación entre las actitudes del

personal, el comportamiento de los bovinos y la calidad de la carne (Coleman y

col 2003).

Es evidente que mejorar la Interacción hombre-animal de los bovinos, requiere

de un esfuerzo conjunto de todos los participantes de la cadena, por lo tanto

deben tenerse en cuenta aspectos como: 1) adopción de infraestructura

basada en el comportamiento bovino, 2) selección, capacitación y

entrenamiento del recurso humano, 3) implementación de indicadores de

evaluación, 4) política gremial, 5) incentivos al personal manejador, y 6)

fortalecimiento de la legislación sanitaria.

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LITERATURA CITADA

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