azulmetodos cromat adsrocion

5/12/2018 azulmetodos cromat adsrocion - slidepdf.com

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SEPARACIÓN DE UNA MEZCLA DE AZUL DE METILENO Y FLUORESCEÍNAUSANDO CROMATOGRAFÍA POR ADSORCIÓN

RESULTADOS

1)

Tabla No. 1. Valores de absorbancia obtenidos para la separación de fluoresceína y azul demetileno

Volumen de elución(ml)

A493 A668

3 0.008 0.028

6 2.012 0.019

9 1.176 0.02912 0.316 0.013

15 0.018 0.011

18 0.008 0.010

21 0.003 0.004

24 0.002 0.010

27 0.013 0.007

30 0.163 0.097

33 0.031 0.23436 0.055 0.734

39 0.052 0.883

42 0.028 0.515

45 0.008 0.148

48 0.004 0.056

51 0.005 0.036

54 0.002 0.029

57 0.003 0.03660 0.001 0.022

63 0.003 0.012



2)

Grafica No. 1. En esta grafica se muestra el perfil de elución obtenido de la fluoresceína (enazul) y el azul de metileno (en rojo).

3) Los elementos del sistema cromatográfico para esta separación son:

y Fase estacionaria: en esta experiencia nuestra fase estacionaria consistió en una columna de

alúmina alcalina.

y Fase móvil: la fase móvil en este caso fue de dos componentes en dos tiempos, el primeroes agua y posteriormente se utilizo alcohol etílico acido.

y Analito o eluato: este consistió en una mezcla de azul de metileno y fluoresceína.

4) Adsorción: es un proceso por el cual las moléculas o iones son atrapados en la superficie de un

material muy poroso.

5) teniendo en cuenta las propiedades de solubilidad, las modificaciones posibles serian: primero

hacer pasar un liquido con una polaridad no afín a la fluoresceína como seria el alcohol propílico

acido o isopropilico acido o en su defecto cualquier liquido que este protonado, el cual sería mas

afín a la alúmina y así el azul de metileno se vería debilitado en su unión a la misma y

posteriormente se agregaría un liquido muy polar como el agua, el cual sería mas afín por lafluoresceína.

0.000

0.500

1.000

1.500

2.000

2.500

3 6 9 12 15 1 8 21 24 2 7 30 33 3 6 39 42 4 5 48 5 1 54 57 6 0 63Volumen de elución (ml)

Abs(nm)

2.012 Abs493

0.883 Abs668

PERFIL DE ELUCIÓN



DISCUSION

Como pudimos observar, la elución resulto casi como la esperábamos, ya que si nos fijamos en el

perfil de elución, podemos ver dos picos en el espectro de absorción y un considerable espacio entre

ellos, los cuales corresponden a la máxima elución de los colorantes involucrados. Sin embargo

nosotros hubiéramos esperado que en el grafico los picos no tuvieran puntos intermedios, es decir,

que deberían tener una perfecta forma de cono pero no fue el caso, esto se debe a un mal cálculo en

el conteo de las gotas, que si tuvieran un ritmo de 32 gotas por minuto se observarían los picos

perfectos, esto nos indica que estaban saliendo más rápido de lo indicado, sin embargo la separación

de los colorantes si se logro, ya que como se menciono tenemos bastante espacio entre los picos, lo

que nos indica que en ese lapso no estuvo eluyendo analito.

El perfil de elución también nos indica que la fluoresceína tiene mucha más afinidad por el agua

que por la alúmina, lo cual sebe a su alta polaridad ya que si se observa su formula podemos ver que

tiene varios átomos de oxigeno los cuales causan una carga parcial en cada uno de ellos y esto es

aprovechado por el agua para solvatarlo.

En el caso del azul de metileno, podemos observar en su estructura que también tiene átomos

electronegativos (nitrógeno en este caso) sin embargo podemos ver también que este posee Cargas

parciales positivas lo cual hace que sea mas afín por la alúmina la cual esta básica, lo que a su vez

nos indica que posee cargas negativas, así ambas son atraídas y esto es lo que facilita la unión del

azul con la alúmina, luego cuando ponemos el alcohol acido, que por esta misma condición os habla

de un exceso de protones, se comienza a eluir el azul de metileno, esto se explica por el hecho de

que los protones del alcohol se unen a las cargas negativas de la alúmina y así esta se deshace de las

cargas del azul, el cual por tener una polaridad afín con el alcohol se ve disuelto por este y así es

como termina de eluir.

CONCLUSIONES

Según lo observado tenemos:

1. El método fue efectivo para la separación de los colorantes involucrados

2. La fluoresceína es mucho mas afín al agua que a la alúmina básica

3. El azul de metileno es mas afín por la alúmina básica

4. Cumplimos con los objetivos de aplicar la técnica y comprobar la separación con el perfil

de elución.



ESTRUCTURAS DE LOS COLORANTES

REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS

- SIN AUTOR. https://www.itescam.edu.mx/principal/sylabus/f pdb/recursos/r49955.PDF .

Consultado el 16/08/2011 a las 10:45 am

AZUL DE METILENO

FLOURESCEÍNA

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