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Universidade Estadual do Ceará Faculdade de Veterinária Biotecnologia da Reprodução Animal
Avaliação Microscópica do Sêmen
Vicente José de F. Freitas
Laboratório de Fisiologia e Controle da Reprodução
www.uece.br/lfcr
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Plano de Aula
� Apresentar a importância da realização da técnica.
� Discutir os diferentes parâmetros microscópicos
seminais.
� Apresentar a técnica de avaliação computadorizada.
� Apresentar considerações finais sobre o tema
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Conceito
� Etapa de avaliação de reprodutores onde são considerados os
parâmetros microscópicos seminais.
� Faz parte da rotina de centrais de IA quando:
� da escolha de doadores de sêmen e
� da manipulação e processamento do sêmen para congelação.
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Parâmetros a serem observados 1. Macroscópicos:
a. Volume b. Cor
c. Aspecto d. Turbilhão
2. Microscópicos: a. Motilidade massal
b. Concentração espermática c. Motilidade espermática
I. Motilidade individual progressiva
II. Vigor
d. Morfologia espermática
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Motilidade massal • Conceito: • É o movimento em forma de ondas observado, sob
microscópio, em uma gota de sêmen puro.
• Procedimento: • Colocar 10 µl de sêmen puro em uma lâmina. • Observar no microscópio na objetiva de menor
aumento (×4). • Avaliar em uma escala de 0 a 5.
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Concentração espermática • Conceito: • Representa o número de espermatozoides por mL
do ejaculado. • Ao multiplicar pelo volume ejaculado têm-se o
número total de espermatozoides.
• Procedimentos: • em câmara de Neubauer, • em fotocolorímetro.
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Motilidade espermática 1. Motilidade individual progressiva:
1. Estimativa subjetiva da viabilidade e qualidade espermática.
2. Análise realizada em microscópio óptico. 3. Avaliação pode ser dificultada em amostras com elevada
concentração espermática. 4. Colocar 10 a 20µL de sêmen entre lâmina e lamínula e
observar em microscópio óptico nas objetivas de ×10 e ×40. 5. Células móveis são observadas e estimado o percentual.
2. Vigor: 1. Velocidade na qual as células atravessam o campo. 2. Avaliar em uma escala de 0 a 5.
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Morfologia espermática
1. Conceito: 1. Estimativa do percentual de células normais e patológicas.
2. Procedimento: 1. Amostra é diluída e conservada em solução formol salina. 2. Avaliação através de esfregaço e coloração;
1. Hematoxilina-eosina ou Giemsa, Rosa de Bengala. 2. 100 a 200 sptz devem ser avaliados.
3. Espermatozoides morfologicamente normais: • Bovino: 65 – 90% • Ovino: 80 – 95% • Caprino: 80 – 95% • Suíno: 70 – 90% • Equino: 60 – 90%
Classificação das anormalidades espermáticas: • Primárias: associadas a cabeça e acrossomo. • Secundárias: gotas citoplasmáticas. • Terciárias: defeitos de cauda.
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Análise computadorizada
Sistema de Análise Espermática Computadorizado – CASA
Ø Sistema automatizado (hardware e software) para visualizar e
digitalizar imagens sucessivas dos espermatozoides.
Ø Processa, analisa e fornece informações da cinética individual das
células e valores estatísticos.
Ø Proposto e aplicado na tentativa de minimizar os efeitos da
avaliação subjetiva do sêmen.
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Considerações
� A avaliação dos parâmetros seminais microscópicos é a última etapa da escolha de reprodutores antes de confirmar a fertilidade dos mesmos.
� Técnicas modernas de avaliação (CASA) podem tornar mais “qualitativa” o exame dos espermatozoides ejaculados.