analizador agilent gc/ms triple cuadrupolo · agitación hasta equilibrio (10-12 horas),...
TRANSCRIPT
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 1
Julio 2012
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 1
Julio 2012
ANALIZADOR Agilent GC/MS Triple Cuadrupolo s
Jose Juan Rivero Especialista de Producto
Cromatografía GC y GCMS
AGILENT TECHNOLOGIES
901.11.68.90 Seminario On-Line
20-Julio-2012
Aplicaciones de GC-MS de triple
cuadrupolo para la determinación
de compuestos semivolátiles en
aguas
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 2
Julio 2012
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 2
Julio 2012
Use el chat-box de la parte inferior-derecha de la pantalla o siga las
instrucciones al final de la presentación para realizar en directo sus preguntas
Todas las preguntas serán respondidas y enviadas junto a una copia de la
presentación a todos los asistentes al e-seminario
Contacte con el host para cualquier problema técnico que le surja durante la
presentación
Para cualquier cuestión relacionada con el problemas con el sonido pulse *0
Para otros problemas técnicos contacte con el teléfono gratuito:
800-9323-9000 (España/Portugal)
Recomendaciones para el buen desarrollo del e-seminar
Para el
SEGUIMIENTO DEL SONIDO de este eseminar por favor siga las instrucciones
del correo recibido o siga el enlace del chat
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 3
Julio 2012
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 3
Julio 2012
ANALIZADOR Agilent GC/MS Triple Cuadrupolo s
Jose Juan Rivero Especialista de Producto
Cromatografía GC y GCMS
AGILENT TECHNOLOGIES
901.11.68.90 Seminario On-Line
20-Julio-2012
Aplicaciones de GC-MS de triple
cuadrupolo para la determinación
de compuestos semivolátiles en
aguas
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 4
Julio 2012
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 4
Julio 2012
Agenda
1. Introducción al Agilent 7000B GC Triple Cuadrupolo
2. Analizador 2.0: Una solución global a los principales problemas
del laboratorio de medioambiente • Legislación
• Sensibilidad y Preparación de la muestra
• Acreditación
• Software Mass Hunter-Reporting
• GC/MS/MS – Analizador 2.0
3. Otras aplicaciones: a. Determinación de compuestos organoestánnicos
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 5
Julio 2012
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 5
Julio 2012
Situación actual en el análisis Medioambiental/Alimentario
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 6
Julio 2012
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 6
Julio 2012
Introducción al nuevo Agilent 7000B GC Triple
Cuadrupolo
1. Sistema introducido en 2008
2. Primer sistema del mercado especialmente
diseñado para análisis GC
3. Basado en la plataforma de cuadrupolo simple
de Agilent Technologies
4. Desarrollo focalizado en la resolución de
problemas en el laboratorio de rutina
5. Robustez
6. Incorpora la plataforma de software
MassHunter que unifica toda la oferta Agilent
en MS y mejora el rendimiento de Chemstation
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 7
Julio 2012
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 7
Julio 2012
Diseño basado en el rendimiento y la robustez de la
aplicación
Niveles de sensibilidad de femtogramos en columna y MRM de alta velocidad accesibles
para un amplio rango de usuarios
– Sensibilidad: 100 fg OFN a 1500:1 RMS S/N IDL 12 fg
– Alto rendimiento SRM (MRM) con hasta 500 transiciones/s
– Celda de colisión hexapolar patentada
– Cuadrupolos de cuarzo recubiertos de oro para una segura operación en rutina
– Agilent 7890 GC con Tecnología de Flujo Capilar
– MassHunter Software
Agilent 7000B Triple Quadrupole GC/MS Gold Plated Hyperbolic Quartz Quadrupole
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 8
Julio 2012
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 8
Julio 2012
Limite de detección Instrumental (IDL)
Desviación estandar
IUPAC Gold Book
http://goldbook.iupac.org/L03540.html
USP United States
Pharmacopeia 30
UE Method Validation And
Quality Control Procedures For
Pesticide Residues Analysis In Food And Feed. Document No.
Sanco/10684/2009
EPA Analytical Detection Limit Guidance, 1996 Laboratory Guide for Determining Method
Detection Limits
Exactitud Precisión
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 9
Julio 2012
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 9
Julio 2012 Febrero 2011 Febrero 2011
El limite de detección como un cálculo estadistico
LD = t * SD
LD es el limite de dtección
t es el valor de la t de student (t=2.988 al 99% y 8 iny)
SD e la desviacion estandar
DL (area) = 2.988* SD (area)
100% xx
SDRSD
100
100 fgRSDtIDLconc
4%100 RSDfgx
fgfg
IDLconc 12100
)100()4()988.2(
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 10
Julio 2012
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 10
Julio 2012 Febrero 2011 Febrero 2011
IDL especifación basada en la reprodubilidad de la medida
8 ínyecciones consecutivas, 1 μl, 100fg/μl OFN
MS/MS transition of m/z 272→222
Area precision: 2 .0 % RSD
IDLconc = (t * RSD * concentration)/100 (t para el 99% de confianza, n-1 grados de libertad=2.988)
IDLconc = 6 fg
Caso real en un cliente en España
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 11
Julio 2012
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 11
Julio 2012
7000 Series Cuadrupolo MS/MS Optimizado para cromatografía de gases
Espectro de impacto electrónico con todos
los iones de los compuestos y del
fondo químico
Celda de Colisión Q3 Q1
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 12
Julio 2012
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 12
Julio 2012
Q1 filtra todas las masas permitiendo únicamente el paso
del ion precursor m/z 210
7000 Series Cuadrupolo MS/MS Optimizado para cromatografía de gases
Q1 Celda de Colisión Q3
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 13
Julio 2012
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 13
Julio 2012
En la celda de colisión se produce la
disociación del ión seleccionado en iones
producto
7000 Series Cuadrupolo MS/MS Optimizado para cromatografía de gases
Q1 Celda de Colisión Q3
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 14
Julio 2012
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 14
Julio 2012
En Q3 se monitorizan sólo dos de los iones característicos generados correspondientes al compuesto de
interés. Uno con finalidad cuantitativa y el otro con finalidad
cualitativa
7000 Series Cuadrupolo MS/MS Optimizado para cromatografía de gases
Q1 Celda de Colisión Q3
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 15
Julio 2012
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 15
Julio 2012
Agenda
1. Introducción al Agilent 7000B GC Triple Cuadrupolo
2. Analizador 2.0: Una solución global a los principales
problemas del laboratorio de medioambiente • Legislación
• Sensibilidad y Preparación de la muestra
• Acreditación
• Software Mass Hunter-Reporting
• GC/MS/MS – Analizador 2.0
3. Otras aplicaciones: a. Determinación de compuestos organoestánnicos
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 16
Julio 2012
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 16
Julio 2012
Normativa de análisis de aguas:
Reales Decretos
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 17
Julio 2012
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 17
Julio 2012
Parámetros químicos. Sensibilidad
Nota 4: Por «plaguicidas» se entiende: Insecticidas orgánicos, herbicidas orgánicos, fungicidas orgánicos, nematocidas orgánicos,
acaricidas orgánicos, algicidas orgánicos, rodenticidas orgánicos, molusquicidas orgánicos, productos relacionados (entre otros,
reguladores de crecimiento) y sus pertinentes metabolitos y productos de degradación y reacción. Sólo es preciso controlar aquellos
plaguicidas que sea probable que estén presentes en un suministro dado.
Nota 5: El valor paramétrico se aplica a cada uno de los plaguicidas. En el caso de aldrin, dieldrin, heptacloro y heptacloroepóxido, el valor
paramétrico es de 0,030 μg/l.
Nota 6: Por «total plaguicida» se entiende la suma de todos los plaguicidas detectados y cuantificados en el procedimiento de control.
Nota 7: Los compuestos especificados son: Benzo(b)fluoranteno, benzo(k)fluoranteno, benzo(ghi)perileno e indeno (1,2,3-cd)pireno.
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 18
Julio 2012
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 18
Julio 2012
Parámetros químicos. Sensibilidad
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 19
Julio 2012
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 19
Julio 2012
Agenda
1. Introducción al Agilent 7000B GC Triple Cuadrupolo
2. Analizador 2.0: Una solución global a los principales
problemas del laboratorio de medioambiente • Legislación
• Sensibilidad y Preparación de la muestra
• Acreditación
• Software Mass Hunter-Reporting
• GC/MS/MS – Analizador 2.0
3. Otras aplicaciones: a. Determinación de compuestos organoestánnicos
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 20
Julio 2012
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 20
Julio 2012
Tipos de preparación de la muestra
• Solid Phase Extraction (SPE)
• Solid Phase Microextraction (SPME)
• Stir Bar Sorptive Extraction (SBSE)
• Otros…
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 21
Julio 2012
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 21
Julio 2012
Secuencia de Extracción
Elución Aplicación Muestra Lavado Acondicionar
Elución : Elución o desorción selectiva del cartucho
Acondicionar: preparación del cartucho de SPE para permitir la interacción con muestra
Aplicación de la Muestra: analitos de interés y algunas interferencias se absorben sobre la superficie del sorbente
Lavado : eliminación de los compuestos no deseados que puedan quedar retenidos en la
superficie del sorbente
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 22
Julio 2012
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 22
Julio 2012 Febrero 2011 Febrero 2011
Concentracion de Fenoles en aguas de consumo por SPE
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 23
Julio 2012
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 23
Julio 2012
Tipos de preparación de la muestra
• Solid Phase Extraction (SPE)
• Solid Phase Microextraction (SPME)
• Stir Bar Sorptive Extraction (SBSE)
• Otros…
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 24
Julio 2012
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 24
Julio 2012
Cliente puede actualizar de iny Liquida Headspace SPME
1. Comenzamos por Inyección Liquida
2. Cambiar a Headspace
3. Cambiar a SPME
Configuración standar
Jeringa de 10 para inyeccion liquida
Combipal
Inyeccion Liquida
Con LVI hasta 500 l
Headspace
Sin sample loop ni linea de
transferencia calentada
SPME
Extraccion para muestras agitadas y
calentadas
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 25
Julio 2012
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 25
Julio 2012
Microextracción en fase sólida (SPME): Funcionamiento
absorb
desorb
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 26
Julio 2012
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 26
Julio 2012
La fibras de SPME pueden utilizarse para analizar
volatiles/semivolatiles/no volatiles por GC o LC
Las fibra son tubos de silice fundida o metálicos recubiertos de un
adsorbente:
Polydimethylsiloxane, PDMS
Carbowax, polyethylene glycol
Divinylbenzene Polymer, DVB
Carboxen, graphitized carbon
Combinaciones de éstas
Ventajas
Reducción de solventes
Economicas y reusables
Versatiles: GC o HPLC
Manual o automatizable
Tipos de fibras
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 27
Julio 2012
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 27
Julio 2012
Tipos de preparación de la muestra
• Solid Phase Extraction (SPE)
• Solid Phase Microextraction (SPME)
• Stir Bar Sorptive Extraction (SBSE)
• Otros…
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 28
Julio 2012
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 28
Julio 2012
Imán, Encerrado en vidrio y
SPME : max. 0.5 µl
l = 10 mm, df = 0.5 mm
df = 1.0 mm
l = 20 mm, df = 0.5 mm
df = 1.0 mm
24 µl
63 µl
47 µl
126 µl
Gerstel Twister
Recubierto de PDMS
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 29
Julio 2012
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 29
Julio 2012
SISTEMA GERSTEL/AGILENT PARA ANALISIS
AUTOMATICO RD-140 (VOCS Y SEMIVOCS)
ANALISIS DE SEMIVOCS
Desorción Térmica de Twisters (TDU)
Análisis SIMULTANEO en una extracción y una única inyección
de Pesticidas (POC, POF, PON) y PAH’s
Preparación SIMPLE : Adición de sal (opcional), introducción del Twister
Agitación hasta equilibrio (10-12 horas), introduccion en automuestreador
ANALISIS DE VOCS
Head Space Dinámico (DHS)
Análisis SIMULTANEO de Benceno, THM’s, 1,2 Dicloroetano,
Tricloroeteno y Tetracloroeteno
Preparación SIMPLE: 10 ml de Agua en vial de Head Space
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 30
Julio 2012
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 30
Julio 2012
Agenda
1. Introducción al Agilent 7000B GC Triple Cuadrupolo
2. Analizador 2.0: Una solución global a los principales
problemas del laboratorio de medioambiente • Legislación
• Sensibilidad y Preparación de la muestra
• Acreditación
• Software Mass Hunter-Reporting
• GC/MS/MS – Analizador 2.0
3. Otras aplicaciones: a. Determinación de compuestos organoestánnicos
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 31
Julio 2012
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 31
Julio 2012
Dificultades al afrontar los requisitos de las entidades de
acreditación Plaguicidas – ENAC/SANCO
Validación, incertidumbre, sensibilidad,
control de calidad, exactitud, recuperación,
robustez, precisión, repetibilidad …
MS – Technique IP /
ion
Low resolution mass spectrometry (LR-MS) 1.0
LR-MSn precursor ion 1.0
LR-MSn transition products 1.5
High resolution mass spectrometry (HR-MS) 2.0
HR-MSn precursor ion 2.0
HR-MSn transition products 2.5
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 32
Julio 2012
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 32
Julio 2012
7000B: Precision, Precision, Precision
Dwell Time (msec) 10 5 3 2 1
# Transitions 18 33 50 66 99
Cycle Time 198 198 200 198 198
MRM/sec 91 167 250 333 500
n=1 37453 39629 38589 37722 36246
2 37854 38444 35487 34584 34524
3 36464 39402 37690 35916 35007
4 38547 37270 35756 36243 33895
5 38372 38376 37277 37373 36955
6 36349 37881 38076 38625 33315
7 39439 32900 36179 38984 34861
8 37654 37787 37455 38018 37986
9 37588 38620 40348 34537 34307
10 37140 36425 37795 36869 34700
Average Area 37686 37673 37465 36887 35180
SD Area 940 1925 1439 1557 1447
% RSD 2.5% 5.1% 3.8% 4.2% 4.1%
Para 10ppb de Propizamida Mejor precisión,
supone mejoras en
la información
cualitativa
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 33
Julio 2012
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 33
Julio 2012
Detección de anómalos
1. Más de 20 criterios posibles
2. Tolerancias establecidas en el método de análisis
3. Avisos & Herramientas de filtrado
4. Report de Anómalos
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 34
Julio 2012
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 34
Julio 2012
Batch-at-a-Glance Comprobación de tolerancias para transiciones cualificadoras
Tolerancias de legislación
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 35
Julio 2012
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 35
Julio 2012
Batch-at-a-Glance Navegación + Informacion
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 36
Julio 2012
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 36
Julio 2012
Integrador libre de parámetros Validación de picos
Valida la calidad de pico basándose en:
– Altura de pico
– Area de pico
– Anchura de pico
– Simetría de pico
– Picos unidos a la derecha/izquierda
– Nivel de “spikes” en un pico
Clasifica la calidad de los picos como:
– Aceptados
– Revisar
– Rechazar
¡Permite centrarse en los picos de interés!
Merge Valley Height 15 %
Peak Accepted
Merge Valley Height 39 %
Inspect Peak
Merge Valley Height 54%
Peak Rejected
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 37
Julio 2012
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 37
Julio 2012
Reporting basado en Excel Excel 2003 + XML
Selección de la plantilla correcta Cola con reports múltiples Selección Impresora/Pdf
Excel Carga la plantilla Importa los resultados Formatea el report Report es: a) Guardado como XLS b) OPT: Printer c) OPT: PDF
Report Resultados (XML) & Gráficos generados
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 38
Julio 2012
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 38
Julio 2012
Agenda
1. Introducción al Agilent 7000B GC Triple Cuadrupolo
2. Analizador 2.0: Una solución global a los principales
problemas del laboratorio de medioambiente • Legislación
• Sensibilidad y Preparación de la muestra
• Acreditación
• Software Mass Hunter-Reporting
• GC/MS/MS – Analizador 2.0
3. Otras aplicaciones: a. Determinación de compuestos organoestánnicos
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 39
Julio 2012
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 39
Julio 2012
El concepto de analizador en AGILENT
La instalación y el test de la aplicación se realiza con Espcialistas de Agilent
en el mismo laboratorio del cliente
Instalacion y
familiarización
por Especialista
Responsabilida
d del cliente
Soporte
postventa
Chequeo en
fábrica
Producción de los
componentes
individuales
Testeo de los
componentes
individuales (OFN
Montaje del sistema
Desarrollo del método
en el sistema
Mix para chequear la
aplicación en el sistema
Inyección de la pimera
muestra del cliente
Optimizar el método del
cliente
Mantenimiento y servicio
Implementación
en fábrica
Consulting
opcional
Despues de
la venta
I&F por
especialista
Venta solo
del equipo
Venta del
analizador
Anlizador
aporta un
valor
añadido
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 40
Julio 2012
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 40
Julio 2012
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 41
Julio 2012
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 41
Julio 2012
Características Técnicas: Pesticidas y Contaminantes medioambientales GC/MS/MS Analyzer 2.0
Nuevo
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 42
Julio 2012
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 42
Julio 2012
GC 1 SSL/FPD
GC/MS
GC 2 PTV/µECD
Column 1
Column 2
Column 3
Column 1
GC 1 SSL/NPD
¿Qué es el Retention Time Locking (RTL)?
Es la posibilidad de traspasar los tiempos de retención cromatográficos de un sistema cromatográfico a otro con el mismo método y la misma columna.
¿Cómo se consigue?
Ajustando la presión en cabeza de columna de la columna vía EPC usando MassHunter.
Bloqueo de tiempos de retención
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 43
Julio 2012
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 43
Julio 2012
ANALISIS RTL GC-MS (/MS)
Cargar el metodo, una sola inyección para re-lock RT en el lab del cliente, y el método de
adquisición está establecido!
Trifluralin
Expected RT = 5.8185 min
Sistema en lab. Agilent
Sistema en Lab del cliente
despues de re-lock
5.8177 min
5.8176 min
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 44
Julio 2012
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 44
Julio 2012
- Capacidad de programación de temperatura Hot/cold S/SL (pulsed mode), temperature programmed vaporization (PTV), solvent vent.
- Flexibilidad en los volúmenes de inyección Análisis de muestras termolábiles y mínima discriminación en la inyección para compuestos con alto peso molecular
- Mayor sensibilidad en inyecciones de gran volumen
- Compatibilidad con Tecnología de flujo Capilar Venteo de disolventes y uso de Backflush
- Totalmente integrado con Chemstation, EZChrom y MassHunter
Nuevo Inyector Multimodo
Ambient In-vial Small-Volume Derivatization Dilution Internal Standard Heating/Mixing Headspace Extraction Sampling Addition Bar Code
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 45
Julio 2012
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 45
Julio 2012
¿Por que usar retroflujo (Backflush)?
Incrementa la productividad:
• La selectividad del MS/MS elimina “matrices sucias”
• Los requerimientos de los LOD hace que se necesiten inyecciones de
grandes volumenes
• Los picos más pesados eluyen mas tarde y no son “idealmente cromato-
grafiables” dejando un residuo en la columna
• Matrices pesadas contaminanc la fuente más rápidamente – PERDIENDO
prestaciones!
¡Retroflujo asegura que la calidad de los datos se mantiene con GC/MS/MS!
El no usarlo puede representar entre un 10-20% caida de la sensibilidad.
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 46
Julio 2012
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 46
Julio 2012
Analsis de extracto de leche
5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 70
Run se para a 42 min y el
retroflujo se realiza a 280oC
durante 7 min
Necesita 33 min adicionales y
poner a 320oC la columna
para eliminar estos picos.
Blanco run despues de limpieza
min
Columna limpia.
Una vez instalado, el tiempo de retroflujo
trabajará para TODOS los compuestos
pesados.
- Los compuestos de menor peso eluyen
primero
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 47
Julio 2012
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 47
Julio 2012
Sin opción de backflush Un problema serio
Abundance
4.00 6.00 8.00 10.00 12.00 14.00 16.00 18.00 20.00 0
2000000
4000000 6000000
8000000 1e+07
1.2e+07 1.4e+07
1.6e+07 1.8e+07 2e+07
2.2e+07 2.4e+07
2.6e+07 2.8e+07
3e+07 3.2e+07
3.4e+07 3.6e+07
3.8e+07 4e+07
4.2e+07 4.4e+07
4.6e+07
Time
B
A
Superposición de dos cromatogramas correspondientes a un blanco inyectado antes y después de una secuencia de tres
inyecciones de lechuga sin BACKFLUSH
Tras solo 3 muestras, el fondo es claramente mayor debido al
aumento de ruido quimico a nivel espectral
A: TIC: lettuce_blank.D\data.ms
B: TIC: lettuce_blank3.D\data.ms
Cromatograma suministrado por
usuario de Almeria
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 48
Julio 2012
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 48
Julio 2012
Con opción de backflush Sin incrementos de fondo y RTs repetitivos
Tiempos de retención totalmente estables y línea de base casi libre de ruido químico
4.00 6.00 8.00 10.00 12.00 14.00 16.00 18.00 20.00 0
2000000
4000000
6000000
8000000
1e+07
1.2e+07
1.4e+07
1.6e+07
1.8e+07
2e+07
2.2e+07
2.4e+07
2.6e+07
2.8e+07
3e+07
3.2e+07
3.4e+07
3.6e+07
3.8e+07
4e+07
4.2e+07
4.4e+07
4.6e+07
Time
Abundance
TIC: lettuce_10_ppb.D\data.ms
TIC: lettuce_100_ppb.D\data.ms
TIC: lettuce_5_ppb.D\data.ms
Superposición de dos cromatogramas correspondientes a un blanco inyectado antes y después de una secuencia de tres inyecciones de lechuga sin BACKFLUSH
Cromatograma suministrado por
usuario de Almeria
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 49
Julio 2012
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 49
Julio 2012
MS-Tee QQQ
EPC MMI Pres Alta
1.0 ml/min
Flujo Constante
Pres = 0 Presión RESIDUAL Presión ALTA
Backflush y análisis simultáneos: Funcionamiento
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 50
Julio 2012
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 50
Julio 2012
Nuevo analizador de pesticidas 2.0 BASE DE DATOS DE TRANSICIONES MRM
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 51
Julio 2012
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 51
Julio 2012
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 52
Julio 2012
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 52
Julio 2012
Contiene 7000 MRMs optimizados de 1000 pesticidas
-- basados en más de 3000 inyecciones
Máxima Flexibilidad permitiendo la optimización de métodos
• Promedio de 7 transiciones MRM por componente con sus
intensidades relativas
-- Muy útil para evitar interferencias proveniente de la matriz
• Clasificado por compuestos, numero CAS etc. En formato excel
-- Permite búsquedas y ordenación fácil para realizar métodos
• Tres métodos cromatográficos con RTs y RI
-- Permite máxima liberta para seguir flujo de trabajo del cliente
• Intensidades absolutas por cada transición MRM
-- Permite una semi- cuantificación sin el uso de estándares
La más completa base de datos MRMs con la máxima flexibilidad
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 53
Julio 2012
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 53
Julio 2012 Febrero 2011 Febrero 2011
Analyzer 2.0 Update – No sólo pesticidas
Hasta 1100 compuestos con mas de 8000 transiciones MRM
• Pesticidas
• Ftalatos
• PBDEs
• PAHs
• PCB congéneres
• Compuestos según norma EPA 8270
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 54
Julio 2012
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 54
Julio 2012
Peso
molecular
promedio
y masa
exacta
Cada compuesto es
clasificado con hasta
dos categorías
Base de datos con RTs (y RIs) para ser usado
con hasta tres métodos de GC diferentes(CP,
CF-target, y CF-screening).
Flexibilidad: 7 transiciones; clasificaciones; 3 métodos RTs y RIs
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 55
Julio 2012
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 55
Julio 2012
(Escala de color): Rojo denota mayor intensidad y
azul una intensidad mas debil entre todas las
transiciones.
The Flexibility: Excel format, relative and absolute intensity
Excel MassHunter
Format
Un Ion de Cuantificacion y varios
cualificadores por compuesto
Las intensidades
absolutas y relativas
Intensidad de los Iones ratio
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 56
Julio 2012
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 56
Julio 2012
Click para ordenar,
esconder y mostrar los
cualificadores
Filtrar y ordenar como en Microsoft Exceltm
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 57
Julio 2012
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 57
Julio 2012
Ordenar para rápidamente
seleccionar un Quant (Q0) y
seleccionar los tres cualificadores
Filtrar y ordenar como en Microsoft Exceltm
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 58
Julio 2012
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 58
Julio 2012
Click en el boton de ordenacion para
seleccionar/mostrar los compuestos que serán
añadidos al metodo de adquisición.
Filtrar y ordenar como en Microsoft Exceltm
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 59
Julio 2012
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 59
Julio 2012
Agenda
1. Introducción al Agilent 7000B GC Triple Cuadrupolo
2. Analizador 2.0: Una solución global a los principales problemas
del laboratorio de medioambiente • Legislación
• Sensibilidad y Preparación de la muestra
• Acreditación
• Software Mass Hunter-Reporting
• GC/MS/MS – Analizador 2.0
3. Otras aplicaciones: a. Determinación de compuestos organoestánnicos
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 60
Julio 2012
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 60
Julio 2012
Análisis de tributilestaño (TBT) y
compuestos relacionados por GC-QQQ
Usos:
■ -Agentes anti incrustantes (protección de algas, moluscos, etc.)
■ -Fungicidas en conservantes de madera
■ -Conservantes en tejidos, papel, piel y vidrio.
■ -Insecticidas, biocidas, repelentes de roedores, antioxidantes,
inhibidores de corrosión, retardantes de llama del poliéster, etc.
■ -El metacrilato de tributil estaño se usa como estabilizador del PVC
Legistalación de control y acuerdos internacionales:
Environmental Quality Standards Directive (2008/105/EC) designa al
TBT como Substancia peligrosa prioritaria (Priority Hazardous
Substance)
■
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 61
Julio 2012
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 61
Julio 2012
Análisis de tributilestaño (TBT) y
compuestos relacionados por GC-QQQ
Técnicas analíticas disponibles
GC-AAS
GC-FPD
GC-MS
HPLC-ICP-AES
HPLC-ICP-MS
GC-QQQ
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 62
Julio 2012
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 62
Julio 2012
Análisis de tributilestaño (TBT) y compuestos relacionados por GC-QQQ
250ml sample
Spike samples with 50ul of internal standard
Adjust to pH 5 with acetic acid/ acetate buffer
Shake for 1 minute
Add 2ml 0.3% sodium tetraethyl borate in
methanol
Add 2ml 0.05% tropolone in hexane/ethyl
acetate
Shake for 1 minute
Allow 30 minute reaction time with occasional
shaking
Transfer organic layer into 2ml vial
Analyze by GC-QQQ
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 63
Julio 2012
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 63
Julio 2012
Cromatograma TBT / Espectro de masas
MBT
TBT
DBT
TtBT
Espectro de masas del derivado TBT
TBT eluye a 13.76 minutos
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 64
Julio 2012
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 64
Julio 2012
TBT Calibration/MRM transitions
Quantification
291m/z 179m/z
Qualification
207m/z 151m/z,
205m/z 149m/z
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 65
Julio 2012
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 65
Julio 2012
TBT Validation
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 66
Julio 2012
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 66
Julio 2012
Conclusiones
1. Un sistema basado en la tradición GC/MS Agilent, con más de 30 años de experiencia en el manejo de sistemas cuadrupolares
2. Un sistema especialmente dedicado para un robusto acoplamiento GC destinado a obtener las mejores prestaciones sin riesgos ni falsas expectativas
3. Una novedosa celda de colisión basada en el desarrollo realizado para la serie 6400 LC/MS Triple Cuadrupolo
4. Un sistema destinado a aplicaciones en matriz compleja en busca de la más alta robustez y sensibilidad
5. Facilitando la puesta en marcha de la aplicación a través del uso del MassHunter Software o del uso de los Agilent Analyzers
6. Colaborando con el laboratorio en muchas de las tareas propias del trabajo en entorno acreditado
7. MassHunter Software. Una nueva plataforma que recoge las demandas del usuario más exigente en cuestiones relevantes como el tratamiento de datos, el autosintonizado o la generación de reports
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 67
Julio 2012
E-seminar Soluciones Agilent en Medioambiente Page 67
Julio 2012
Jose Juan Rivero Especialista de Producto
AGILENT TECHNOLOGIES
901.11.68.90
MUCHAS GRACIAS
por su atención