analisis bacteriologico
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Proyecto de Proyecto de Vinculación Vinculación ComunitariaComunitaria
CCaañño Martín Peo Martín Peñña a
MicrobiologíaMicrobiología
BIO 206BIO 206
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Proposito del Proyecto:Proposito del Proyecto:
El proyecto de Vinculación Comunitaria, El proyecto de Vinculación Comunitaria, permite al estudiante poner en práctica lo permite al estudiante poner en práctica lo aprendido en el laboratorio y a su vez beneficia aprendido en el laboratorio y a su vez beneficia a los miembros de la comunidad aledaña al a los miembros de la comunidad aledaña al Caño.Caño.
El propósito de este proyecto es cuantificar e El propósito de este proyecto es cuantificar e identificar coliformes fecales en las muestras identificar coliformes fecales en las muestras recolectadas.recolectadas.
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Ubicación del Caño Martín Ubicación del Caño Martín PeñaPeña
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Comunidad de FocoComunidad de Foco
El estudio fue enfocado en Sector La Marina el El estudio fue enfocado en Sector La Marina el cual esta aledaña al caño.cual esta aledaña al caño.
La escuela elemental Barrio Obrero I, que está La escuela elemental Barrio Obrero I, que está en la comunidad, se encuentra afectada por en la comunidad, se encuentra afectada por las condiciones del caño. las condiciones del caño.
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Problema Presentado:Problema Presentado:Señales físicas de contaminación Señales físicas de contaminación en la comunidad cercana al Caen la comunidad cercana al Caññoo
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Señales físicas de contaminación Señales físicas de contaminación en la comunidad cercana al caen la comunidad cercana al cañño.o.
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Desperdicios encontrados:Desperdicios encontrados:Escombros yEscombros y desechos de desechos de origen animal o humano.origen animal o humano.
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Hipótesis planteada:Hipótesis planteada:
Esperamos Esperamos confirmar la confirmar la presencia de presencia de coliformes en las coliformes en las muestras de agua muestras de agua recolectadas en el recolectadas en el Caño. Caño.
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Estudio Microbiológico Estudio Microbiológico del Aguadel Agua
La presencia de bacterias coliformes sirven como marcadores de La presencia de bacterias coliformes sirven como marcadores de contaminación fecal en cuerpos de aguascontaminación fecal en cuerpos de aguas
Coliformes fecales son bacterias intestinales las cuales son partes Coliformes fecales son bacterias intestinales las cuales son partes de la flora normal en seres humanos y animalesde la flora normal en seres humanos y animales
Los coliformes se distinguen por :Los coliformes se distinguen por : morfología de bacilos Gram negativosmorfología de bacilos Gram negativos facultativos anaeróbicos facultativos anaeróbicos No forman esporas No forman esporas Fermentan lactosaFermentan lactosa
Enterobacteriaceae
Escherichia coli Klebsiella pneumoniae Enterobacter spp.
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Bacterias entericas Bacterias entericas
Klebsiella pneumoniaeKlebsiella pneumoniae
Escherichia coliEscherichia coli
Enterobacter spp.Enterobacter spp.
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Estas bacterias son Estas bacterias son causantes de:causantes de:
E. coli E. coli - diversidad de enfermedades - diversidad de enfermedades gastrointestinales como el síndrome de gastrointestinales como el síndrome de Montézuma e infecciones del tracto urinarioMontézuma e infecciones del tracto urinario
K. pneumoniae - K. pneumoniae - septicemia pediatrica, septicemia pediatrica, pneumonia , infecciones del tracto urinariopneumonia , infecciones del tracto urinario
Enterobacter spp. - Enterobacter spp. - infecciones del tracto infecciones del tracto urinariourinario
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Flora NormalFlora Normal
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Materiales Necesarios:Materiales Necesarios:
Sombrilla (opcional)Sombrilla (opcional) Bastón con soporte de botella Bastón con soporte de botella
para colectar el aguapara colectar el agua Botellas de cristal estérilesBotellas de cristal estériles Gomas plásticasGomas plásticas Etiquetas Etiquetas
MarcadorMarcador Nevera con hieloNevera con hielo GuantesGuantes Botas de gomaBotas de goma Batas de laboratorioBatas de laboratorio CámaraCámara
FotográficaFotográfica De videoDe video
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Colección de muestrasColección de muestras
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Colección de muestrasColección de muestras
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Proceso de colecciónProceso de colección
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Análisis de las muestras Análisis de las muestras de agua.de agua.
I.I. Método de Filtración Método de Filtración II.II. Determinación del número mas probable de Determinación del número mas probable de
bacterias/100 mL de aguabacterias/100 mL de aguaIII.III. Análisis cuantitativos empleando diluciones Análisis cuantitativos empleando diluciones
en serie (# de bacterias/mL)en serie (# de bacterias/mL)IV.IV. Pruebas bioquímicas para identificar Pruebas bioquímicas para identificar
taxonómicamente las bacteriastaxonómicamente las bacteriasV.V. Uso de métodos comerciales para la Uso de métodos comerciales para la
identificación identificación
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Realización de Análisis:Realización de Análisis:Trabajo en el laboratorioTrabajo en el laboratorio
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Trabajo en el laboratorioTrabajo en el laboratorio
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Método de Filtración Método de Filtración
Filtración por membranaFiltración por membrana
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Extracción de membranaExtracción de membrana
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Medio nutritivo para Medio nutritivo para cultivar bacterias cultivar bacterias
coliformes:coliformes: Agar EMB Agar EMB
selectivo para selectivo para coliformes fecalescoliformes fecales
Suprime crecimiento Suprime crecimiento de otros de otros microorganismos microorganismos
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Resultados obtenidos:Resultados obtenidos:
Dos tipos diferentes de colonias:Dos tipos diferentes de colonias: Apariencia mucoide y brillosaApariencia mucoide y brillosa Verde metálicoVerde metálico
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Sub-cultivosSub-cultivos
Colonias verde metálicas son características de E. coli
Colonias mucoide son caracteristica de Klebsiella
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Número mas probable de Número mas probable de Coliformes presentes en cada Coliformes presentes en cada
muestra: estimación muestra: estimación estadísticaestadística
Fase presuntiva Fase presuntiva Fase confirmatoriaFase confirmatoria Fase completadaFase completada
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Resultados Obtenidos:Resultados Obtenidos:
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MPN: Número Más MPN: Número Más ProbableProbable
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Fase confirmativaFase confirmativa
Caldo Lauryl Sulfato Caldo Lauryl Sulfato es selectivo para es selectivo para bacterias Gram bacterias Gram negativas.negativas.
Resultados:Resultados: PositivoPositivo
Producción de gas Producción de gas
NegativoNegativo No producción de gasNo producción de gas
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Fase CompletadaFase Completada
Resultados positivos en Resultados positivos en la fase confirmativala fase confirmativa Inoculados en EMBInoculados en EMB
ConfirmaciónConfirmación
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Diluciones en SerieDiluciones en Serie
PropósitoPropósito Cuantificar numero de bacterias/mL de aguaCuantificar numero de bacterias/mL de agua
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Resultados obtenidos:Resultados obtenidos:
Se observo crecimiento de una colonia en la Se observo crecimiento de una colonia en la dilucion de 1:10,000dilucion de 1:10,000
# de bacterias/mL = (#colonias)(dilución)# de bacterias/mL = (#colonias)(dilución)
1: 1001: 1001: 10001: 1000
1: 100001: 100001: 1000001: 100000 1: 10000001: 1000000 1: 10000001: 1000000
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Aislamiento de Colonias:Aislamiento de Colonias:sub-cultivos de dilución en sub-cultivos de dilución en
serieserie
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Pruebas de IMViC:Pruebas de IMViC:
IndolIndol Rojo de MetilRojo de Metil Vogues-ProskauerVogues-Proskauer Citrato Citrato
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Resultados de IMViCResultados de IMViC
ResultadosResultados Colonias verde metalicoColonias verde metalico
Indol +Indol + Rojo de Metil +Rojo de Metil + VP –VP – Citrato –Citrato – Movilidad +Movilidad +
Colonias mucoideColonias mucoide Indol –Indol – Rojo de metil +Rojo de metil + VP +VP + Citrato +Citrato + Movil -Movil -
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Uso de pruebas Uso de pruebas comerciales: Enterotubocomerciales: Enterotubo
Pruebas bioquímicas para identificar Pruebas bioquímicas para identificar taxonómicamente las bacterias.taxonómicamente las bacterias.
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Resultados obtenidos:Resultados obtenidos:
Confirmación del género y especie a través de su Confirmación del género y especie a través de su comportamiento metabólicocomportamiento metabólico
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ConclusiónConclusión
Hipótesis confirmadaHipótesis confirmada El agua del Caño está contaminada con: El agua del Caño está contaminada con:
Escherichia coli Escherichia coli Klebsiella pneumoniaeKlebsiella pneumoniae
El # de bacterias/mLEl # de bacterias/mL
= (1 colonia)( 1:10000)= (1 colonia)( 1:10000)
= 10,000 bacterias por cada mL de agua= 10,000 bacterias por cada mL de agua