transcripcion del gen biotech.2011

2011

INHIBIDORES DE LA REPLICACIÓN

• Actinomicina D: Inhiben la síntesis de ADN y ARN, tanto en eucariotes como en procariotes

• Acido Nalidíxico, Acido Oxonílico, norfloxacina,enoxacina, ciprofloxacina, etc. inhiben a la DNA girasa bacteriana

• Doxorubicina (Adriamicina), amsacrina inhiben a la Topoisomerasa II de eucariotes. SE están usando en el tratamiento del cáncer

• Acicloguanosina ( Acyclovir) inhiben a las ADN polimerasas de algunos virus y se les usa para tratar infecciones virales.

DNA POLIMERASA BACTERIANAS Y DE EUCARIOTES

FUNCION Enzimas Bacter Enzimas Eucar.

Formación del primer

Primasa Polα y primasa

Copiar la cadena completa

Pol III Pol δ

Sintesis de fragmen- tos de Okazaki

Pol III Pol δ

Llenar despues de retirar el primer

Pol I Pol δ

Reparar la escisión de bases

Pol I Pol β

DNA POLIMERASAS DE BACTERIA

CARACTE-RISTICAS

α β γAct. Poli- merizante

5’→ 3’ 5’→ 3’ 5→3’

Act. Exonu- cleásica

5’→ 3’

3’→ 5’

3’ → 5’ 5’→ 3’

3’ → 5’

P.M. 109,000Una cadena

120,000 400,000Varias subunidades

Act, molec.

Molec/cel

600

400

30

1

9000

10

REPRESENTACION ESQUEMATICA DE LA SINTESIS PROTEICA (EXPRESION DEL GEN)

TRANSCRIPCION DE LA INFORMACION GENETICA

SINTESIS PROTEICA

EXPRESION GENICA

EXPRESION GENICA

EXPRESION GENICA EN EUCARIOTES Y PROCARIOTES

1. Exon-intron-exon2. 5’ cap3. 3’ poli AAAA4. Nucleo-citoplasma5. 3 tipos de RNA polimerasa

ProcarionteEucarionte

RNA POLIMERASAS

• RNA polimerasa I : Transcribe la mayoría de genes rRNA

• RNA polimerasa II: Transcribe todos los genes que codifican proteínas

• RNA polimerasa III: Transcribe todos los genes tRNA y el gen del rRNA 5S

Sigma

BetaAlfa

Alfa

Beta’

RNA POLIMERASA DE BACTERIAS

RNA POLIMERASAS DE LOS EUCARIOTES

Propiedades I II III

Localización Nucleolo Cromatina y nucleoplasma

Nucleoplasma

% de la actividad celular

50-70 20-40 10

Productos rRNA 28 S, 18S, 5.8 S

mRNAs tRNAs

rRNA 5S

Relación Mn /Mg para mayor actividad

1-1.5 2-5 2

Concentración de α-amanitina necesaria para la inhibición(ug)

>400 0.025 20

SEÑALES DE ACTIVACION DE GENES

2.Demetilación3.Presencia de zonas

hipersensibles a la DNAasa

En procariontes (bacterias) un mRNA puede tener información para más de un gen

DÓNDE SE INICIA Y TERMINA LA TRANSCRIPCION ‘

Promotor: secuencia río arriba del inicio de la transcripción donde se une el complejo de transcripción incluyendo la RNA polimerasa.Factor de transcripción: proteínas que regulan la expresión génica, se unen a secuencias del DNA río arriba del sitio de inicio de la transcripción o al complejo de transcripción, estimulando o reprimiendo la actividad del complejo.

DONDE SE INICIA Y TERMINA LA TRANSCRIPCION

TRANSCRIPCION Y PROCESAMIENTO DE LA INFORMACIÓN GENICA

La RNA polimerasa (12 subunidades) requiere de estos factores que permiten:•Posicionar correctamente la enzima•Regular su actividad

FACTORES GENERALES DE TRANCRIPCION:•TFIID: 2 subunidades (TBP y 1complejo de 10 TAFs)•TFIIB: (1 proteína) media la interacción entre TFIID y la Polimerasa•TFIIF: (4 proteínas) estabiliza el complejo DNA-TBP-TFIIB.•TFIIE: (4 proteinas) regula TFIIH y en conjunto promueven la formación la adición del primer nucleotido del RNA.•TFIIH: es el complejo de mayor tamaño (9 subunidades) actividad helicasa y de reparación de DNA.

Dominio CTD

ACCION DE LA PROTEINA ACTIVADORA

El complejo: RNA polimerasa y los factores generales de la transcipción, son suficientes para realizar transcripción especificamenten en regiones que contienen un promotor.

Sin embargo se requiere de otros factores (proteinas) que activen o desactiven este proceso.

Existen complejos de proteínas que integran señales de regulación tanto de otros factores de transcripción como de señales provenientes de la célula

Activación de la transcripción via “mediator”

A diferencia de los factores de transcripción, estas proteinas no se unen al DNA

•Se unen a laRNA polimerasa•Pueden regular la actividad de TFIIH CTD kinasa

PROCESAMIENTO DEL hnRNA DE OVOALBUMINA

Dominio CTD

ACCION DE LA PROTEINA CTD (REGULADORA) DURANTE EL PROCESO DE LA TRANSCRIPCION EN EUCARIOTES

TRANSCRIPCION

1

2

3 45

Recent findings suggest that each step regulating gene expression (from transcription to translation) is a subdivision of a continuous process. In this contemporary view of gene expression, each stage is physically and functionally connected to the next, ensuring that there is efficient transfer between manipulations and that no individual step is omitted

RIBOSOMA: Estructura y función en la síntesis proteica

El Factor Sigma en la Transcripción

SEÑALES DE INICIO Y DE TERMINACION DE LA TRANSCRIPCION

TERMINACION DE LA TRANSCRIPCION

• FASES:1. Terminación del crecimiento de la cadena

de ARN2. Liberación de la cadena recien sintetizada

de ARN3. Liberación de la ARN polimerasa

TERMINACION DE LA TRANSCRIPCION

• Algunos RNA requieren de un factor adicional para la terminación de su síntesis, es el factor rho

• Este factor tiene un PM de 276000 y es un hexámero constituido de subunidades idénticas de 46000 de PM. El factor rho utiliza ATP para su actividad, se une a la cadena naciente de ARN y la separa del molde

EL CODIGO GENETICO

EL CODIGO GENETICO

t RNAt RNA

ESTRUCTURA DEL RNA DE TRANSPORTE ( tRNA)

PARTICIPACION DEL RIBOSOMA EN LA SINTESIS PROTEICA

RIBOSOMA: Estructura

SITIOS E, P y A EN EL RIBOSOMA

EL POLIRRIBOSOMA

Subunidad mayor

Subunidad menor

Proteína en síntesis

Ribosoma

FORMACION DEL COMPLEJO DE INICIACION DE LA SINTESIS PROTEICA

CRECIMIENTO DE LA CADENA PEPTIDICA

PROCESAMIENTO DEL RNA

TRANSCRIPCION Y PROCESAMIENTO DE LA INFORMACIÓN GENICA

EL FLUJO DE LA INFORMACION GENETICA EN UNA CELULA SUPERIOR (EUCARIOTICA)

THORU PEDERSON

SINTESIS DE LAS PROTEINAS DE EXPORTACION

GLICOSILACION DE LAS PROTEINAS

REGULACION TRADUCCIONAL DE LA EXPRESION GENICA

• HEMO ↓• ICH ( Inhibidor controlado por el hemo) ↑• Fosforilación del eIF-2*• eIF-2*-eIF-2B (Secuestramiento del eIF-2)