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SalmonellaSalmonella

LaboratorioLaboratorio de de MicrobiologíaMicrobiología AplicadaAplicadaDraDra. Esther Z. Vega . Esther Z. Vega BermúdezBermúdez

SalmonellaSalmonella sp.sp.

SalmonellaSalmonella

Salmonella

entericaSalmonella

bongori

Subs.

enterica

Subs.

salamaeSubs.

arizonaeSubs.

diarizonaeSubs.indica

Subs.houtenae

From: Porwollik, S., et al., 2004. Characterization of Salmonella enterica subspecies I genovars by Use

Of Microarrays. J. of Bacteriol. 186:5883-5898.

IncidenciaIncidencia de Salmonella de Salmonella

CaracterísticasCaracterísticas

EnterobacteriasEnterobacterias

BacilosBacilos Gram (-) Gram (-)

MótilesMótiles con con

flagelaciónflagelación perítricaperítrica

No No esporulanesporulan

No No fermentanfermentan

lactosalactosa

2, 300 2, 300 especiesespecies

CreceCrece entreentre 40-140 40-140ooCC

VariantesVariantes GenéticasGenéticas

MediadaMediada porpor PlasmidiosPlasmidios

–– UtilizaciónUtilización de de lactosalactosa y y sucrosasucrosa

MicroorganismosMicroorganismos atípicosatípicos puedenpueden ““escaparescapar””aa la la

deteccióndetección en en situacionessituaciones clínicasclínicas

Las Las especiesespecies de de SalmonellaSalmonella no son un no son un grupogrupo homogéneohomogéneo

de de organismosorganismos

ReservoriosReservorios / / AlimentosAlimentos RelacionadosRelacionados

Carnes Carnes crudascrudas

AvesAves

HuevosHuevos

LecheLeche y y productosproductos lácteoslácteos

PescadoPescado

CamaronesCamarones

SalsasSalsas

MezclasMezclas parapara bizcochobizcocho

PostresPostres de de cremacrema

otrosotros

PatogénesisPatogénesis

DosisDosis infecciosainfecciosa tan tan bajobajo comocomo 15-20 15-20 célulascélulas ( (depediendodepediendo de de hospederohospedero))

AntígenosAntígenos estructuralesestructurales (pared (pared celularcelular o o

antígenoantígeno O, H- O, H- flagelarflagelar y el IV- y el IV-antígenoantígeno

capsular capsular termolábiltermolábil - -poderpoder frentefrente a a loslos

ácidosácidos))

SustanciasSustancias tóxicastóxicas

EndotoxinasEndotoxinas

ExotoxinasExotoxinas ( (efectoefecto irritanteirritante y y citotóxicocitotóxico

parapara el el tractotracto intestinal) intestinal)

RutaRuta oral-fecal oral-fecal

SintomatologíaSintomatología y y EnfermedadesEnfermedades

PeríodoPeríodo de de incubaciónincubación de 6- de 6-48hrs48hrs

DiarreasDiarreas

Dolor abdominal Dolor abdominal

FiebreFiebre entreentre 8-72hrs 8-72hrs

Dolor de Dolor de cabezacabeza y y

en el en el cuerpocuerpo

EscalofríosEscalofríos

NaúseasNaúseas

VómitosVómitos

SepticemiasSepticemias

BacteremiasBacteremias

CistitisCistitis, , endocarditisendocarditis y yosteomilitisosteomilitis

SíndromeSíndrome de de ReitersReiters quequepuedepuede terminarterminar en en artritisartritiscrónicacrónica

FiebreFiebre tifoideatifoidea ó óparatifoideaparatifoidea

DiagnósticoDiagnóstico y y TratamientoTratamiento

PruebasPruebas de de serologíaserología y de y de hecesheces fecalesfecales

AislarAislar el el pacientepaciente

TratamientoTratamiento parapara todostodos en el en el hogarhogar

AntibíoticosAntibíoticos

MuestreoMuestreo en en AlimentosAlimentos

MétodosMétodos convencionalesconvencionales de de aislaciónaislación queque

requierenrequieren de de cincocinco díasdías parapara confirmarconfirmar resultadosresultados..

CultivoCultivo 37-42 37-4200C o en C o en neveranevera..

SalmonellaSalmonella

MetodologíaMetodología

Pre-Pre-EnriquecimientoEnriquecimiento

–– CaldoCaldo de de lactosalactosa

PermitePermite la la recuperaciónrecuperación de de célulascélulas ““heridasheridas””

AumentaAumenta la la razónrazón Salmonella:Non-Salmonella Salmonella:Non-Salmonella

–– AguaAgua de de dilucióndilución peptonadapeptonada

ProductosProductos AnimalesAnimales

DiluciónDilución 1:10 1:10

–– I.e.. 25 g I.e.. 25 g muesramuesra a 225 ml de a 225 ml de caldocaldo

24 24 horashoras a 35 a 35 ooCC

EnriquecimientoEnriquecimiento SelectivoSelectivo

1 ml de 1 ml de caldocaldo de de LactosaLactosa

–– 10 ml 10 ml SeleniteSelenite CystineCystine

–– 10 ml 10 ml tetrathionatetetrathionate broth broth

PermitePermite el el crecimientocrecimiento de de SalmonellaSalmonella

No hay No hay resultadosresultados despúesdespúes de de esteeste pasopaso

24 24 horashoras a 35 a 35ooCC

PlacasPlacas SelectivasSelectivas

TresTres tipostipos de de mediomedio selectivoselectivo

–– Bismuth SulfiteBismuth SulfiteMarrónMarrón, , grisgris, negro con , negro con ““metallic sheenmetallic sheen””

–– HektoenHektoen Enteric Agar Enteric AgarAzul-verdosoAzul-verdoso con o sin con o sin centrocentro negro o negro o ““glossy blackglossy black””

–– XyloseXylose Lysine Lysine DesoxycholateDesoxycholate

Rosado con o sin Rosado con o sin centrocentro negro negro

EstriadoEstriado de de ““Selective EnrichmentsSelective Enrichments””

IncubaciónIncubación de 18-24 h a 35 de 18-24 h a 35ooCC

ResultadosResultados –– PRESUMPTIVE POSITIVE PRESUMPTIVE POSITIVE

MedioMedio DiferencialDiferencial –– DiscernimientoDiscernimiento

bioquímicobioquímico

Triple Sugar Iron AgarTriple Sugar Iron Agar

–– Streak Slant and Stab ButtStreak Slant and Stab Butt

–– 1% 1% LactosaLactosa

–– 0.1% 0.1% GlucosaGlucosa

–– SulfatoSulfato FerrosoFerroso

IndicadorIndicador de H de H22SS

–– TiosulfatoTiosulfatoProducciónProducción de H de H22SS

–– RojoRojo fenolfenolAlkalinaAlkalina –– RojoRojo, , AcidoAcido –– Amarillo Amarillo

–– IncubaciónIncubación a 35 a 35 ooCC porpor 24 24 horashoras

Triple Sugar Iron AgarTriple Sugar Iron Agar

ReacciónReacción de de SalmonellaSalmonella

–– Red Slant (Red Slant (AlkalinoAlkalino))

–– Acid Butt (Amarillo)Acid Butt (Amarillo)

–– PrecipitadoPrecipitado Negro Negro

Lysine Iron Agar- Lysine Iron Agar- DiscernimientoDiscernimiento bioquímicobioquímico

Stab Butt and Streak SlantStab Butt and Streak Slant

–– Se Se quierequiere condicionescondiciones anaeróbicasanaeróbicas en el en el fondofondo parapara queque ocurraocurra la ladecarboxilacióndecarboxilación

DecarboxilaciónDecarboxilación a a partirpartir de L- de L-LysinaLysina

SulfatoSulfato FerrosoFerroso

BromoBromo Cresol Purple Cresol Purple

–– VioletaVioleta –– AlkalinoAlkalino, Amarillo - , Amarillo - AcidoAcido

GlucosaGlucosa

TiosulfatoTiosulfato

Lysine Iron AgarLysine Iron Agar

ReacciónReacción de de SalmonellaSalmonella

–– Alkaline Butt Alkaline Butt –– Purple Purple

–– PrecipitadoPrecipitado Negro Negro

SóloSólo eses negativonegativo sisi hay hay condicionescondiciones ácidicasácidicas, , puedenpueden

obtenerseobtenerse otrasotras reaccionesreacciones no no típicastípicas

ConfirmaciónConfirmación BioquímicaBioquímica

AglutinaciónAglutinación de de antígenosantígenos superficialessuperficiales con con anticuerposanticuerpos

específicosespecíficos parapara Salmonella Salmonella

AntígenosAntígenos de de SalmonellaSalmonella

–– O O –– SomáticoSomático –– LipopolisacáridoLipopolisacárido

–– H H –– FlagellarFlagellar –– ProteínaProteína

–– K K –– Capsular - Capsular - PolisacáridosPolisacáridos

AglutinaciónAglutinación

MezcleMezcle anticuerposanticuerpos con un con un pocopoco de de cultivocultivo

AglutinaciónAglutinación eses un un resultadoresultado positivopositivo

AislamientoAislamiento vs. vs. EnumeraciónEnumeración

UsualmenteUsualmente sólosólo se se aislaaisla

Se Se enumeraenumera parapara propósitospropósitos de de investigacióninvestigación

–– MétodoMétodo MPN MPN

–– MétodoMétodo de de filtraciónfiltración porpor membranasmembranas

No No ““AccurateAccurate””

OtrosOtros métodosmétodos- kits - kits bioquímicosbioquímicos

IdentificaciónIdentificación basadabasada DNA-DNA DNA-DNA

IdentificaciónIdentificación basadabasada en en deteccióndetección de de antígenosantígenos

IdentificaciónIdentificación basadabasada en la en la utilizaciónutilización de de sustratossustratos