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ROYAUME DU MAROC
UNIVERSITE MOHAMED V
FACULTE DE MEDECINE ET DE PHARMACIE RABAT
Memoire de Fin de Specialite
-Pharmacie Industrielle-
Réalisé par : Dr. Zineb ALIAT
Encadré par : Pr. Mustapha BOUATIA
Pour l’obtention du Diplome de Specialite
Année 2020
Screening phytochimique et evaluation de l’activite
antioxydante et antilithiasique de Juncus acutus
2
Je tiens à exprimer toute ma reconnaissance à mon
encadrant de mémoire Pr Mustapha BOUATIA. Je
le remercie de m’avoir encadrée, orientée, aidée et
conseillée.
J’adresse mes sincères remerciements à tous les
professeurs, intervenants et toutes les personnes du
laboratoire de chimie analytique pour avoir mis à
ma disposition l’aide et le matériel nécessaires pour
la réalisation de ce travail.
A tous ces intervenants, je présente mes
remerciements, mon respect et ma gratitude
REMERCIEMENT
3
Table des matières
RESUME: ........................................................................................................................... 7
INTRODUCTION : ............................................................................................................... 8
MATERIEL ET METHODES : ................................................................................................. 9
Matériel végétal : ................................................................................................................................. 9
Préparation des extraits : ..................................................................................................................... 9
Caractérisation phytochimique : ........................................................................................................ 10
Détermination des polyphénols totaux : ........................................................................................... 10
Dosage des flavonoïdes totaux : ........................................................................................................ 11
Activité antioxydante: ........................................................................................................................ 11
Activité antilithiasique :...................................................................................................................... 12
Analyses statistiques : ........................................................................................................................ 13
RESULTATS ET DISCUSSION : ............................................................................................ 13
Rendements d’extraction : ................................................................................................................. 13
Caractérisation physicochimique : ..................................................................................................... 13
Polyphénols totaux:............................................................................................................................ 14
Flavonoïdes totaux : ........................................................................................................................... 15
Ativité antioxydante: .......................................................................................................................... 16
Activité antilithiasique :...................................................................................................................... 19
Conclusion: ..................................................................................................................... 22
Références: ..................................................................................................................... 23
4
LISTE DES TABLEAUX
Tableau 1 : Screening de quelques groupes phytochimiques de 4 extraits de Juncus acutus
Tableau 2 : Teneur totale en polyphénols exprimée en milligrammes équivalent d'acide
gallique par gramme de poudre de Juncus acutus
Tableau 3 : Teneur totale en flavonoïdes exprimée en milligrammes équivalents de Quercétine
par gramme de poudre de Juncus acutus
5
LISTE DES FIGURES
Figure 1 : Pourcentage d’inhibition des radicaux libres des différents extraits de Juncus acutus
en utilisant le test DPPH.
Figure 2 : Les valeurs de capacité de piégeage des radicaux DPPH (IC50) des différents
extraits de Juncus acutus
Figure 3 : Pouvoir réducteur des extraits de Juncus acutus
Figure 4 : Test au phosphomolybdate de Juncus acutus
Figure 5 : Taux de dissolution des calculs de cystine dans l'extrait de Juncus acutus et la
solution témoin
Figure 6 : Taux de dissolution des calculs d'acide urique dans l'extrait de Juncus acutus et la
solution témoin
Figure 7 : Taux de dissolution des calculs de carbapatite dans l'extrait de Juncus acutus et la
solution témoin
6
LISTE DES ABREVIATIONS
AA : Acide Ascorbique
ABTS : Sel d'ammonium d'acide 2,2'-azinobis-3-éthylbenzothiazoline-6-sulfonique
AE : Acétate d’ethyle
BHA : Butylhydroxyanisole
BHT : Butylhydroxytoluène
DPPH : Diphényl-picrylhydrazyl
FRAP : Ferric Ion Reducing Antioxidant Parameter
FTIR : Spectrophotométrie Infrarouge à Transformée de Fourier
MET : Méthanol
ORAC : Oxygen Radical Absorbance Capacity
TRAP : Total Radical Trapping Antioxidant Parameter
UV-V : Ultraviolet-Visible
7
RESUME:
L'objectif de ce travail était de réaliser un screening phytochimique des graines de Juncus
acutus et d'évaluer son activité antioxydante et son activité antilithiasique. Le screening
phytochimique a démontré la présence de catéchine, de tanins et d'alcaloïdes dans les différents
extraits étudiés. L'activité antioxydante des extraits méthanoliques et d'acétate d'éthyle par
ultrasons et macération a été évaluée par la méthode du DPPH, du FRAP et du
phosphomolybdate. L'extrait d'acétate d'éthyle par ultrasons, l'extrait méthanolique par
macération et ultrasons ont respectivement montré une IC50 avec DPPH de 1,449 mg / ml,
1,535 mg / ml et 4,771 mg / ml et un pouvoir réducteur a été observé à des concentrations de
419,561 mg BHA / 100 g, 207,143 mgBHA / 100g et 142,20mgBHA / 100g par la méthode de
FRAP et à des concentrations de 839,470mg AAE/100g, 283,260mgAAE / 100g et
141,018mgAAE / 100g par le test au phosphomolybdate. La détermination des polyphénols
totaux de l'extrait d'acétate d'éthyle par ultrasons, de l'extrait méthanolique par macération et
par ultrasons a présenté respectivement des teneurs de 2,428 mg GAE/g, 1,960 mg GAE/g et
1,172 mg GAE/g, de même, le dosage des flavonoïdes a montré respectivement des
concentrations de 14,469 mg EQ/g, 6,466 mg EQ/g et 3,143 mg EQ/g. L'activité antilithiasique
a été évaluée sur des calculs de Carbapatite, de Cystine et des calculs d'acide urique. La perte
de masse d'acide urique, de carbapatite et de cystine était respectivement de 42%, 7% et 16%.
143 mg EQ / g.
Mots clés: Juncus acutus - Activité antioxydante - Activité antilithiasique – flavonoïdes -
polyphénols.
8
INTRODUCTION :
Les plantes médicinales sont le principal remède pour la fabrication de remèdes
pharmaceutiques. En effet, les substances naturelles provenant des plantes ont de multiples
intérêts mis à profit dans le système de soins traditionnel et dans différentes industries. Parmi
ces composés, on retrouve dans une large mesure les métabolites secondaires qui sont
particulièrement illustrés en thérapeutique [Hebi et Eddouks, 2016]. Dans notre étude, nous
nous concentrerons sur les activités antioxydante et antilithiasique de Juncus acutus.
Les antioxydants les plus populaires sont l'acide ascorbique (vitamine C),-carotène
(Provitamine A), tocophérol (Vitamine E) et les composés phénoliques. En effet, la plupart des
antioxydants synthétiques ou naturels ont des groupes hydroxyphénoliques dans leurs structures
et les propriétés antioxydantes sont attribuées en partie à la capacité de ces composés naturels
à piéger les radicaux libres tels que les radicaux hydroxyles et les superoxydes [Rice-Evanset
al.,1995; Bartosz, 2003; Popovici et al., 2010].
Plusieurs méthodes sont utilisées pour évaluer, in vitro et in vivo, l'activité antioxydante en
piégeant différents radicaux, tels que les peroxydes par la méthode ORAC (Oxygen Radical
Absorbance Capacity ou capacité d'absorption des radicaux libres), par le TRAP (Total Radical
Trapping Antioxidant Parameter) [Ricardo da Silva et al., 1991]; par la méthode au FRAP
(Ferric Ion Reducing Antioxidant Parameter) [Benzie et souche, 1996]; ou par les radicaux
ABTS (sel d'ammonium d'acide 2,2'-azinobis-3-éthylbenzothiazoline-6-sulfonique) [Re et al.,
1999], ainsi que la méthode utilisant le radical libre DPPH (Diphényl-picrylhydrazyl) [Popovici
et al., 2010; Sharma Om et Bhat, 2009].
Dans notre étude, trois méthodes seront utilisées pour évaluer cette activité: FRAP, DPPH et
test au phosphomolybdate.
9
Au Maroc tel que rapporté par Bouatia et al. (2015), le type de calculs prépondérant était
l'oxalate de calcium monohydraté (56,4%), suivi par l'acide urique (18,1%), de la carbapatite
(7,9%) et de la cystine (0,6%).
Dans cette étude, nous avons choisi d'étudier l'effet des extraits de Juncus acutus sur la les
calculs rénaux de la carbapatite, l'acide urique et la cystine.
Cette étude s'est fixée comme principaux objectifs :
• Réalisation d'un screening phytochimique pour rechercher certains groupes phytochimiques.
• Détermination des polyphénols totaux et des flavonoïdes totaux contenus dans les graines de
Juncus acutus.
• Etude de l'activité antioxydante des extraits méthanoliques et de l'acétate d'éthyle de Juncus
acutus.
• Etude de l'activité antilithiasique des extraits méthanoliques et de l'acétate d'éthyle de Juncus
acutus.
MATERIEL ET METHODES :
Matériel végétal :
L'échantillon prélevé provient de la région sud du Maroc. Au laboratoire, nous avons broyé les
graines de Juncus acutus avec un broyeur jusqu'à obtention d'une poudre fine.
Préparation des extraits :
Nous avons utilisé deux types d’extraction : la macération sous agitation pendant 24 heures et
l'extraction aux ultrasons pendant 60 minutes.
Extraction par macération:
40 g de poudre des graines de Juncus acutus sont extraits dans 100 ml d'acétate d'éthyle par
macération sous agitation pendant 24 heures à température ambiante. Après filtration et séchage
10
de la même poudre, une deuxième extraction dans 100 ml de méthanol a été réalisée dans les
mêmes conditions précédemment décrites.
Extraction par ultrasons:
40 g de poudre des graines de Juncus acutus sont extraits dans 100 ml d'acétate d'éthyle sous
ultrasons pendant 60 minutes à 39 ° C. Après filtration et séchage de la même poudre, une
deuxième extraction dans 100 ml de méthanol a été réalisée dans les mêmes conditions
précédemment décrites.
Les 4 filtrats sont concentrés dans une étuve à 40 ° C afin de se débarrasser du solvant et de
récupérer les extraits. Les 4 extraits ainsi récupérés, sont conservés dans des flacons stériles au
réfrigérateur.
Caractérisation phytochimique :
Nous avons effectué, séparément, des réactions qualitatives sur nos différents extraits de Juncus
acutus pour le screening de certains groupes phytochimiques en utilisant les méthodes de
Harborne (1998),Trease et Evans (1989) ainsi rapporté par Buvaneswari et al. (2011) et Touré
(2015).
Détermination des polyphénols totaux :
La teneur totale en composés phénoliques a été déterminée en utilisant la méthode de Folin
Ciocalteu [Hashemi et al., 2016]. 1,25 ml du réactif Folin (dix fois dilué) a été ajouté à 250 µl
d'extrait ou d'étalon (préparé dans le méthanol) avec des concentrations allant de 0,3 à 3 mg/ml.
Après 4 min, 1 ml d'une solution de carbonate de sodium (7,5 g/100 ml) est ajouté au mélange
précédent. L'ensemble est incubé dans l'obscurité à température ambiante pendant 30 min.
L'absorbance a été mesurée à 765 nm. La concentration des polyphénols totaux est exprimée en
milligrammes équivalent d'acide gallique par gramme d'extrait (mg GAE / g d'extrait).
11
Dosage des flavonoïdes totaux :
La méthode du trichlorure acétique [Tohma et al., 2016] est utilisé pour estimer les flavonoïdes
totaux dans les extraits. 1,5 ml de la solution d'AlCl3 (2%) est ajouté à 1,5 ml de l'échantillon
ou de standard. Après 1 heure de réaction en absence de lumière, la densité optique est
déterminée à 415 nm. La concentration en flavonoïdes a été exprimée en milligramme
équivalent de quercétine par gramme d'extrait (mg EQ / g d'extrait).
Activité antioxydante:
Capacité de piégeage des radicaux libres: DPPH
Le DPPH, un radical libre de couleur violette, est réduit en composé jaune en présence de
composés anti-radicaux libres [Hossain et al., 2015]. Dans les tubes à essai, 500 µl de chaque
extrait ou standard de concentrations différentes (2,5; 5 ; 10 et 15 µg / ml) et 2 ml de solution
de méthanol DPPH (50 µM) ont été introduits, après mélange au vortex, les tubes sont incubés
dans l’obscurité à température ambiante pendant 30 minutes. La mesure a été effectuée à l'aide
d'un spectrophotomètre UV-V à une longueur d'onde de 517 nm.
Des valeurs IC50 ont été calculées pour déterminer l'inhibition de 50% des radicaux DPPH.
Le BHT a été utilisé comme standard.
Dosage du pouvoir antioxydant réducteur ferrique: FRAP
Le pouvoir réducteur de nos extraits a été déterminé en utilisant la méthode de Florentine Marie-
Chantal [Foe et al., 2016]. Le volume de 250 μl de chaque extrait ou de standard de
concentration (0,01 à 0,1 mg / ml) a été ajouté au mélange de 1,25 ml de tampon phosphate (0,2
M ; pH 6,6) et 1,25 ml de ferricyanure de potassium (1%). Après incubation pendant 20 minutes
dans un bain-marie à 50 ° C, 1.25 ml d'acide trichlorure acétique (10%) a été ajouté au mélange
puis centrifugé à 3000 tr / min pendant 10 minutes. Le surnageant (1,25 ml) a été ajouté à un
mélange de 1,25 ml d'eau distillée et 250 μl de chlorure ferrique (0,1%). L'absorbance a été
12
mesurée au spectrophotomètre à 700 nm. Une absorbance accrue du mélange réactionnel
suggère un pouvoir réducteur élevé. Les résultats ont été exprimés en milligrammes équivalent
de butylhydroxyanisole (BHAE) pour 100 grammes d'extrait (mg de BHA / 100g d'extrait).
Phosphomolybdate
Le test est basé sur la réduction du Mo (VI) en Mo (V) par l'échantillon et la formation
subséquente d'un complexe phosphate de Mo (V) vert à pH acide. Le volume de 0,3 ml de la
solution d'extrait est ajouté à 3 ml du réactif (acide sulfurique 0.6 M, phosphate de sodium
28mM et molybdate d'ammonium 4 mM). Le tube est fermé et incubé dans un bain-marie à
95°C pendant 90 minutes. Après refroidissement à température ambiante, l'absorbance de la
solution est mesurée à 695 nm contre un blanc avec un spectrophotomètre UV-Visible. L’acide
ascorbique a été utilisé comme standard. Les résultats ont été exprimés en milligramme
équivalent d'acide ascorbique pour 100 grammes d'extrait (mg AAE / 100g d'extrait).
Activité antilithiasique :
Douze calculs rénaux de carbapatite; cystine et acide urique pur du sud du Maroc ont été
sélectionnés après analyse par spectrophotométrie infrarouge à transformée de Fourier (FTIR).
Leur masse était de 330 ± 12 mg. Un extrait de plante a été préparé par infusion de 3g de plante
sèche dans 100 ml de solution physiologique bouillante pendant 30 minutes. La solution de
NaCl de 9 g/l était utilisée comme milieu témoin pour apprécier les modifications de masse des
calculs. Après filtration, l'extrait a été partagé (60 ml) dans des flacons en verre Erlenmeyer.
Les calculs ont été placés dans un sac poreux de fibres tressées et suspendus dans l'extrait.
[Hannache et al., 2012]
La perte de masse des calculs rénaux a été évaluée en pesant le calcul après séchage à 40 ° C
pendant 18 heures. Chaque test a été effectué 3 fois.
L'évaluation de l'activité de l'extrait a été déterminée en calculant le taux de dissolution des
calculs après séjour dans le milieu expérimental en comparant le poids résiduel des calculs à
13
leur poids initial avant incubation avec notre extrait. Le pourcentage de dissolution a été
déterminé par la formule:
a% = (Winitial - Wfinal) × 100 / Winitial
Avec: a% est le taux de dissolution du calcul et Winitial et Wfinal sont les poids de calcul avant
et après incubation avec l’extrait de la plante.
Analyses statistiques :
Les résultats sont exprimés en moyenne écart-type (SD) et toutes les analyses ont été
effectuées en triple. Les résultats ont été comparés par ANOVA unidirectionnelle avec le post-
test de bonferoni. Une différence est significative si p0,05.
RESULTATS ET DISCUSSION :
Rendements d’extraction :
Le rendement était de 0,517% pour l’extraction par macération réalisée au premier stade avec
de l'acétate d'éthyle sur la poudre de Juncus acutus, la deuxième extraction effectuée au
méthanol a donné un rendement plus élevé qui est de 1,62%.
Pour l’extraction sous ultrasons, les rendements étaient de 2,9% pour l'extrait à l'acétate d'éthyle
et de 1,16% pour l'extrait au méthanol.
L'extraction par le méthanol de la poudre de graines de Juncus acutus par ultrasons a montré
un rendement plus élevé que celui obtenu par macération, et des rendements presque identiques
pour l'extraction avec de l'acétate d'éthyle pour les deux méthodes.
Caractérisation physicochimique :
Les résultats de la caractérisation qualitative de nos extraits sont résumés dans le tableau 1:
14
Tableau 1: Screening de quelques groupes phytochimiques de 4 extraits de Juncus
acutus
Constituants
Macération Sous échographie
Extrait d'acétate
d'éthyle
Extrait de
méthanol
Extrait d'acétate
d'éthyle
Extrait de
méthanol
Stérols et polyterpènes + + - -
Polyphénols - - - -
Flavonoïdes - - - -
Tanins catéchiques + + + +
Tanins gaulois - - - -
Alcaloïdes + + + +
Saponosides - - - -
(+) indique la présence; (-) indique l'absence
Le screening phytochimique des graines de Juncus acutus a montré la présence des tanins
catéchiques et d'alcaloïdes dans tous les extraits. Les stérols et les polyterpènes n'étaient
présents que dans les extraits de macération. Une étude des extraits aqueux de Juncus subulatus
Forsak a révélé la présence d'alcaloïdes, de glycosides, de saponisides, de flavonoïdes et de
terpénoïdes [Fawzy et al., 2013].
Polyphénols totaux:
La spectrophotométrie UV / Visible a permis de quantifier le niveau des polyphénols présents
dans les 3 extraits de Juncus acutus.
La courbe d'étalonnage établie à partir de différentes concentrations d'acide gallique a permis
d'estimer la teneur phénolique de chacun des 3 extraits. La concentration des composés
phénoliques a ensuite été calculée à partir de la courbe d'étalonnage et exprimée en mgGAE/g.
La teneur totale en polyphénols dans les différents extraits de Juncus acutus est présentée dans
le tableau 2.
15
Tableau 2: Teneur totale en polyphénols exprimée en milligrammes équivalent d'acide
gallique par gramme de poudre de Juncus acutus
Extrait de Juncus acutus Teneur totale en polyphénols (mg GAE/g)
Extraction par macération
- Extrait de méthanol
1,960
Extraction par ultrasons
- Extrait d'acétate d'éthyle
- Extrait de méthanol
2,428
1,172
L'extrait d'acétate d'éthyle par ultrasons montre la teneur la plus élevée en composés
phénoliques 2,428 mg GAE / g.
Flavonoïdes totaux :
La courbe d'étalonnage est tracée en utilisant différentes concentrations de Quercétine. La
concentration de flavonoïdes dans les extraits de Juncus acutus est déterminée en se reportant
à la courbe d'étalonnage.
La teneur en flavonoïdes est exprimée en milligrammes équivalent de Quercétine par gramme
d’extrait (mg QE / g d'extrait).
La teneur en flavonoïdes totaux dans les différents extraits de Juncus acutus est donnée dans le
tableau 3.
16
Tableau 3: Teneur totale en flavonoïdes exprimée en milligrammes équivalents de
Quercétine par gramme de poudre de Juncus acutus
Extrait de Juncus acutus Teneur totale en flavonoïdes (mgQE/g)
Extraction par macération
- Extrait de méthanol
6,466
Extraction par ultrasons
- Extrait d'acétate d'éthyle
- Extrait de méthanol
14,694
3,143
L'extrait d'acétate d'éthyle par ultrasons présente la teneur en flavonoïdes la plus élevée avec
une concentration de 14,694 mg QE / g.
Les teneurs totales en polyphénols et en flavonoïdes totaux de nos extraits étaient plus élevées
que celles trouvées dans d'autres études sur Juncus acutus [Erdem et al., 2015] et Juncus effusus
[Li et al., 2013].
Activité antioxydante :
DPPH :
Les différentes concentrations de l'extrait d'acétate d'éthyle par ultrasons (2,5; 5; 10 et 15 μg/ml)
ont montré des activités antioxydantes dose-dépendantes avec 52,30%; 59,14%; 71,83%; et
83,82% d'inhibition. Quant à l'extrait méthanolique, il a montré des taux de 50,46%; 57,35% ;
66,02% et 75,35% d'inhibition pour l'extraction par macération, et des taux de 48,30%; 50,45%;
53,36% et 56,65% pour l'extraction par ultrasons (figure 1).
17
Figure 1: Pourcentage d’inhibition des radicaux libres des différents extraits de Juncus
acutus en utilisant le test DPPH.
La capacité antioxydante des différents extraits a été déterminée à partir de l'IC50, la
concentration nécessaire pour réduire 50% du radical DPPH. Plus la valeur de IC50 est faible,
plus l'activité de l'extrait testé est grande [Hebi et Eddouks, 2016].
Les valeurs IC50 pour les extraits de Juncus acutus sont présentées dans la figure 2.
Figure 2: Les valeurs de capacité de piégeage des radicaux DPPH (IC50) des différents
extraits de Juncus acutus
0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
0 5 10 15 20
Inhibition % EA Ultasound
Inhibition % Met Maceration
Inhibition % Met Ultrasound
I % of DPPH radical
Concentrations µg/ml
0
1
2
3
4
5
6
EA Ultasound Met Maceration Met Ultrasound
IC50 (mg/ml)
Extract
1,459 1,535
4,771
18
L'activité antioxydante la plus importante a été notée pour l’extrait d'acétate d'éthyle par
ultrasons de Juncus acutus avec une IC50 de 1,459 mg / ml.
FRAP (Reducing power assay) :
Le pouvoir réducteur ferrique peut servir d'indicateur significatif du potentiel antioxydant. Les
capacités de réduction des extraits de Juncus acutus ont été déterminées par référence à la
courbe d'étalonnage de l'anti-oxydant de référence BHA. Le pouvoir réducteur le plus important
a été noté pour l’extrait d'acétate d'éthyle par ultrasons avec une concentration de 419,561 mg
BHAE / 100 g. (Figure 3)
Figure 3: Pouvoir réducteur des extraits de Juncus acutus
Test au phosphomolybdate
Le test est basé sur la réduction de Mo (VI) en Mo (V) par l'échantillon et la formation
subséquente d'un complexe phosphate de Mo (V) vert à pH acide. Les capacités de réduction
des extraits de Juncus acutus ont été déterminées par référence à la courbe d'étalonnage de la
vitamine C. Le pouvoir réducteur le plus important a été noté pour l’extrait d'acétate d'éthyle
par ultrasons avec un taux de 839,470 mg AAE / 100 g (figure 4).
0
50
100
150
200
250
300
350
400
450
EA Ultasound Met Maceration Met Ultrasound
Reducing power assay (mg BHAE/100g)
Extract
19
Figure 4: Test au phosphomolybdate de Juncus acutus
Nos résultats ont montré une activité antioxydante plus importante que ceux trouvés dans
d'autres études réalisées sur Juncus Bufonius [El Gawad et al., 2015] et Juncus acutus [Erdem
et al., 2015].Il est également noté que la teneur en polyphénols totaux et en flavonoïdes totaux
et l'activité antioxydante la plus importante ont été observées dans l'extrait d'acétate d'éthyle
par ultrasons.
Activité antilithiasique :
La perte de masse des calculs de cystine était de 60 mg ± 5 mg pour Juncus acutus et 20 mg ±
2 mg pour la solution témoin (16% contre 4% pour la solution témoin (figure 5)).
0
100
200
300
400
500
600
700
800
900
AE Ultrasons Met Macération Met Ultrasons
Phosphomolybdate test (mg AAE / 100g )
Exract
20
0 1 2 3 4 5 6 7
0
10
20
% L
oss o
f m
ass (
Cystine s
tones)
Week
Juncus acutus
9 g/l NaCl/ H2O
Figure 5: Taux de dissolution des calculs de cystine dans l'extrait de Juncus acutus et la
solution témoin
Cette perte de masse était de 158 mg ± 35 mg pour Juncus acutus et de 61 mg ± 3 mg pour la
solution témoin (42% contre 20% pour la solution témoin (figure 6)) pour les calculs d'acide
urique.
0 1 2 3 4 5 6 7
-5
0
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
% L
oss o
f m
ass (
Uric a
cid
sto
ne
s)
Week
Juncus acutus
9g/l NaCl/H2O
Figure 6: Taux de dissolution des calculs d'acide urique dans l'extrait de Juncus acutus et
la solution témoin
21
Et c'était 25 mg ± 4 mg pour Juncus acutus et 19 mg ± 2 mg pour la solution témoin (7% vs 5%
pour la solution témoin (figure 7)) pour les calculs de carbapatite.
0 1 2 3 4 5 6 7
2
4
6
8
% L
oss o
f m
ass (
Carb
apatite
sto
nes)
Week
Juncus acutus
9 g/l NaCl/H2O
Figure 7: Taux de dissolution des calculs de carbapatite dans l'extrait de Juncus acutus et
la solution témoin
La masse des trois calculs rénaux lors de l'incubation avec l'extrait de Juncus acutus et la
solution témoin au cours des trois premières semaines a peu varié, le taux de dissolution est
resté faible (p> 0,05) et a commencé à augmenter entre la quatrième et la sixième semaine
(p=0,01).
Nos résultats n'ont pas montré de différence significative entre l'extrait et la solution témoin en
ce qui concerne la perte de masse des calculs de cystine, carbapatite et acide urique sur la
période expérimentale choisie. Cependant, la pente de la courbe de dissolution obtenue pour les
calculs de cystine et d'acide urique a fortement augmenté au cours des dernières semaines par
rapport aux courbes observées avec les calculs de carbapatite. Ce qui suggère que cette plante
est probablement plus efficace pour dissoudre les calculs de cystine et d'acide urique, mais
nécessite probablement plus de temps pour la dissolution des calculs.
22
Conclusion:
Ces travaux nous ont tout d'abord permis de réaliser un screening phytochimique, afin de
rechercher certains groupes phytochimiques tels que les stérols et les polyterpènes, les
polyphénols, les flavonoïdes, la catéchine et les tanins galliques, les alcaloïdes et les
saponosides; dans des extraits de Juncus acutus.
Cela nous a également permis de quantifier les flavonoïdes totaux et les polyphénols totaux.
L'application de la méthode Folain-Ciocalteu et de la méthode au trichlorure d'aluminium a
montré que la teneur totale en polyphénols est comprise entre 1,172 et 2,428 mg EAG / g; et
que la teneur totale en flavonoïdes est comprise entre 3,143 et 14,469 mgEQ / g.
Concernant l'activité antioxydante, nous avons réalisé 3 tests: le test DPPH, le FRAP et le test
au phosphomolybdate. La teneur en polyphénols totaux la plus élevée ainsi que la teneur en
flavonoïdes totaux et l'activité antioxydante la plus importante ont été observées dans l'extrait
d'acétate d'éthyle par ultrasons. L'étude de l'activité antioxydante des extraits méthanoliques et
de l'acétate d'éthyle de Juncus acutus, a montré qu'ils possèdent une activité antioxydante non
négligeable.
L'étude de l'activité antilithiasique démontre que Juncus acutus est probablement plus efficace
pour dissoudre les calculs de cystine et d'acide urique, mais nécessite probablement plus de
temps pour la dissolution des calculs.
23
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