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BacteriologíaLaboratorio # 3

Objetivos

Comprender la diferencia entre procariotas y eucariotas

Observar los cambios entre el sistema de clasificación anterior y el utilizado actualmente

Aprender técnicas básicas de microbiología y control de bacterias

Procariotas Eucariotas

Carecen de núcleo y organelos limitados por membranas.

Son organismos unicelulares.

Se encuentran en mayor cantidad.

Poseen un núcleo organizado y organelos delimitados por membranas.

Pueden ser unicelulares o pluricelulares.

Sistema de cinco reinos

Robert Whittaker (1969) Procariotas

Reino Monera (bacterias) Eucariotas

Protista (protozoos, algas, mohos del limos, entre otros) Fungi (hongos y liquenes) Plantae (musgos, helechos, coníferas, plantas con flor) Animalia (vertebrados e invertebrados)

Sistema de seis reinos

Carl Woese (1977) Procariotas

Eubacterias Archaebacterias

Eucariotas Protista Fungi Plantae Animalia

Sistema de tres dominios

Carl Woese & George Fox (1990) Procariota

– Bacteria – Archaea (Presentan envolturas con pseudomureína,

ácidos nucleicos ribosomales con nucleótidos mdificados, el ADN se empaquetaen nucleosomas, presentan intrones)

Eucariota– Eukarya

Bacterias

Procariotas Unicelulares Carecen de organelos rodeados por

membranas Pared celular de peptidoglicano DNA en forma de anillos – plásmidos No tienen cromosomas

Reproducción por fisión binaria

Autótrofas Heterotrofas

Beneficios de bacterias

Descomposición y biorremediación Síntesis de vitaminas y antibióticos Industria de alimentos

– Yogurt

Equilibrio ecológico– Fijación de nitrógeno

Flora natural del cuerpo

Desventajas

Morfología

cocos bacilos

espirilos

Ejercicio 1Frotis de la boca

Obtener y observar células bacterianas presentes en la boca. PLACA

Procedimiento:– Preparar laminilla con UNA gota de agua– Frotar el interior de la boca con un palillo de madera– Esparcir por la laminilla– Sujetar la laminilla con pinzas y secar en mechero (no

muy cerca)

Procedimiento (continuación)

– Teñir con 3-4 gotas de cristal violeta– Esperar 1 minuto– Lavar con agua– Secar suavemente– Observar bajo el microscopio

(utilizar aceite de inmersión si es necesario)

Dibuja las células, responde preguntas

Ejercicio 2Bacterias Ambientales

Tomar placa con agar (1 por mesa)a. Exposición al ambienteb. Muestreo de superficiesc. Muestreo de agua

Hacer estriado en placa Sellar la placa con parafina Rotular en los bordes Incubar 48 hrs. Anotar observaciones y dibujar

Control de Crecimiento Bacteriano

Importancia:– Bacterias crecen en una variedad de ambientes– Crecimiento descontrolado o en exceso puede

causar daños ambientales o enfermedades Agentes de control bacteriano

– Antibióticos– Antisépticos– Desinfectantes

Antibióticos– Químico producido por una bacteria u hongo que puede

controlar el crecimiento de otra bacteria u hongo

Antiséptico– Controlan crecimiento bacteriano en tejidos vivos

Desinfectantes– Controlan el crecimiento bacteriano en objetos inanimados

Los antisépticos y desinfectantes no matan todas la bacterias como ocurre en la esterilización, solo reducen el número de bacterias en la superficie

Nota

Eejrcicio 3

Dividir el plato petri en cuatro cuadrantes (por detras).

Sumergir el hisopo estéril en el caldo de bacterias (cerca a mechero, tapar rápido).

Estriar en plato (en dos direcciones). Colocar discos.

Sellar con parafina Marcar alrededor Incubar 48 hrs. /

Observar resultados

Importante Observar inhibición de

crecimiento.

Medir halo de inhibición en mm.– Halo de inhibición – área

alrededor del disco donde el crecimiento bacteriano ha sido inhibido

Anotar resultados y usarlos en el informe.

INDIVIDUAL

Ejercicio 4. Laminillas de bacterias

Montar laminillas en microscopios Observar y tomar nota de características:

forma (bacilos, cocos, espirilos), si están agregados o separados

Ejercicio 5. Morfología de colonias

Describir la morfología de las colonias (estereoscopio): tamaño (medir), borde, color, si están en relieve, características de la superficie… (ver términos guía ).

Escribir observaciones INDIVIDUAL en tabla 13.1

Ver preguntas de la guía

Nombre Tamaño Forma Margen Superficie color

Sp1

Sp2