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Métodos de Conservación de Fitopatógenos

Dra. Ing. Agr. Sandra AlanizMayo de 2012

Importancia de conservar los Fitopatógenos

¿Para qué hay que conservar las cepas de los patógenos?

- intercambio de cepas- nuevas investigaciones- docencia

Métodos de Conservación

1) Repique continuo en medio de cultivo

INCONVENIENTES:

- contaminaciones- degeneración de cepas- perdida de virulencia- disminución de capacidad de esporulación- alto costo

Métodos de Conservación

Objetivos:- no afecten sus características (expresión fenotípica, virulencia, esporulación)- bajo riesgo de contaminación- bajo costo- no ocupen mucho espacio

Se basan en: disminuir al mínimo la actividad del patógeno mediante

- bajada de temperatura- deshidratación

Métodos de Conservación

A) CORTO PLAZO (< 2 años)- medio de cultivos a baja temperatura

Ventajas: bajo costoDesventajas: baja duración

B) MEDIANO PLAZO (2 a 8 años)- desecación (sílica gel, perlas de vidrio, otros)- en suelo- en tejido vegetal deshidratado- suspensión en agua estéril

Métodos de Conservación

C) LARGO PLAZO (> 8 años)- criopreservación (almacenar a < 20 ºC)- liofilización

Ventajas: larga conservaciónDesventajas: alto costo de los aparatos y

materiales

Métodos de Conservación- Corto plazo

1)Tubos con medio de cultivo a 5ºC- en general medio de cultivo pobre (AA,

otros)- se puede cubrir superficie con aceite- hongos, bacterias

Métodos de Conservación- Corto plazo

2) En planta viva- virus- se mantienen en invernáculo

Métodos de conservación – Mediano plazo

1) Papel de filtro colonizado deshidratado y almacenado a -20ºC

- papel se deseca con sílica gel (hidróxido de sílice)

- hongos (productores de esporas) y bacterias

Métodos de Conservación – Mediano plazo

2) Material vegetal deshidratado

- se deseca el vegetal y almacena con sílica gel- en general se almacena a temperatura

ambiente- hongos, bacterias y virus

Métodos de Conservación – Mediano plazo

3) Embebidos en agua- temperatura almacenamiento depende del

patógeno- problemas de contaminación- hongos

Métodos de Conservación – Mediano plazo

4) En suelo- se puede o no almacenar en frío - para hongos de suelo ( ej: Monosporascus

cannonballus)

Métodos de Conservación- Largo Plazo

1)Solución con glicerol a - 70ºC- solución de glicerol (alcohol):10-15 %- clave: congelamiento y descongelamiento

rápido- hongos y bacterias

Métodos de Conservación- Largo Plazo

2) Nitrógeno líquido a -196ºC- hongos, bacterias y virus

Métodos de Conservación- Largo plazo

3) Liofilizados- se mantienen entre 0 y 5ºC- hongos, bacterias, virus

Muchas gracias!!!

Dra. Ing. Agr. Sandra AlanizMayo de 2012