histo introduccion 9
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Histología
Histos
Tissú: textura
Estudio del desarrollo de
los tejidos y su adaptación para formar
órganos enfocándose y relacionando estructura y
función.
Se relaciona con otras ciencias como:
Anatomía Fisiología
Biología Celular
Citología Bioquímica
Patología Oncologia
Odontología
Pasos evolutivos para la integración de los seres vivos:
Moléculas: Mínima estructura inherente al ser vivo.
Organelos: Tienen función especifica y propiedad de autorreplicación en el caso de las mitocondrias.
TÉCNICAS HISTOLÓGICAS
Proceso que tiene como finalidad la obtención de un
corte histológico
Capa delgada y transparente de tejido con grosor Aprox. De 1 A 40 micrómetros
FIJACIÓN: Consiste en tratar de mantener el tejido lo mas parecido posible a
cuando estuviese vivo.
Formol
Tetraóxido de osmio
g) Acción rápida
h) Buen poder de penetración
i) Debe de tolerar la estructura del tejido que esta fijando.
Son los fijadores mas comunes
Caract. de un buen fijador.
Deshidratación: Se sumerge el tejido en alcoholes de mayor a menor concentración.
Con la finalidad de hacer desaparecer el agua contenida en el tejido y sustituirla por alcohol.
Inclusión:
Poner en un molde parafina derretida A 60 c
La parafina ocupara los espacios donde originalmente se encontraba el agua.
Al enfriar se endurece dando rigidez a la preparación.
A veces usamos nitrocelulosa en vez de parafina.
Corte:Para cortar se requiere un instrumento llamado: micrótomo
Hará cortes de Aprox. 20 micrómetros de grosor y se podrá observar con un microscopio compuesto.
TIPOS DE MICROTOMOS:
g) Micrótomo de parafina: para tejidos blandos, la pieza es la que se desplaza.
h) Micrótomo de congelación: se utiliza pArA tejidos frescos congelados.
i) Criostato: para tejidos frescos y tiene una cámara de congelación.
Coloración: 2) El corte se somete a un proceso de lavado con agua y alcohol
para eliminar la parafina.
3) Se va a colorear utilizando colorantes específicos para identificar estructuras.
Colorantes mas usados:
Hematoxilina: colorante natural básico
que va a dar coloración azul a estructuras
basófilas. Ejemplo: núcleo de la célula
Eosina: colorante sintético ácido que da
coloración roja a estructuras acidófilas.
Ejemplo: citoplasma de la célula
Colorantes con Afinidades especificas:
Proteínas: son ligeramente básicas se tiñen de rojo con eosina.
Ácidos nucleicos: son ácidos se tiñen de azul con hematoxilina.
Hueso: depósitos de calcio se tiñen de azul con hematoxilina y las sust. periféricas se tiñen de rojo con eosina.
Lípidos: se usa tetraóxido de osmio y se tiñe de negro.
Carbohidratos: no se tiñen con h y e se ven zonas transparentes y con reacción de shiff se tiñen de púrpura.
Mucopolisacáridos: se tiñe con el método metacromático de azul de toluidina que da color rojo.
Factores ha considerar para formar una tinción son:
Tiempo de exposición.
Temperatura Ambiente.
PH del colorante.
Concentración del colorante.
Técnicas histológicas:
Cultivo de células:
Células y tejidos se cultivan en soluciones de composición conocida (sales, aminoácidos, vitaminas) que generalmente son componentes del suero.
Para hacer esto primero se separan las células, ya aisladas se pueden cultivar en suspensión o bien se pueden colocar sobre una placa de Petri, superficies sobre las que las células se adhieren formando una unica capa celular.
Fraccionamiento celular:
Es un proceso físico mediante el cual se utiliza una fuerza centrifuga para separar los orgánulos y los componentes celulares en función de sus coeficientes de sedimentación.
Los orgánulos y las moléculas obtenidos mediante estas técnicas pueden analizarse mediante el microscopio electrónico para la comprobación de su pureza y su composición química.
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