ficha de reumatología
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Presenta: Luis Valderrama.
Caracas, febrero de 2015.
Hospital Universitario de CaracasCentro de nfermedades !eum"ticas
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#$%&' #L '%U#(&
U'$: Universidad de )lorida, *ainesville.
$po+ado por becas de investiaci-n del (nstit(nvestiaci-n de Lupus + el (nstituto acional de $nfermedades /usculoesuelticas + #ermatol-icas.
Presentado para publicaci-n en abril de 2013 acerevisado en septiembre de 201.
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(%!&#UCC(4
l () tipo ( est" fuertemente implicado en la patonesis del L
mononucleares de sanre perifrica 6P7/Cs8 de apro9imadamepacientes adultos con L' + de casi todos los pacientes pedi"sobree9presan enes reulados por () tipo ( 6sello del ()8.
$dem"s, los individuos con < copias del cl=ster de enes pa
desarrollan lupus>li?e, + el ()@ e9acerba el lupus en ratones contraste, el %)@ es crDtico para la patonesis de la $!inflamatoria intestinal + psoriasis, las cuales son tratadas con (mismo.
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(%!&#UCC(4
Hasta 0; de los pacientes tratados con inEibidores de %desarrollan $$s + 10 F 20 ; desarrollan autoanticuerpos anti>ds
1; de los pacientes desarrolla lupus clDnico.
La patonesis del lupus inducido por %)i siue siendo infactores de rieso son conocidos incompletamente. Los pasDndrome de 'Iren tratados con %)i Ean aumentado los nitipo (, lo ue suiere ue el %)@ reula neativamente su produ
l %)@ inEibe la eneraci-n de clulas dendrDticas plasmocitoila secreci-n de () tipo ( por ellas tras activaci-n viral.
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(%!&#UCC(4
l cultivo in vitro de P7/Cs con un %)i aumenta la e9presi-n de
Los ratones 7 tratados con pristano son conocidos por desarrollde lupus impulsado por %L!>J asociado a la producci-n de ()acumulaci-n de clulas muertas en mdula -sea.
s probable ue las clulas muertas no depuradas sean la fuenend-enos de %L!>J ue impulsan la respuesta inflamatoria a pris
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TLR7/9
IC: RNA/DNA-Ig
Fcγ RIIa
Célula dendrítica
IFN-α
P$!$#(*/$ #L !CP%&! #U$L6C#<2B%L!J>K8 L'
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http://slidepdf.com/reader/full/ficha-de-reumatologia 7/46Rönnblo at al! Art"riti# R"eu $%
CD
plasmocitoide
IFN-
Apoptosis
ADN RNA
IgG LES
Necrosis
CD
MonocitoIFN-
P$!$#(*/$ #L !CP%&! #U$L6C#<2B%L!J>K8 L'
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&7%(V&
Los TNFi son eficaces para el tratamiento y otras enfermedades inflamatorias, pero puede complicarse por el desarrollo de fende lupus-like. Este estudio se realizó para inel papel de TNF" en un modelo murino de lup
'e investia si ratones deficientes de %)@ 6%desarrollan lupus.
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Lupus mediado por li!ando del TLR-# fue inducido tras la pristano en ratones $%#&L'( )&(* deficientes en TNF" )TNF"-'-*TNF" intacto de tipo sala+e como controles.
La producción de autoanticuerpos e FN tipo fue medida ede ratones, y los efectos de la presencia o ausencia de TNFdendrticas plasmocitoides )/0$s* productoras de FN tipo y dLy-($alto y neutrófilos productores de TNF" fueron determinada
P$C(%' M /N%&#&'
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Ensayo por inmunoa1sorción li!ado a enzimas )EL2A*.
Los niveles de ( fueron medidos por L('$ para anti>'mB!P, an
U1>$ 6subconunto de anti>!P8.
nmunofluorescencia para ANAs.
'e detectaron anticuerpos antinucleares en suero.
Reacción en cadena de la polimerasa cuantitatia )3/$R*
Los an"lisis cuantitativos de PC! utiliOando $! de sanre periperitoneales.
P$C(%' M /N%&#&'
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Reacción en cadena de la polimerasa cuantitatia )3/$R*
Los an"lisis cuantitativos de PC! utiliOando $! de sanre periperitoneales.
P$C(%' M /N%&#&'
Irf7 (factor 7 regulador de IFN). Mx1 (proteína 1 de resistencia a mixovirus).
CXC!. "#$# o %cf& (factor & de transcripci'n de %). Factor pi. CXC#. CXC*. +oc,# (gen # dedicado a cito-uinesis).
Il1. Il1 .
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$itometra de flu+o.
Las clulas se incubaron con anti>C#1BC#<2 de rat-n antes de se
el anticuerpo primario o con el anticuerpo de isotipo control.'e utiliOaron los siuientes anticuerpos:
P$C(%' M /N%&#&'
anti-2ca-4.
anti-TNF". anti-Ly-(5. anti-&667. anti-$044c. anti-Ly-($. anti-$$R#.
anti-$0441.
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0epleción de monocitos.
Liposomas ue contienen clodronato fueron utiliOados para l
monocitos peritoneales en los ratones %)@>B>, in+ectando 150 l despus de ue estos EabDan sido tratados con pristano las 2 semanas
Las clulas peritoneales fueron recoidas 2 dDas m"s tarde, + losmonocitos + P#Cs L+>C alto + L+>C bao fueron determinados.
e9presi-n de marcadores reulados por (), 'ca>1 6medida comintensidad de fluorescencia en citometrDa de fluo8 + Irf7 6determinacuantificaron.
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Transferencia de neutrófilos
Para los e9perimentos de transferencia de clulas, los ratones
donantes de neutr-filos fueron tratados con 1,5 ml (P tiolicolato3 5las clulas peritoneales fueron obtenidas de los ratones.
l clodronato ue contiene liposomas fue in+ectado <0 minutosin+ecci-n de tiolicolato. Las clulas peritoneales donantes fuedespus de su obtenci-n. Los esplenocitos de los mismos ratones docomo control + fueron tratados de manera similar.
Los l-bulos roos fueron lisados. < ratones %)@>B> pretratadossemanas antes recibieron 5910 clulas peritoneales depletadas6principalmente neutr-filos8 o 5910 esplenocitos 6principalmein+ectados (P.
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Transferencia de neutrófilos (continuación)
La composici-n de las poblaciones de clulas donantes fue
citometrDa de fluo.Como control positivo, los ratones %)@>B> fueron tratados con pr
semanas pero no recibieron clulas donantes3 los ratones %)@sirvieron como controles neativos.
EL2A de cito3uinas
'e realiO- L('$ para CCL1K + CQCL5. Ealuación de la !lomerulonefritis.
La celularidad lomerular se evalu- contando los n=cleos presentransversal de teido lomerular.
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El an9lisis estadstico
Los an"lisis estadDsticos fueron realiOaron utiliOando el softRare Pr
Las diferencias entre rupos se analiOaron mediante t de 'tudenindependientes o la prueba de /ann>Eitne+.
Los datos se e9presan como desviaci-n est"ndar para condistribuidos normalmente.
La normalidad fue determinada por el test de #Saostino + Person o
Los valores P inferiores a 0,05 fueron considerados sinificativos.
P$C(%' M /N%&#&'
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Los ratones %)>B> no desarrollaron espontautoanticuerpos o manifestaciones clDnicas de lup
suiere ue la deficiencia de solamente %)@ es insuficausar lupus.
$unue los niveles de () tipo ( fueron comparableratones %)>B> no tratados + los ratones tipo salvae auellos %)>B> tenDan niveles elevados de P#Cs + cP#C circulantes, lo ue aumenta el potencial de pro() tipo (.
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Los ratones %)@ al ser tratados con pristano desarrom"s rave en comparaci-n con los controles
caracteriOado por aumento en los niveles de autoantic'mB!P, () tipo (, P#Cs + monocitos inflamatorios.
n los ratones %)>B> tratados con pristano, el neutr-filos, promovedores de resoluci-n de inflamacdisminuido considerablemente, mientras ue la remonocitos inflamatorios + P#Cs + la producci-n de ()increment- + prolon-.
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C&CLU'(4
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iveles baos de %)@ aumentan el n=mero de P#C ciratones, meorando asD el potencial de producir ()embaro, esto solo conduce a la producci-n de ()autoinmunidad si e9iste e9posici-n concomitante end-enos de %L!>J, los cuales son liberados de clulasdespus del tratamiento con pristano.
n los seres Eumanos, la tasa del aclaramiento demuertas, unto con los niveles de %)@, puede influidesarrolle lupus posterior al tratamiento con %)i.
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