fagocitosos reporte

UNIVERSIDAD DE IXTLAHUACA CUIIncorporada a la UAEMex.

Li. Químico Farmacéutico BiólogoClave 91- Q

GENÉTICAReporte

Grupo: 602

Sexto semestre

Marzo 2014

OBJETIVO

Al término de la práctica el alumno será capaz de aislar al ADN de germen de trigo.

RESULTADOS

Durante el tiempo del precipitado se pudo observar notablemente que si se obtuvo el ADN del trigo, se pudo observar bien con la ayuda de los rayos de luz porque vimos una pequeña turbidez que se presentó en el vaso.

ANÁLISIS DE RESULTADOS

La práctica se elaboró pesando 5 gramos de trigo y posteriormente se colocó en un mortero un pedacito de hielo, se molió el germen hasta que obtuvimos un macerado, posteriormente transferimos el germen molido a un vaso de precipitado y se agregó 20ml de solución de tris- sacarosa-MgCl2 y un trozo de hielo seco para debilitar la pared celular y poder accesar al citoplasma para obtener una mayor facilidad de extraer el ADN, esto se realizó durante 10min, posteriormente se descongelo a baño maría a una temperatura aproximada de 37 grados centígrados, transferimos el homogenizado a través de una gasa doble para filtrar y quitar las partículas más grandes, este filtrado obtenido se centrifugo a una velocidad de 3000rpm durante 10 min, se re suspendió la pastilla obtenida del centrifugado en 2.5ml de solución amortiguadora tris, pH 8.5, luego se añadió 2.5ml de SDS al 4% para romper las membranas del germen en este caso la membrana nuclear, prosiguiendo se añadió 0.25ml de EDTA- salina, 0.5ml de citrato- salina y se mezcló. Todo esto se depositó en un tubo con etanol frio, es importante esto ya que se ha liberado el ADN de la membrana nuclear separándola de otras sustancias llevando a cabo un precipitado, pasando el precipitado a un vaso agregando 0.6gr de NaCl, un volumen igual de cloroformo: alcohol isoamílico y se mezcló durante 10min, ya para finalizar se centrifugo a 3000rpm durante 10min esto se realizó para aislarlo de las proteínas y del

cloroformo: alcohol isoamílico, en donde obtuvimos tres fases. La primer fase se encontraba el ADN, la segunda las proteínas y en la tercera fase se encontraba la mezcla de cloroformo. Se separó con la ayuda de una pipeta Pasteur y se vertió en un vaso de precipitado con etanol frio y se dejó precipitar durante 10min.

CONCLUSIÓN

En suma a todo lo realizado en la práctica nos encontramos que, la extracción de ADN requiere de un proceso secuencial, en donde se trata de aislarlo de los demás componentes de la célula, este proceso provoca el “desenrrollamiento” (por así decirlo) del ADN, el cual es apreciado en forma de fibras o pequeños hilos; por lo tanto los reactivos que empleamos son de suma importancia ya que cada uno de estos juega un papel fundamental, es decir, una función específica, que conjuntamente hacen posible la extracción de ADN.

BIBLIOGRAFÍA

Mogrovejo Y. Extracción de ADN. ( sede web). Calomeo. ( actualizado en 2010, acceso 12 MAR14). Disponible en: www.calomeo.com/books/001644667dee77767eeb7