enzima ramificante de hígado de rata : aislamiento...

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Di r ecci ó n:Di r ecci ó n: Biblioteca Central Dr. Luis F. Leloir, Facultad de Ciencias Exactas y Naturales, Universidad de Buenos Aires. Intendente Güiraldes 2160 - C1428EGA - Tel. (++54 +11) 4789-9293

Co nta cto :Co nta cto : digital@bl.fcen.uba.ar

Tesis de Posgrado

Enzima ramificante de hígado deEnzima ramificante de hígado derata : Aislamiento, purificación yrata : Aislamiento, purificación y

propiedadespropiedades

Krisman de Fischman, Clara Rebeca

1963

Tesis presentada para obtener el grado de Doctor en CienciasQuímicas de la Universidad de Buenos Aires

Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales y de maestría de la BibliotecaCentral Dr. Luis Federico Leloir, disponible en digital.bl.fcen.uba.ar. Su utilización debe seracompañada por la cita bibliográfica con reconocimiento de la fuente.

This document is part of the doctoral theses collection of the Central Library Dr. Luis FedericoLeloir, available in digital.bl.fcen.uba.ar. It should be used accompanied by the correspondingcitation acknowledging the source.

Cita tipo APA:Krisman de Fischman, Clara Rebeca. (1963). Enzima ramificante de hígado de rata : Aislamiento,purificación y propiedades. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de BuenosAires. http://digital.bl.fcen.uba.ar/Download/Tesis/Tesis_1198_KrismandeFischman.pdf

Cita tipo Chicago:Krisman de Fischman, Clara Rebeca. "Enzima ramificante de hígado de rata : Aislamiento,purificación y propiedades". Tesis de Doctor. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales.Universidad de Buenos Aires. 1963.http://digital.bl.fcen.uba.ar/Download/Tesis/Tesis_1198_KrismandeFischman.pdf

UNIVERSIDAD DE BUENOS AIRES

FacuItad de Ciencias Exúctus y Natumles

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ENZIMA RAMIFICANÏE DE HIGADO DE RATA

AISLAMIENÏO. PURIFICACION Y PROPIEDADES

Cloro R. Krismon de Fischman

ÏESIS PRESENÏADA, PARA OPIAR Al

ÏIÏUIO DE DOCTOR EN CIENCIAS QUIMICAS

1963

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DI.LUIB 1.LILOII

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-5­INDICE

INTRODUCCION

wooaamo................................................................ .. 11Pm es no n . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. 12

mmum if 10'11............................................ .. 13

En!) utmctgn; . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1h

¡mima qm intentaran on 01 ruben-nn dal gluaópno t

a)3íntoogldeflm' m . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . ....17

IEP-¿Itrabglmo'pm amoontnnlfoma . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 17

susan-mutuas. ¿a 1-.Lam Sqlmiltnufonn ......... .. 17b)MM .........................................18

Paterna-a6cum-am. estare-hu; - n‘ ‘ 18hilo 1-. 6 meo-man.6 onain(humillante ................. 18

Tucuman“ . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. 19

a anula ¿ahhh-41m Lglmandúdrohn..................... .. ao¡saunas ¿“3.5 ¿nm-H“' ........................ 20

PARTE ¡EXPERIMENTAL

mansWa)M1611 d. motive

010m de calcio . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. 23

Solución lodo-Incluso . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. 23

Mivodolodo . . . . . . . . . . . . ... . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .... a

010mm do monto . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 23

al ü a oa on- ao. aa oo - n . ougga - aoooa. noaon. pooo. . o-ooo a

E !. ! H . H

"tentacion . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . ... a

Olmüm BW ... . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . ...... 8

anciano............................................................. aummm-1mm ................................................. .. 25

W321 ÏÏÏ‘Ï'ÏÏÏÏJZZ2212ZZIZIZIIZZIZIZIZZZZIZIZIZZIIZI2

¡burla-p.18“a.Mi!!! ¿liliana...................... 21mun- una d-tontos-nn.a. nflopotimy autom .. .......... .. nWPam.- .......................................................... 20

Moran-aduana........................................aan... q.¡un .............................................. 30aduana-bw. .................................................. .. sono ’ d. ............................................. .. 31Lílitotb .. 1nd. ' 1 ................... ..31

MW ........................ ............. ......... Jlnm a. ' a .............................................. .. 33¡íconom unn¡nm ............................................ 33lo'tedodohantm................................................... .. 33MododoParkdenlonu . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . ..Jlt

BSULTADOS

PARIS I

W101 comunica EL(¡me (EN¡ono

Efecto do diferentes mas . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 37

Nom tónica . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. 38

Curva do absorción . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. LIO

¡“todo doptaio . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .... 110

leógano on “Jide. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. ¡42

Ramadán . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . ¡41%

Efectodo tmntun . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . bh

Efectodaipu...................................................... unEstabilidad G.1 color con el timo . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 104

ciuaógema. dhtintooorfgonee..................................... M5

otros poli-WI . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . NB

PARES II

IznuammDotomlmcio'ndala actividadmiflanto .. ......................... 5h

Doteminncio'na. 1. actividadoC-un‘llúica..... .................. 55

humillación d. la actividadmiflcanto onpnenncindom-¡num 95

Purificación do la onda mutante . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. 58

Función do lol cuando. do tejido. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 58Tntanionto ocn pl cb retrato do calcio . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. 59Pincipitacio'n con sulfato b uranio . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 59

paar» n(cont.)

mudado:d. Iaonzim............................................ .. 60cuina............................................................ 61¡séptimo...... ........................................... 61adn . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 63

Efecto d. panal.“ activ-donn . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . ... 65

rotación d- un polincírido son-Junto al glucógem . . . . . . . . . . . . . . . . 65

Acciónoobnannopocum................. ..... 66Acciónuna 1. «bm-1mp-límitoa. Mmmm: .............. 66Acoio'nnobnotro!ponnan'rido-......................... .... 67

mmxms........................................... ............ 69

Eng...... ............ ............ ........ ............ 73

¡comanminado. “una. 1- qmparti­capaon1. bio-(mm m ¿damn

1:1«una dobunny“ 1asucciónqu o...

m1.. dopam-a. 1. «mmm a. unnítoaomm

¡un 1. Modificación 4.1 producto: por 1o tanto.

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1° Ibtominnolóncolon-¡rien dal anciano:

2°¡min mmm. .

Antona. mam- lo. "Mi" mundos. o mi

un bm donoripaióndaha mm dol¡11:96pmy

lu anahi qmintentan» en unInt-bonus.

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un1mm. 92823:838th 16022.4. ido- lo. Widntu gn.con.¡bmMad-similar. mm .1¡neoon838.4 . ¡hutnlq­¡01.30 lu duna- eonWin-od.» lt “¡un los pico. on9231 75° (1).

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un. m o.¿actuaronlo. ¡hada-a. ¡»uni-ü. «no¡»mmm “un.m-1o-pflnflpln up- a. mi. una 1- am continuos... u! nodo­mam'qu n unhayan-¡run ¡nu-nn minado. qu.conta-usol-mnadanloMan-ud tonnlo dm conManson al}.1- ra.- “tinmuy om- o!porunen.a1 á 6. unan Iocuantasun.pm m.¡ióna. mon-«1 * 3 (l. 3). ¡stoun e. “tm ¡au-1tocom .1 amó.pmonoldmmhmw unlan-lloradopm; o al.¡u¿una a. 1. me“- (noa. 1e-mmo- dalnmmón)¡ol-mt. onlcnbdondflhdü.

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Dinamo! poopmdio.nana 1-!mmiwb‘lmo'pnooonpo­"IO.

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n duth mucha pormitinen. {alternanoa. 1. Pau... un­norafinidadporlu mich: ¡un moon noch}. conlu m o: ..

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u “10.10inclino (11)qu ¡opm reforman“ conclub”. dun ­

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[Dla nntorlm.

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Im «¡Manténdalnuo'pmyqu o!Mata. ¡both-Into 1-.tuc­Undnwlrpoonlocnhro«valium-burla- numm porta­m-o. M pornulvor ninuna a. 1o-dal upo- a. mansión. damn. o

sida."un mjorol ando ofl‘inl bl union.

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¡nba un! ¡todos más“. o end-Moon. uta-lanus. lo ¡opta ¡un ol nu.

pmh utmtnn matutino-da, onfomaMont. phpbt‘h por¡bye! (1‘).

¡“Mm ningúndalmaipu. pmm porIan.-8m11.l1 “por "IlhaawnuufioonuI-oh.. ¡nodoMim wnwfimu1»6“me ¡uh-tunn­I. apodo-lan

-15­

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“(fimmMfiM)ahMummoúdu-IA:“albunfimhnflnanorolmn­autor{Manantial-.6.

m. no’uhnmctnldona.yoohqmpmúl-mun.on1m¡str-o 01¡m nin-tor lbn.

¡doubt-Immm- “¿unmmm on1mm.Unglwúpmdopunoluuhrdalorbnbamloul. conta-um­

¡Into¡annual-0 Mason. ¡hJut- dnddordo].8‘ comun,“ mpuñalada.ocnnthaümimou-p61ún1-nhnbm­uhMooonWanaMd-um.“WMnDGaSWcIIn-d (17).¡no-bio.Quinua“._1»6monb3akumnm. “¡acumulan-olía).I’m. m tu. nom ur ¡«kk-n.stud-¡son“Más. (15).

“¿mutuamtnoamamomn-aun .1meacumu­Imtuúi‘nonuma-uní- uhonnr.unan. -1.“unn-1.1.nbmfldublgluípu.

más: mmm-¿M

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¡(m ! 10.11: aman. av. cm. Glam.¡a (1951)262.I 51m)«anulan-.6 6atom í. Famoïms zdola! dom!a (nomina glucou)

doha adamso lugo de hpau-as glucosa)

¿alumnas

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Inma. m. om. un... u (1962)373­

cuomni. JA.O.S.. 1g (1956)sus.

(x) 0Lg conha inicial“ do main Ruth x unn-nm 01to de asiduo- Muooaa por grupotenim.

-17­

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“batalla-¡Inma ¡nu-shout“!urbano.mln-dian­t-h uma-lindodoscuando“. ¡sul-61:2“: ’T 4 “-­rtant-nl. (18.¡9)y1-ou-I.km 1- 6¡1m Gamma-tm (a).

Land-n¡intan-la Manual-altm ln dom. ¡aom .un!“ la.puto-domua d tmbn: mhan lodoll "ul-9Mn0tadba. tom ln ¡manual-pS.

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un; qu ¡autom-domina)... aqui-10upon-dado ¡lt-uh un­{Mona-no10"(19).nnuópmnmuolúomuo.

¡Jn-petoummuúnoui-ünmwuuumumdon­tincfimth-S-P.

hamaca-tm analítico-unidades“.o-ümmmn¡Indonomflmdlo(19).m(a).mñqm019fiidnkuuviddnu­dbatóloyeonflmóquhmhnnh’uflcdnfipmymaluemm­nuvonohnwfia.

mi! ' vam-.12;i‘m-fino Variosmidnu ¿Imanol doun andana otra ¡una á a la n10­

... tandas-nao1o-¡mazosa- mmun. In “too. .1 mm ¿un Mi.»

-18­

poca misma por ¡un carboma 1, y 6.

b)MPÉIWLILX‘

F_°-._.....____f°r11mLJ.-.z..‘4-al_____wnmeflofosfaLQ-fls;mu¿m­

Lafodofllafla (2? - 25) Catalina la ¡aguante mación :

glucosa-brocha 4 nante:- ——+ P1 + ¿11100011(tx1 a h) mptor

Socomió-ra qu- "ln vivo“ ¡Ita succión está dolphznda or. ol sentido de la

Moción. eliminarlo unidades glucosa; o'sta noción ae lutierl mudo quam

.ndodor do h residuos ¿1110031103por rana (2C). m‘lpanamá-1do ramitth no

un ‘f- dnxtrlm o dutrim 117mmde foaforilala.

La{adornan de ¿luciana ¡o encanta on del tom: un activa ! y 1..

n ¡manu g (27). s. han¿agarrando nmnhalnon-f.- nfonuhn a 1. utor­

mmón de ¡nba rom. ¡.1 compte actual u qu. 1. foafornaoa g no con­

"to onL indicate un {atenuación conla ¡articipación cb m y de un on­

n {alternan nm. “pacífica (28.29). la ¡»acción11mm n catalina.

¡rotm angina. una foufutaln otpeífica (30 - 32).

Milo [-0 6 gup__l___1duao «¡gg! QQMQLQQ,

¡u un anginaqu. hidrolila ha mom-a1 -. 6 a. lo. puntosaa mitimción.

niñola cadenaexterna nt.’ inducida a un único residuo glucosa.

mm- y ¡rn-nn (33) danootnmn qu. «Lo-maí-de la asoma a. la raton-uan.

¡danh mudado. ¿[moon por una. Por lo tanto. para qu- u oroctu'. 01 prosa»

l“unificación oo manana la participación do del encina. un tmnngluooai­

Iaqmtrunflon trosasiduo.gluooudoumaotmmdamzüomdohn

dom. y la gundam qm motín ontomn madoastur eliminadoh una quo

xquando con un solo mima glucosa.

-19­

unmllmlmono oncoan qmla gar-puncióndouna l -p6e;le

¡toni-Japor Cor! y hrmr (3“) contara catan don “tkm-du.

¡.1tratará-nte nmolvo confooter-una y 1a much 11m nano 1-. 6 glu­

Mdnaha pomiudo verificar 1- utmtun au glucópno (35).

¿mm-¿1222Sonenzima! qm transit-nn residuos glucoliloo de una molículn a ctm, en

voir.que¡distribuyan union" aumfdieaial +15.

¡n un pnpnnoio'n parcialan purificada d. vínculo de conejo. Gir! y

¡1. 06) y Btotton (37) han dana-traia la palencia de una ensinn quo ¡atún ¡obra

nm. ymmm- tmfimrdo unhimno duooufloal-oh deuncuco-ani­

Ldodudara un acoptor mando.

Enmúculo dc oomJo (38) lo ha ¡montado un encima qm tamano” glucosa

rmmlo'cula de amos. . h paliclán 6 d. ctm. tomado .1 tflsaaífldo pam­

. [mw-amoopmm-um + 6)-O-0t-4J-glunop1rams11—(1.. n).on.n.g1uoop1u ­

n . annoción0| ¡"Junto n la ¡num mantente.

¡no Iughn 09) qm mi. un cuina u otn ¡gún qm el ¡chats-atano. un

up o un poliladrldo.

Bm o ¡Inma-th 040)omontruon en 01 músculod. conoJonm 011m

l -. ¡Jglmantnmfemn. 0mm Wants u la “¡cripta por Petras (nl) onhí­

dodauta. qmno¡chincobrounen o mltotrlou linoloba 01M

various.“¡nation pnfenntuntc umandandoun reclamododm.

ido!¡nou ah.

¡manzana mmm y mm (ha)y nm y col. (ha) ¿Olot-¡Moronun pm­

¡odoburniflcuión qmnoaqui“. Interviu-1: wn dal anciano. arch­

-fl­mpmpcmünodhnhdomtwwnmy ¡anual-.641:­mmmwumoanomnmmnwúuuuna.tintob (¡IW 03).ktm-muaMúnmummIIIUhmlehnmn.“nuputnrñhdblaGJWM.HWolfiiudoh-oünt ‘4‘ 3. “" uúnmyup­1W1mmtmmMAL-MM

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MmhwaaMmpIMnnhaumMn-ümúm.“oprnonmmm. momhoMoOMMaonhumio-¡nan! y ¡"un (¡5)y porbm y 01m (¡06).Mí- Iobn(maipu¡uno-01M.

nannnbmfinylnmaumünumommhnmnbamnfloonhqnpodrfin-molammmw. 1).Inclmummnauúummmnmüumunnmhblnuúpm.1-qmmymlumubmbomNW.

PP-Dextrina2ñ/ Pi

Igextr‘ína 52:22:5673 H20 , C l "glucógeno _.—-—­'°’ . \:__9y10" ,,-—" UDPDexm"a1 " Olígosaca'rldos'

ramificados, uniones Glucógeno deDsacáfldos ougí y a1+6 ramas externasheales // kx más largasx 1.4 Ramificados \ 6 (“1"4)

Glucosa 1’ migo_sacár¡dos\

12IIsoperlores \\¡ “1,4 ‘63 Olígosacáridos

.¡nas ra_ ¿y , xd1*4 del tipo 5

was, unío- ÉX ¡'14 de amïosa

“1*4; “1.6 1x ‘\ Glucosa‘\\\\\\ Oj\ ‘M43M53 a7?»

l '\l \Hzo/ Glucó'geno con

mayor numero deramas, uniones «1+4

y «11*6

C IELG DEI. GLUCCBENO

ma correayonden a enzimas cuya participación en el ciclo sc ha demostrado..untoa se refieren a enzimas cuya participación en el ciclo no es segura.

sfataaa 8d -AnilaaaLasa 9 Amilo 1,6 glucosidaaabrilaas 10 Trunaglucosidaaa (Ehelan)m glucosiltranafvraaa 11 l-Anilaaa.cante (dl-L-glucano:al-A-g]ucano 1? Tranaglucosidasa (Iukomskaia)

6-glucoaí1transfuraua) 1? Lligo J,¿-1,4 Elucantransftrasa (Illing­¿Íd—,A-r;ucuno:urtostfato plu- north)

Cusiltrunsfrrhsa) l¿ Transglucosícasa (Steftcn;

PARTE EXPREIHIITAL

-5­THOIICAS GBIBRALBS

a)mmm mmnos

nos-m a ¿gina g 0120.m )

Solución¡ctm a “mutua ubuntu ( 20°c ).mw260ngd312nmblindoyZ.nga monwfldonguthim.mmma. ngolnn no m1de solución utundl a. c120. y 0.5 m1a. solución ¡odo ..

duro.1m. nunk no(un. onuntruco color“lo contcp. turn-da

ntrodola hablen; lo mm Monamat- unnu.WSoluciónm a tampontnndiante (eo- O).

21.92.99“!d- 612

Fumar-dosegún[011111y num. (5h). Pu- ono o usen c120. y mln.) .precipitadoqm u tom a fl 7.1i.dnpm'nch una lados. u .1 que¡o un.

n. oncontratacionesMi“, omodoorbentodaput-(nu.

b)mmm:mWMm(brillante andinopor.1 Dr. culo. n. mm.MmmPap-michmmm a. una manu-neu 0o..¡"YongManía-bd.

mjohhmnomm..hvïofl.ómpnndnugfinw (¡47).

91.05212

a ¡un un mmm: 6-1oli-too¡{todomisa-r.amm..an WaMnfloonmmhmdpiw anna-na.

II. 60s(2/7)p:-dag- a. nano. lomanu onubdo-rhhlflhntolun-mtu. han. agitadom h pri-r han. lot. solucióno «lan onmama mmh.‘qontmdhnto. lomonhmrnmmMundo doJabónqmel!le toda la! iman-I “una. y ol nino portac­

i-nto euro. a ne.- gamma». nopu. a ctm nupum. ¡1 nus-m ¡611­

to. "pm mamon-na. ¡su igual.1 4-1mudo«una». a. mmmmp0] Júo'nudtlpr-y ono’ununntonWCIkh-tnp coagul­uv-m; a .mt. y ruta. mundo .1 líquidoobtenidocon.1 anterior.¡vuelven-amar umfioúhncGolfifporo-úalmfl d­nlunu'ndonna. guano cantina-Into. a: oomito 1. segun. camión.

m¡no-rio diluir .1 pra-r flfiido alcalina conunvom-n 15m1a. ago. p. ­

¡ubuntu-comertme«¿mibsofiqnu una-mamamipituión conalcohol.

¡1 pmipitdo no(handamntarduranteun noch.a “apuntan atlanta.

b ¡Hornla oq: clan dal ¡obam- y 01pnelpltdo In nop-n dal mito

loruntrlhantón. Lugo o lo la. val-hn nooo conun colaciónd. noohol­

una“ (1:2, V/V)h-ta quool líquido“lp ¡molan y un-vn ú con¡loo­

m95i. m ancianozumou num enun; 1- putímtu ¡mmmI oli-unn porfiltración. ¡o agan el {mano OI! (a) han. manía ¡aida

al papalrojo Conca(color m1 pudo). Conol apto d. tour gn nao:- neon­

-25­

un:an gluo'pno.n-mac-n donacho!absurdaloom1do non-aany-mtn. AlmtmnmdoohoISSShntaunvd-ntom downporoda ¡co¡1 a. oolnoiónM ¡nda orlgiml. n connotaciónaman.

unn mi ¡uuu-nt. a. ¡45«15. Iuflobntopan “¡ctm 1. pnapttncnín

cul-tn dolauction onndlo fino.

al menudo lo «lanaudi-omarm nodo. oolo m porcontribución

y ¡o 1.o doono” con alcohol 16 i. doo con alcohol 95 1 y {inn-neo con ¡ton

b bJa nur obtonhnlounpolvobhmo. m. manto tun untidad apreciable

doOll- qm ¡o ¡nd- olinlnr "maipu-¡no dos nooo conalcohol 16f. 81on

h ¡atenuación tin-1 01 dental ¡0'10om opacidadpomono pucipitaaión, oo

bb. a IAmomia d. electrolitos; lavando 0.} m1d. Olla 0.1 I por od.

100¡1a. flúldomm“ “Mmm .1 gluópm.MMA!Moa pon-mirada. amm-nte adidas por.1 Dr. Culo. a. Cardiol.(bm

pum-slo..gínol un'tododoMyammod (1+8).Menudo m (19).apartirdo¡billónb un. D md). la prom docierto. alcohol“como

o].butanolo o].un]. dotom caminó“ imlülu conla una“.

—M'ü ' suglínht‘cnladouflptlporMÜO).húnlmmm. pWyooMoonMoflm.qui-tmonmandancon2c 3 vai-m b no. unn-u. 1. millón obtenidano

mm a turí- ¡loun ton a. mon. lo mito .1 tus-¡omo on¡nadan

con01asiduotibio-o qu pa. onol intro y Io m1" o futur. lo aut.­

¡tuth quadbmnmmulándomflón.¡wanda-nn:

Molina;canto"lupa1. mi bum-tudo {amamantandooyflm.a.dond-ol¡»W yu mm. .1mañanmebm a. ¡su Manouds-mm nouMinuto u ¡»no mm- nos.a automunabundante Ibn».-mu “mmmuïmüzgümonïona.“260-16.gmonobuluuín.yo daa-bnth enmasc­agoníah mr 0.5 g da Html on polvo. nonation. a fi. dnnnto otros

uuu. ram-m. ¡odadaa amp-nm abans. ¿uma tn- dí- con.1¡todoqu 01cual-Jomobil-apunta“ ¡“plot-mo. Souna ol

mundopormamada. y .1 ¡abundantequ.mas n campana.mmm y lugo nobum a nando connotan! un oli-inn ol tino]. b

Luluonun y manu. ¡luv-no conlo qu lo Quan mlopoun m.

¡0910.10anoto-tild- dispon- on ano¡1 do un on ebullición. y Io pu ­

¡un .110. Mo 1. oolnnlú:conm1 (a)m1)y dejadoenfriar10n­

¡ntmIl comi-Jo¡nous-butanol. no op:- par contains-oido y a 1.a vo­

Inm conaguastud. conm1.en ol obJotodopatinar un {motín lo la nat-mln on¡su 11mm

¡de un ¡amén 0.2 i 0/7) do.110- (tonionlooncum quo01mah

mantasWo 201.4.dio-) . yn ¡"puntual(unn­m«want. .1 1os a. 1. oclusiónmu ): n tlan ontrln ontor- Ion­

raup'.a. zud36bomme. .1¡animado¿.1sql-JoMi.hn mm 1-ntmfin gimnasta.ol calphJonobb. para unn.­

:0;pri-ro n 1o«¡mm poragitacióncon10vai-nn a ¡m1 {ríoy

mp I “un. ¡Ita mutación Io ropitaYuri-i"con y o].punto un]. Io

¡a on"tun ¡1 vacío a 75° O.

nm ¿{una a. anna ot '

nm W por.1n'tododo¡ban (51).ha onoo m. dm.unmah.a 30°chao "por" dotolnnm. 1 g dommm o'andan: con

6gb Penn- (av:-pnpnmiónlo tbloríbonn'ommm) yan a. bum:dudo 0.1 ll fl 6.0 on un volmn total do ao Ill. ¡1 polllacl'fldo ¡camu-1 lo

mcipihconevolú-nnd. m1 y Ioum poranemia. nomi-a.

¡him ol alcoholonunModo! ¡1 vacío, ll mito h Moción con p-nnn­

ahat. qu-non llbon n'- mito... I. «atun. una o ¡um-um.paolpltl'n­

oh vam vean conmmm 75f y dhlilculo .1 nun.

to a. r a. ot ‘

a. aman han!de¡ctm fodoflhu a. ¿me (51)sebamanana.

elude-mo

nula. d. mociónu 1. 01gth s poll.er 100ng;wm room..15ll ¡i 6.8; omnia. matt. 0.015I: rca-torna. (m ¡impulsiónn doom.

í. ¡sI-nm) a 1. 3“ mp. a. por:an onenana-1eomlponlhmoa 5a;

¡patch onunvolmtotgldoall. notumbas}?Oy. MannInntomqmnn hmto'nb hdutrln Pakito.

o)mmm! II MIN

¿suBomnmínMIGnyLmk (52),¡gitanobut-unt- lmgdo md.

¡co-dimmlidoconMIfldo“60611.15. durant.“ubuntu!!­naruto. ¡1 mms-mmio ¡e nm porcuts-¡Mini11g 2.00011-. n

¡puto'na. patrona flm o 00mm a o- c duranteaoInnata. . ¡4.000nn.

Mamo(aD-210m1)thnounnpcto tmbn.museum ¡aguanta¡chungo-h. C.Allíquido ¡abundante o W un volmnn15m1de etanol.rod-¡tudo (fi í)

(o. Lugo no continúa por uno- nimton la agitación lenta. a. daa. on apoco

mmo-y .1 pucipits‘loqu-num. ¡e doom dnlpuo'ld. mm.

A1¡obama claro noagua 1.8 no“ lu volumnde dada]. 95S. ¡Ito

unoontoninonooho'ncofin-1a. ¡pme 807Lonvon-m. 1..nun

agita¡cuando durant. varios limtol y u «lan un rato on ramo. a ob-.

m unmontado blanconocuhnto. qm noun mln nan conanotar. {rf­

luegooo doJa near ¡1 sin.

¡1 "manto OIcb 0.9 g do Pana. por cad. ¡no g do trigo.

M991]...d.miPara tu preparación o ¡1.5116ol dudo bwflpto por dor! y col. (53). Con

ninacciónuta-um. a. 5 nl. a. putobu‘blm. ¡ático (60¡ng/¡1)u matan.

canje Monalumnado, qa lugo o ¡adrian por (¡ocultacióndan'nlolo lugar;

-29­

miminobb. tour com-lomo.

¡aa-púasoliminnrhpiolnom-n loonúculoodohn“71m. ¡omr'widmntey. ¡Manco-H‘cmntomrdo‘tht-pmmdurmto­lu operacion.mmm.

-113“ =load-culos¡apmduvomporunpioadondo mymmm-n¡manu-nm onunvoluln a. agua«sum. tri... a. qm con

11hd- udme (kiwi. do 10mimtoln {mm porun. m. Il músculo

Idola pudor: bien connm espátula para senyor»: h mor cantidadpam­

lígnao.un amm:- 1apu.

¡1 {nudo II centrífuga 5 minuto.a 841Dtp y el abundante oo

“¡atraía dopp]. ¿algodón(Mo. en01onodomundi. clanhunmnantrwlónfimldowa'3M ). SonidoolflalO'Omohetmdovidrio(¿anonimatoesti a ¡a 6.5 .. 6.7) 7 o un». a pl 6.u en Mor auto.

lldofih.60'oon01¡0.05!.MaMnhnlontnntoyoonngih­n. n extracto. ¡pu-I tania. u ¿1.112.conta. ¡gun«una. du'nnto3 a h

n. gitano a. vu oncuado1.- bolsita. a. diñhil. roda 1a. opa-cion”

I. la anunció! do lo. uni-culo-hasta 1- 4mm. ¡o donan¡amm- on um­

thn. ¡1 extrano¿inflado o mm a ¡I 6.ocononto’amo; «mi.

molInnata-¡o fomaun maintain floculontoqm o m matrimonio

.000-10.000tp durant.5 una. n ¡om-mantouna n filtra a mm

“¡Mauri pios-do;¡1filtradono¡"anuncian-who mmm­Llegara ¡l 6.8.

JO­

1¿191m : 1a soluciónu pnoipita ¡glam lulfato domaniahasta

0.141de ntuncio'n; ut. comontncio'n u nan-a aguarda 7o m1da solución

domlfato de anonio utunda a t° mbionte ( fl 6.8 ) por nda 100m1do estado.

b deja on niponadurant. un nod» y Dalmata un pnoipitudo noculonto quo n

¡un antruugnio a 10.000x g durant. 20nimtoa.

- 31m g.1 pndpitulo q- mati-m Infernal... ¡a aun-¡n on¡o a

15nl doaguadonada. 1..soluciónalgo tmbn o. amm num-m ¿mut­

60a aonimtol conta asu.donna. tri... :1 tuboa. ama-u u tranth a

unn-o qu- contan- 1. sigui-nu solución z 2.5 ¡1 a. olomidnto a. ciflofin

o.) u ó vtr-n 0.015I. 100¡1 a. glimwfonfato d- ¡odio0.02 I y ¡gl-hat.

ouplohriSOll(olimMaSá-GJ ). 81nmanoolmlónan­una: III h-tn un comun-aciónfull de 0.1 u. .1 null-hate do1o. ori- ­

No.nJon y“a o inhibeh montón Wim dofedora. gon1.¡a¡un 1. “¿una dm. 16a 201mmnin.dudo 3¡unen-1 líquidoatom.

Booín1o-antena. onut. ctm arman. 1. unn-n. In muro o...

o uumá amet-neo 1. 0011101611com-nm. en .1 tuboa. ami-u. pm no

¡aIW]! cristal".MmSoconsumo 1. una. chanta 10mi.th a 2.000un. y 01 lohan-¡uno

u dilwo 100"con concon Guinda.W¡a musa comun. onn Innatia:a. "¡ItalianoMusume a. ¡{un a.

-31­

n. n mad .gl'n .1 pmoodimhntodomdptoporToml y cum-í. (¡6).

¡1hígqlodoun nt. han amada noun. onunhungria-¡lor contu.

msnma. m alumna... n ¡»una a. glueógnmautom. anpun'.a. contri­

nruáSJJWzguManga-yn moipitaeonutonfú (45°C).sutura. ¡Iv-nm y 01precipitadon 11a dosno“ connotan frí- 1 u

a..1neto onundonada. n mmm d. ¿11:45pm¡mmm no¿m1.

onburro:-canto 0.5 l ¡I 6.14nando h acuñación a 14¡Ig/Il.

d)mwmmno proteín- a estampa peu-.1 ¿todo a. ¡mm y Havanna(55)muuu­

m uma! un oclusióna. ¡minu- mmm. a. bwin).

0935:: pmuammmommmaumugannmnírmmomngd- Panmynmrmm

MlofiGJOnmnIt-Inflnnb0.15nldnnnhmmchoa37'c.Wopana-tam».Sodathnhmión.mmmmmnmm.1woudfioolpdorndmtnhmdímudmmolfitdobPakann(5)nunk-unan). d. 2:1.

z) ¿mmmmmm m cm (oq“vuelvan-1 ¡Ii-nd.unn-dunwmdaavnuaumiml.

nm. un.main conpunto (51)7o amm aa) ¡el valium ¡nativo- do¿un agua-uan pan mun- 01tos-Into1L.

mprhmündn glnuípnoydnmwaaatn ¡In-Jam.y

-32­

b) 1.- oonoontnotmo nhttvn 6.1 ¡lucía-m y dal ¡tanda-d. medido con.1

¡tododoh amm.

h anidacio'n lo 110V. a cabo con mtapriodato de ¡odio 0.1 ll dns-¡nte ¡48ho ­

I a 3° c. on la oscuridad.

¡n nnenemy-r contm “¡cruda o pin-tu l nl d. un solución¡1 1fi

P/V)cbglmápno. y on otro orlomnr 1 m1tb unnsoluciónmotín m d.

raul gluoóudo .1 0.1 fi (¡v/v); ¡bol no colocan dontm an un baño a. nulo. A

¡daun da lu “lucio!!! frías II ganga 1.0 m1do solucióndl pued-to, u

nah oxidada-nante(nhnpn bntn dal bañod. hule) y u dom montana:

u1a cam-1m durant. ua bom a ¡4°o. nupuü a. “to pos-(odoa. anidación ¡o

mp 0.1 ¡1 do cul-n 311.001trío y o 1|an on h olmrtdad ¿mts 1 bon a

montura minuto.

b prom dooblanco.uuu-nio paraolloconfio.enamoro. mdamn d. ono- 1.o nl doutapflndato do ¡odio0.2 u trío y 0.1 ¡1 a. otuon

[m1. La! solucion. u angel-ny nohan: “tu on h elena-lu y a torpon ­

undal-uta¡un ¡nom la afinaciónemm dalprldnto: Imp ¡om.Onúdo¡olmóndo‘lmo'pmamdo100be laudo-anotanan­klglmo'ddoalctm.Winonthhflh CIDIImi. holida­ta’nda bl otnn soluciona.

Eutanasia“ msnm 1md.n My 1:1a. tio-uma0.011..ozonodoumlfnto o titula conun loluoio'ndoIdo 0.01I m un p ­

I doalmidónal 1 fi om inundar. ¡1 Valor cuchillo on h titulación dal

¡mo una. 01 dal calvo da 01 von-nn do todo«mmm ¡1 bno {61.1001:1­

Ido.

-33­

n abro doannalu ¿mom mamon on01 5113969110y on01otth gh.­

íoidola dotomim por 01 ¿todo da h mtrom (58).

V A

¡agita!pmdlo deadn. .1. 1 .9.'a ‘I

V" y VG t volúnnu nun-doc pan titular 01 nulo do unido;dal ntu­glucónflo CI) y 6-1 ¿luciano (o).

N y A0 g valor“ obtenidos on 1a atenuación con antnom.

g)mmm IIW“tododo],{MmBot-nítodo (59) ¡»mito dolar cnica!- totaln tengano no 01 mp0 Motor

hn, es decir qu. 01m parandir animo limpios.enga-ainda. y poli-airl­

la

Consisteon ndir al color producidoCuandooo tratan “tu Mit-nom con

[unlulhírloo ¡»montt-¡loy fenol. a. utiliza cano“¡tip un. ¡alusión a. glu­

la.

..mm: a 0.8¡1 dematt. lo agregan0.0¡4m1d. fenol¿cundo

ao15y lugo on tom bm 2 m1d- ¿ono ¡ulf‘n'flooamando. Duni- a.

solaro m1qu onbañomi. hmunt. amm 10númton,o .mt. y 1.o

Mm».hígado2mm!15ml qm 01 añado anterior poqu donarunicas! tota." (58). Into. lo

útdntmonunndlod. ¡cun muúfloodandoundnmadomagma quo-o

-Ju­

¡Momunhutmpndnrunmtomlquuolqm-Ifio.-nnouvoamaban!an ¡aunk-n 0.1¡‘donntmon

(¡damn-dilata.BhlolutánuanMQmml­Int-qunúbnGOnldoogmdutn-dayl‘jfldootmlóf.-mzummmalmaavoglmnonnm a.

lhmhnntOIDmimtonnlm'cynluawnjt.mblmouhlmonhnt-tompromuflollldomonlw

Junta.MmmmCanino¡{todo(55)¡opa-don¿atan-1mmn“ Montar-n 01

MMMM'IBR.kuanhmmmthmn 1aunha-“Manu.” ¡Indiodunas.

¡tomasuman-atom: amama- onMushkin“ “mas.-mg a)0.5; ¡’0(G)&3Monono-onlutndnm

b)5.33 WM y 0.65; dom culiando...una};dominoth yIguana.dun-1to-onllitndo ¡olla 0.051.

-WIIBmldnmúnuhagaplnldohloludínb)yndolaiolmióna):Wnannm-munt..mo'caamu 15:11:1­l. aoúrfnyuqneafimldnhulmfino).¡Manr-pacman!”mntmmhntoyHInQQOMjA.

SimfltíummummblmoonolqsumhmtnmMVIMOI thmmooluoiún conocidadouünr.

Panutoulmnfiml dañadopunto“¡raishlim-0.051443!"a“.

-35­

RESULTADOS

-36­

PARTE I

DETERIIIACIO! COLORIMBTRICADEL

OLUCOGÉIO OO! IODO

-31­

¡alta 01 pub-nio. lo. ¡{todos“no para 01 donde coles-lindaa del un ­

n'pnohan con-M160 on la hidm'lhu 6.1 paul-nítida y pocurtor determinación

¡namlibondn(58-62).Lospmdimioutol bado. on 1. {canción do un ouploJo colorado con01

odohnn ¡1do cunado- por Luna Morris (6]) quina 00W qm la intensidad dal

olorm4. m conu tanpm y .1 tipoa. duoógnmcunado. uní­

mr y Burn (6h)abarcan qt. h intensa-d doh aleación ¡tu-nt. por

Iman mido (¡amonionando.ups-¡nm pm a. om tanjo no4.41.6. hbúqmdadn unitario dual.

amm- pnn 01dudo colonn'trloo4.1 ¿“69m con1do. onpro-anota

I ¡1h! oomontmiomudoun". ll lino u quan. a lo. poli-¡aúna! tb].

I'm¿.1 Msn y con61 nopaga.distinguir antro .1 anciano. h Inflopcum

h una“.Im M ¡o61116wlhrtonnntopara¡dir la ¡divida!doh out.

IMM.

IIICTO DI DIIIRIITIB SALDO

Somaná la Munch quothan lu duen-nt“ ¡del onh nación eo.­

aflítrlca dal ¿Who contodo. OnoD v. onh Tél- I. h infinidad dal

¡Ion-mutua.haïnou náuhfl.¡1 ¡nudo d- mio. citrato d. ¡odio y cloruro d. calcio conlu mi: ¡foo­

tuo.

S eligió ol 0120. pam los estudios posterior-o debido a qm ol sulfato de

montoy ol citrato tb ¡odio pmdmonla precipitación del ¿aucting mudo mn­

n tu cornantmclán.

'I‘ablsI - 2111-9. 9.1.0.!gn.leon-09.169 .691¿M319191141 ¿092

Ia muela de mamonón oontiorm gl'négem 0.06 mg; 12 0.52 mer;IK 5.2 mr; y ¡al -’ en un valmnn total do 1.52 un. Se basa elblamo oomlnondinnte a onda¡al con todo. lo. motivan mm.01 gluoáenno.Por el armenia de dada sal lo produooun donna-miento de lalomzitu'l de mia del máximode absorción. m: “te me toda­lan ¡actuan ao hicieron a W) m” , qm el 01 máximaque como.ponia nl oarpledo gluógom-iodo en prounoia do sulfato do a ­mania.

Sal mada Cantidai ¿inserción(mami)

¡33(GI5000)2 0.72 0.270(mamon 0.65 c.295(mmm 0.):3 0.315Citrato do sodio 6.81 CJ50m 0.742 p.270¡mm 031.0 0.130(wow: 9.57 0.37CGael? 0.87 0.3160

.. - 0.050

(x) - las cantidades inundan de ¡al oorrumnien a 1.3 Illde solución“tm. acento paraol sulfatodo“no.

FUERZA IONIOA

Sedatomlná la innumia de la ibm 16mm Boba lo coloracióndal comio­

o¿luciano-todo,on mmm de distinta salon.

-39­

l Ï Í8 -Am 0.3- ,k‘r ,.| 4< “f50.2. ,A- ’ °

O 0.1? / °23 1.. ­< l

o . n lO 5 10 15 20

FUERZAnomad/1)3. Influencia do la fgorza iónica en la co oración ¿al coupleí'o Gluco­¡O-06° en gresenc‘xa de ¡stintas sales.- Mezcla de reacción: g uoogmo,>61n¡ 12, ,518 mg' IK, 5 2 Ing; volmen final, 1,52 m1. Aparato, espec­>fot metro Beckman ¿U A1 500 mln A, sulfato de amonio; o, citrato delio; I, cloruro ae ca cio.

1.2 1 U I l

1.0

0.8

0.6

ABSÜRCION

0.4

0.2

o 1 1 J400 440 480 520 560 600

LOHGlTUD DE ONDA (rn/.1.)FIG. 2. Espectro de absorción del comylejo Glucógono-Iodo en pesencia decloruro de caloio.- I, Blanco con cloruro de calcio; u, Blanco sin clo­ruro de calcio; o, Glucógeno con c]oru.ro de calcio (rentado el blanco) so, Glucógenoein cloruro de calcio (restado el blanco).

(la-nando la Hg. 1. nopudo mluir qm ¡nn um dadafibra tónica como­

mi.mmm. la milanintensidaddecolor.anlquhra¡oala al ¡gwIndio.

CURVA DE ABSORCIOÍ

Si lo m 6120.a la muela do “noción. o'ntapralenta el aúna: de absor­

lo'na l¡60mjt (11g. 2) y la intonlidai d. color mmm. lo vcoen.

m efecto del 6120. loba ol blanco es pequoñoen o]. intervalo de 1:60- Goomy,

n“Mo a louitubl de onh mmm» la abunión dpl bl.an es mwalt. y 1.loth (bl 6120.lo aducea h ¡if-¡1.

s. actuan; 1. annual. de cadaunoa. 1o- reactivos qu. participa on la

nociónmenudo toda- la! dani- oonlioionu constantes.

In Hg. 3 ¡mn-tn 01 afecto do 1- difonntos mui-¡cional ch c120... Gano

a ¡blorclónno varía metal-¡Into asumido ni.- do 0.26 mgde 12 (ver Hg. h),

a01131.6uta entidad m evita blancosmuyaltos.

Unestudio similar. homo con 01 objeto de obten" url intonndd do color

¡“pull-nt. d. 1. conmutaciónde n. dmnctm'quaut. aun debomun­

nnnuouodo 10nooa(P/V)ntpnctodol todo.

METODO ADOP'IADO

sn bno a esta: datos. lo adaptó 01 siguiente pmoodiminnto: se ognm 2.6 m1

o nativo d- iodo a 0.11m1do un ¡nm-tn qu. contenga ontn 0.06 y 0.75 mgd.

luciano pr ¡1. Dunia de anular un (¡buon um lolució‘nlimpidade color

0.2 b .

:gE " -1c:co<t

< 0.1 ' 4z:S?LJm Do dunan4

o A 4 l n l0 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5

CaClz (mL)PIG.3. Efecto de 1a concentración del cloruro de calcio.- La meZCIade re­acción está constituida por: 0.1 mg de glucógeno' 0 26 mg de Ig; 2 6 m ae IKylas cantiaaaes indzcaaas de cloruro de calcio (soiución saturada e vo]u­nentota] es de 3,0 m1. Para cada concentración de Clzca se hace e corres­ponaionte blanco.

0-8 ‘ í Í

0.6 v .é"° am —Q‘

< 0.4 - <zc: _ .¡3CZ

s; 0.2- .CD

< 1

o l l l0 0.25 0.50 0.75

12 ("19)“IG.4. Efecto del Iodo.- La mezcla de reacción está constituida por 0,2 mgle glucó eno; 1,7 g de cloruro de calcio; 9,38 mg de IK y las cantidades in­ücadas e IZ en un volumen fama] de 3,0 m1. A1 valor para cada concentra­úón de iodo se ha restaao su Correspondiente blanco.

-142­

mujianRifinnmid-¡MGOmlei-hmlhmmmlandan.mtmión de gltfipm han. 1 ¡ng/m1(ng. 5).

GLUOOGHNO BI TEJIDOS

hnmdirol 5115659!»tuna-mm unnugúnhtíoninaeom'n (65)MomodohIiguiOm-mnnum0.9nldon331vllmlgdlh­Mnei‘nuinflo 6.0.lnl donnhmopmindo.¡anal-lo odisntadunn­

Imminutun 100°Cy u enfría. ai nooboornnanto! almas a. Moli­

m pormmm. Alsobran-dantelíquidoto ln una 1.3nl doetanol

Si. o hungria y dun-3 doalante hasta ebulliciónincipiente nosufrí.

¡paint-¡Intoon 1m¡Ido do hinlo pr. facilitar ln nom-ción dal gluoópm. 3’

¡DGI!ol ¡ahumado obtenidoporantrifupoiún a LM m m 15mimo.

ol tvbo¡o colocainvertidosobreun tngo de papal“emm. lo u notario

Ipncipitaruna vom .1 ¿lucianoomou habitualm ctm “cnica. su

bum.u ¡w ups-tuu. mutnli-r .1 ozonoa. han: msnm 0.2¡1 anno.

niánntumdn d. m y nonlanlo audacia-nte conun varilla dovidrio. In

¡luciónd. alfil-i daba nadar bion la panda! dal two; lugo. n calienta 5 mima.

malCO'emanadas-elmundo. u onfl'hyno¡gsm 0.2nlh un

num-y 2.6 mldel «activo a. lodo. (¡nominado 1. abionión o ha) up. . a:

m on1. m1.. tom con1o-blnnoo.y los nm (so-up.) donuoo'gnno.

¡no(luciana de¿innata “pain nolima du ol milancolor; oocomo.

ona utilinr un ¡tun-¡ü dal ¡ni-noorignn.

-15­

0.5 i r

p.op N(¡ob TirU

l

ABSORCIONA460m» P ._¡ T

o L A n

o 0.05 0.10 0.15 0.20GLUCOGENO(m9.)

. Ablorcién a íóO m;Lcn función dc la Concentración de glucógcno.­:cla de reaccion: c oruro de calcio, 1 7 5; I , 0,261215 IK, 2,6 m5;¡cógencuen las concentraciones inalcaáac. Vo umen{maiz 3,0 m1.

0.5

Pe.

ABSURGIDNA450m};

o U

pN

o 16 2.o 3h 4h 56

TEMPERATURA(°c)J. 6. Efecto ae temperatura.- Mezcla de reacción: glucógeno, 0,2 mg;nuro de calcio, 1,7 g; Iz, 0,26 mn IK, 2,6 mg. Volumznfinal 3,0 m1.

RECUPERACION

Socontroló ol mo'todoaguarda cuantías!“ conocidasde gluoápm a ¡nm ­

o-detejido. cuyocontenidonomi. asuman-no mmmo.

Soobturinmn ncupraoiom. d. 100t 5 fi.

EFECTO DE TEMPERATURA

¡Jnmuch de Islan, un ¡manto do tmratum produceum diluimnión d.­

alor (63) del 37 í para un intorvnlo de 10° C. En ounbio. on pnumh do 01203

¡diminuciónu calm-nte del 11fi(1er Hg. 6).

nrncro nnL pH

Apfl ns-utro o ácido. no ha “nación on la intemiduí do color: oo daban

ram-¡a superiores o.7 wn .1 color dimimy' rípidmnto. nato mato no dub.

la “¡aparición d. 12 er. tom de hlpuyodito.

¡2.8)’ --—-p IO'+ 1--}. Bm

310“ -——-> 21' «t ¡03’

¡ESTABILIDAD DBL COLOR CON EL TIEHPO

Cam ¡a vo en 1a M1. II. h ¡boot-ciónde la solución no varía aprecian-mn­

t en el 1211:0de do 1 horm

un n -mgum gang;—-- — -­

Lnnrnhd- nación n 13m1quhdooaflptaon"Máth "

¡boomio'n Tim maratón(m1n.) (111111.)

o 0.525 no 0.53)5 0-520 50 0-515

1o cam 110 0.149015 0.53: 215 0.180zo 0.58) a las 2h h- 0.1400

GLUOOG'IBNODE DISTINTOS ORIGINES

en¡mmm-on gluoópnooobtenido. a. difomntos orígom y a. ¡ninlu en

1mm mrfliolums. por .1 m‘todo«1.1todo y .1 «1.1fenol tulhírtao (59): o.

Io'oomotuúudglmápmdohíplodn nt...

IanMundo. o hanmido unla un. III. Pamun mjor incautación

I 1o- uni-noono han 01 valor 3 cano ol naci-nz. ontn ol glmápm obtenido por

1n'todo 4.1 todo y .1 hall-do por 1. tículo. 4.1 fenol canina. ona-cado ¡Ibo­

n Ig.

Puno].¿Indúme nodoptaolvaloran1 para“. alguién. bob ­

un qm los (Italiano. Mandala- daz valor" muybuon da g.

-h6­

m1. m ..Mamimtcín«1 vdorg ¡nn dhtintoo¡nm

¡{todo da ¡nin-1o aalmág-m todo fenol Iulfiírim

(ugde 01W.) ( ng da Chung.) (todo/tmmírioo)

do de coraje 1.08 1.06 1.02¡lodo urna-m mutua 0.77 0.92 0.81:‘10d. “MÍÚO mm lo} 105 00%¡lo do ups moho 1.38 1.n7 0.87¡lo d. uno h-nbn 3.14 14.2 0.81noa. m. amén“ 1 1.16 0.86Idode m. ¿una 2.07 2.57 0.81¡lodent. onm ¿(1) 2.37 0.3“Idod. mts non-1 1m 1.15 0.914miode uta onm 0.89 1.05 0.5¡“10de ruta ml‘lml 1.02 1022 0083Caguado htc noml 0.39 0.35 1.1

tngo;dont. non![amm 0.35 0.32 1.1mln nt. ¿mítica 0.1:} 0.7!: 0.57trim «¿finito 2.15 mas 0345

“1m W. cow OJ 002

Io- vnloru do años ¡{toda "tin uva-Idol Onng cb¿lucía-no. nforme! a un “una!!! de hfpio de rata.Imdiatnnh donpm'sdl Gartner01 tejido a aunarnoblah-011:.conEl 33f y lugo ootm dfmtu.¡pau-do las“¡un proud.ugínoln'todop ­un].

“En ¡a ¡1:11:5601 gluoógpmb eritrocitos. Pan lu atracción n poco ..

demado n Ja. 8mm y col. (66). no.global“lo "una noramm ­

ndslnngnannuazngmanu 1512:1thg oolnundocvoeucon

¡ohhd. 01h 0.5 f. n tratan con¡gainvon-In dt ¡oido tfloloma'tioo a) fi

Idohumanitario bhn conun m1. dovidrioy lo aun-1m a 2.500m

-u7­

0.3 ji I 1 Ï

0.2 - ­

ABSDRCIDN

400 440 480 520 560

LONGITUD DE ONDA(my)FIG. 7. Curva espectrofotométrica en Presencia de] reactivo de Iodo delglucógeno obtenido de glóbulos.­

p&ABSDRCIDN

P N

o l l l l

400 480 560 640 720

LONGITUD DE ONDA (mp)FIG. 8. Espectro de absorción de los complejos anilopeotína-Iodo y amilosa­1060.- O , Amílopeetina sin cloruro de calcio; a, Amilopectim con clorurode calcio; I , Amilosa sin cloruro de calcio; O, Amilosa con clorurc de cal­cio.

mm ¡ouna. n ¡abundant-no41.11-enasnun. anna. hrnto a ho­u. bemmnm.hm-1own mama-today¡lb-n010mm 401¿luciano (Ha- 7).

¡aclamado a ¡omita alante-bhim oonolcuandon ond {maníalo0M:- 01andan.

a. own .1 pum por"maratón g 2.000Ip. un nama- {una a ­

¡Ido-mm h paopr dolMano doadn-uta Ioctodosydejaronupmo'n ¡a bil-nooo.Do1.. tm tnoaionl unn-du. pum. nauc- todo.

amoo humos. oo‘ioa oncontnígusano In 1. u'lth. nato oohnub con

m ano-oblonflalun uma- maquina. (67).

OTRO! POLIAOÁRIDOB

n ¡India 00m1. omnm ds conol ¡a un alemán unía violetacon

honiándunasmny. ¡anoma- un. oloolornríndovonlouunl.pm. quomat. 1.much dodnldán.I. ólordánu ¡»mmm on1¡up a. 0.05 . 0.5 Inc/nl.

Innuopmn. .1 amante anulado a1 mms mm un absorción

¡whom-51091015. 8).qmnbdmhntnfiovunmmhb 6120..nMovida!dal coloro Mio- onmami. b 1a .1. Gonfinancian de­

m1»: pum (¿ctm P-lfiúto)n ¡bth ¡ll-Im ¡nm30fi.pn­mm ¡m1. .1 Amin.. ¡n .1 cano4-1¿lu-6pm.enmio. losAds.

o1a-mm límite.41W.Ranelagh-mol Mountain]. mAú.a6fim/.Lonmnmhó

-ug­0.8

0.6 ­

0.4 L

ABSORCIÜN

0.2 '

460 44o 480 520 5

FIG. 9. Espectro de absorción del ¿lucógeno vegeta]vo de 1060.­

60 600

LONGITUD DE ONDA rn»)presencáa de] reacti­

Curva Amilopectina Glucogano7€ ma- ñ m6­

. 1 100 0.2 - ­

2 80 0.16 20 0.04

É 3 60 0.12 4o 0.03gg 4 4o 0.08 60 0.12Dg; 5 20 0.04 Bo 0.16<

6 «- — 100 0.20

l

430 520 sáo

LONGITUD DE ONDA (my)

440

P10. lo.con reactivo ac 5060.­

Curvas espectrofotométricas de mezclas de amilopectina y ¿Iucó‘ano

-50­

mamut man.C715.8). aman 0120.“.an- mpooohuna: ­Inddal color.

ln la flan 9a ¡md-nr 01“para bI ¡hablanW (¿nome donf.) onpan-nan 4.1 nativo a. 1do.

Canalobjetodonrhvcflnio'a qmn m onh url-midi!cinta: onmin-obmfinb nulo}!!!-¡ahonda-yanciano.¡omnllum do¡Ibo-mm“. In 1aHg.10II nn lolsmc"!!!compoth¡damn dolu num. a. ubun- quola lengua!doonh comunicat- ¡1

¡ka-od.ónrciónpnondaunb hau-cluvnrfidndo sana)».(Ada. pu.Inland“. pum)Mt. ¡460n (>II'I. paraanciano puso).

ln bc- s “to. mas. .1 o cum lo. candente. deextincióndoInno­

pcun y asignan pun- a 520y Moa); man-nm. lo pu. obtonorunrán-u.para pra .1 «nano «b1.- outuna- a. mmomn y ¿lucianopn­

nnhoonunamuda. Minuto unIm dodosanchas.

A: lll}!-ooc9.0.I 8aman.

Á. ha: mln... 13.0. g 0.980; ¡21‘60 g 19.6

A ‘1’ ntw ¡Pa-onoo.Í Í1o}01m

)Í¡mI/L...0.0.| g

- 51 ­

Lecturaa l¿60ml.“ Iqso : i' ÁJ-Ïuso (1)

Datum l 53) m» z ¡5m ¿5.32520 -} 045.3% (2)

A,1.th a. om;13.0.: «inunda! óptica.

¡.120 y anunciante de «tinción a N606 520n/ULnipotlvaonto.

A 2 cantidad a. milopoctim en g/ml

G : cantidad de gluco'gono on g/ml

¡5m y ¡46° : hatur. 6 ¡boot-ciónpam. a 5206 l¡60a}; ¡»pucha-nt...

Doha soluciono (1) y (2) ¡I pudo Galpón: :

o I - O OAmilcpectlm: A s ¡"L " “52° 11‘3 x L "5° x 1/100 g/ml

116.6

01‘36ng o a BÉLÉÉÉÉJA x 1/100g/ml1 .

Se probó opto mítodo con dan-mo. mmm y mmm. ‘Iinguno do ono.

rom mudo. oolonados.

PARTE II

BIZIIARAIIÍICANTB

n. ton-cso'n a. m unionla 1+6. punto. a. ¡unificación en 1a molo'cnu

dogluoópno.n una a cabopor un onlim qm trataran vuln- rnidnn glu­

oooiloo.paul-tout.“ on h mol‘cnh. d- un n ctm un.

1. (zona-una. zum a. 1. UniónIntomoionl a. ¡mama uan: . ¿su

m1:- .1 nanbnanal á h- ¿1m 6 - glucuiltmhma a.c.2.h.1.18).2- ­

wn agan on1. bibliogmflncanosano-1.11,1.6 tan-amada... Porr... ­

no docanadidd.on"to trabadola lla-nm- Buin mmm.

un onaimnlmmm“ Olta'nmwdistribuida en 1. mmm-s. Inn ¡1do

“tilda. on "got-1.a ( on own caso no 1.o dió ol nata do "out. Q“KGB-72).

unha (73). "Paly‘tamllacana“ (714)."sois-r1. prnavl' (75)y on usua­

mnu- (en).

0er!y col. (76)Osama-onqu h Infernal. obtenidan pair d. hide

o con-ón. a ¿mz-m1. cb 1a do músculouqmu'uco. pmduoínun pola-aúna

qmlo oolonabadonrnín conel todo. Elto- amm“ firm intel-putada

cano"mami. de comminotón do 1a tontos-11n-por un anulan miflonnto.

s. ha dona-mo(en)1. mimaán mm d- 1- nno 1,14...1.6amm...mm... obtonidanp-rurdnhí‘doymimnod.un; pro no¡bloc-donm. emploth de1.o:anna. primiplcontaminan.

¡mr (ED)dana-tai qu. uta Quim al 1a ¡"pon-bh do IAaparicióna. 1a

punto.a. unificación. aan ono. ¡m6 un dom-1m ‘f-mzm d. ¿11:06pm

conal“ 0.1.: y foufofllm. :1 ¡blindado resultarán¡[rado con01M“

onla ¡Ind ¡nora-I. ñn' ¡Mudo m ¡It-trato dl un 0mm Iraladohip.

doo domiedo. y ¡montó cp-ngnnnldolos residuo.¿mona "151mm

unidosona 1-oIt moi-n unidosonul +6. Entemodernismo no“patata.

onanunci. do reitero 1mrgn'niooo cb glucosa libra. Buúúo. on “tu abou-­

motoras. Luar pootulo'por prima; voz el mmm-nn do nocio'nd. h 0mm m ­

mmm. h aun {ong-famas nm unn-um, transfirhnlounasunto do

andan nltolídica, ¡1 urbano 6 de tm ruidm de glucosamptor.

¡n los ¡studio! mundos hnlta 01 pasante no tanjó conÁztnctoo poco

paz-momia-on 1o- cuan Mat-milan. quoturbio'nuuu- comomutante In

nm atom-n cm ¿1mm o annopatim. Porlo tanto, 1. dimimción a.

¡Montónmm. ¡.1¡cortas-nao da un adams lo debo. 1. motín suman.

ch nba enzimas.

0m ol objeto do oltudhr h ensimamifimnto o buscóun nítodo h dotar­

ntnoión omoífloo qm pmithm mdir lu actividai en oxtncta orudon.on

puto-nahdaat ¿il-n.

DETERMINACIOI

El} LA ACTIVIDAD BAHII‘ICLITE

In actividad end-¡tica o dntomim por .1 ¡{todo a aclaración con lodo .

mi.th 1. diluimnión a. 1. ¡Maruti . sao In); detpm'oa. hambu-conanna-pao­um canonbotnto.

deo indicación espacial. h much do moción oonthm 0.2 ng de 811110­

patín y angina on ¡narrar citrato 0.3 ¡í ¡fl 6.1! (volunn fiml 0.1 m1).

m tkm d. inaubaom'no. d- 30 minuto.y u tampoth 37° c.

Umvon Mtv-h la Chain. la much de moción lo c11le con¡gm hasta

-55­

0.hm1.uw2.6m1d01m1voda 1doynmiflohólorcfinn SDIIU.oontnunbhmdoagmymthodoíodo.

Enolmodoutnl-rmim purificada.ammoemgaopanmynmiúxnintom odontuúoïnfimtonawo. Oonpnpnctonoonfluhannthoomin-WolOJImIyhmión-d-tummo0.9n1d0n33 í: Implica 01pmdim‘hntodnlcrlptoonhhrMI

nom-paint“ a amianto dotejidos.

DBTBRIINÁOIOIDE LA ACTIVIDAD a-AIILASICA

n. mmm cat-unión. n dot-min mas.on 1. “Invasión dela ¡Ia-or­

bwin a ¡48)mln alamo 111.111-glunágom omo nin-tam. In Inch da mocióny01Mimi-nte units-do. ¡on100W qu.m la onún ¡II-111m. pro

minado 0.2¡Igd. nmbm on1m daaumenta.

DDTEBIINAOION DE LA ACTIVIDAD

RAIIÏICANTE EN PRESENCIA Dia-‘IILASA

s. pana. mlculnr 1a intortonmh d- 1. ü-mflua en 1. ¡inundación do 1.

¡num millon“ mus-nde por apurado¡adidas congluoópm y unilapeun. oo.

no¡lb-trata.

a. hanna-¡trato qm 1. ¡mima miriam“ no¡más seba .1 glum'pno donf ­

ado do carajo (dot-m1me por 01 nítodo tb coloración con o]. todo). oanoortnhnto

"mila: al do 1- 0mm mutante de lovadum"turn-1a por Guru.y col.(73).

m obama-oanne-nan qu ladinúmnióndnnumeración-5520.};obtenida.1 1m ora-11... a. ¡nun o a. "¿lucianomundo- conuno­

poctimbadola: adiciona pad-tantodonoriptu.u mmm 1am a

humman uobthuahEOmenndou Wannudpno. Portotanto.ute ¿una ¡{batutaoo«¡pl-do pu. ¡ndir 1. ¡MMM (¡mui-ica.

31o. unn- nnopnoum canomagma. 1. acción¡matias a. 1a-dooom.

w m unefecto aditivo. Porlo tanto. noruda expresar1aactividadd.

h main miriam. on“¿noto- ordol. omo1. ¿Hannah ontrah «¡unim­

atúna. nboorción. sao un}:con ¡astuto a. aumentan. y 1. «¡mansión a

1¡60un):mudo glmópno cano ubuntu.

Aactividad unifica)“: A dnoroián - A ubicacióna 520 m a ‘48) In[.1(nt-tng) (nitrato)

(animatim) (gin-59m)

Soaplicó"to nítodoparaentonar 1. muak: dola animamin ­

cantoa partir del “tn-sto mano.

-57­unn-WWhn 1. ¡non a. melón y doteninoiónd. 1. actividad.IOproud. .gtín lo MMO ¡Merlot-uta. ln lo. up­rlnntoo 17 2 ¡o ¡“llanos-.11.- donuvny do31m6­pm Munilla matt-Ito. ln 012‘CiprianoIonadoomoontmumomommumtaamowp.n MW 1aChain. ln doo upon-uto-IOuna.ami-W dohúth-otqndoasuman.z.man-no.mu un ¿mas a.dode ¿masahlomtühmmpom1mtodú1mhmobuníaa1 manto mua-do.

mm¡»mato lui- .nopoctim (¡luciano

1 mm 0.160 ouna. de¡dth catas 0.155Bdflcnnk+una. a. ¡nm 0.628 0.1450

2 mmm 0.105 ouna. a. hide 0.090 0.110mm +.111. b bw 0.210 Dom

_%­

PUBII'IOACIOIDE LA BIZIIA BAIIFICANTI

Todahaoponcionnullwonnaúoomtmtmdoo-a'c.“miga dolo. «Clintondotando.In mu oonan-nm:conlolmio'nmmm domas "odunen." du.

nntoSo'Ghom. obunpor sorda.onde-todoeosnlodahon. proa-oq.

u ropita lt nooo; lugo do lo ‘ñti. soul. lo (10,1.¡1 ani-1 on upooo anoto

3 bono y oo lo marinos “¡dolo un golp on ol mono. n hígadolo “tu. 1n­

modhtmnto y oo corto on poquito. nom qm oo ¡Inn doonooo con solucion

mt. domas 0.25I qmcomun vor-on.w"3I. pra ¡nun-r 1. m.

Lostro-oo oo¿autom on unbo-opnoindor dovidrio dal tipo Potter.

contu. volúnnn dom 0.25I-nroono10"3I.

Por oontrlfiuolo'n o 5M x g donna 15minutoo.oo oli-1m adulto onto­

rn. noto- ooluhru y nínlooo. El ¡abundante (¡num crudo)oooontflhp

. 25.000x g ¿amm 15 minutos. doooartúflooo .1 nda-nato. n nuvo lohan-dan­

to oo antrlfugn on la utnantrímp promflvo Splnoo.mdan 1.. o 105.000x 3

manto 15mimtoO. ¡:1¡abundante 11mm dont. Iñtim contribución o u.

pin midndoonm conun pinto evitandoel ¡rn-tro do valían" degrua quo

flotan on la suponían. IAmor pre. do la actividad ¡mutante oo ¡ocupara

oncota {nociónHung. a. colornun-nte. mmm quo1. milan quod.roto­

nidaonla malla dogluco'pmMim-do.

-59­

mo n 1 b f f t b o

s. «mmm ¡un a. un masón a. 91 d. {olfatoa. calcio (no¡»g/¡1)y

lodom. 01"bum. m maipu-io dalal. II recume on8¡1 dal

¡abundant- do 105.” z g. ¡Ita ¡“punción ¡o 60.1.dar-m 15númtona 0' c

conagitación eta-ton: y lo 01h11: 01 maipu-do por conta-111190161:a 25.” 3 g.

sm anotación¡o repito un vn con01 abundante.MMMn mw. sobras-¡hate qu- ptas-u a. 1. 2‘ adsorciónconpl ¡o pan-capa.

conun von-n delolnolo'ndoturno a. none ata-da . h- c ¡a 6.8. a.

MaonupoolfinimtuaO‘Oqltuflominima“: lugo. “un,dns-¡lo 15¡llanto- a 25M x g. ¡1 precipitadod. proteín- ¡o tomado on

buffer(1/8an von-n origin].a. mmm m) y ¡ouma con¡unión

conta 1 una a- oclusióna. ¿matan 10"hu. hinata 2 bono. cuando .1

¡{nido momo duplío a. 1 han.

a. cuantas qu .1 nautica amm. 1. imattuoie'md. 1. onlin durant. 1.

duna-u. n ama-domutua conta-mmm“ 16ngd. mot-Mu.Gmo Mvoronh'hbhv. hactividdnpofllumntnfim dupli­de“tu etapa a. panamá-a.

Tabl- V- ELLO-ción 119.12.22.15

b pnpanm la. alter-nt“ funcion- y Omron su actividad"domato a lo downptoantoriomnto.In actividad.mutante a. uma. canola diloromh ont“ la dimi­nnio'n do h absorción a sao ¡ya y la disminución a ¡860mp.

Volmn Mi:le Protein actividad Factor Don­dad tota]. Espaci- do pon­

rmfin mui- fica Mi —eio'ncanto cación

absorción(la) (me) mgproteïm f

Manto «nado 10.14 291 1185.6 0.2% 1 100

¡abr-md. 25.000 3 g 9.2 276 676.2 0.141 1.7 95

find. 18 80° ahhh 0073 306 7‘.2°Sound. luegolo adoorción on gollo fontato d. calcio 8.o nu 85.6 1.7 7.1 ¡49.5

¡cinta de maniaVdmili. 80° 8.5 505

PROPIEDADES DE LA ENZIIA

Quando¡e ¡unha 1a ensima unificanto purificada. con milopootim o malo-n

durante 18 bom a 37- c bado vapores do tommo. no no liberan minar-- seductora;

porlo tanto. no pude considera: quela promfin anti 11kmcb01411.... Inm­

¡nulocn m mm condicionaconun gm one-o de dextrlm fl-límito a. muy».

um, tnpooo Ia liboum “¿cama ndmtomu. ¡0to indica quola anginapaulina. no

um actividad dotoetablod- amo 1.. 6 glucoddau (25).

1mm uta ensim-condutnm no Io obnrvo'odio en ol pod-rndun ­

tor ni en 01 color conol todo. Por lo hnto. esta pnpraoioml Min 1.1an

de 1. dutrnm 1 +6 ¿Inocuidad dsocrlpta por Roloufolda:col. (78) on tejido.

un“...hominpuriflcadaumyntóhyamm-mfiflihdo ac­

ttvldd! durant. dos no“ a 45° C. ya ¡en comooolución comentada o como

pmlpituio de mirate de malo.

OINETIOA

Canono u on 1a Hg. 11. la actividad n praporcloml a la eoncontra.­

ción do angina dentro do diarios unit... Io- onwol de actividad angin' ­

tica. sa llevan a cabo simpre dentro do "to. límites do concentración.

¡n la ng. 12 no ve 1. Variación do la actividad omim’tic. con 1. con­

mutación de mbatrato. Ia mas ch 1a 1'13. 1.3monta la vudnaián do 1.­

actividad onahm'tim en función dai tiempo.

pH OPTIIO

Om la puedoVer en la Hg. 1h. on anunci. do buffer citrato 01 pH

com-ponian. al marinodoactividadn 6.u. s. obtbr- mor actividad

con¡m buffbr qm conTra-altra“ do 1a mln mohridad.

-62­É"ONun 04< r I I I I I Iz ,3D .0...8 ' .'0' 4cn 0'<1 ¡x Ü< o“J 02' 0' .LIJDzQa 0.1> .DÉZtna 0 A l 1 l L l 4

0 004 0.08 0.12 0.16

PROTEINA (m9.)FIG. 11. Relación entre actividad y concentración ae enzim.- las condi­ciones ao]. las descripuo anterior-ente.

"vu° . I I l T Ï 17 Ï I .Ntn4g 0.3 — .¡3o:O88< " a<_ILUQ 0.1 r- .zDGÉ o n l t 1 1‘ 1 A 4í o 0.2 0.4 0.6 0.82 AMILOPECTINA (m9.)Q

F16. 12. Efecto de la concentración de substrato en la velocidai ¿e re­acción.- Las condiciones son las de un ensayo standard.

SALES

nom-n miriam dohfgnio.igualquelaomunQdam manu dor­tu ¡dos pu. dourrollar .1 mitin: Iu actividad.

¡un lao una. amada- (vorTablav1) .1 citrato a. ¡odio 0.3 I produ- .1

ofoato nor. ¡1 un“. Ig’ '. molibdatoda anonioy p-n‘ 4* A a. genio,

¡on 11111121601“.

Mi. VI.. EfectodoEl en1amaldad ¡“Him

In invitacion. oounan a cuboon los condicionandnoriptu.mptoquo 1a oomontrooiándo buffer el 0.01 N para ol “puntito 1. y 0.3 llpara ol ommmo 2. Sohiso ol bhnco corro-nominac-para ondaul.

hpoflnnto an comentmu'n manana“(u ) uuu".

1 Ningun - 1Soutod. 0.2 10D¡conto damio 0.2 1.6Citratod. 0.3 2006Citrato do ¡odio 0.1 1.51}loubdato de malo 0.oh6 0.21;¡conto do mando 0.6 o.loClorurodo moho 0.2 Op-n‘l -'L ‘ 0.0001 0

2 Ningun - 1m 0.01 1¡5612 0.01 0.33

(x) a. tam emml la actividad on ¡In-mn do Idol.

¡.1EO I I v v vgas»<zOGguz- ­mCDd4_Iu0.1' "GZD5Dzo l a L i 12051015202530g MINUIOS

PIC. 13. Actividad enzimática. en función del tiempo.- La ¡01011 ae incuba­ción contiene por al: 3 2 ng ¿o miloncüm en buffer citnto 0,8 IL ong:­. ca unogli,lclfltidld caga-3:90?ente A 4 mg(11:prgtdldlrsgo inca“ .4os oo os se ue s ao van e n­dgho a unpmesch 3: 0,35 can ‘ "3423.1 de 1436!“: ae 1 o. w

100 .

80 ' .

's - ­8.1D 60 * qqe . d2

E ’ 120 ’ ­

o . .0 5 5 7 8

pH

FIG. 14. pHóptimo ama, buffer citraio 0,3 ll y 0,02 mg¿e enzima;, buffer Trío-citrato 0,3 My 0,08 mgde enzima.Las ¿más condiciones según lo descripto anteriormente.

-55...

¡PHOTO DE POSIBLES ACTIVADOBBS

Barbr y col. (7h) intentaronmn la tmlmosunción catalina. por la on.­

sim mutante a. “¡butth con." ¡o calera poro].¡gr-anod. dt. tri. y on­

condados. Con01 objeto do ver a1 1a ensimaunificar!“ d. hígado pandonor un;

nda porolmlmírldnc. ¡o salvaron hn “guantes Matama- a milton, alumno­

n. hidrolindol mmm“ da milopoum. do glnoápnoy d. num. Enningúncano

pudo(¡banano asunción. Boton"cuando. consuman ocn lol obtenido! por ¡na-mr

y U-h (Ti) quam saw-ron mlton. hanna“ y ¡nm-n.

FORMACION DI UIPOLISAOARIDO SEMIJAHTI AI. GLUOOOIXO

¡cogía¡obra212mmn amu- múlopoctimconaman mmm a. hígado.¡o muy unpon ­

¡acia-1doDurante .1 ¿musa-m. luto ponnoármo thu. on pnlonoh ¿.1 mauro

de todo. un cop-ctm de ubicación qu. coincido con ol dal anciano conun Alá. a

usoa); (Hg. 15). nosdato. a. 1.a.un vn montan qm ha matado .1 uni-m a.

m. una. por.1m‘tododalperiodatoyporWim con Ialv. ­lor“ ¡un ¡muros a lo. qu. figuran on la ¡Montura (15)para “¡tintos ¿11:06.­

nos, qm than un longitudnun-dio de 9 a 18unidad" ¿una y o].línia dsp-d.­

lolhu entro 39 - ¡45fi. pero no coincidancantant- oonlos obtenido.uuu-mln

3111065.110mmm cano oontml .

Tú];VII- Ecotgd. 15gn Minuto loba Inningún.I o .1 tu! diod.MM h­

W: 60ngdounilapoctim.antldadde01:31.ranita-m comandant- a 6.“ ngdomot-Im. burn:-ci­u-to 0.3 u pl 6.11.Vol.1: tot-¡1 i 1.0 ¡1.Genial. 10.1 qu al Inn-lor. poro¡cuando encin-nl fi­mldohtmtáu. ¡bordadoMammaïl’cbajovapor" dotolunnoIo ¡gm 2 valium donotan)"npnotpndoquicoobtbucomunalanqu n1'. doovoca-annun nach denatal!“ (3:1).n n­dlmln onunpaga-novelan ¡loun y lo ami- m o­nlimr 1-!nd“. a. tunaaim ¡un onda¡won-nu.

> ' P-Ilflonu- longitudMi. GruponoPons-nando do ¿glam Mustan­G) (a) (fi)

humour- 53 23 14.);

monton:- +­m W 50 13 5.5(¡luciano ¡6 15 6.7

16a b c- d.

n rotundoan capa-nte atom condonan Paint. a. «num ­un o concibeonh tabla VIII. hombmfltmmudmhu­¡lomode520. 14601:}en.1 ¿aún india-mitin onh ¡emm Miobadnnyfonnoiúxdomnrun. lopndmnnprhmfindnh¡Ba-.11.“qu ¡iban mito“.

TablaVIII- Accióndeg om minuto Ign g data! hay.¿1.292293

¿Más z 16m1qu-nan1aTabl-vn

Demand ¡Maratón Ain't. paniloliunpmdio aatt-trato d- ando- 520 m);

m;­

(cL) (mp) (7‘)

nom-1mP. límite

Dam-1mP. límited. milopatim g­enial runiflcnnto 11.7 0.590 1160 8

Acciónsobre otros Enunciado.

Enla prima-apara d. “te tramo u damnró qm on anuncia dal re ­

activo de lodo la longitui do aula entrenamiento ¡1 drum de ¡blorcio'n 0|

1:60mln para 01 glucópno. sao ¡nn/¿paraInnopoctim y varía ontn ¡460y San)»

paramachi dem.La!mu da h agan 16msnm un(Input-¡into on01luis. domain

a. 1mmnonsmmmeanu «hígadomndmnóndntngo.manana

¡uy yuna...Se ¿aduce que“to. pongais-ido! 10 sirvan do Iubotnto.

0.8

ABSORCION

o.o 4xas

.°N

l l Lo 1440 480 520

l ll

560 500

LONGITUD DE ONDA (mg;FIG. JS. Espectro de absorción en presencia ¿el rea t vo ¿e ioao de] po­lísacáriao que se obtiene por acción a. la enzimaramificante sobre ami­lopectina.- Se empleanlas condiciones descriptas en 1a Tabla VII.I, Amilopectina; O, Amilopectina ¿“pués de la incubación con enzima

ramificante; A, Glucógono.

I ‘ ' V Ï U ¡ Í I Í

0.9 ' a

z 0.7 .oc3CZ > ..o8?.< ' .

0'3 A 1 l n l44o 430 520 550 soo

LONGITUD DE ONDA gm}?TIG. 16. Espectros ¿e absorción de los polisacár' otivo au ioao, antes (simbolos llenos) E aesyuós isimbolos vacios) de mau­‘bar con enzima ramificante de hígado. as condic ones son las ya descrthas.A,‘ : Amihsa; o , .2 polisacuido ae] maíz waxy;D,I: almidónde tr150‘

l l l

640

n presenc ia del _re¿c­

-59­

CONCLUSION]

El ¡{tododa oolonoián con todo, damrlpto on 1a prima tu" dn en. tn ­

bado,OIrípidoy unn. 31 colorn “table y no“ría ¡paul-Inn“ con1a

tanpontun.

su. ndueoanmmo loovolúnmidotdoo¡air-activosa. nadanmodu-mm- tm ¡»qu-Hucano0.02u do glugápno.

un 1:01le qu.porhuman-1.unos-auúounl nduotonl pro quono

foma cuando conel iodo. no lntorfionn.

lo ari-to un comunión“tm antrolo. nmw cuando.oonol pro­

admmo dominio y con1o-dtodal «¡sí-tooo.¡anto qu-mo- mm m...

ruldml m. ¡intra quool color«lc-arrolladoconol relativo d- iodod- ­

poma- 1110:1593qu-nadan (79-81). Porlohnto. “to ¡{todo-suis“.

pcífloo ¡un 01 sluqípno.

no mm cae-¡musau gusano damn-nun m1 myimportant.onn

montónodorlno’trlca.mi. porom. cardo a ha actua:h tutor-nan qu

69,1.¡ox-nomu muuu- glunooilolon1.- r-I mmm. 1. anexión nonan.

ooonuaf. ¡han ell-cono).¡anunciadoqu ¡ocultadohmu'ndoh

pam-n. “6.3.2.3 mano-M1100.hólmiíndWOnmï-Bf.hbfmámvúorgqumhnmfinontn mubnuoúpnoeb­

tonMuporoI-üeaomtodayporú¿.1fono].Estonian-Innol ¡lucianatant-do culoIW y n ¡ítn ¡un Circula“! m ¿maipu nosmümdngrldndo.cnmmoolvllordogub-Jo.

-70­

Losuporlnntonmundo- conun]... a. nudo!» y maquetas. manu

qua1a magma d. un. an mhz-oa. absorciónuna.) “tí ocupa-nm. entre 1o­

nloru comandantes ¡1 ¡luciano (160ny.)y a 1auruapan. (520le) m.som qu-our-k. «si sancionadocon.1 ¡rulod. míticas“): 6.1pol“!!­

do. ¡Ito mah conlol anto.Munt-nut- granada!pormanu y “¡.(H).n ¡“odome nopuntoout-nuwoman mama. sou-1.-n­

ruciom on proporcióny distribuciónd. 1a- mono-m -. 6 on.1 una-to. su

embargo.dotominniouna. dal cum-Jopaludismo-todonopudoamm

unpon-dadoa1 tipod. ¡W a. uma1 up a. alumna. ¡no «¡una¡y ¿tu para01“halo b h enci- rumana".

Sinouuu. la ¡alopecia ocnMute dola cuinamm. 01pm­¿notommm. ooun¡anunciadoan una an anciano.

¡lb-dnd. wo¡acusanmiriam. mtwndón “m1. (un-amm.1 ¡{todo¿.1 todo)cobro-1glmápmdn big-ind. many mayor-actúan. 1.

amhdmmónonnmomnnsanfimum ¡humillaciónqu.o chun. a usoa}; (m noutuln can Ida-tutomuevan. o club.m nnpocthmto) pag-nusdot-mua 1. ¡uma-d mamut. a: mm cn.­dOI.¡ancianonatacion! conabo- pnudfldo. portopado.

n:-export-uta-dnaiptoconne‘pnom"Abdome hon­Itm ratifican“ dehide douta, al sentia.

¡opud-obtonormln-nte 1111!.dolu princlnlGW, hot-d.­lm. Molo- mmuhí’domhmndo mani-mm; canta-con­dicionana ton. "amiantopulsando“qual ¡orinar-dommm.1%.abt‘mt-h0t-nnfln. dodufloahondmmumdolmm­

-71­

dante. su: emm, cuado 01 his-3.oOIpobn en glucógm, tmhiín laa-milan

modacnol “afin... encuyocasomultnuú ¿una W... Elpl de

almidóny almidónenpolvonoduen para¡asoman- mutante. ¡una of“.

tuadooconglmópm mimo tratadoconuna 8 M. “tr-nn (I) ur ofoc­

tiva on 1a clima-acióndoesta mm. cuado lo omnntn on oonantraoiomobodas.

140mmmüinantoühígdo,15m1"mama-naa“... aqui.­n ol mvpio de sales nan desarrollar .1 “¡31m lu nottvldd. Du’hn de la

Qde papa (83, 81:)mm es mmm. nor el molibdato do mmm: nero no lo oo

por 01 howto de sodio. ¡gun que 1. de ¡mmm (73). punt (77) y otras. no o.

antivaiapor oligo-aírldoo canonde ' Romana mas ' (7k).

¡a caninacbMade pandoutnlnr cam ¡vb-trato. la una... la ¡milano ­

un. y la ¿amp-1h“. a. ¡nun-ctm. m han dequo¡su aun sirvacanosubstrato y am ol non-anidan mutante moda cor atacado mlvmnte por

1aFauna-a, 1mm. qa la mina ¡"atacante tam-'11nado trastorn- tuvo.d. donna rnnifioadal.

I- omimnmirtannto dl hígadoy la dolavada. monta: mn apelación!

¡”Junto nor los Iubltratoa (73) pero din-nn de 1- onzim Qdo algunnl plantel

en qm calmant- ¡nadantir-¡atom anne“ on¡alemanas (95)un lugar a fon­

mar glmo'epno.

La anima muificanto obtenida a partir dal oninopumn de amonio(¡raíz due.) (x)

qm comun. ¿[unísono¡demíscb almidón,utnln canoMatute. tanto ¡milano ­

tin canoanimen. oie-¡do.1 nmduatorm un polllaca'r‘ldoda espectro msnm

al gluno'pm.

(x) Cantv-clone put-nom)“ de Clan n. ¡{n-nn.

-72­

mm:ma(wrm.mnnynmy (ano-manana...“brombmhprhudínbhouthdomanu-ninia.“datoamm1m. b “tu m. ¡humanMunichpanammmmgmdmumnmmmaheynsm­mamon.

¡«aduanal-anununúpnmmmmmgnclausura.mzdphmwumpnm. Mahaunlon‘ltdüdmmdbdoSnnWaWonln-mmm ­DIN‘WW.

WMWyolbdndaqnmhmhbmm­¡una(5.8deflu)mlnmnom(n-l7unddu)dahmutuo-um!“ ¡poth ¡1m Másuna. “tu ctmpou­bflMuquohdummhoúnlva-umüMnmmyn­Mi]."¡Mmhmmud mmunummaubu.

umbhpülmqnmpornmnuamúbnmtua-hinduQWImdqnmunuo-ounmeanmWed-own“!­

MZ. ¿(MWQÁFW

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REBUIBI

a. doom-lb-un¡todo fluido. 01ml-y ocn-amoopu- Moulin: uuu-Im.

o-nmol¿Woman-núm” qnlvarínoztnOJSylu/nconmu­acuvo do ¡2 on IKon paloma da “la.

su. mill-into Ballet-nítricopudo¡Ir num-do m 1. dot-aumenta01

mas.“ contenidoon1o-“Jun. a. pu. dihmhr un¡»IW an up.¿.1 ¿Imágena. unaan tipo a. unilapathn. Manzana. .1 Ana. m mm.

pla-nítida - todo.

a. amas ut. ¡todopan¡nur1.¡num-ad-u ond- mua.hat-1,qu ¡(dai-nmManantnuhmha¡nom

nmmammMuaha-aodomhmmhcm muiflhyfinhInstinto-con“.

en cundocuandoenandan». a dt. una“.Innociónonline. una muevan. n fin- oninflardim 0.3l

un“. hanna-laynmmmh“,u”y;‘ - Aa. cono. ¡a cum. 17-111“. a. Manopad. nus-r tania. un "batuta­

.110- 1unan ¡Lu-¡toa. alemana.¡chabon-¡todomomhmI-onpmnhba‘nm

-n­

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’(Güt)m‘12!WII-m"l'wuma"un'Iiu“vmuy“r!'mo°9í

'(aáfit)no'81"un"con't"ro'mo"ro'voo"aNao-ktm"r‘sm'Gí«unLt“a!"II-n'ma-r"r'uI-m"ro'ïao"¡í1096!)taz‘91"rmanu"rnWII-n"ro“zm'íí

1996!)6mW"-0't-u"r"r!‘mmvo“(n‘om'aí'(Gíót)m“tu!"-0wm-r"uh-tm1€

'(096t)Sos'55“Inn'tou'r"9°!'om"ruMal-u"ra'm-o°oí“(931)SanW“noWow:"cn'smwn"r!Mm"ra'n'l'6i’(moí!‘I’nw"¡enn'90""Elum"r!'Im'32'(ítít)tí'15!“un1m‘t"ro“¡no“rv‘uuo'lz'(666!)laa'fl"r"¡Im"rn«nt-¡n"ro“¿qt-n°9

'(ítót)u'G!"II-mwon'r"ro'mo"v-vmua'92

’(líát)611‘9!“¡III¡In°tna"tuwo:'uu"to'I-Ilo"¡'o'ïno‘nz

'(aím¡al‘¡ï!"¡v-Iun'tou'sdn'00!'oua"ro‘tno"to‘tao’{3

'(Sífit)¿oíEl(OI-warm:nos'vul’U-O"aWan-n“rr“III-na'33

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