determinaciÓn de sensibilidad bacteriana frente a dos metales, dos ligandos orgÁnicos y tres...

UNIVERSIDAD NACIONAL

DEL CHACO AUSTRAL (UNCAUS),

COMANDANTE FERNÁNDEZ Nº 755,

CP 3700, SÁENZ PEÑA, CHACO.

e-mail: juanjoc_mm09@yahoo.com.ar

DETERMINACIÓN DE SENSIBILIDAD BACTERIANA FRENTE A DOS

METALES, DOS LIGANDOS ORGÁNICOS Y TRES COMPLEJOS TERNARIOS

MARTÍNEZ MEDINA, JUAN J.; LÓPEZ TÉVEZ, LIBERTAD L.

OBJETIVOS

Determinar la actividad antimicrobiana de los metales Cobre (II) y Cadmio (II), de los ligandos Ortofenantrolina (o-fen) y Cianoguanidina (cnge), y de los complejos Cd:cnge:o-fen (1:1:2), Cu:cnge:o-fen (1:1:2) y Cu:cnge:o-fen (1:1:1) sobre bacterias Gram-positivas y Gram-negativas.

Demostrar la modificación de la actividad antibacteriana de los metales y los ligandos luego del proceso de complejación.

MATERIALES

Metales y ligandos sin complejar: soluciones acuosas de los metales (Cu2+ y Cd2+) y de los ligandos (cnge y o-fen) en concentraciones de 10mM o 100mM.

Complejos: soluciones de los complejos Cd:cnge:o-fen (1:1:2), Cu:cnge:o-fen (1:1:2) y Cu:cnge:o-fen (1:1:1) en concentraciones de 10mM o 100mM. Para éstas se utilizó como solvente Agua:DMSO (1:1).

MATERIALES

Cepas bacterianas: cultivos derivados de Staphylococcus aureus ATCC 25923, Enterococcus faecalis ATCC 29212, Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 y Escherichia coli ATCC 35218.

Controles positivos con discos de Gentamicina 120 μg para E. coli, P. aeruginosa y S. aureus y de Ampicilina 10 μg para E. faecalis.

MÉTODO

Se empleó el método de difusión en agar basado en la técnica de Kirby Bauer.

Se utilizaron discos estandarizados estériles impregnados con 40μl de la solución del agente

en estudio. Dichos discos se colocan sobre la superficie del agar Mueller-Hinton previamente sembrada mediante hisopado de una suspensión

bacteriana de turbidez comparable con el Mc-Farland 0,5. Se determinó el poder de inhibición

teniendo en cuenta el diámetro de los halos.

RESULTADOS

Referencias: (+) produjo inhibición , (-) no produjo inhibición.

S. aureus P. aeruginosa E. coli E. faecalis

Cobre + + + +

Cadmio + + + +

Ortofenantrolina + + + +

Cianoguanidina - - - -

Cd:cnge:o-fen (1:1:2) + + + +

Cu:cnge:o-fen (1:1:2) + - + +

Cu:cnge:o-fen (1:1:1) + - + +

Determinación de la actividad antimicrobiana de los metales, ligandos y complejos.

RESULTADOS

Referencias: (+) inhibición baja, (++) inhibición media, (+++) inhibición alta, (+++) inhibición excelente, (-) no produjo inhibición.

S. aureus P. aeruginosa E. coli E. faecalis

Cobre + + + +

Ortofenantrolina ++++ ++++ ++++ +

Cianoguanidina - - - -

Cu:cnge:o-fen (1:1:1) ++ - ++ ++

Cu:cnge:o-fen (1:1:2) +++ - +++ +++

Modificación de la actividad antibacteriana del Cu2+ luego del proceso de complejación.

RESULTADOS

S. aureus P. aeruginosa E. coli E. faecalis

Cadmio + + + +

Ortofenantrolina ++ ++ ++ ++

Cianoguanidina - - - -

Cd:cnge:o-fen (1:1:2) + +++ + +++

Referencias: (+) inhibición baja, (++) inhibición media, (+++) inhibición alta, (-) no produjo inhibición.

Modificación de la actividad antibacteriana del Cd2+ luego del proceso de complejación.

CONCLUSIONES La mayoría de las sustancias ensayadas resultaron tener

actividad antibacteriana con excepción de la cnge que no tuvo actividad frente a ninguna cepa y los complejos de cobre que

no inhibieron a P. aeruginosa.

El proceso de complejación mejora la actividad antibacteriana del cobre y o-fen frente a E. faecalis pero la elimina frente a P.

aeruginosa y no la modifica frente a las demás cepas.

El proceso de complejación mejora la actividad antibacteriana del cadmio y o-fen frente a P. aureuginosa y E. faecalis pero no

frente a las demás cepas.

PROYECCIONESLa complejación de metales con sustancias bioactivas es una alternativa que podría resultar útil, para el diseño de antisépticos, desinfectantes o antimicrobianos en general, cuando dicho proceso mejora la actividad

antibacteriana.

Por otra parte, el hecho de que la complejación elimina la actividad frente a ciertas cepas sería provechoso para otorgarle selectividad a medios de

cultivos.

Además, seguimos incursionando en la determinación de la concentración inhibitoria mínima (CIM) mediante la técnica de macrodilución en agar

tanto para las especies libres como complejadas.

AGRADECIMIENTOS

A la Secretaría de Ciencia y Tecnología de la UNCAus por

el apoyo brindado para la realización de este trabajo.

¡GRACIASPOR SU

ATENCIÓN!