cultivo de abscesos, secreciones de heridas
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CULTIVO DE ABCESOS Y SECRECIONES DE HERIDAS
I. MARCO TERICOLas bacterias infecciosas se reproducen rpidamente en el organismo y muchas excretan sustancias qumicas llamadas toxinas las cuales pueden daar los tejidos. Las infecciones de piel y tejidos blandos son, junto con las infecciones de las vas respiratorias, las infecciones ms frecuentes en clnica humana
Tipos: Agudas Crnicas
Microbiologa de las heridasEl tejido subcutneo expuesto es un excelente medio de cultivo para la colonizacin y proliferacin de los microorganismos, que dependen de las caractersticas de la lesin. Los microorganismos provienen del entorno ambiental, de la propia microbiotaflora de la piel y de la flora bacteriana comensal de mucosas.
Potencialmente patgenos: Estreptococos beta-hemolticos, Staphylococcus. aureus, Enterococcus spp., Bacillus anthracis, Pseudomonas aeruginosa y otros bacilos gramnegativos como las Enterobacteriaceae, tanto en las heridas agudas como en las crnicas.
Son factores predisponentes de la infeccin la edad, la diabetes, la inmunosupresin, la obesidad, la malnutricin y las alteraciones circulatorias.
INFECCIN DE
LA HERIDA QUIRRGICA
Infeccin que se produce en la herida de una incisin quirrgica
La infeccin posoperatoria de la herida quirrgica es la mayor causa de morbilidad infecciosa en el paciente quirrgico.
EpidemiologaConstituye la segunda causa de infeccin nosocomial y la desarrollan entre el 2-20% de los enfermos operados, segn el tipo de ciruga.Se ha demostrado que cuando el sitio operatorio se encuentra contaminado con ms de 105 microorganismos por gramo de tejido, el riesgo de infeccin de la herida quirrgica se incrementa significativamente y la cantidad de grmenes requeridos para producir infeccin es mucho menor cuando se encuentran materiales extraos presentes en el sitio operatorio.
En las heridas sucias infectadas es frecuente encontrar como colonizadores, microorganismos como la E. coli, Klebsiella, B. fragilis, Clostridium species y estreptococo anaerobio
En los abscesos e infecciones intrahospitalarias la microflora del sitio operatorio es diferente; son grmenes multirresistentes, como la Pseudomona sp, Enterobacter sp y el Enterococo.
Microorganismo
Nmero de aislados (%)
Ciruga limpia
Ciruga limpiacontaminada
Ciruga sucia
Enterobacterias
470 (32,5)
110
187
173
Staphylococcus aureus
240 (16,5)
140
51
49
Enterococcus spp. BGNa no fermentadores
212 (14,6)
63
70
79
197 (9,1)
44
54
99
Staphylococcus epidermidis
118 (8,1)
59
26
33
Anaerobios
69 (4,8)
9
39
21
Otros
59 (4,0)
12
36
11
Levaduras Otros CGPbCGP
49 (3,4)
13
16
20
42 (3,0)
17
22
3
Total
1456
467
501
488
Infecciones post-parto
Las infecciones que ocurren durante el puerperio son una causa relativamente frecuente de morbilidad, y raramente incluso de mortalidad.
Tcnica
Factores que predisponen a infecciones post partoy Obesidad. y Nivel econmico bajo. y Anemia. y Inmunosupresin. y Enfermedad crnica ( ejm diabetes mellitus). y Infeccin vaginal, especialmente vaginosis bacteriana.
ComplicacionesENDOMETRITISy Infeccion al utero y Causa mas frecuente de infeccion despues de una cesarea. y Estas infecciones usualmente se extienden bastante ms all de la delgada capa
endometrial limitando con el miometrio adyacente, los tejidos blandos fibroareolares que se ubican dentro del parametrio, e incluso algunas veces ms all, con formacin de absceso plvico. y Pacientes con mayor riesgo de infeccin: aquellas que sufren de desnutricion, obesas, trabajo de parto prolongado, fiebre intraparto, ciruga laboriosa.
INFECCION DE HERIDAy Es poco frecuente y Fiebre acompaada de dolor, sensibilidad, y eritema alrededor de la incisin se
observa ms frecuentemente al tercer o cuarto das despus del parto. y Se debe obtener el cultivo del sitio de incision, luego del cual se inicia con frecuencia el tratamiento antibitico de amplio espectro. y Absceso de la herida operatoria el drenaje del material purulento y el aseo con antispticos. y Fasctores que aumentan el riesgo: DM, malnutricion, duracion de cirugia, material de cirugia, obesidad, uso de corticoides, anemia
INCIDENCIA13,823 cesreas
Organismos comnmente asociados con infecciones plvicas
Staphylococcus Escherichia coli Streptococcus
Klebsiella Clostridium Proteus
Materiales:y
Hisopo de algodn o sinttico estril
y
Lmina porta objetos
Materiales:y
Tubo con tapa de rosca estril conteniendo medio de transporte Medios de cultivo: Caldo Thioglicolato (CTh)caldo de enriquecimiento ms utilizado en Microbiologa (Caseina, extractos de Levadura y Carne,Vitaminas, etc)
y
Materialesy
Agar Sangre (AS), Agar Mac Conkey (MC), Medio Hipertnico (MH) y Agar Sabouraud (SAB)
Agar Sangre
usada para ver la capacidad hemoltica de los microorganismos patgenos
Agar Mac ConkeyEste medio se utiliza para el aislamiento de bacilos Gram negativos de fcil desarrollo, aerobios y anaerobios facultativos. Permite diferenciar bacterias que utilizan o no, lactosa en muestras clnicas, de agua y alimentos. Los organismos no fermentadores de lactosa producen colonias incolorasMicroorganismos Escherichia coli Klebsiella pneumoniae Salmonella typhimurium Shigella flexneri Proteus mirabilis Enterococcus faecalis Colonias Rojas con halo turbio Rosadas mucosas Incoloras, transparentes Incoloras, transparentes Incoloras, transparentes Diminutas, incoloras, opacas
Medio Hipertnico
Es un medio de cultivo conteniendo 6,5% de cloruro de sodio. Se usa para identificar la tolerancia salina de las bacterias
Agar SabouraudMedio utilizado para el aislamiento, identificacin y conservacin de hongos patgenos y saprfitos. Tambin es til para el cultivo de levaduras.Microorganismos Saccharomyces cerevisiae Aspergillus niger Candida albicans ATCC 10231 Crecimiento Bueno Bueno Bueno
Obtencin de la muestra
y
La muestra fue tomada de una paciente mujer de 37 aos de edad la cual fue sometida a un parto por cesrea el 25 de octubre del presente ao, estuvo hospitalizada durante 5 das debido a la cesrea y por propias complicaciones producidas en el parto.
Obtencin de la muestraLa muestra de la herida que fue obtenida dos das despus de su ltimo da de hospitalizacin, todava presentaba los puntos realizados tras la operacin. y Se tuvo en cuenta adems, que la paciente no se encontraba en tratamiento con antibitico y que la nica recomendacin dada por su doctor para el tratamiento de la herida fue el de higiene diaria con agua y jabn.y
Obtencin de la muestraPara poder obtener una muestra de buena calidad se le pidi a la paciente que no realizara la limpieza de la herida 24 horas previas al examen realizado, para el cual se emple un hisopo de algodn esterilizado, el cual se humedeci con la secrecin y teniendo el cuidado necesario para no tocar superficie de piel evitando as la contaminacin con la microbiotaflora normal. y El hisopo con la muestra se coloc dentro del tubo con medio de transporte y se conserv a 5C durante 1 da.y
Coloracin Gramy
Con el hisopo se hizo un pequeo frotis en el portaobjetos, al cual luego se le aplic la tcnica de coloracin Gram
Siembray
Con el hisopo se hizo un pequeo frotis en un ngulo de cada medio de cultivo, y luego con el asa de siembra se distribuy la muestra por agotamiento. Luego se incubaron las placas a 37C por 48 horas.
Siembray
Al tubo con el medio de transporte se le aadi +/- 3 ml de caldo thioglicolato y tambin se incub a 37C.
oEn el medio de cultivo, las peptonas, aportan los nutrientes necesarios para el desarrollo bacteriano, la lactosa es el hidrato de carbono fermentable, y la mezcla de sales biliares y el cristal violeta son los agentes selectivos que inhiben el desarrollo de gran parte de la flora Gram positiva. o Por fermentacin de la lactosa, disminuye el pH alrededor de la colonia. Esto produce un viraje del color del indicador de pH (rojo neutro), la absorcin en las colonias, y la precipitacin de las sales biliares. Los microorganismos no fermentadores de lactosa producen colonias incoloras.
Indica: Fermenta Lactosa o no Resultado: Positivo Posibles bacterias: Escherichia coli Klebsiella
oSe trata de un medio altamente selectivo debido a su alta concentracin salina. oLos estafilococos coagulasa positiva hidrolizan el manitol acidificando el medio; las colonias aparecen rodeadas de una zona amarilla brillante. Los estafilococos coagulasa negativos, presentan colonias rodeadas de una zona roja o prpura. Las colonias sospechosas, se repicarn en un medio sin exceso de cloruro de sodio para efectuarles, posteriormente, la prueba de la coagulasa.
oEn el medio de cultivo, el extracto de carne y la pluripeptona, constituyen la fuente de carbono, nitrgeno, vitaminas y minerales, el manitol es el hidrato de carbono fermentable, el cloruro de sodio (que se encuentra en alta concentracin) es el agente selectivo que inhibe el desarrollo de la flora acompaante, y el rojo fenol es el indicador de pH. oLas bacterias que crecen en un medio con alta concentracin de sal y fermentan el manitol, producen cidos, con lo que se modifica el pH del medio y vira el indicador de pH del color rojo al amarillo. oLos estafilococos crecen en altas concentraciones de sal, y pueden o no fermentar el manitol.
Indica: Metaboliza manitol o no Desarrolla en medio salado o no Resultado: Positivo Posible bacteria: Staphylococcus aureus
oEs una combinacin de un Agar base (Agar nutritivo) con el agregado de 5 % de sangre ovina, tambin puede usarse sangre humana, para cultivos en una placa de Agar. o El Agar sangre aporta muchos factores de enriquecimiento. oSe usa tambin para ver la capacidad hemoltica de los microorganismos patgenos (que es un factor de virulencia). o Observando los halos hemolticos alrededor de las colonias se determina el tipo de hemlisis que posee: alfa: halos verdosos beta: halos incoloros gamma: inexistencia de halos
Indica: Capacidad hemoltica de microorganismos patgenos Resultado: Gamma hemolticos ( no hemolticos) Posibles bacterias: Streptococcus fecales
oMedio selectivo para el cultivo de hongos patgenos y no patgenos, en particular de levaduras y dermatofitos. oEl pH acido (5.6) del medio inhibe muchas especies de bacterias. oLa adicin de cloranfenicol hace el medio ms selectivo. o Diagnstico caractersticas tales como estructuras de esporas y la pigmentacin estn bien desarrollados en este medio.
40 g / L de dextrosa 10 g / L de peptona 20 g/L agar pH 5.6 pH 5,6
Indica: Presencia de hongos o no Resultado: Positivo Posibles bacterias: Candida albicans
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