células madre y regeneración de tejidos...estrategía para idenficar y purficar células madre...

Célulasmadreyregeneracióndetejidos

¿Quésonlascélulasmadre?

Potencialidad

•  Capacidaddedarorigenaotros1poscelulares

To1potentesPluripotentesMul1potentes

Cigoto:To1potente

BlastocistoMCI

Trofoblasto

Cavidad

Lascélulasdel“macizocelularinterno(MCI)”sonlasque

daránorigenalfeto

Célulasmadreembrionariaspluripotentes

Puedengenerartodoslostejidosdelorganismo

Célulasmadreadultas(célulascapacesderegeneraróreponeruntejido)

Mul1potentes

Puedendarorigenalascélulasdeunlinajecelular

Célulasmadreadultas

Dosconceptosimportantes

Nicho Célulasamplificadorastransitorias

Nicho

Una par1cular zona de tejido con unmicroambiente especializado en donde seintegran todas las señales que determinan siunacélulamadresedivide,damáscélulasdesímisma,daorigenaotracélulaconfuncionesmásespecializadasonosedivide.

Célulasamplificadorastransitorias

Célulasmadreembrionarias

Lascélulasmadreembrionariaspuedencul1varseindefinidamente

MCI

Trofoblasto

Cavidad

Condicionesadecuadas

¿Porquéesimportantepodermanipularcélulasmadreencul1vo?

•  Medicinaregenera1va

Célulasnerviosas(Parkinson,Alzheimer)Célulasmusculares(distrofiamuscular)

Célulaspancreá1cas(diabetes)Célulasinmunes(desórdenesinmunológicos)

• Testgené1cosdeembriones

Célulasforáneassonreconocidasporelsistemainmuneyrechazadas

Otrosmétodosparagenerarcélulasmadre

•  Transferencianuclear

Sesolucionaelproblemadelrechazo

•  Transferencianuclear

Clonación

Nature.1997Feb27;385(6619):810-3.ViableoffspringderivedfromfetalandadultmammaliancellsWilmutI1,SchniekeAE,McWhirJ,KindAJ,CampbellKH.

MuseonacionaldeEdimburgo,Escocia

Clonacióndeprimatesnohumanosportransferencianuclear

Cell,Feb.2018

ADN-Dime1lasa+InhibidorHistona

deace1lasa

Implicanciasé1cas

Losexperimentosdetransferencianuclearindicabanqueelcitoplasmadeloocito

favorecelade-diferenciación.Así,éstedebecontenerfactoresdereprogramacióndela

croma1na

OtrosmétodosparagenerarCM:

Célulasmadrepluripotentesinducidas(iPSC)

AlgunosavancesimportantesenelcampodelasIPSCdesdeeltrabajofundacionaldeYamanaka

ü  DispensabilidaddelfactorC-Myc(oncogénico)comouncomponenteesencialparala

reprogramaciónü  Otrosmétodosde“delivery”delosfactores:Adenovirus(noesintegra1vo),ARN

codificandolosfactores,losfactoresdirectamente(proteínas),“smallmolecules”queac1vanepigené1camenteelprogramadeexpresióngené1cadecélulaspluripotentes.

ü  SehalogradodiferenciarcélulasiPSChumanasadis1ntos1poscelulares,incluyendocélulasprovenientesdepacientesconpatologías.

Célulasmadredelapiel

PNAS,100,September30,2003

Folículopiloso

Iden1ficaciónylocalizacióndecélulasmadre

Bromodesoxiuridina:AnálogodeTimidina

JournalofInves/ga/veDermatology(2001)117,943–948

Tissue-specificpromoter

H2B-GFP H2B-GFP

Estrategíaparaiden1ficarypurficarcélulasmadredelapiel:marcarconGFP-histona2Baquellascélulasquesedividenesporádicamente

SinTc(odoxy)=expresióndeH2B-GFP

NatCellBiol.2011May;13(5):513–518.

PULSE:SINTcCHASE:CONTc

Célulasmadreadultasdelapiel

•  Puedencul1varseenellaboratorio•  Puedenpropagarseporlargo1empo•  Puedendiferenciarseencul1voygenerarepidermis

Terapiaenquemados

Muestradepielsanadelapersonaafectada

Cul1voyamplificacióndecélulasmadredela

piel

Diferenciaciónencul1vo

reimplante