b10 metodos pdf1

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© J. L. Sánchez Guillén

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I) Técnicas para el estudio fisicoquímico: sirven para conocer la

composición y relacionar esta composición con las estructuras

celulares. Estos métodos son:

a) Destilación

b) Filtración

c) Decantación

d) Centrifugación

e) Cromatografía

f) Electroforesis

II) Técnicas para el estudio morfológico de la célula. Nos permiten

conocer cómo es su forma, su tamaño y su estructura. Son,

fundamentalmente:

a) Microscopía óptica

b) Microscopía electrónica

1) Microscopio electrónico de Trasmisión (MET)

2) Microscopio electrónico de barrido (MEB)

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Destilación: Sirve para separar por evaporación y conden-

sación posterior, dos liquidos miscibles.

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Decantación: Sirve para separar, por ejemplo, mezclas de

líquidos no solubles de densidad diferente.

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FILTRACIÓN: Separa la fase líquida de la parte sólida.

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Homogeneizador

Se trata de un aparato que sirve

para triturar y disgregar el material

biológico, rompiendo las

membranas celulares para dejar

libres los orgánulos y el resto del

contenido celular para posteriores

tratamientos.

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Centrifugación: Los materiales biológicos sometidos a fuertes

aceleraciones se desplazan hacia el fondo de los recipientes que los

contienen con velocidades que dependen de su masa, de su forma y

volumen, y de la naturaleza del medio en el que se realice la

centrifugación.

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Cromatografía sobre papel

Cromatografía sobre papel

Cromatografía sobre papel

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Cromatografía de gases

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ELECTROFORESIS

En este método, la mezcla a separar se deposita en una cubeta sobre un

soporte de tipo poroso (acetato de celulosa o también gel de almidón). A

continuación se establece una diferencia de potencial entre los extremos del

soporte. Las sustancias que componen la mezcla se desplazarán en función

de su carga eléctrica.

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Cultivos in vitro:

Bacterias en cápsulas de Petri

Frascos para cultivos celulares

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17

El microscopio

electrónico,

desarrollado a

mediados del siglo

XX, permite más de

100 000 aumentos

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luz

c

objeto

b

imagen

o

interruptor

Cañón de electrones

c

objeto

b

imagen

o

Microscopio electrónico Microscopio óptico

Fundamento del microscopio óptico y del microscopio electrónico

c) condensador; b) objetivo; o) ocular.

electrones

visor

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Diferencias entre el microscopio óptico y del microscopio electrónico

Microscopio óptico Microscopio electrónico

Fuente de iluminación: La luz Fuente de iluminación: electrones

Se pueden ver seres vivos No se pueden ver los seres vivos

Poco aumento (X1000) Mucho aumento (X300 000)

Se observa la estructura Se observa la ultraestructura

Preparaciones sencillas Preparaciones complejas

Aparato relativamente barato Instrumento muy caro

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Unidades de medida en microscopía

1 micrometro*= 1 µm = 0,001 mm (milésima de milímetro)

1 nanometro = 1 nm = 0,000 001 mm (millonésima de milímetro)

1 amstrong = 1 Å = 0,1 nm (diez millonésima de milímetro)

* También se llama micra

Tamaños usuales en microscopía

átomo = 1 Å

virus = 25 nm a 300 nm

bacteria =1 µ

Célula = 10 µm a 100 µm

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