actividad citotÓxica in vitro de extractos metanÓlicos de plantas medicinales del sur del ecuador

C.B.C.M

Grupo de Genética Toxicológica - CBCM

C.B.C.Mwww.who.int/research/es/

C.B.C.M

• Se hace necesaria la búsqueda de nuevos compuestos quimioterápicos.

• Está bien establecido que las plantas son una fuente útil de componentes antitumorales relevantes (Journal of Ethnopharmacology 70 (2000) 143-149).

C.B.C.M

• Varios fármacos actualmente utilizados en quimioterapia fueron aislados de especies vegetales o son derivados de un prototipo natural.

– Alcaloides vinca.– Derivados de epipodofilotoxina.– Taxanos.– Derivados de camptotecina.

• 50% de los fármacos en ensayos clínicos para actividad anticancerígena fueron aislados de fuentes naturales o están relacionadas con ellas (Journal of Ethnopharmacology 99 (2005)21-30).

C.B.C.M

• Los modelos de screening de citotoxicidad proveen de importantes datos preliminares que ayudan a seleccionar los extractos vegetales con potenciales propiedades antineoplásicas (Journal of Ethnopharmacology 90 (2004) 33-38).

C.B.C.M

• General:

– Establecer que plantas de la flora del Sur del Ecuador con uso etnomédico pudieran tener principios activos con actividad anticancerosa.

• Específicos:

– Establecer que extractos tienen un efecto citotóxico importante en células de ovario de hámster chino (CHO K-1).

– Establecer que extractos son más efectivos en la inhibición del crecimiento en células de cáncer de pulmón (A-549), riñón (CAKI), seno (MCF) y astrocitoma cerebral (D-384).

– Determinar mediante MTS la DL50 de los extractos en células de cáncer de pulmón (A-549), riñón (CAKI), seno (MCF) y astrocitoma cerebral (D-384).

C.B.C.M

C.B.C.M

FAMILIANOMBRE

CIENTÍFICONOMBRE VULGAR

USO ETNOMÉDICO

Asteraceae Artemisia sodiroi AjenjoAntiinflamatorio, cólico estomacal

y hepático, fiebre, infección, riñones y tos.

Asteraceae Baccharis latifolia Chilca negraAntiinflamatorio, cólico estomacal y hepático, fracturas, gangrena y

reumatismo.

Commelinaceae Callisia repens CalchaFiebre, gangrena, gastritis,

hipertensión, infección, nervios y reumatismo.

Fabaceae Crotalaria sp. FenogrecoCáncer, cólico estomacal y

hepático.

Asteraceae Gynoxis verrucosa GuangaloAlergias, espanto, dermatitis y

nervios.

Onagraceae Ludwigia peruviana MejoranaCólico hepático, diurético y

riñones.

Piperaceae Piper barbatum CordoncilloCefalea, cólico estomacal, diabetes, diurético, gripe y

riñones.

Apocynaceae Prestonia mollisBejuco del

cáncerCáncer, desinfectante, cicatrizante

e infecciones.

Moraceae Siparuna eggersii Monte del osoContusiones, diabetes, fracturas,

reumatismo y riñones.

Asteraceae Tagetes filifolia Sacha anís Cólico menstrual.

C.B.C.M

RECOLECCIONRECOLECCION

ELABORACION DE EXTRACTOS METANOLICOSELABORACION DE EXTRACTOS METANOLICOS

P. CITOTOXICAS

EFICIENCIA EN PLACA (CHO)CURVA DE CRECIMIENTO CLONAL(CHO) MTS (CINCO LINEAS TUMORALES)

P. CITOTOXICAS

EFICIENCIA EN PLACA (CHO)CURVA DE CRECIMIENTO CLONAL(CHO) MTS (CINCO LINEAS TUMORALES)

SELECCION SELECCION

AISLAMIENTO DE MS

FRACCIONAMIENTOCOLUMNA CARACTERIZACIÓN QUIMICA

AISLAMIENTO DE MS

FRACCIONAMIENTOCOLUMNA CARACTERIZACIÓN QUIMICA

P. DE GENOTOXICIDAD DEL EXTRACTO

COMETA (HUMANOS)MICRONUCLEOS (HUMANOS Y LINEA TUMORAL

P. DE GENOTOXICIDAD DEL EXTRACTO

COMETA (HUMANOS)MICRONUCLEOS (HUMANOS Y LINEA TUMORAL

P. DE GENOTOXICIDAD DEL MS

COMETAMICRONUCLEOS

P. DE GENOTOXICIDAD DEL MS

COMETAMICRONUCLEOS

P. CITOTOXICAS

EFICIENCIA EN PLACAMTS

P. CITOTOXICAS

EFICIENCIA EN PLACAMTS

C.B.C.M

C.B.C.M

Toxicidad medida en Ensayos de Proliferación y Supervivencia Celular

FABACEAE

COMMELINACEAE

EXTRACTODOSIS

CITOTÓXICADOSIS

CITOSTÁTICA

Callisia repens < 1000 ug/ml NA

EXTRACTODOSIS

CITOTÓXICADOSIS

CITOSTÁTICA

Crotalaria sp. NA < 1000 ug/ml

NA: no hubo actividad

C.B.C.M

Toxicidad medida en Ensayos de Proliferación y Supervivencia Celular

MORACEAE

EXTRACTODOSIS

CITOTÓXICADOSIS

CITOSTÁTICA

Siparuna eggersii < 1000 ug/ml NA

PIPERACEAE

EXTRACTODOSIS

CITOTÓXICADOSIS

CITOSTÁTICA

Piper barbatum < 1000 ug/ml NA

NA: no hubo actividad

C.B.C.M

Toxicidad medida en Ensayos de Proliferación y Supervivencia Celular

APOCYNACEAE

EXTRACTODOSIS

CITOTÓXICADOSIS

CITOSTÁTICA

Prestonia mollis < 1000 ug/ml < 100 ug/ml

Curva de Crecimiento Clonal Prestonia mollis

0

10

20

30

40

50

60

70

0 20 40 60 80 100 120

Horas

cél/

clo

n

0 ug/ml

1 ug/ml

10 ug/ml

100 ug/ml

1000 ug/ml

Curva de supervivencia Prestonia mollis

0

20

40

60

80

100

120

0 1 10 100 1000

Dosis ug/ml

% S

up

erv

ive

nc

ia

C.B.C.M

Toxicidad medida en Ensayos de Proliferación y Supervivencia Celular

ONAGRACEAE

EXTRACTO DOSIS CITOTÓXICA DOSIS CITOSTÁTICA

Ludwigia peruviana < 1000 ug/ml < 100 ug/ml

Curva de crecimiento clonal Ludwigia peruviana

1

10

100

0 24 48 72 96 120

Horas

Cél/clo

n

0 ug/ml

1 ug/ml

10 ug/ml

100 ug/ml

1000 ug/ml

C.B.C.M

Toxicidad medida en Ensayos de Proliferación y Supervivencia Celular

ASTERACEAE

EXTRACTO DOSIS CITOTÓXICA DOSIS CITOSTÁTICA

Baccharis latifolia < 1000 ug/ml NA

Tagetes filifolia < 1000 ug/ml NA

Artemisia sodiroi < 1000 ug/ml NA

NA: no hubo actividad

Gynoxis verrucosa < 100 ug/ml < 10 ug/ml

C.B.C.M

Toxicidad medida en Ensayos de Proliferación y Supervivencia Celular

Curva de crecimiento clonal Gynoxis verrucosa

0

5

10

15

20

25

30

35

0 20 40 60 80 100 120

Horas

Cél/

clo

n

0 ug/ml

1 ug/ml

10 ug/ml

100 ug/ml

1000 ug/ml

C.B.C.M

Toxicidad medida en Ensayos de Proliferación y Supervivencia

Celular

C.B.C.M

Extracto D384 A549 MCF-7 CAKI

Artemisia sodirioi >50 >50 >50 >50

Baccharis latifolia >50 >50 >50 >50

Callisia repens >50 >50 >50 >50

Crotalaria sp. >50 >50 >50 >50

Gynoxys verrucosa 22,06±10,7 57,06±2,61 62,14±1,69 42,73±8,14

Ludwigia peruviana >50 >50 >50 >50

Piper barbatum >50 >50 >50 >50

Prestonia mollis >50 >50 >50 >50

Siparuna eggersii >50 >50 >50 >50

Tagetes filifolia >50 >50 >50 >50

LÍNEA CELULAR TUMORAL HUMANA

DL50 (ug/ml) ENSAYO MTS

C.B.C.M

C.B.C.M

C.B.C.M

CHO

A-549CAKID-384MCF

CHO

1, 10, 100 y 1000 ug/ml50 ug/ml