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Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Actividad anti-VIH-1 de factores
solubles su papel protector en esta
infeccioacuten
Maria Teresa Rugeles
Grupo Inmunovirologiacutea
Universidad de Antioquia
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Infeccioacuten No infeccioacuten
Progresor
tiacutepico
Progresor
raacutepido
Expuestos
seronegativos
Mecanismos de
resistencia
Geneacuteticos Inmunoloacutegicos
Progresor
lento
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Inmunidad Celular y Humoral
Factores solubles
Interferones Citoquinas Th1 quimoquinas SLPI Defensinas RNasas entre otros
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Factores solubles anti-VIH
RANTES MIP-
1α MIP-1 y
SDF-1
HAD y HBD
HBD SLPI
RNasas
α-defensinas
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Defensinas
Peacuteptidos de 30-48 aminoaacutecidos catioacutenicos
y microbicidas que se producen de forma
constitutiva yo en respuesta a productos
microbianos o citocinas proinflamatorias
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Defensinas
Alfa seis en humanos
Beta seis en humanos
Teta una en primates
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Evidencia antiviral in vitro de
HAD
Chang TL et al J Clin Invest 2005 Mar 115(3)765-73
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Quintildeones et al AIDS 2003 Sun et al Journal of virology 2005
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Klotman et al Nat Rev Immunol 2006
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Enzimas reguladoras que participan en varios procesos fisioloacutegicos que van
desde el procesamiento alternativo del RNA hasta la muerte celular
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Superfamilia A 13 RNasas humanas
Familia T1
Familia T2
Defensa contra distintos patoacutegenos
Actividad antitumoral
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Bedoya et al AIDS Research and Human Retroviruses 22(9) 2006 pp 897ndash907
Evidencia antiviral in vitro de
RNasas
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
EMBARAZO
EDN SDF-1 LIF y hCG
Aumenta el desarrollo fetal yo proteje contra la transmisioacuten vertical de
patoacutegenos
Alo-reconocimiento materno-
fetal
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Determinar la participacioacuten en la resistencia natural
a la infeccioacuten por el VIH-1 de los siguientes factores solubles
Defensinas HAD y HBD-2 y 3 RNasas EDN RNasa 1 y angiogenina
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
ESN 60 CS 60 SP 60
Citometriacutea LT-CD4
Plasma
Carga viral SP
Mucosas Oral vaginal y endocervical
Extraccioacuten de RNA
(TRIZOL)
PCR en tiempo real CK19 HAD-1 HBD-2 y 3 y
RNasas
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Characteristics HC (n=60) HESN (n=61) SP (n=60)
Age
Median (Range) 28 (19-54) 34 (17-61) 34 (17-51)
Gender n ()
Male
Female
33 (55)
27 (45)
35 (57)
26 (43)
27 (46)
33 (54)
Viral Load
Median (Range) ND ND
2569 copiesmL
(50-493000)
T CD4+Lymphocytes
Median (Range) ND ND
361 cellsmL
(17-909)
Table 1
Demographic profile
No data
Poblacioacuten de Estudio
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Produccioacuten aumentada de defensinas
en mucosa oral de HESN
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Produccioacuten similar de RNasas
en mucosa oral Oral mucosa
HC
HESN S
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ED
N m
RN
A
Angiogenina se detectoacute en 5
HC 1 HESN y 3 SP
RNase 1 se detectoacute en 6 HC
7 HESN y 5 SP
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Produccioacuten aumentada de RNasas en
mucosa genital de HESN
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Produccioacuten similar de defensinas en
mucosa genital
Vaginal mucosa
HC
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Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
HAD en mucosa genital
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NA
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Anaacutelisis de mecanismos de accioacuten anti-VIH-1 con proteiacutenas recombinantes
Inhibicioacuten de la replicacioacuten viral
Infeccioacuten con HIV-GFP Cuantificacioacuten de GFP y p24
(48h PI)
Inhibicioacuten de la Transcripcioacuten reversa
PCR en tiempo real para productos
tempranos tardiacuteos y ciacuterculos de 2-LTR
Inhibicioacuten de la entrada del virus HIV-GFP (R5-X4)
Infeccioacuten con HIV-GFP Cuantificacioacuten de GFP y p24
(48h PI)
Tamizaje de concentracioacuten viral
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
ceacutelulas 293T Transfeccioacuten
Genes de VIH-1 sin env
HIV-GFP
Env R5 (HxB2)
Env X4 (YU2)
Env VSV-G
HIV-1 YU2
HIV-1 HxB2
HIV-1 no Env Neg control
HIV-1 VSV-G Pos control
Produccioacuten de virus
recombinantes
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Clones de VIH
Ceacutelulas 293T
2 diacuteas
Colectar y filtrar el sobrenadante
ELISA de p24 Precipitacioacuten con PEG concentracioacuten del virus
PEG + VIH 3 diacuteas
Transfeccioacuten
Calcio fosfatos
p24 100-400 pgml
+
+
+
Produccioacuten de virus infecciosos a partir de
clones moleculares
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Liacuteneas celulares
Infeccioacuten 100 pgml p24 polybrene 8ugml 96 pozos2h Incubacioacuten por 3 diacuteas
Infeccioacuten de liacuteneas celulares con virus de una sola ronda de replicacioacuten
HIV-1-GFP+YU2
HIV-1-GFP+HxB2
HIV-1-GFP no Env Neg control
HIV-1-GFP+VSV-G Pos control
U373-MAGI
U3T3-CD4-CCR5-MAGI
CD4
CCR5
U3T3-CD4-CXCR4-MAGI
CXCR4 CD4
HB
D y
RN
asas
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Actividad antiviral de defensinas
recombinantes
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Actividad antiviral de RNasas
recombinantes
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Modelo de expresioacuten de factores solubles en mucosa genital
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Modelo de inhibicioacuten de la replicacioacuten del VIH-1 por hBDs y RNasas
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Ventajas para el desarrollo de agentes toacutepicos
Amplio espectro antirretroviral contra
cepas X4 y R5
Mayor biodisponibilidad al no ser
susceptible a peptidasas hepaacuteticas y
renales
Bajos costos de produccioacuten
Capacidad antibacteriana
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Pacientes Individuos HESN
AGRADECIMIENTOS
Wildeman Zapata Wbeimar Aguilar
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Infeccioacuten No infeccioacuten
Progresor
tiacutepico
Progresor
raacutepido
Expuestos
seronegativos
Mecanismos de
resistencia
Geneacuteticos Inmunoloacutegicos
Progresor
lento
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Inmunidad Celular y Humoral
Factores solubles
Interferones Citoquinas Th1 quimoquinas SLPI Defensinas RNasas entre otros
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Factores solubles anti-VIH
RANTES MIP-
1α MIP-1 y
SDF-1
HAD y HBD
HBD SLPI
RNasas
α-defensinas
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Defensinas
Peacuteptidos de 30-48 aminoaacutecidos catioacutenicos
y microbicidas que se producen de forma
constitutiva yo en respuesta a productos
microbianos o citocinas proinflamatorias
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Defensinas
Alfa seis en humanos
Beta seis en humanos
Teta una en primates
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Evidencia antiviral in vitro de
HAD
Chang TL et al J Clin Invest 2005 Mar 115(3)765-73
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Quintildeones et al AIDS 2003 Sun et al Journal of virology 2005
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Klotman et al Nat Rev Immunol 2006
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Enzimas reguladoras que participan en varios procesos fisioloacutegicos que van
desde el procesamiento alternativo del RNA hasta la muerte celular
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Superfamilia A 13 RNasas humanas
Familia T1
Familia T2
Defensa contra distintos patoacutegenos
Actividad antitumoral
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Bedoya et al AIDS Research and Human Retroviruses 22(9) 2006 pp 897ndash907
Evidencia antiviral in vitro de
RNasas
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
EMBARAZO
EDN SDF-1 LIF y hCG
Aumenta el desarrollo fetal yo proteje contra la transmisioacuten vertical de
patoacutegenos
Alo-reconocimiento materno-
fetal
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Determinar la participacioacuten en la resistencia natural
a la infeccioacuten por el VIH-1 de los siguientes factores solubles
Defensinas HAD y HBD-2 y 3 RNasas EDN RNasa 1 y angiogenina
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
ESN 60 CS 60 SP 60
Citometriacutea LT-CD4
Plasma
Carga viral SP
Mucosas Oral vaginal y endocervical
Extraccioacuten de RNA
(TRIZOL)
PCR en tiempo real CK19 HAD-1 HBD-2 y 3 y
RNasas
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Characteristics HC (n=60) HESN (n=61) SP (n=60)
Age
Median (Range) 28 (19-54) 34 (17-61) 34 (17-51)
Gender n ()
Male
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33 (55)
27 (45)
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26 (43)
27 (46)
33 (54)
Viral Load
Median (Range) ND ND
2569 copiesmL
(50-493000)
T CD4+Lymphocytes
Median (Range) ND ND
361 cellsmL
(17-909)
Table 1
Demographic profile
No data
Poblacioacuten de Estudio
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Produccioacuten aumentada de defensinas
en mucosa oral de HESN
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Produccioacuten similar de RNasas
en mucosa oral Oral mucosa
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Angiogenina se detectoacute en 5
HC 1 HESN y 3 SP
RNase 1 se detectoacute en 6 HC
7 HESN y 5 SP
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Produccioacuten aumentada de RNasas en
mucosa genital de HESN
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Produccioacuten similar de defensinas en
mucosa genital
Vaginal mucosa
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Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Anaacutelisis de mecanismos de accioacuten anti-VIH-1 con proteiacutenas recombinantes
Inhibicioacuten de la replicacioacuten viral
Infeccioacuten con HIV-GFP Cuantificacioacuten de GFP y p24
(48h PI)
Inhibicioacuten de la Transcripcioacuten reversa
PCR en tiempo real para productos
tempranos tardiacuteos y ciacuterculos de 2-LTR
Inhibicioacuten de la entrada del virus HIV-GFP (R5-X4)
Infeccioacuten con HIV-GFP Cuantificacioacuten de GFP y p24
(48h PI)
Tamizaje de concentracioacuten viral
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
ceacutelulas 293T Transfeccioacuten
Genes de VIH-1 sin env
HIV-GFP
Env R5 (HxB2)
Env X4 (YU2)
Env VSV-G
HIV-1 YU2
HIV-1 HxB2
HIV-1 no Env Neg control
HIV-1 VSV-G Pos control
Produccioacuten de virus
recombinantes
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Clones de VIH
Ceacutelulas 293T
2 diacuteas
Colectar y filtrar el sobrenadante
ELISA de p24 Precipitacioacuten con PEG concentracioacuten del virus
PEG + VIH 3 diacuteas
Transfeccioacuten
Calcio fosfatos
p24 100-400 pgml
+
+
+
Produccioacuten de virus infecciosos a partir de
clones moleculares
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Liacuteneas celulares
Infeccioacuten 100 pgml p24 polybrene 8ugml 96 pozos2h Incubacioacuten por 3 diacuteas
Infeccioacuten de liacuteneas celulares con virus de una sola ronda de replicacioacuten
HIV-1-GFP+YU2
HIV-1-GFP+HxB2
HIV-1-GFP no Env Neg control
HIV-1-GFP+VSV-G Pos control
U373-MAGI
U3T3-CD4-CCR5-MAGI
CD4
CCR5
U3T3-CD4-CXCR4-MAGI
CXCR4 CD4
HB
D y
RN
asas
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Actividad antiviral de defensinas
recombinantes
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Actividad antiviral de RNasas
recombinantes
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Modelo de expresioacuten de factores solubles en mucosa genital
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Modelo de inhibicioacuten de la replicacioacuten del VIH-1 por hBDs y RNasas
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Ventajas para el desarrollo de agentes toacutepicos
Amplio espectro antirretroviral contra
cepas X4 y R5
Mayor biodisponibilidad al no ser
susceptible a peptidasas hepaacuteticas y
renales
Bajos costos de produccioacuten
Capacidad antibacteriana
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Pacientes Individuos HESN
AGRADECIMIENTOS
Wildeman Zapata Wbeimar Aguilar
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Inmunidad Celular y Humoral
Factores solubles
Interferones Citoquinas Th1 quimoquinas SLPI Defensinas RNasas entre otros
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Factores solubles anti-VIH
RANTES MIP-
1α MIP-1 y
SDF-1
HAD y HBD
HBD SLPI
RNasas
α-defensinas
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Defensinas
Peacuteptidos de 30-48 aminoaacutecidos catioacutenicos
y microbicidas que se producen de forma
constitutiva yo en respuesta a productos
microbianos o citocinas proinflamatorias
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Defensinas
Alfa seis en humanos
Beta seis en humanos
Teta una en primates
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Evidencia antiviral in vitro de
HAD
Chang TL et al J Clin Invest 2005 Mar 115(3)765-73
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Quintildeones et al AIDS 2003 Sun et al Journal of virology 2005
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Klotman et al Nat Rev Immunol 2006
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Enzimas reguladoras que participan en varios procesos fisioloacutegicos que van
desde el procesamiento alternativo del RNA hasta la muerte celular
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Superfamilia A 13 RNasas humanas
Familia T1
Familia T2
Defensa contra distintos patoacutegenos
Actividad antitumoral
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Bedoya et al AIDS Research and Human Retroviruses 22(9) 2006 pp 897ndash907
Evidencia antiviral in vitro de
RNasas
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
EMBARAZO
EDN SDF-1 LIF y hCG
Aumenta el desarrollo fetal yo proteje contra la transmisioacuten vertical de
patoacutegenos
Alo-reconocimiento materno-
fetal
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Determinar la participacioacuten en la resistencia natural
a la infeccioacuten por el VIH-1 de los siguientes factores solubles
Defensinas HAD y HBD-2 y 3 RNasas EDN RNasa 1 y angiogenina
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
ESN 60 CS 60 SP 60
Citometriacutea LT-CD4
Plasma
Carga viral SP
Mucosas Oral vaginal y endocervical
Extraccioacuten de RNA
(TRIZOL)
PCR en tiempo real CK19 HAD-1 HBD-2 y 3 y
RNasas
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Characteristics HC (n=60) HESN (n=61) SP (n=60)
Age
Median (Range) 28 (19-54) 34 (17-61) 34 (17-51)
Gender n ()
Male
Female
33 (55)
27 (45)
35 (57)
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27 (46)
33 (54)
Viral Load
Median (Range) ND ND
2569 copiesmL
(50-493000)
T CD4+Lymphocytes
Median (Range) ND ND
361 cellsmL
(17-909)
Table 1
Demographic profile
No data
Poblacioacuten de Estudio
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Produccioacuten aumentada de defensinas
en mucosa oral de HESN
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Produccioacuten similar de RNasas
en mucosa oral Oral mucosa
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Angiogenina se detectoacute en 5
HC 1 HESN y 3 SP
RNase 1 se detectoacute en 6 HC
7 HESN y 5 SP
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Produccioacuten aumentada de RNasas en
mucosa genital de HESN
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Produccioacuten similar de defensinas en
mucosa genital
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HAD en mucosa genital
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Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Anaacutelisis de mecanismos de accioacuten anti-VIH-1 con proteiacutenas recombinantes
Inhibicioacuten de la replicacioacuten viral
Infeccioacuten con HIV-GFP Cuantificacioacuten de GFP y p24
(48h PI)
Inhibicioacuten de la Transcripcioacuten reversa
PCR en tiempo real para productos
tempranos tardiacuteos y ciacuterculos de 2-LTR
Inhibicioacuten de la entrada del virus HIV-GFP (R5-X4)
Infeccioacuten con HIV-GFP Cuantificacioacuten de GFP y p24
(48h PI)
Tamizaje de concentracioacuten viral
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
ceacutelulas 293T Transfeccioacuten
Genes de VIH-1 sin env
HIV-GFP
Env R5 (HxB2)
Env X4 (YU2)
Env VSV-G
HIV-1 YU2
HIV-1 HxB2
HIV-1 no Env Neg control
HIV-1 VSV-G Pos control
Produccioacuten de virus
recombinantes
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Clones de VIH
Ceacutelulas 293T
2 diacuteas
Colectar y filtrar el sobrenadante
ELISA de p24 Precipitacioacuten con PEG concentracioacuten del virus
PEG + VIH 3 diacuteas
Transfeccioacuten
Calcio fosfatos
p24 100-400 pgml
+
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+
Produccioacuten de virus infecciosos a partir de
clones moleculares
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Liacuteneas celulares
Infeccioacuten 100 pgml p24 polybrene 8ugml 96 pozos2h Incubacioacuten por 3 diacuteas
Infeccioacuten de liacuteneas celulares con virus de una sola ronda de replicacioacuten
HIV-1-GFP+YU2
HIV-1-GFP+HxB2
HIV-1-GFP no Env Neg control
HIV-1-GFP+VSV-G Pos control
U373-MAGI
U3T3-CD4-CCR5-MAGI
CD4
CCR5
U3T3-CD4-CXCR4-MAGI
CXCR4 CD4
HB
D y
RN
asas
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Actividad antiviral de defensinas
recombinantes
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Actividad antiviral de RNasas
recombinantes
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Modelo de expresioacuten de factores solubles en mucosa genital
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Modelo de inhibicioacuten de la replicacioacuten del VIH-1 por hBDs y RNasas
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Ventajas para el desarrollo de agentes toacutepicos
Amplio espectro antirretroviral contra
cepas X4 y R5
Mayor biodisponibilidad al no ser
susceptible a peptidasas hepaacuteticas y
renales
Bajos costos de produccioacuten
Capacidad antibacteriana
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Pacientes Individuos HESN
AGRADECIMIENTOS
Wildeman Zapata Wbeimar Aguilar
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Factores solubles anti-VIH
RANTES MIP-
1α MIP-1 y
SDF-1
HAD y HBD
HBD SLPI
RNasas
α-defensinas
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Defensinas
Peacuteptidos de 30-48 aminoaacutecidos catioacutenicos
y microbicidas que se producen de forma
constitutiva yo en respuesta a productos
microbianos o citocinas proinflamatorias
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Defensinas
Alfa seis en humanos
Beta seis en humanos
Teta una en primates
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Evidencia antiviral in vitro de
HAD
Chang TL et al J Clin Invest 2005 Mar 115(3)765-73
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Quintildeones et al AIDS 2003 Sun et al Journal of virology 2005
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Klotman et al Nat Rev Immunol 2006
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Enzimas reguladoras que participan en varios procesos fisioloacutegicos que van
desde el procesamiento alternativo del RNA hasta la muerte celular
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Superfamilia A 13 RNasas humanas
Familia T1
Familia T2
Defensa contra distintos patoacutegenos
Actividad antitumoral
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Bedoya et al AIDS Research and Human Retroviruses 22(9) 2006 pp 897ndash907
Evidencia antiviral in vitro de
RNasas
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
EMBARAZO
EDN SDF-1 LIF y hCG
Aumenta el desarrollo fetal yo proteje contra la transmisioacuten vertical de
patoacutegenos
Alo-reconocimiento materno-
fetal
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Determinar la participacioacuten en la resistencia natural
a la infeccioacuten por el VIH-1 de los siguientes factores solubles
Defensinas HAD y HBD-2 y 3 RNasas EDN RNasa 1 y angiogenina
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
ESN 60 CS 60 SP 60
Citometriacutea LT-CD4
Plasma
Carga viral SP
Mucosas Oral vaginal y endocervical
Extraccioacuten de RNA
(TRIZOL)
PCR en tiempo real CK19 HAD-1 HBD-2 y 3 y
RNasas
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Characteristics HC (n=60) HESN (n=61) SP (n=60)
Age
Median (Range) 28 (19-54) 34 (17-61) 34 (17-51)
Gender n ()
Male
Female
33 (55)
27 (45)
35 (57)
26 (43)
27 (46)
33 (54)
Viral Load
Median (Range) ND ND
2569 copiesmL
(50-493000)
T CD4+Lymphocytes
Median (Range) ND ND
361 cellsmL
(17-909)
Table 1
Demographic profile
No data
Poblacioacuten de Estudio
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Produccioacuten aumentada de defensinas
en mucosa oral de HESN
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Produccioacuten similar de RNasas
en mucosa oral Oral mucosa
HC
HESN S
P
0
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Re
lati
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of
ED
N m
RN
A
Angiogenina se detectoacute en 5
HC 1 HESN y 3 SP
RNase 1 se detectoacute en 6 HC
7 HESN y 5 SP
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Produccioacuten aumentada de RNasas en
mucosa genital de HESN
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Produccioacuten similar de defensinas en
mucosa genital
Vaginal mucosa
HC
ESN S
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Endocervical mucosa
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Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
HAD en mucosa genital
Vaginal mucosa
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of
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Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Anaacutelisis de mecanismos de accioacuten anti-VIH-1 con proteiacutenas recombinantes
Inhibicioacuten de la replicacioacuten viral
Infeccioacuten con HIV-GFP Cuantificacioacuten de GFP y p24
(48h PI)
Inhibicioacuten de la Transcripcioacuten reversa
PCR en tiempo real para productos
tempranos tardiacuteos y ciacuterculos de 2-LTR
Inhibicioacuten de la entrada del virus HIV-GFP (R5-X4)
Infeccioacuten con HIV-GFP Cuantificacioacuten de GFP y p24
(48h PI)
Tamizaje de concentracioacuten viral
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
ceacutelulas 293T Transfeccioacuten
Genes de VIH-1 sin env
HIV-GFP
Env R5 (HxB2)
Env X4 (YU2)
Env VSV-G
HIV-1 YU2
HIV-1 HxB2
HIV-1 no Env Neg control
HIV-1 VSV-G Pos control
Produccioacuten de virus
recombinantes
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Clones de VIH
Ceacutelulas 293T
2 diacuteas
Colectar y filtrar el sobrenadante
ELISA de p24 Precipitacioacuten con PEG concentracioacuten del virus
PEG + VIH 3 diacuteas
Transfeccioacuten
Calcio fosfatos
p24 100-400 pgml
+
+
+
Produccioacuten de virus infecciosos a partir de
clones moleculares
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Liacuteneas celulares
Infeccioacuten 100 pgml p24 polybrene 8ugml 96 pozos2h Incubacioacuten por 3 diacuteas
Infeccioacuten de liacuteneas celulares con virus de una sola ronda de replicacioacuten
HIV-1-GFP+YU2
HIV-1-GFP+HxB2
HIV-1-GFP no Env Neg control
HIV-1-GFP+VSV-G Pos control
U373-MAGI
U3T3-CD4-CCR5-MAGI
CD4
CCR5
U3T3-CD4-CXCR4-MAGI
CXCR4 CD4
HB
D y
RN
asas
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Actividad antiviral de defensinas
recombinantes
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Actividad antiviral de RNasas
recombinantes
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Modelo de expresioacuten de factores solubles en mucosa genital
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Modelo de inhibicioacuten de la replicacioacuten del VIH-1 por hBDs y RNasas
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Ventajas para el desarrollo de agentes toacutepicos
Amplio espectro antirretroviral contra
cepas X4 y R5
Mayor biodisponibilidad al no ser
susceptible a peptidasas hepaacuteticas y
renales
Bajos costos de produccioacuten
Capacidad antibacteriana
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Pacientes Individuos HESN
AGRADECIMIENTOS
Wildeman Zapata Wbeimar Aguilar
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Defensinas
Peacuteptidos de 30-48 aminoaacutecidos catioacutenicos
y microbicidas que se producen de forma
constitutiva yo en respuesta a productos
microbianos o citocinas proinflamatorias
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Defensinas
Alfa seis en humanos
Beta seis en humanos
Teta una en primates
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Evidencia antiviral in vitro de
HAD
Chang TL et al J Clin Invest 2005 Mar 115(3)765-73
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Quintildeones et al AIDS 2003 Sun et al Journal of virology 2005
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Klotman et al Nat Rev Immunol 2006
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Enzimas reguladoras que participan en varios procesos fisioloacutegicos que van
desde el procesamiento alternativo del RNA hasta la muerte celular
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Superfamilia A 13 RNasas humanas
Familia T1
Familia T2
Defensa contra distintos patoacutegenos
Actividad antitumoral
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Bedoya et al AIDS Research and Human Retroviruses 22(9) 2006 pp 897ndash907
Evidencia antiviral in vitro de
RNasas
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
EMBARAZO
EDN SDF-1 LIF y hCG
Aumenta el desarrollo fetal yo proteje contra la transmisioacuten vertical de
patoacutegenos
Alo-reconocimiento materno-
fetal
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Determinar la participacioacuten en la resistencia natural
a la infeccioacuten por el VIH-1 de los siguientes factores solubles
Defensinas HAD y HBD-2 y 3 RNasas EDN RNasa 1 y angiogenina
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
ESN 60 CS 60 SP 60
Citometriacutea LT-CD4
Plasma
Carga viral SP
Mucosas Oral vaginal y endocervical
Extraccioacuten de RNA
(TRIZOL)
PCR en tiempo real CK19 HAD-1 HBD-2 y 3 y
RNasas
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Characteristics HC (n=60) HESN (n=61) SP (n=60)
Age
Median (Range) 28 (19-54) 34 (17-61) 34 (17-51)
Gender n ()
Male
Female
33 (55)
27 (45)
35 (57)
26 (43)
27 (46)
33 (54)
Viral Load
Median (Range) ND ND
2569 copiesmL
(50-493000)
T CD4+Lymphocytes
Median (Range) ND ND
361 cellsmL
(17-909)
Table 1
Demographic profile
No data
Poblacioacuten de Estudio
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Produccioacuten aumentada de defensinas
en mucosa oral de HESN
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Produccioacuten similar de RNasas
en mucosa oral Oral mucosa
HC
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ED
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Angiogenina se detectoacute en 5
HC 1 HESN y 3 SP
RNase 1 se detectoacute en 6 HC
7 HESN y 5 SP
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Produccioacuten aumentada de RNasas en
mucosa genital de HESN
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Produccioacuten similar de defensinas en
mucosa genital
Vaginal mucosa
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HAD en mucosa genital
Vaginal mucosa
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Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Anaacutelisis de mecanismos de accioacuten anti-VIH-1 con proteiacutenas recombinantes
Inhibicioacuten de la replicacioacuten viral
Infeccioacuten con HIV-GFP Cuantificacioacuten de GFP y p24
(48h PI)
Inhibicioacuten de la Transcripcioacuten reversa
PCR en tiempo real para productos
tempranos tardiacuteos y ciacuterculos de 2-LTR
Inhibicioacuten de la entrada del virus HIV-GFP (R5-X4)
Infeccioacuten con HIV-GFP Cuantificacioacuten de GFP y p24
(48h PI)
Tamizaje de concentracioacuten viral
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
ceacutelulas 293T Transfeccioacuten
Genes de VIH-1 sin env
HIV-GFP
Env R5 (HxB2)
Env X4 (YU2)
Env VSV-G
HIV-1 YU2
HIV-1 HxB2
HIV-1 no Env Neg control
HIV-1 VSV-G Pos control
Produccioacuten de virus
recombinantes
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Clones de VIH
Ceacutelulas 293T
2 diacuteas
Colectar y filtrar el sobrenadante
ELISA de p24 Precipitacioacuten con PEG concentracioacuten del virus
PEG + VIH 3 diacuteas
Transfeccioacuten
Calcio fosfatos
p24 100-400 pgml
+
+
+
Produccioacuten de virus infecciosos a partir de
clones moleculares
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Liacuteneas celulares
Infeccioacuten 100 pgml p24 polybrene 8ugml 96 pozos2h Incubacioacuten por 3 diacuteas
Infeccioacuten de liacuteneas celulares con virus de una sola ronda de replicacioacuten
HIV-1-GFP+YU2
HIV-1-GFP+HxB2
HIV-1-GFP no Env Neg control
HIV-1-GFP+VSV-G Pos control
U373-MAGI
U3T3-CD4-CCR5-MAGI
CD4
CCR5
U3T3-CD4-CXCR4-MAGI
CXCR4 CD4
HB
D y
RN
asas
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Actividad antiviral de defensinas
recombinantes
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Actividad antiviral de RNasas
recombinantes
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Modelo de expresioacuten de factores solubles en mucosa genital
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Modelo de inhibicioacuten de la replicacioacuten del VIH-1 por hBDs y RNasas
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Ventajas para el desarrollo de agentes toacutepicos
Amplio espectro antirretroviral contra
cepas X4 y R5
Mayor biodisponibilidad al no ser
susceptible a peptidasas hepaacuteticas y
renales
Bajos costos de produccioacuten
Capacidad antibacteriana
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Pacientes Individuos HESN
AGRADECIMIENTOS
Wildeman Zapata Wbeimar Aguilar
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Defensinas
Alfa seis en humanos
Beta seis en humanos
Teta una en primates
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Evidencia antiviral in vitro de
HAD
Chang TL et al J Clin Invest 2005 Mar 115(3)765-73
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Quintildeones et al AIDS 2003 Sun et al Journal of virology 2005
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Klotman et al Nat Rev Immunol 2006
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Enzimas reguladoras que participan en varios procesos fisioloacutegicos que van
desde el procesamiento alternativo del RNA hasta la muerte celular
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Superfamilia A 13 RNasas humanas
Familia T1
Familia T2
Defensa contra distintos patoacutegenos
Actividad antitumoral
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Bedoya et al AIDS Research and Human Retroviruses 22(9) 2006 pp 897ndash907
Evidencia antiviral in vitro de
RNasas
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
EMBARAZO
EDN SDF-1 LIF y hCG
Aumenta el desarrollo fetal yo proteje contra la transmisioacuten vertical de
patoacutegenos
Alo-reconocimiento materno-
fetal
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Determinar la participacioacuten en la resistencia natural
a la infeccioacuten por el VIH-1 de los siguientes factores solubles
Defensinas HAD y HBD-2 y 3 RNasas EDN RNasa 1 y angiogenina
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
ESN 60 CS 60 SP 60
Citometriacutea LT-CD4
Plasma
Carga viral SP
Mucosas Oral vaginal y endocervical
Extraccioacuten de RNA
(TRIZOL)
PCR en tiempo real CK19 HAD-1 HBD-2 y 3 y
RNasas
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Characteristics HC (n=60) HESN (n=61) SP (n=60)
Age
Median (Range) 28 (19-54) 34 (17-61) 34 (17-51)
Gender n ()
Male
Female
33 (55)
27 (45)
35 (57)
26 (43)
27 (46)
33 (54)
Viral Load
Median (Range) ND ND
2569 copiesmL
(50-493000)
T CD4+Lymphocytes
Median (Range) ND ND
361 cellsmL
(17-909)
Table 1
Demographic profile
No data
Poblacioacuten de Estudio
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Produccioacuten aumentada de defensinas
en mucosa oral de HESN
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Produccioacuten similar de RNasas
en mucosa oral Oral mucosa
HC
HESN S
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Re
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ED
N m
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Angiogenina se detectoacute en 5
HC 1 HESN y 3 SP
RNase 1 se detectoacute en 6 HC
7 HESN y 5 SP
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Produccioacuten aumentada de RNasas en
mucosa genital de HESN
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Produccioacuten similar de defensinas en
mucosa genital
Vaginal mucosa
HC
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Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
HAD en mucosa genital
Vaginal mucosa
HC
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Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Anaacutelisis de mecanismos de accioacuten anti-VIH-1 con proteiacutenas recombinantes
Inhibicioacuten de la replicacioacuten viral
Infeccioacuten con HIV-GFP Cuantificacioacuten de GFP y p24
(48h PI)
Inhibicioacuten de la Transcripcioacuten reversa
PCR en tiempo real para productos
tempranos tardiacuteos y ciacuterculos de 2-LTR
Inhibicioacuten de la entrada del virus HIV-GFP (R5-X4)
Infeccioacuten con HIV-GFP Cuantificacioacuten de GFP y p24
(48h PI)
Tamizaje de concentracioacuten viral
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
ceacutelulas 293T Transfeccioacuten
Genes de VIH-1 sin env
HIV-GFP
Env R5 (HxB2)
Env X4 (YU2)
Env VSV-G
HIV-1 YU2
HIV-1 HxB2
HIV-1 no Env Neg control
HIV-1 VSV-G Pos control
Produccioacuten de virus
recombinantes
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Clones de VIH
Ceacutelulas 293T
2 diacuteas
Colectar y filtrar el sobrenadante
ELISA de p24 Precipitacioacuten con PEG concentracioacuten del virus
PEG + VIH 3 diacuteas
Transfeccioacuten
Calcio fosfatos
p24 100-400 pgml
+
+
+
Produccioacuten de virus infecciosos a partir de
clones moleculares
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Liacuteneas celulares
Infeccioacuten 100 pgml p24 polybrene 8ugml 96 pozos2h Incubacioacuten por 3 diacuteas
Infeccioacuten de liacuteneas celulares con virus de una sola ronda de replicacioacuten
HIV-1-GFP+YU2
HIV-1-GFP+HxB2
HIV-1-GFP no Env Neg control
HIV-1-GFP+VSV-G Pos control
U373-MAGI
U3T3-CD4-CCR5-MAGI
CD4
CCR5
U3T3-CD4-CXCR4-MAGI
CXCR4 CD4
HB
D y
RN
asas
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Actividad antiviral de defensinas
recombinantes
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Actividad antiviral de RNasas
recombinantes
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Modelo de expresioacuten de factores solubles en mucosa genital
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Modelo de inhibicioacuten de la replicacioacuten del VIH-1 por hBDs y RNasas
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Ventajas para el desarrollo de agentes toacutepicos
Amplio espectro antirretroviral contra
cepas X4 y R5
Mayor biodisponibilidad al no ser
susceptible a peptidasas hepaacuteticas y
renales
Bajos costos de produccioacuten
Capacidad antibacteriana
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Pacientes Individuos HESN
AGRADECIMIENTOS
Wildeman Zapata Wbeimar Aguilar
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Evidencia antiviral in vitro de
HAD
Chang TL et al J Clin Invest 2005 Mar 115(3)765-73
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Quintildeones et al AIDS 2003 Sun et al Journal of virology 2005
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Klotman et al Nat Rev Immunol 2006
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Enzimas reguladoras que participan en varios procesos fisioloacutegicos que van
desde el procesamiento alternativo del RNA hasta la muerte celular
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Superfamilia A 13 RNasas humanas
Familia T1
Familia T2
Defensa contra distintos patoacutegenos
Actividad antitumoral
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Bedoya et al AIDS Research and Human Retroviruses 22(9) 2006 pp 897ndash907
Evidencia antiviral in vitro de
RNasas
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
EMBARAZO
EDN SDF-1 LIF y hCG
Aumenta el desarrollo fetal yo proteje contra la transmisioacuten vertical de
patoacutegenos
Alo-reconocimiento materno-
fetal
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Determinar la participacioacuten en la resistencia natural
a la infeccioacuten por el VIH-1 de los siguientes factores solubles
Defensinas HAD y HBD-2 y 3 RNasas EDN RNasa 1 y angiogenina
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
ESN 60 CS 60 SP 60
Citometriacutea LT-CD4
Plasma
Carga viral SP
Mucosas Oral vaginal y endocervical
Extraccioacuten de RNA
(TRIZOL)
PCR en tiempo real CK19 HAD-1 HBD-2 y 3 y
RNasas
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Characteristics HC (n=60) HESN (n=61) SP (n=60)
Age
Median (Range) 28 (19-54) 34 (17-61) 34 (17-51)
Gender n ()
Male
Female
33 (55)
27 (45)
35 (57)
26 (43)
27 (46)
33 (54)
Viral Load
Median (Range) ND ND
2569 copiesmL
(50-493000)
T CD4+Lymphocytes
Median (Range) ND ND
361 cellsmL
(17-909)
Table 1
Demographic profile
No data
Poblacioacuten de Estudio
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Produccioacuten aumentada de defensinas
en mucosa oral de HESN
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Produccioacuten similar de RNasas
en mucosa oral Oral mucosa
HC
HESN S
P
0
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Re
lati
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its
of
ED
N m
RN
A
Angiogenina se detectoacute en 5
HC 1 HESN y 3 SP
RNase 1 se detectoacute en 6 HC
7 HESN y 5 SP
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Produccioacuten aumentada de RNasas en
mucosa genital de HESN
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Produccioacuten similar de defensinas en
mucosa genital
Vaginal mucosa
HC
ESN S
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Endocervical mucosa
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Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
HAD en mucosa genital
Vaginal mucosa
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Endocervical mucosa
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Re
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of
HA
D-1
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NA
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Anaacutelisis de mecanismos de accioacuten anti-VIH-1 con proteiacutenas recombinantes
Inhibicioacuten de la replicacioacuten viral
Infeccioacuten con HIV-GFP Cuantificacioacuten de GFP y p24
(48h PI)
Inhibicioacuten de la Transcripcioacuten reversa
PCR en tiempo real para productos
tempranos tardiacuteos y ciacuterculos de 2-LTR
Inhibicioacuten de la entrada del virus HIV-GFP (R5-X4)
Infeccioacuten con HIV-GFP Cuantificacioacuten de GFP y p24
(48h PI)
Tamizaje de concentracioacuten viral
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
ceacutelulas 293T Transfeccioacuten
Genes de VIH-1 sin env
HIV-GFP
Env R5 (HxB2)
Env X4 (YU2)
Env VSV-G
HIV-1 YU2
HIV-1 HxB2
HIV-1 no Env Neg control
HIV-1 VSV-G Pos control
Produccioacuten de virus
recombinantes
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Clones de VIH
Ceacutelulas 293T
2 diacuteas
Colectar y filtrar el sobrenadante
ELISA de p24 Precipitacioacuten con PEG concentracioacuten del virus
PEG + VIH 3 diacuteas
Transfeccioacuten
Calcio fosfatos
p24 100-400 pgml
+
+
+
Produccioacuten de virus infecciosos a partir de
clones moleculares
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Liacuteneas celulares
Infeccioacuten 100 pgml p24 polybrene 8ugml 96 pozos2h Incubacioacuten por 3 diacuteas
Infeccioacuten de liacuteneas celulares con virus de una sola ronda de replicacioacuten
HIV-1-GFP+YU2
HIV-1-GFP+HxB2
HIV-1-GFP no Env Neg control
HIV-1-GFP+VSV-G Pos control
U373-MAGI
U3T3-CD4-CCR5-MAGI
CD4
CCR5
U3T3-CD4-CXCR4-MAGI
CXCR4 CD4
HB
D y
RN
asas
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Actividad antiviral de defensinas
recombinantes
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Actividad antiviral de RNasas
recombinantes
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Modelo de expresioacuten de factores solubles en mucosa genital
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Modelo de inhibicioacuten de la replicacioacuten del VIH-1 por hBDs y RNasas
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Ventajas para el desarrollo de agentes toacutepicos
Amplio espectro antirretroviral contra
cepas X4 y R5
Mayor biodisponibilidad al no ser
susceptible a peptidasas hepaacuteticas y
renales
Bajos costos de produccioacuten
Capacidad antibacteriana
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Pacientes Individuos HESN
AGRADECIMIENTOS
Wildeman Zapata Wbeimar Aguilar
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Quintildeones et al AIDS 2003 Sun et al Journal of virology 2005
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Klotman et al Nat Rev Immunol 2006
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Enzimas reguladoras que participan en varios procesos fisioloacutegicos que van
desde el procesamiento alternativo del RNA hasta la muerte celular
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Superfamilia A 13 RNasas humanas
Familia T1
Familia T2
Defensa contra distintos patoacutegenos
Actividad antitumoral
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Bedoya et al AIDS Research and Human Retroviruses 22(9) 2006 pp 897ndash907
Evidencia antiviral in vitro de
RNasas
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
EMBARAZO
EDN SDF-1 LIF y hCG
Aumenta el desarrollo fetal yo proteje contra la transmisioacuten vertical de
patoacutegenos
Alo-reconocimiento materno-
fetal
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Determinar la participacioacuten en la resistencia natural
a la infeccioacuten por el VIH-1 de los siguientes factores solubles
Defensinas HAD y HBD-2 y 3 RNasas EDN RNasa 1 y angiogenina
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
ESN 60 CS 60 SP 60
Citometriacutea LT-CD4
Plasma
Carga viral SP
Mucosas Oral vaginal y endocervical
Extraccioacuten de RNA
(TRIZOL)
PCR en tiempo real CK19 HAD-1 HBD-2 y 3 y
RNasas
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Characteristics HC (n=60) HESN (n=61) SP (n=60)
Age
Median (Range) 28 (19-54) 34 (17-61) 34 (17-51)
Gender n ()
Male
Female
33 (55)
27 (45)
35 (57)
26 (43)
27 (46)
33 (54)
Viral Load
Median (Range) ND ND
2569 copiesmL
(50-493000)
T CD4+Lymphocytes
Median (Range) ND ND
361 cellsmL
(17-909)
Table 1
Demographic profile
No data
Poblacioacuten de Estudio
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Produccioacuten aumentada de defensinas
en mucosa oral de HESN
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Produccioacuten similar de RNasas
en mucosa oral Oral mucosa
HC
HESN S
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ED
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A
Angiogenina se detectoacute en 5
HC 1 HESN y 3 SP
RNase 1 se detectoacute en 6 HC
7 HESN y 5 SP
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Produccioacuten aumentada de RNasas en
mucosa genital de HESN
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Produccioacuten similar de defensinas en
mucosa genital
Vaginal mucosa
HC
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Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
HAD en mucosa genital
Vaginal mucosa
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Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Anaacutelisis de mecanismos de accioacuten anti-VIH-1 con proteiacutenas recombinantes
Inhibicioacuten de la replicacioacuten viral
Infeccioacuten con HIV-GFP Cuantificacioacuten de GFP y p24
(48h PI)
Inhibicioacuten de la Transcripcioacuten reversa
PCR en tiempo real para productos
tempranos tardiacuteos y ciacuterculos de 2-LTR
Inhibicioacuten de la entrada del virus HIV-GFP (R5-X4)
Infeccioacuten con HIV-GFP Cuantificacioacuten de GFP y p24
(48h PI)
Tamizaje de concentracioacuten viral
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
ceacutelulas 293T Transfeccioacuten
Genes de VIH-1 sin env
HIV-GFP
Env R5 (HxB2)
Env X4 (YU2)
Env VSV-G
HIV-1 YU2
HIV-1 HxB2
HIV-1 no Env Neg control
HIV-1 VSV-G Pos control
Produccioacuten de virus
recombinantes
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Clones de VIH
Ceacutelulas 293T
2 diacuteas
Colectar y filtrar el sobrenadante
ELISA de p24 Precipitacioacuten con PEG concentracioacuten del virus
PEG + VIH 3 diacuteas
Transfeccioacuten
Calcio fosfatos
p24 100-400 pgml
+
+
+
Produccioacuten de virus infecciosos a partir de
clones moleculares
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Liacuteneas celulares
Infeccioacuten 100 pgml p24 polybrene 8ugml 96 pozos2h Incubacioacuten por 3 diacuteas
Infeccioacuten de liacuteneas celulares con virus de una sola ronda de replicacioacuten
HIV-1-GFP+YU2
HIV-1-GFP+HxB2
HIV-1-GFP no Env Neg control
HIV-1-GFP+VSV-G Pos control
U373-MAGI
U3T3-CD4-CCR5-MAGI
CD4
CCR5
U3T3-CD4-CXCR4-MAGI
CXCR4 CD4
HB
D y
RN
asas
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Actividad antiviral de defensinas
recombinantes
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Actividad antiviral de RNasas
recombinantes
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Modelo de expresioacuten de factores solubles en mucosa genital
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Modelo de inhibicioacuten de la replicacioacuten del VIH-1 por hBDs y RNasas
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Ventajas para el desarrollo de agentes toacutepicos
Amplio espectro antirretroviral contra
cepas X4 y R5
Mayor biodisponibilidad al no ser
susceptible a peptidasas hepaacuteticas y
renales
Bajos costos de produccioacuten
Capacidad antibacteriana
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Pacientes Individuos HESN
AGRADECIMIENTOS
Wildeman Zapata Wbeimar Aguilar
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Klotman et al Nat Rev Immunol 2006
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Enzimas reguladoras que participan en varios procesos fisioloacutegicos que van
desde el procesamiento alternativo del RNA hasta la muerte celular
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Superfamilia A 13 RNasas humanas
Familia T1
Familia T2
Defensa contra distintos patoacutegenos
Actividad antitumoral
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Bedoya et al AIDS Research and Human Retroviruses 22(9) 2006 pp 897ndash907
Evidencia antiviral in vitro de
RNasas
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
EMBARAZO
EDN SDF-1 LIF y hCG
Aumenta el desarrollo fetal yo proteje contra la transmisioacuten vertical de
patoacutegenos
Alo-reconocimiento materno-
fetal
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Determinar la participacioacuten en la resistencia natural
a la infeccioacuten por el VIH-1 de los siguientes factores solubles
Defensinas HAD y HBD-2 y 3 RNasas EDN RNasa 1 y angiogenina
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
ESN 60 CS 60 SP 60
Citometriacutea LT-CD4
Plasma
Carga viral SP
Mucosas Oral vaginal y endocervical
Extraccioacuten de RNA
(TRIZOL)
PCR en tiempo real CK19 HAD-1 HBD-2 y 3 y
RNasas
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Characteristics HC (n=60) HESN (n=61) SP (n=60)
Age
Median (Range) 28 (19-54) 34 (17-61) 34 (17-51)
Gender n ()
Male
Female
33 (55)
27 (45)
35 (57)
26 (43)
27 (46)
33 (54)
Viral Load
Median (Range) ND ND
2569 copiesmL
(50-493000)
T CD4+Lymphocytes
Median (Range) ND ND
361 cellsmL
(17-909)
Table 1
Demographic profile
No data
Poblacioacuten de Estudio
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Produccioacuten aumentada de defensinas
en mucosa oral de HESN
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Produccioacuten similar de RNasas
en mucosa oral Oral mucosa
HC
HESN S
P
0
10
20
30
40
Re
lati
ve
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its
of
ED
N m
RN
A
Angiogenina se detectoacute en 5
HC 1 HESN y 3 SP
RNase 1 se detectoacute en 6 HC
7 HESN y 5 SP
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Produccioacuten aumentada de RNasas en
mucosa genital de HESN
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Produccioacuten similar de defensinas en
mucosa genital
Vaginal mucosa
HC
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Endocervical mucosa
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Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
HAD en mucosa genital
Vaginal mucosa
HC
ESN S
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08
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Endocervical mucosa
HC
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Re
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D-1
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NA
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Anaacutelisis de mecanismos de accioacuten anti-VIH-1 con proteiacutenas recombinantes
Inhibicioacuten de la replicacioacuten viral
Infeccioacuten con HIV-GFP Cuantificacioacuten de GFP y p24
(48h PI)
Inhibicioacuten de la Transcripcioacuten reversa
PCR en tiempo real para productos
tempranos tardiacuteos y ciacuterculos de 2-LTR
Inhibicioacuten de la entrada del virus HIV-GFP (R5-X4)
Infeccioacuten con HIV-GFP Cuantificacioacuten de GFP y p24
(48h PI)
Tamizaje de concentracioacuten viral
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
ceacutelulas 293T Transfeccioacuten
Genes de VIH-1 sin env
HIV-GFP
Env R5 (HxB2)
Env X4 (YU2)
Env VSV-G
HIV-1 YU2
HIV-1 HxB2
HIV-1 no Env Neg control
HIV-1 VSV-G Pos control
Produccioacuten de virus
recombinantes
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Clones de VIH
Ceacutelulas 293T
2 diacuteas
Colectar y filtrar el sobrenadante
ELISA de p24 Precipitacioacuten con PEG concentracioacuten del virus
PEG + VIH 3 diacuteas
Transfeccioacuten
Calcio fosfatos
p24 100-400 pgml
+
+
+
Produccioacuten de virus infecciosos a partir de
clones moleculares
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Liacuteneas celulares
Infeccioacuten 100 pgml p24 polybrene 8ugml 96 pozos2h Incubacioacuten por 3 diacuteas
Infeccioacuten de liacuteneas celulares con virus de una sola ronda de replicacioacuten
HIV-1-GFP+YU2
HIV-1-GFP+HxB2
HIV-1-GFP no Env Neg control
HIV-1-GFP+VSV-G Pos control
U373-MAGI
U3T3-CD4-CCR5-MAGI
CD4
CCR5
U3T3-CD4-CXCR4-MAGI
CXCR4 CD4
HB
D y
RN
asas
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Actividad antiviral de defensinas
recombinantes
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Actividad antiviral de RNasas
recombinantes
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Modelo de expresioacuten de factores solubles en mucosa genital
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Modelo de inhibicioacuten de la replicacioacuten del VIH-1 por hBDs y RNasas
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Ventajas para el desarrollo de agentes toacutepicos
Amplio espectro antirretroviral contra
cepas X4 y R5
Mayor biodisponibilidad al no ser
susceptible a peptidasas hepaacuteticas y
renales
Bajos costos de produccioacuten
Capacidad antibacteriana
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Pacientes Individuos HESN
AGRADECIMIENTOS
Wildeman Zapata Wbeimar Aguilar
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Enzimas reguladoras que participan en varios procesos fisioloacutegicos que van
desde el procesamiento alternativo del RNA hasta la muerte celular
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Superfamilia A 13 RNasas humanas
Familia T1
Familia T2
Defensa contra distintos patoacutegenos
Actividad antitumoral
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Bedoya et al AIDS Research and Human Retroviruses 22(9) 2006 pp 897ndash907
Evidencia antiviral in vitro de
RNasas
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
EMBARAZO
EDN SDF-1 LIF y hCG
Aumenta el desarrollo fetal yo proteje contra la transmisioacuten vertical de
patoacutegenos
Alo-reconocimiento materno-
fetal
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Determinar la participacioacuten en la resistencia natural
a la infeccioacuten por el VIH-1 de los siguientes factores solubles
Defensinas HAD y HBD-2 y 3 RNasas EDN RNasa 1 y angiogenina
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
ESN 60 CS 60 SP 60
Citometriacutea LT-CD4
Plasma
Carga viral SP
Mucosas Oral vaginal y endocervical
Extraccioacuten de RNA
(TRIZOL)
PCR en tiempo real CK19 HAD-1 HBD-2 y 3 y
RNasas
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Characteristics HC (n=60) HESN (n=61) SP (n=60)
Age
Median (Range) 28 (19-54) 34 (17-61) 34 (17-51)
Gender n ()
Male
Female
33 (55)
27 (45)
35 (57)
26 (43)
27 (46)
33 (54)
Viral Load
Median (Range) ND ND
2569 copiesmL
(50-493000)
T CD4+Lymphocytes
Median (Range) ND ND
361 cellsmL
(17-909)
Table 1
Demographic profile
No data
Poblacioacuten de Estudio
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Produccioacuten aumentada de defensinas
en mucosa oral de HESN
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Produccioacuten similar de RNasas
en mucosa oral Oral mucosa
HC
HESN S
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0
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Re
lati
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un
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of
ED
N m
RN
A
Angiogenina se detectoacute en 5
HC 1 HESN y 3 SP
RNase 1 se detectoacute en 6 HC
7 HESN y 5 SP
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Produccioacuten aumentada de RNasas en
mucosa genital de HESN
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Produccioacuten similar de defensinas en
mucosa genital
Vaginal mucosa
HC
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Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
HAD en mucosa genital
Vaginal mucosa
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Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Anaacutelisis de mecanismos de accioacuten anti-VIH-1 con proteiacutenas recombinantes
Inhibicioacuten de la replicacioacuten viral
Infeccioacuten con HIV-GFP Cuantificacioacuten de GFP y p24
(48h PI)
Inhibicioacuten de la Transcripcioacuten reversa
PCR en tiempo real para productos
tempranos tardiacuteos y ciacuterculos de 2-LTR
Inhibicioacuten de la entrada del virus HIV-GFP (R5-X4)
Infeccioacuten con HIV-GFP Cuantificacioacuten de GFP y p24
(48h PI)
Tamizaje de concentracioacuten viral
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
ceacutelulas 293T Transfeccioacuten
Genes de VIH-1 sin env
HIV-GFP
Env R5 (HxB2)
Env X4 (YU2)
Env VSV-G
HIV-1 YU2
HIV-1 HxB2
HIV-1 no Env Neg control
HIV-1 VSV-G Pos control
Produccioacuten de virus
recombinantes
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Clones de VIH
Ceacutelulas 293T
2 diacuteas
Colectar y filtrar el sobrenadante
ELISA de p24 Precipitacioacuten con PEG concentracioacuten del virus
PEG + VIH 3 diacuteas
Transfeccioacuten
Calcio fosfatos
p24 100-400 pgml
+
+
+
Produccioacuten de virus infecciosos a partir de
clones moleculares
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Liacuteneas celulares
Infeccioacuten 100 pgml p24 polybrene 8ugml 96 pozos2h Incubacioacuten por 3 diacuteas
Infeccioacuten de liacuteneas celulares con virus de una sola ronda de replicacioacuten
HIV-1-GFP+YU2
HIV-1-GFP+HxB2
HIV-1-GFP no Env Neg control
HIV-1-GFP+VSV-G Pos control
U373-MAGI
U3T3-CD4-CCR5-MAGI
CD4
CCR5
U3T3-CD4-CXCR4-MAGI
CXCR4 CD4
HB
D y
RN
asas
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Actividad antiviral de defensinas
recombinantes
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Actividad antiviral de RNasas
recombinantes
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Modelo de expresioacuten de factores solubles en mucosa genital
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Modelo de inhibicioacuten de la replicacioacuten del VIH-1 por hBDs y RNasas
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Ventajas para el desarrollo de agentes toacutepicos
Amplio espectro antirretroviral contra
cepas X4 y R5
Mayor biodisponibilidad al no ser
susceptible a peptidasas hepaacuteticas y
renales
Bajos costos de produccioacuten
Capacidad antibacteriana
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Pacientes Individuos HESN
AGRADECIMIENTOS
Wildeman Zapata Wbeimar Aguilar
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Superfamilia A 13 RNasas humanas
Familia T1
Familia T2
Defensa contra distintos patoacutegenos
Actividad antitumoral
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Bedoya et al AIDS Research and Human Retroviruses 22(9) 2006 pp 897ndash907
Evidencia antiviral in vitro de
RNasas
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
EMBARAZO
EDN SDF-1 LIF y hCG
Aumenta el desarrollo fetal yo proteje contra la transmisioacuten vertical de
patoacutegenos
Alo-reconocimiento materno-
fetal
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Determinar la participacioacuten en la resistencia natural
a la infeccioacuten por el VIH-1 de los siguientes factores solubles
Defensinas HAD y HBD-2 y 3 RNasas EDN RNasa 1 y angiogenina
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
ESN 60 CS 60 SP 60
Citometriacutea LT-CD4
Plasma
Carga viral SP
Mucosas Oral vaginal y endocervical
Extraccioacuten de RNA
(TRIZOL)
PCR en tiempo real CK19 HAD-1 HBD-2 y 3 y
RNasas
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Characteristics HC (n=60) HESN (n=61) SP (n=60)
Age
Median (Range) 28 (19-54) 34 (17-61) 34 (17-51)
Gender n ()
Male
Female
33 (55)
27 (45)
35 (57)
26 (43)
27 (46)
33 (54)
Viral Load
Median (Range) ND ND
2569 copiesmL
(50-493000)
T CD4+Lymphocytes
Median (Range) ND ND
361 cellsmL
(17-909)
Table 1
Demographic profile
No data
Poblacioacuten de Estudio
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Produccioacuten aumentada de defensinas
en mucosa oral de HESN
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Produccioacuten similar de RNasas
en mucosa oral Oral mucosa
HC
HESN S
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ED
N m
RN
A
Angiogenina se detectoacute en 5
HC 1 HESN y 3 SP
RNase 1 se detectoacute en 6 HC
7 HESN y 5 SP
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Produccioacuten aumentada de RNasas en
mucosa genital de HESN
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Produccioacuten similar de defensinas en
mucosa genital
Vaginal mucosa
HC
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Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
HAD en mucosa genital
Vaginal mucosa
HC
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Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Anaacutelisis de mecanismos de accioacuten anti-VIH-1 con proteiacutenas recombinantes
Inhibicioacuten de la replicacioacuten viral
Infeccioacuten con HIV-GFP Cuantificacioacuten de GFP y p24
(48h PI)
Inhibicioacuten de la Transcripcioacuten reversa
PCR en tiempo real para productos
tempranos tardiacuteos y ciacuterculos de 2-LTR
Inhibicioacuten de la entrada del virus HIV-GFP (R5-X4)
Infeccioacuten con HIV-GFP Cuantificacioacuten de GFP y p24
(48h PI)
Tamizaje de concentracioacuten viral
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
ceacutelulas 293T Transfeccioacuten
Genes de VIH-1 sin env
HIV-GFP
Env R5 (HxB2)
Env X4 (YU2)
Env VSV-G
HIV-1 YU2
HIV-1 HxB2
HIV-1 no Env Neg control
HIV-1 VSV-G Pos control
Produccioacuten de virus
recombinantes
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Clones de VIH
Ceacutelulas 293T
2 diacuteas
Colectar y filtrar el sobrenadante
ELISA de p24 Precipitacioacuten con PEG concentracioacuten del virus
PEG + VIH 3 diacuteas
Transfeccioacuten
Calcio fosfatos
p24 100-400 pgml
+
+
+
Produccioacuten de virus infecciosos a partir de
clones moleculares
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Liacuteneas celulares
Infeccioacuten 100 pgml p24 polybrene 8ugml 96 pozos2h Incubacioacuten por 3 diacuteas
Infeccioacuten de liacuteneas celulares con virus de una sola ronda de replicacioacuten
HIV-1-GFP+YU2
HIV-1-GFP+HxB2
HIV-1-GFP no Env Neg control
HIV-1-GFP+VSV-G Pos control
U373-MAGI
U3T3-CD4-CCR5-MAGI
CD4
CCR5
U3T3-CD4-CXCR4-MAGI
CXCR4 CD4
HB
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Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Actividad antiviral de defensinas
recombinantes
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Actividad antiviral de RNasas
recombinantes
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Modelo de expresioacuten de factores solubles en mucosa genital
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Modelo de inhibicioacuten de la replicacioacuten del VIH-1 por hBDs y RNasas
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Ventajas para el desarrollo de agentes toacutepicos
Amplio espectro antirretroviral contra
cepas X4 y R5
Mayor biodisponibilidad al no ser
susceptible a peptidasas hepaacuteticas y
renales
Bajos costos de produccioacuten
Capacidad antibacteriana
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Pacientes Individuos HESN
AGRADECIMIENTOS
Wildeman Zapata Wbeimar Aguilar
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Bedoya et al AIDS Research and Human Retroviruses 22(9) 2006 pp 897ndash907
Evidencia antiviral in vitro de
RNasas
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
EMBARAZO
EDN SDF-1 LIF y hCG
Aumenta el desarrollo fetal yo proteje contra la transmisioacuten vertical de
patoacutegenos
Alo-reconocimiento materno-
fetal
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Determinar la participacioacuten en la resistencia natural
a la infeccioacuten por el VIH-1 de los siguientes factores solubles
Defensinas HAD y HBD-2 y 3 RNasas EDN RNasa 1 y angiogenina
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
ESN 60 CS 60 SP 60
Citometriacutea LT-CD4
Plasma
Carga viral SP
Mucosas Oral vaginal y endocervical
Extraccioacuten de RNA
(TRIZOL)
PCR en tiempo real CK19 HAD-1 HBD-2 y 3 y
RNasas
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Characteristics HC (n=60) HESN (n=61) SP (n=60)
Age
Median (Range) 28 (19-54) 34 (17-61) 34 (17-51)
Gender n ()
Male
Female
33 (55)
27 (45)
35 (57)
26 (43)
27 (46)
33 (54)
Viral Load
Median (Range) ND ND
2569 copiesmL
(50-493000)
T CD4+Lymphocytes
Median (Range) ND ND
361 cellsmL
(17-909)
Table 1
Demographic profile
No data
Poblacioacuten de Estudio
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Produccioacuten aumentada de defensinas
en mucosa oral de HESN
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Produccioacuten similar de RNasas
en mucosa oral Oral mucosa
HC
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Angiogenina se detectoacute en 5
HC 1 HESN y 3 SP
RNase 1 se detectoacute en 6 HC
7 HESN y 5 SP
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Produccioacuten aumentada de RNasas en
mucosa genital de HESN
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Produccioacuten similar de defensinas en
mucosa genital
Vaginal mucosa
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Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
HAD en mucosa genital
Vaginal mucosa
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Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Anaacutelisis de mecanismos de accioacuten anti-VIH-1 con proteiacutenas recombinantes
Inhibicioacuten de la replicacioacuten viral
Infeccioacuten con HIV-GFP Cuantificacioacuten de GFP y p24
(48h PI)
Inhibicioacuten de la Transcripcioacuten reversa
PCR en tiempo real para productos
tempranos tardiacuteos y ciacuterculos de 2-LTR
Inhibicioacuten de la entrada del virus HIV-GFP (R5-X4)
Infeccioacuten con HIV-GFP Cuantificacioacuten de GFP y p24
(48h PI)
Tamizaje de concentracioacuten viral
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
ceacutelulas 293T Transfeccioacuten
Genes de VIH-1 sin env
HIV-GFP
Env R5 (HxB2)
Env X4 (YU2)
Env VSV-G
HIV-1 YU2
HIV-1 HxB2
HIV-1 no Env Neg control
HIV-1 VSV-G Pos control
Produccioacuten de virus
recombinantes
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Clones de VIH
Ceacutelulas 293T
2 diacuteas
Colectar y filtrar el sobrenadante
ELISA de p24 Precipitacioacuten con PEG concentracioacuten del virus
PEG + VIH 3 diacuteas
Transfeccioacuten
Calcio fosfatos
p24 100-400 pgml
+
+
+
Produccioacuten de virus infecciosos a partir de
clones moleculares
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Liacuteneas celulares
Infeccioacuten 100 pgml p24 polybrene 8ugml 96 pozos2h Incubacioacuten por 3 diacuteas
Infeccioacuten de liacuteneas celulares con virus de una sola ronda de replicacioacuten
HIV-1-GFP+YU2
HIV-1-GFP+HxB2
HIV-1-GFP no Env Neg control
HIV-1-GFP+VSV-G Pos control
U373-MAGI
U3T3-CD4-CCR5-MAGI
CD4
CCR5
U3T3-CD4-CXCR4-MAGI
CXCR4 CD4
HB
D y
RN
asas
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Actividad antiviral de defensinas
recombinantes
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Actividad antiviral de RNasas
recombinantes
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Modelo de expresioacuten de factores solubles en mucosa genital
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Modelo de inhibicioacuten de la replicacioacuten del VIH-1 por hBDs y RNasas
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Ventajas para el desarrollo de agentes toacutepicos
Amplio espectro antirretroviral contra
cepas X4 y R5
Mayor biodisponibilidad al no ser
susceptible a peptidasas hepaacuteticas y
renales
Bajos costos de produccioacuten
Capacidad antibacteriana
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Pacientes Individuos HESN
AGRADECIMIENTOS
Wildeman Zapata Wbeimar Aguilar
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
EMBARAZO
EDN SDF-1 LIF y hCG
Aumenta el desarrollo fetal yo proteje contra la transmisioacuten vertical de
patoacutegenos
Alo-reconocimiento materno-
fetal
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Determinar la participacioacuten en la resistencia natural
a la infeccioacuten por el VIH-1 de los siguientes factores solubles
Defensinas HAD y HBD-2 y 3 RNasas EDN RNasa 1 y angiogenina
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
ESN 60 CS 60 SP 60
Citometriacutea LT-CD4
Plasma
Carga viral SP
Mucosas Oral vaginal y endocervical
Extraccioacuten de RNA
(TRIZOL)
PCR en tiempo real CK19 HAD-1 HBD-2 y 3 y
RNasas
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Characteristics HC (n=60) HESN (n=61) SP (n=60)
Age
Median (Range) 28 (19-54) 34 (17-61) 34 (17-51)
Gender n ()
Male
Female
33 (55)
27 (45)
35 (57)
26 (43)
27 (46)
33 (54)
Viral Load
Median (Range) ND ND
2569 copiesmL
(50-493000)
T CD4+Lymphocytes
Median (Range) ND ND
361 cellsmL
(17-909)
Table 1
Demographic profile
No data
Poblacioacuten de Estudio
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Produccioacuten aumentada de defensinas
en mucosa oral de HESN
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Produccioacuten similar de RNasas
en mucosa oral Oral mucosa
HC
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Re
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ED
N m
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A
Angiogenina se detectoacute en 5
HC 1 HESN y 3 SP
RNase 1 se detectoacute en 6 HC
7 HESN y 5 SP
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Produccioacuten aumentada de RNasas en
mucosa genital de HESN
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Produccioacuten similar de defensinas en
mucosa genital
Vaginal mucosa
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HAD en mucosa genital
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Anaacutelisis de mecanismos de accioacuten anti-VIH-1 con proteiacutenas recombinantes
Inhibicioacuten de la replicacioacuten viral
Infeccioacuten con HIV-GFP Cuantificacioacuten de GFP y p24
(48h PI)
Inhibicioacuten de la Transcripcioacuten reversa
PCR en tiempo real para productos
tempranos tardiacuteos y ciacuterculos de 2-LTR
Inhibicioacuten de la entrada del virus HIV-GFP (R5-X4)
Infeccioacuten con HIV-GFP Cuantificacioacuten de GFP y p24
(48h PI)
Tamizaje de concentracioacuten viral
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
ceacutelulas 293T Transfeccioacuten
Genes de VIH-1 sin env
HIV-GFP
Env R5 (HxB2)
Env X4 (YU2)
Env VSV-G
HIV-1 YU2
HIV-1 HxB2
HIV-1 no Env Neg control
HIV-1 VSV-G Pos control
Produccioacuten de virus
recombinantes
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Clones de VIH
Ceacutelulas 293T
2 diacuteas
Colectar y filtrar el sobrenadante
ELISA de p24 Precipitacioacuten con PEG concentracioacuten del virus
PEG + VIH 3 diacuteas
Transfeccioacuten
Calcio fosfatos
p24 100-400 pgml
+
+
+
Produccioacuten de virus infecciosos a partir de
clones moleculares
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Liacuteneas celulares
Infeccioacuten 100 pgml p24 polybrene 8ugml 96 pozos2h Incubacioacuten por 3 diacuteas
Infeccioacuten de liacuteneas celulares con virus de una sola ronda de replicacioacuten
HIV-1-GFP+YU2
HIV-1-GFP+HxB2
HIV-1-GFP no Env Neg control
HIV-1-GFP+VSV-G Pos control
U373-MAGI
U3T3-CD4-CCR5-MAGI
CD4
CCR5
U3T3-CD4-CXCR4-MAGI
CXCR4 CD4
HB
D y
RN
asas
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Actividad antiviral de defensinas
recombinantes
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Actividad antiviral de RNasas
recombinantes
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Modelo de expresioacuten de factores solubles en mucosa genital
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Modelo de inhibicioacuten de la replicacioacuten del VIH-1 por hBDs y RNasas
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Ventajas para el desarrollo de agentes toacutepicos
Amplio espectro antirretroviral contra
cepas X4 y R5
Mayor biodisponibilidad al no ser
susceptible a peptidasas hepaacuteticas y
renales
Bajos costos de produccioacuten
Capacidad antibacteriana
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Pacientes Individuos HESN
AGRADECIMIENTOS
Wildeman Zapata Wbeimar Aguilar
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Determinar la participacioacuten en la resistencia natural
a la infeccioacuten por el VIH-1 de los siguientes factores solubles
Defensinas HAD y HBD-2 y 3 RNasas EDN RNasa 1 y angiogenina
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
ESN 60 CS 60 SP 60
Citometriacutea LT-CD4
Plasma
Carga viral SP
Mucosas Oral vaginal y endocervical
Extraccioacuten de RNA
(TRIZOL)
PCR en tiempo real CK19 HAD-1 HBD-2 y 3 y
RNasas
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Characteristics HC (n=60) HESN (n=61) SP (n=60)
Age
Median (Range) 28 (19-54) 34 (17-61) 34 (17-51)
Gender n ()
Male
Female
33 (55)
27 (45)
35 (57)
26 (43)
27 (46)
33 (54)
Viral Load
Median (Range) ND ND
2569 copiesmL
(50-493000)
T CD4+Lymphocytes
Median (Range) ND ND
361 cellsmL
(17-909)
Table 1
Demographic profile
No data
Poblacioacuten de Estudio
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Produccioacuten aumentada de defensinas
en mucosa oral de HESN
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Produccioacuten similar de RNasas
en mucosa oral Oral mucosa
HC
HESN S
P
0
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Re
lati
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its
of
ED
N m
RN
A
Angiogenina se detectoacute en 5
HC 1 HESN y 3 SP
RNase 1 se detectoacute en 6 HC
7 HESN y 5 SP
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Produccioacuten aumentada de RNasas en
mucosa genital de HESN
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Produccioacuten similar de defensinas en
mucosa genital
Vaginal mucosa
HC
ESN S
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0
5
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of
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Endocervical mucosa
HC
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Vaginal mucosa
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of
HB
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Endocervical mucosa
HCESN SP
0
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of
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D-3
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NA
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
HAD en mucosa genital
Vaginal mucosa
HC
ESN S
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of
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Endocervical mucosa
HC
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Re
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of
HA
D-1
mR
NA
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Anaacutelisis de mecanismos de accioacuten anti-VIH-1 con proteiacutenas recombinantes
Inhibicioacuten de la replicacioacuten viral
Infeccioacuten con HIV-GFP Cuantificacioacuten de GFP y p24
(48h PI)
Inhibicioacuten de la Transcripcioacuten reversa
PCR en tiempo real para productos
tempranos tardiacuteos y ciacuterculos de 2-LTR
Inhibicioacuten de la entrada del virus HIV-GFP (R5-X4)
Infeccioacuten con HIV-GFP Cuantificacioacuten de GFP y p24
(48h PI)
Tamizaje de concentracioacuten viral
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
ceacutelulas 293T Transfeccioacuten
Genes de VIH-1 sin env
HIV-GFP
Env R5 (HxB2)
Env X4 (YU2)
Env VSV-G
HIV-1 YU2
HIV-1 HxB2
HIV-1 no Env Neg control
HIV-1 VSV-G Pos control
Produccioacuten de virus
recombinantes
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Clones de VIH
Ceacutelulas 293T
2 diacuteas
Colectar y filtrar el sobrenadante
ELISA de p24 Precipitacioacuten con PEG concentracioacuten del virus
PEG + VIH 3 diacuteas
Transfeccioacuten
Calcio fosfatos
p24 100-400 pgml
+
+
+
Produccioacuten de virus infecciosos a partir de
clones moleculares
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Liacuteneas celulares
Infeccioacuten 100 pgml p24 polybrene 8ugml 96 pozos2h Incubacioacuten por 3 diacuteas
Infeccioacuten de liacuteneas celulares con virus de una sola ronda de replicacioacuten
HIV-1-GFP+YU2
HIV-1-GFP+HxB2
HIV-1-GFP no Env Neg control
HIV-1-GFP+VSV-G Pos control
U373-MAGI
U3T3-CD4-CCR5-MAGI
CD4
CCR5
U3T3-CD4-CXCR4-MAGI
CXCR4 CD4
HB
D y
RN
asas
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Actividad antiviral de defensinas
recombinantes
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Actividad antiviral de RNasas
recombinantes
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Modelo de expresioacuten de factores solubles en mucosa genital
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Modelo de inhibicioacuten de la replicacioacuten del VIH-1 por hBDs y RNasas
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Ventajas para el desarrollo de agentes toacutepicos
Amplio espectro antirretroviral contra
cepas X4 y R5
Mayor biodisponibilidad al no ser
susceptible a peptidasas hepaacuteticas y
renales
Bajos costos de produccioacuten
Capacidad antibacteriana
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Pacientes Individuos HESN
AGRADECIMIENTOS
Wildeman Zapata Wbeimar Aguilar
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
ESN 60 CS 60 SP 60
Citometriacutea LT-CD4
Plasma
Carga viral SP
Mucosas Oral vaginal y endocervical
Extraccioacuten de RNA
(TRIZOL)
PCR en tiempo real CK19 HAD-1 HBD-2 y 3 y
RNasas
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Characteristics HC (n=60) HESN (n=61) SP (n=60)
Age
Median (Range) 28 (19-54) 34 (17-61) 34 (17-51)
Gender n ()
Male
Female
33 (55)
27 (45)
35 (57)
26 (43)
27 (46)
33 (54)
Viral Load
Median (Range) ND ND
2569 copiesmL
(50-493000)
T CD4+Lymphocytes
Median (Range) ND ND
361 cellsmL
(17-909)
Table 1
Demographic profile
No data
Poblacioacuten de Estudio
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Produccioacuten aumentada de defensinas
en mucosa oral de HESN
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Produccioacuten similar de RNasas
en mucosa oral Oral mucosa
HC
HESN S
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of
ED
N m
RN
A
Angiogenina se detectoacute en 5
HC 1 HESN y 3 SP
RNase 1 se detectoacute en 6 HC
7 HESN y 5 SP
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Produccioacuten aumentada de RNasas en
mucosa genital de HESN
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Produccioacuten similar de defensinas en
mucosa genital
Vaginal mucosa
HC
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Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
HAD en mucosa genital
Vaginal mucosa
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Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Anaacutelisis de mecanismos de accioacuten anti-VIH-1 con proteiacutenas recombinantes
Inhibicioacuten de la replicacioacuten viral
Infeccioacuten con HIV-GFP Cuantificacioacuten de GFP y p24
(48h PI)
Inhibicioacuten de la Transcripcioacuten reversa
PCR en tiempo real para productos
tempranos tardiacuteos y ciacuterculos de 2-LTR
Inhibicioacuten de la entrada del virus HIV-GFP (R5-X4)
Infeccioacuten con HIV-GFP Cuantificacioacuten de GFP y p24
(48h PI)
Tamizaje de concentracioacuten viral
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
ceacutelulas 293T Transfeccioacuten
Genes de VIH-1 sin env
HIV-GFP
Env R5 (HxB2)
Env X4 (YU2)
Env VSV-G
HIV-1 YU2
HIV-1 HxB2
HIV-1 no Env Neg control
HIV-1 VSV-G Pos control
Produccioacuten de virus
recombinantes
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Clones de VIH
Ceacutelulas 293T
2 diacuteas
Colectar y filtrar el sobrenadante
ELISA de p24 Precipitacioacuten con PEG concentracioacuten del virus
PEG + VIH 3 diacuteas
Transfeccioacuten
Calcio fosfatos
p24 100-400 pgml
+
+
+
Produccioacuten de virus infecciosos a partir de
clones moleculares
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Liacuteneas celulares
Infeccioacuten 100 pgml p24 polybrene 8ugml 96 pozos2h Incubacioacuten por 3 diacuteas
Infeccioacuten de liacuteneas celulares con virus de una sola ronda de replicacioacuten
HIV-1-GFP+YU2
HIV-1-GFP+HxB2
HIV-1-GFP no Env Neg control
HIV-1-GFP+VSV-G Pos control
U373-MAGI
U3T3-CD4-CCR5-MAGI
CD4
CCR5
U3T3-CD4-CXCR4-MAGI
CXCR4 CD4
HB
D y
RN
asas
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Actividad antiviral de defensinas
recombinantes
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Actividad antiviral de RNasas
recombinantes
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Modelo de expresioacuten de factores solubles en mucosa genital
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Modelo de inhibicioacuten de la replicacioacuten del VIH-1 por hBDs y RNasas
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Ventajas para el desarrollo de agentes toacutepicos
Amplio espectro antirretroviral contra
cepas X4 y R5
Mayor biodisponibilidad al no ser
susceptible a peptidasas hepaacuteticas y
renales
Bajos costos de produccioacuten
Capacidad antibacteriana
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Pacientes Individuos HESN
AGRADECIMIENTOS
Wildeman Zapata Wbeimar Aguilar
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Characteristics HC (n=60) HESN (n=61) SP (n=60)
Age
Median (Range) 28 (19-54) 34 (17-61) 34 (17-51)
Gender n ()
Male
Female
33 (55)
27 (45)
35 (57)
26 (43)
27 (46)
33 (54)
Viral Load
Median (Range) ND ND
2569 copiesmL
(50-493000)
T CD4+Lymphocytes
Median (Range) ND ND
361 cellsmL
(17-909)
Table 1
Demographic profile
No data
Poblacioacuten de Estudio
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Produccioacuten aumentada de defensinas
en mucosa oral de HESN
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Produccioacuten similar de RNasas
en mucosa oral Oral mucosa
HC
HESN S
P
0
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Re
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of
ED
N m
RN
A
Angiogenina se detectoacute en 5
HC 1 HESN y 3 SP
RNase 1 se detectoacute en 6 HC
7 HESN y 5 SP
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Produccioacuten aumentada de RNasas en
mucosa genital de HESN
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Produccioacuten similar de defensinas en
mucosa genital
Vaginal mucosa
HC
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Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
HAD en mucosa genital
Vaginal mucosa
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Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Anaacutelisis de mecanismos de accioacuten anti-VIH-1 con proteiacutenas recombinantes
Inhibicioacuten de la replicacioacuten viral
Infeccioacuten con HIV-GFP Cuantificacioacuten de GFP y p24
(48h PI)
Inhibicioacuten de la Transcripcioacuten reversa
PCR en tiempo real para productos
tempranos tardiacuteos y ciacuterculos de 2-LTR
Inhibicioacuten de la entrada del virus HIV-GFP (R5-X4)
Infeccioacuten con HIV-GFP Cuantificacioacuten de GFP y p24
(48h PI)
Tamizaje de concentracioacuten viral
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
ceacutelulas 293T Transfeccioacuten
Genes de VIH-1 sin env
HIV-GFP
Env R5 (HxB2)
Env X4 (YU2)
Env VSV-G
HIV-1 YU2
HIV-1 HxB2
HIV-1 no Env Neg control
HIV-1 VSV-G Pos control
Produccioacuten de virus
recombinantes
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Clones de VIH
Ceacutelulas 293T
2 diacuteas
Colectar y filtrar el sobrenadante
ELISA de p24 Precipitacioacuten con PEG concentracioacuten del virus
PEG + VIH 3 diacuteas
Transfeccioacuten
Calcio fosfatos
p24 100-400 pgml
+
+
+
Produccioacuten de virus infecciosos a partir de
clones moleculares
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Liacuteneas celulares
Infeccioacuten 100 pgml p24 polybrene 8ugml 96 pozos2h Incubacioacuten por 3 diacuteas
Infeccioacuten de liacuteneas celulares con virus de una sola ronda de replicacioacuten
HIV-1-GFP+YU2
HIV-1-GFP+HxB2
HIV-1-GFP no Env Neg control
HIV-1-GFP+VSV-G Pos control
U373-MAGI
U3T3-CD4-CCR5-MAGI
CD4
CCR5
U3T3-CD4-CXCR4-MAGI
CXCR4 CD4
HB
D y
RN
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Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Actividad antiviral de defensinas
recombinantes
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Actividad antiviral de RNasas
recombinantes
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Modelo de expresioacuten de factores solubles en mucosa genital
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Modelo de inhibicioacuten de la replicacioacuten del VIH-1 por hBDs y RNasas
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Ventajas para el desarrollo de agentes toacutepicos
Amplio espectro antirretroviral contra
cepas X4 y R5
Mayor biodisponibilidad al no ser
susceptible a peptidasas hepaacuteticas y
renales
Bajos costos de produccioacuten
Capacidad antibacteriana
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Pacientes Individuos HESN
AGRADECIMIENTOS
Wildeman Zapata Wbeimar Aguilar
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Produccioacuten aumentada de defensinas
en mucosa oral de HESN
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Produccioacuten similar de RNasas
en mucosa oral Oral mucosa
HC
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Angiogenina se detectoacute en 5
HC 1 HESN y 3 SP
RNase 1 se detectoacute en 6 HC
7 HESN y 5 SP
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Produccioacuten aumentada de RNasas en
mucosa genital de HESN
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Produccioacuten similar de defensinas en
mucosa genital
Vaginal mucosa
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Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
HAD en mucosa genital
Vaginal mucosa
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Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Anaacutelisis de mecanismos de accioacuten anti-VIH-1 con proteiacutenas recombinantes
Inhibicioacuten de la replicacioacuten viral
Infeccioacuten con HIV-GFP Cuantificacioacuten de GFP y p24
(48h PI)
Inhibicioacuten de la Transcripcioacuten reversa
PCR en tiempo real para productos
tempranos tardiacuteos y ciacuterculos de 2-LTR
Inhibicioacuten de la entrada del virus HIV-GFP (R5-X4)
Infeccioacuten con HIV-GFP Cuantificacioacuten de GFP y p24
(48h PI)
Tamizaje de concentracioacuten viral
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
ceacutelulas 293T Transfeccioacuten
Genes de VIH-1 sin env
HIV-GFP
Env R5 (HxB2)
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HIV-1 YU2
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HIV-1 no Env Neg control
HIV-1 VSV-G Pos control
Produccioacuten de virus
recombinantes
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Clones de VIH
Ceacutelulas 293T
2 diacuteas
Colectar y filtrar el sobrenadante
ELISA de p24 Precipitacioacuten con PEG concentracioacuten del virus
PEG + VIH 3 diacuteas
Transfeccioacuten
Calcio fosfatos
p24 100-400 pgml
+
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Produccioacuten de virus infecciosos a partir de
clones moleculares
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Liacuteneas celulares
Infeccioacuten 100 pgml p24 polybrene 8ugml 96 pozos2h Incubacioacuten por 3 diacuteas
Infeccioacuten de liacuteneas celulares con virus de una sola ronda de replicacioacuten
HIV-1-GFP+YU2
HIV-1-GFP+HxB2
HIV-1-GFP no Env Neg control
HIV-1-GFP+VSV-G Pos control
U373-MAGI
U3T3-CD4-CCR5-MAGI
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CCR5
U3T3-CD4-CXCR4-MAGI
CXCR4 CD4
HB
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asas
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Actividad antiviral de defensinas
recombinantes
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Actividad antiviral de RNasas
recombinantes
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Modelo de expresioacuten de factores solubles en mucosa genital
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Modelo de inhibicioacuten de la replicacioacuten del VIH-1 por hBDs y RNasas
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Ventajas para el desarrollo de agentes toacutepicos
Amplio espectro antirretroviral contra
cepas X4 y R5
Mayor biodisponibilidad al no ser
susceptible a peptidasas hepaacuteticas y
renales
Bajos costos de produccioacuten
Capacidad antibacteriana
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Pacientes Individuos HESN
AGRADECIMIENTOS
Wildeman Zapata Wbeimar Aguilar
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Produccioacuten similar de RNasas
en mucosa oral Oral mucosa
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Angiogenina se detectoacute en 5
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RNase 1 se detectoacute en 6 HC
7 HESN y 5 SP
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Produccioacuten aumentada de RNasas en
mucosa genital de HESN
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Produccioacuten similar de defensinas en
mucosa genital
Vaginal mucosa
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HAD en mucosa genital
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Anaacutelisis de mecanismos de accioacuten anti-VIH-1 con proteiacutenas recombinantes
Inhibicioacuten de la replicacioacuten viral
Infeccioacuten con HIV-GFP Cuantificacioacuten de GFP y p24
(48h PI)
Inhibicioacuten de la Transcripcioacuten reversa
PCR en tiempo real para productos
tempranos tardiacuteos y ciacuterculos de 2-LTR
Inhibicioacuten de la entrada del virus HIV-GFP (R5-X4)
Infeccioacuten con HIV-GFP Cuantificacioacuten de GFP y p24
(48h PI)
Tamizaje de concentracioacuten viral
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ceacutelulas 293T Transfeccioacuten
Genes de VIH-1 sin env
HIV-GFP
Env R5 (HxB2)
Env X4 (YU2)
Env VSV-G
HIV-1 YU2
HIV-1 HxB2
HIV-1 no Env Neg control
HIV-1 VSV-G Pos control
Produccioacuten de virus
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Ceacutelulas 293T
2 diacuteas
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PEG + VIH 3 diacuteas
Transfeccioacuten
Calcio fosfatos
p24 100-400 pgml
+
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Produccioacuten de virus infecciosos a partir de
clones moleculares
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HIV-1-GFP+YU2
HIV-1-GFP+HxB2
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U373-MAGI
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CXCR4 CD4
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Actividad antiviral de defensinas
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Actividad antiviral de RNasas
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Modelo de expresioacuten de factores solubles en mucosa genital
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Modelo de inhibicioacuten de la replicacioacuten del VIH-1 por hBDs y RNasas
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Ventajas para el desarrollo de agentes toacutepicos
Amplio espectro antirretroviral contra
cepas X4 y R5
Mayor biodisponibilidad al no ser
susceptible a peptidasas hepaacuteticas y
renales
Bajos costos de produccioacuten
Capacidad antibacteriana
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Infeccioacuten con HIV-GFP Cuantificacioacuten de GFP y p24
(48h PI)
Inhibicioacuten de la Transcripcioacuten reversa
PCR en tiempo real para productos
tempranos tardiacuteos y ciacuterculos de 2-LTR
Inhibicioacuten de la entrada del virus HIV-GFP (R5-X4)
Infeccioacuten con HIV-GFP Cuantificacioacuten de GFP y p24
(48h PI)
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Ventajas para el desarrollo de agentes toacutepicos
Amplio espectro antirretroviral contra
cepas X4 y R5
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susceptible a peptidasas hepaacuteticas y
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(48h PI)
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PCR en tiempo real para productos
tempranos tardiacuteos y ciacuterculos de 2-LTR
Inhibicioacuten de la entrada del virus HIV-GFP (R5-X4)
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+
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Modelo de inhibicioacuten de la replicacioacuten del VIH-1 por hBDs y RNasas
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Ventajas para el desarrollo de agentes toacutepicos
Amplio espectro antirretroviral contra
cepas X4 y R5
Mayor biodisponibilidad al no ser
susceptible a peptidasas hepaacuteticas y
renales
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Anaacutelisis de mecanismos de accioacuten anti-VIH-1 con proteiacutenas recombinantes
Inhibicioacuten de la replicacioacuten viral
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(48h PI)
Inhibicioacuten de la Transcripcioacuten reversa
PCR en tiempo real para productos
tempranos tardiacuteos y ciacuterculos de 2-LTR
Inhibicioacuten de la entrada del virus HIV-GFP (R5-X4)
Infeccioacuten con HIV-GFP Cuantificacioacuten de GFP y p24
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Infeccioacuten 100 pgml p24 polybrene 8ugml 96 pozos2h Incubacioacuten por 3 diacuteas
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Modelo de inhibicioacuten de la replicacioacuten del VIH-1 por hBDs y RNasas
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Ventajas para el desarrollo de agentes toacutepicos
Amplio espectro antirretroviral contra
cepas X4 y R5
Mayor biodisponibilidad al no ser
susceptible a peptidasas hepaacuteticas y
renales
Bajos costos de produccioacuten
Capacidad antibacteriana
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(48h PI)
Inhibicioacuten de la Transcripcioacuten reversa
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Inhibicioacuten de la entrada del virus HIV-GFP (R5-X4)
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Env R5 (HxB2)
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Env VSV-G
HIV-1 YU2
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Liacuteneas celulares
Infeccioacuten 100 pgml p24 polybrene 8ugml 96 pozos2h Incubacioacuten por 3 diacuteas
Infeccioacuten de liacuteneas celulares con virus de una sola ronda de replicacioacuten
HIV-1-GFP+YU2
HIV-1-GFP+HxB2
HIV-1-GFP no Env Neg control
HIV-1-GFP+VSV-G Pos control
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Modelo de inhibicioacuten de la replicacioacuten del VIH-1 por hBDs y RNasas
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Env X4 (YU2)
Env VSV-G
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Liacuteneas celulares
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HIV-1-GFP+HxB2
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Actividad antiviral de defensinas
recombinantes
Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes
Actividad antiviral de RNasas
recombinantes
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Modelo de expresioacuten de factores solubles en mucosa genital
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Modelo de inhibicioacuten de la replicacioacuten del VIH-1 por hBDs y RNasas
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Ventajas para el desarrollo de agentes toacutepicos
Amplio espectro antirretroviral contra
cepas X4 y R5
Mayor biodisponibilidad al no ser
susceptible a peptidasas hepaacuteticas y
renales
Bajos costos de produccioacuten
Capacidad antibacteriana
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Pacientes Individuos HESN
AGRADECIMIENTOS
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Clones de VIH
Ceacutelulas 293T
2 diacuteas
Colectar y filtrar el sobrenadante
ELISA de p24 Precipitacioacuten con PEG concentracioacuten del virus
PEG + VIH 3 diacuteas
Transfeccioacuten
Calcio fosfatos
p24 100-400 pgml
+
+
+
Produccioacuten de virus infecciosos a partir de
clones moleculares
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Liacuteneas celulares
Infeccioacuten 100 pgml p24 polybrene 8ugml 96 pozos2h Incubacioacuten por 3 diacuteas
Infeccioacuten de liacuteneas celulares con virus de una sola ronda de replicacioacuten
HIV-1-GFP+YU2
HIV-1-GFP+HxB2
HIV-1-GFP no Env Neg control
HIV-1-GFP+VSV-G Pos control
U373-MAGI
U3T3-CD4-CCR5-MAGI
CD4
CCR5
U3T3-CD4-CXCR4-MAGI
CXCR4 CD4
HB
D y
RN
asas
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Ventajas para el desarrollo de agentes toacutepicos
Amplio espectro antirretroviral contra
cepas X4 y R5
Mayor biodisponibilidad al no ser
susceptible a peptidasas hepaacuteticas y
renales
Bajos costos de produccioacuten
Capacidad antibacteriana
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