Aislamiento y caracterización de la antocianina principal, presente en la cáscara de maracuyá púrpura, Passiflora edulis Sims,

Passiflorácea, mediante cromatografía en capa fina y espectroscopia ultravioleta

Gloria Betancur HiguitaMarcela Gómez Cano

OBJETIVO GENERALAislar y caracterizar la cianidina-3-glucosido, presente en la cáscara del maracuyá púrpura, Passiflora edulis Sims, mediante cromatografía en capa fina y espectroscopia ultravioleta.

OBJETIVOS ESPECIFICOS

• Utilizar la Marcha Fitoquimica como un medio de identificación de las sustancias presentes en el extracto obtenido de la cascara de maracuyá morada.

• Determinar la actividad antioxidante de los metabolitos presentes en la cascara de maracuyá morada, utilizando el ensayo DPPH (2,2-Difenil-1-picrilhidrazil).

• Determinar el coeficiente de reparto de la Cianidina -3-glucosido.

• Determinar los máximos de absorción de la Cianidina -3-glucosido en el espectro visible.

INTRODUCCIÓNUna marcha Fitoquímica es un conjunto de pruebas de caracterización que consisten en reacciones químicas que producen alguna alteración rápida en la estructura molecular del compuesto, como cambio de color, formación de precipitado o desprendimiento de gas, con las cuales, se logran detectar sustancias presentes en el extracto de una planta. (ver tabla )

El maracuyá pertenece a la familia Passiflorácea, nativa de la América Tropical. Hay más de 400 especies de Passiflora y más 50 de estas especies son comestibles. Sólo los frutos de color púrpura (Passiflora edulis Sims) y de color amarillo (Passiflora edulis Flavicarpia) se cultivan comercialmente.

Según los reportes de la literatura, la cascara de maracuyá morado contiene una mezcla bioflavonoides, ácidos fenólicos y antocianinas.

Las antocianinas presentan actividad antioxidante y se ha demostrado que tienen efectos beneficioso sobre personas que parecen de hipertensión arterial.

El objetivo principal al realizar la practica es identificar la presencia de Cianidina- 3-glucosido siendo esta la antocianina mas abundante (97%) presentes en la cascara de maracuyá morado.

INTRODUCCIÓNMETABOLITO SECUNDARIO

ENSAYO FRACCION UTILIZADA

RESULTADO EXPERIMENTAL

Flavonoides Shinoda FA-FE ++

Compuestos fenólicos

FeCl3 FA-FE ++

Taninos Gelatina-sal FA-FE +-

Alcaloides Mayer y Dragendorff

FC-FE --

Quinonas Borntranger FB --

Leucoantocianidinas

Rosenheim FA, FE ++

Cardiotónicos Kedde FB, FC-FE --

Aminoacidos Ninhidrina FA ++

Saponinas Espuma FA --

Triterpenoides y estroides

Liebermann-Burchard

FB, FC +-

INTRODUCCIÓN

ACTIVIDAD BIOLOGICA

• Se ha demostrado recientemente que la cáscara de maracuyá morada, por su alto contenido de bioflavonoides reduce la hipertensión en ratones viejos lo suficiente como para prevenir la insuficiencia cardíaca

• Las antiocianidinas presentes en la cáscara de la maracuyá morada presentan actividad antioxidante y han demostrado tener efectos beneficioso sobre personas que parecen de hipertensión.

• El extracto cáscara de maracuyá morada no muestra ningún efecto inhibitorio sobre el crecimiento celular, pero reduce la rotura del ADN.

PROCEDIMIENTO Extracción con

Etanol (Reflujo)Filtración en

caliente Rotaevaporación

Redisolver en agua

Filtrado acuoso caliente

Cromatografía en columna (RP),

eluente metanol

Recoger fracción roja

Determinar el espectro 300-600

nmDPPH

METODOLOGIA 25 g de Cascara

de maracuyá seca

Extracción con 150 mL de

Metanol : HCl 25% (9:1)

durante 15 min

Filtrar

Concentrar en Rotaevaporador hasta aprox 2

mL

CCF Fase estacionaria: Sílica

gel 60 Fase móvil: acetato de

etilo: acido fórmico: acido acético: agua

(100:11:11:26)

Raspar fracción con ayuda del

luz UV

Redisolver en Metanol: HCl Filtrar

Determinar el espectro UV 300 -600 nm.

DPPH

REFERENCIA CROMATOGRAFICA

7 cianidina-3-glucosido Rf=0,2-0,4

MAXIMOS DE ABSORCION UV

BIBLIOGRAFIA• Wagner, Hildebert, and Bladt, Sabine. Plant Drug Analysis: a

thin layer Chromatografy Atlas. Springer-Verlag, New York, 2001, pp 282-287

• Díaz, L. Padilla, C. Sepúlveda, C. Identificación del Principal Pigmento Presente en la Cáscara del Maracuyá Púrpura (Passiflora edulis). Información Tecnológica-Vol. 17 N°6-2006, pág.: 75-84

• Kidoy, L. Mette, A, Oyvind, M. Anthocyanins in Fruits of Passiflora edulis and P. suberosa. Journal of food composition and analysis 10, 49–54 (1997)

• Zibadia, S. Reza, F. Satoru, M. Yinrong, L. Ulreichf, J. Watsona, R. Oral administration of purple passion fruit peel extract attenuates blood pressure in female spontaneously hypertensive rats and humans. Nutrition Research 27 (2007) 408–416