Actividad anti-cncer de los extractos y sus compuestos activos obtenidos de productos naturalesJoo Ernesto de CarvalhoRIBECANCERItaja SC - BR26 28/11/2012

Bsqueda de nuevos medicamentos contra el cncerTriage (screening) inicial en cultura de clulas tumorales humanasEstudios de los mecanismos de accinModelos experimentales de cncer en animales de laboratorioEstudios de toxicidadEstudios clnicos

Triage (screening) inicial: lneas celulares de cncer humanoLeucemia (K 562)Pulmn (NCI H460)Mama (MCF 7)Ovario con fenotipo de resistencia a mltiplos frmacos (NCI ADR)Melanoma (UACC 62)Rin (786 0)Colon (HT 29)Ovario(OVCAR 03)Prstata (PCO 3)Glioma (U251)

Triage in vitroInoculacinplacas de 96pocillosAdicin de las muestrasFijacin cidade la placa controle(tiempo cero)Incubacin24 horasIncubacin48 horasRPMI +soro fetal bovino

Doxorrubicina

Holbeck, S.L. Update on NCI in vitro drug screen utilitiesEuropean Journal of Cancer 40 (2004) 785793

UNIVALI/RIBECANCER

Colecta y IdentificacinMaterial vegetalExtracto orgnicoMaterial vegetalExtractohidroalcolicodiclorometanoetanol 70%Teste de actividadanticncer in vitro5-10 mgsegundacolectaFraccionamientode los extractos activos

FraccionamentoDe los extractos activosTeste de actividadanticncer in vitro5-10 mgAislamientoprincpios activosTeste atividadeantiproliferativaIdentificacinprincpios activosEstudios agronmicosy cultivoIdentificacinprincpios activosExtracin y aislamientoen gran cuantidadsntesis

Mecanismode accinTestes en animales de laboratorio0,1 100 gramosFormulacinfarmacuticaToxicologapre-clnicaEstudios clnicosFases I, II, III e IVTestes in vivo

EBD - Pothomorphe umbellata (Piperaceae) - pimientaSacoman et al. Braz. J. Medical Biological Res. 41: 411, 2008

Tumor ascitico de Ehrlich en ratonesInoculacin 0,5 mL 104 celulas del tumor de Ehrlich en el abdomen de ratones ip. viaTratamientos: 40, 110 y 180diaControle negativo: salinaControle positivo: doxorrubicina 5 mg/ kg EBD 100, 200 y 400 mg/ kgPs-inoculacinNumero y fechas de las muertes ANOVA y curva de sobrevida Kaplan-Meiern=10Sacoman et al. Braz. J. Medical Biological Res. 41: 411, 2008

Tumor asctico de Ehrlich: curva de sobrevida

Tumor slido Ehrlich en ratonesLas celulas del tumor de Ehrlich son inoculadas en la pata Evaluacin:medida del volumen de la patapeso relativo del tumoranalises histolgicasaumento de peso de los animales

Pletismometro: determinacin del volumen tumoral

Tumor slido de Ehrlich en ratonesDosis de 30 mg/kg inibicin de crecimiento

Metstasis pulmonar inducida pela linaje B16-F10 (melanoma)

Fibra semipermeable (Hollow-fiber)- Encapsulamiento de la linaje tumoral y incubacin por 24 horasImplante de las fibras en ratones Balb-C, tejido subcutneo dorsal y abdomen

Tratamientos- Sacrificio en el 14. da para evaluacin de la viabilidad celular por MTT

Fibra semipermeable: tejido subcutneo dorsal y abdomen

Hollow-Fiber K. coriacea (Fr7)Hollow-fiber: abdomen

Hollow-Fiber model K. coriacea (Fr7)Hollow-fiber: subcutneo dorsal

Metodologas en desarrolloTumor xenogrficoCitometria de flujo

GraciasJoo Ernesto de CarvalhoDiviso de Farmacologia e ToxicologiaCPQBA Unicampcarvalho@cpqba.unicamp.br

***