aclaramiento

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Aclaramiento en la técnica histológica

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Agentes aclaradores

ACLARAMIENTOEquipo 3Miriam Isabel Guzmn Toms

Para qu sirve?Luego de deshidratar el tejido, el aclaramiento sirve para permitir que el alcohol de los tejidos sea remplazado por un liquido que disuelva la parafina, con la cual el tejido va ser impregnado.

El agente desalcoholizador mas utilizado es el Xileno o Xilol.

Se llama aclaramiento ya que el tejido se torna transparente o claro en el xileno, esto se debe a que cambia su ndice de refraccin.

De la misma manera se coloca la muestra de tejido en un recipiente de Xilol, el Xilol. Un tejido no puede estar mas de 2 horas en un agente aclarante o pasara un endurecimiento y entonces no servir.

Agentes aclaradoresXileno (xilol)Es un excelente y verdadero agente aclararte, pero tiende a hacer que los tejidos sean excesivamente duros y quebradizos.Cuando la deshidratacin no es completa el Xilol toma un aspecto lechoso cuando se le aade el tejido.Es muy baratoTiende al encogimiento de los tejidos.

*NUNCA SE DEBE DEJAR EL TEJIDO MAS DE TRES HORAS*Tolueno (tuluol)Endurece menos los tejido que el xilol.El aclara miento requiere un poco mas de tiempo que con xilol o benceno. El tolueno ocurre en forma natural en el petrleo crudo y en el rbol tol.

Cloroformo Este es excelente para: Tejido nervioso, ganglios linfticos y embriones.Produce poco encogimiento en los tejido y no endrense mucho los tejidos. Es el utilizado en piezas grandes y no es inflamable.Pueden presentarse accidentes de intoxicacin Se evapora rpido en el bao de parafina Es caro

Benceno No se recomienda usarlo por su gran toxicidad acta rpido.Produce poco encogimiento.No endurece demasiado los tejidos Se evapora rpidamente del bao de parafina Es muy inflamable

Aceite de cedro Aclara despus del alcohol de 95 por 100Encoge muy poco los tejidos Es muy penetrante Los tejidos pueden ser dejados en el por tiempos prolongados sin que sufran danos

Esencia de clavo Tiende a hacer los tejidos quebradizos Causa poco encogimientoLa inclusin en parafina es lentaEs cara Al envejecer la esencia se oscurece Esencia de bergamota No extrae los colorantes de anilina Puede ser empleada en preparaciones de celoidina

Esencia de oreganoAclara despus del alcohol de 95 por 100No disuelve la celoidina Es caraSalicilato de metil Es conveniente usarc en tejidos delgadosEvita el efecto endurecedor del alcohol No se mezcla bien con la parafina Se recomienda poner en cloroformo durante una hora despus del aceite Se oxida fcilmente en reposo Es mal deshidratante y resulta destruido por cantidades muy pequeas de agua.Es conveniente para tomar transparentes los fragmento de tejidos, o sea aclarar los especmenes.

Disulfuro de carbono Causa poco encogimiento Tiene mal olor Es muy inflamable

MATERIALES

Para realizar el aclaramiento:

Solucin aclarante

Recipiente

Muestra

Esquema corto (Biopsias y fragmentos pequeos de tejido )>Xileno, dos cambios de 15 minutos cada unoEsquema nocturno(especmenes de rutina en procesador automtico) >Xileno, tres cambios de una hora cada uno Neuropatologa (procesamiento manual)>Xileno, tres cambios de 1 hora cada uno Factores que modifican el aclaramiento.El agente aclarador mas clsico con espectro de accin mas amplio y da mejores resultados es el CLOROFORMO, para tejido nervioso, ganglios linfticos, tejido de granulacin, tejidos fetales y otras muestras ricas en clulas que tienden a deformarse o romperse durante el corte cuando se aclaran con xileno, tolueno o venceno.

La sangre y los tejidos que la contienen, el musculo y el tejido conjuntivo fibroso tienden a volverse muy duros si permanecen mas de tres horas en parafina. En cambio, el tejido nervioso, la piel, el hueso compacto y muestras procedentes de glandulas mamarias (en las cuales quedan muchas secreciones en conductos dilatados). Requieren de mayor tiempo en la parafina.Esto resulta molesto para el trabajo ordinario, a base de tratamiento simultaneo de muchas piezas. Se puede resolver este problema tomando fragmentos menores a 3 mm, y fijndolos cuidadosamente antes de llevarlos al sistema automtico.Otra posibilidad, con mejores resultados, es el empleo de TETRAHIDROFURANO.MECANISMOS ACCIONEl aclaramiento acta remplazando el alcohol por xilol.Pues al momento de haber pasado el tejido por el proceso de deshidratacin como se retira el agua, esos espacios deben de ser rellenados con alguna sustancia que se pueda juntar con la parafina y esa sustancia es el xilol.Este tambin le da una cierta firmeza a el tejido para que al momento de cortar, las clulas no aplasten o modifiquen