Test rápido combinado de antígenos COVID-19 y gripe A+B

(Hisopado nasofaríngeo)Prospecto informativo REF ICIC-525

EspañolLa prueba rápida combinada de antígenos COVID-19 y de gripe A+B es un inmunoensayo cromatográfico rápido para la detección cualitativa de los antígenos del virus del SARS-CoV-2, la gripe A y la gripe B presentes en la nasofaringe humana. Sólo para uso profesional de diagnóstico in vitro. USO PREVISTOEl test rápido combinado de antígenos COVID-19 y gripe A+B (frotis nasofaríngea) es un inmunoensayo cromatográfico rápido para la detección cualitativa de antígenos de los virus del SARS-CoV-2, la gripe A y la gripe B en muestras de hisopados nasofaríngeos de individuos con sospecha de infección por SARS-CoV-2/gripe, junto con la presentación clínica y los resultados de otras pruebas de laboratorio. Los resultados son para la detección de antígenos del SARS-CoV-2 y de la gripe A+B. Por lo general, un antígeno es detectable en las muestras de las vías respiratorias superiores durante la fase aguda de la infección. Los resultados positivos indican la presencia de antígenos virales, pero la correlación clínica con el historial clínico del paciente y otra información diagnóstica es necesaria para determinar el estado de la infección. Los resultados positivos no descartan una infección bacteriana o una coinfección con otros virus. El agente detectado puede no ser la causa exacta de la enfermedad. Los resultados negativos no excluyen la infección por SARS-CoV-2/ Gripe A+B y no deben utilizarse como único criterio para el tratamiento o las decisiones de gestión del paciente. Los resultados negativos deben tratarse como presuntos y confirmarse con un ensayo molecular, si es necesario para el tratamiento del paciente. Los resultados negativos deben considerarse en el contexto de las exposiciones recientes del paciente, antecedentes y la presencia de signos y síntomas clínicos coherentes con COVID-19/ Gripe A+B. El test rápido combinado de antígenos COVID-19 y gripe A+B es para uso exclusivo de personal de laboratorio clínico capacitado. RESUMENLos nuevos coronavirus pertenecen al género β. COVID-19 es una enfermedad infecciosa respiratoria aguda. Las personas son generalmente susceptibles a contraer la enfermedad. Actualmente, los pacientes infectados por el nuevo coronavirus son la principal fuente de infección; las personas infectadas asintomáticas también pueden ser una fuente infecciosa. Las principales manifestaciones incluyen fiebre, fatiga y tos seca. Según la investigación epidemiológica actual, el período de incubación es de 1 a 14 días, en su mayoría de 3 a 7 días. En unos pocos casos se observa congestión nasal , secreción nasal , dolor de garganta, mialgia y diarrea.La gripe (también conocida como "influenza") es una infección viral aguda altamente contagiosa del tracto respiratorio. Es una enfermedad contagiosa que se transmite fácilmente a través de la tos y los estornudos de gotas de aerosol que contienen virus vivos1 . Los virus de tipo A suelen tener una mayor prevalencia que los de tipo B y están asociados a las epidemias de gripe más graves, mientras que las infecciones de tipo B suelen ser más leves. El patrón de oro del diagnóstico de laboratorio es el cultivo celular de 14 días de duración con una de las diversas líneas celulares que pueden favorecer el crecimiento del virus de la gripe2. El cultivo celular tiene una utilidad clínica limitada, ya que los resultados se obtienen demasiado tarde en el curso clínico para una intervención eficaz en el paciente. La reacción en cadena de la polimerasa de transcriptasa inversa (RT-PCR) es un método más reciente que, por lo general, es más sensible que el cultivo, con tasas de detección mejoradas con respecto al cultivo del 2 al 23%3

. Sin embargo, la RT-PCR es cara, compleja y debe realizarse en laboratorios especializados.PRINCIPIO El test rápido de antígenos COVID-19 (hisopado nasofaríngeo) es un inmunoensayo cualitativo basado en membrana para la detección de antígenos del SARS-CoV-2 en una muestra de frotis nasofaríngeo humano. El anticuerpo del SARS-CoV-2 se recubre en la región de la línea de prueba. Durante la prueba, el espécimen reacciona con las partículas recubiertas de anticuerpos del SARS-CoV-2 en la prueba. La mezcla entonces migra hacia arriba en la membrana por acción capilar y reacciona con el anticuerpo SARS-CoV-2 en la región de la línea de prueba. Si el espécimen contiene antígenos de SARS-CoV-2, aparecerá una línea de color en la región de la línea de prueba. Si la muestra no contiene antígenos del SARS-CoV-2, no aparecerá ninguna línea de color en la región de la línea de prueba, lo cual indica un resultado negativo. Como control de procedimiento, siempre aparecerá una línea de color en la región de la línea de control, indicando que se ha añadido el volumen adecuado de la muestra y que se ha humedecido correctamente la membrana. El test rápido de la gripe A+B (hisopado nasofaríngeo) es un inmunoensayo cualitativo de flujo lateral para la detección del antígeno de la gripe A y la gripe B en una muestra de frotis nasofaríngeo humano. En esta prueba, el anticuerpo específico de la Gripe A y la Gripe B se recubre por separado en las regiones de la línea de prueba de la prueba. Durante la prueba, el espécimen extraído reacciona con el anticuerpo de la Gripe A y/o Gripe B que se recubre en partículas. La mezcla migra hacia arriba de la membrana para reaccionar con el anticuerpo de la Gripe A y/o Gripe B y genera una o dos líneas de color en las regiones de la prueba. La presencia de esta línea de color en una o ambas regiones de prueba indica un resultado positivo. Como control de procedimiento, siempre aparecerá una línea de color en la región de control si la prueba ha sido realizada correctamente.

REACTIVOS

La prueba contiene anti-SARS-COV-2, anti-influenza A y anti-influenza B como reactivo de captura, anti-SARS-COV-2, anti-influenza A y anti-influenza B como reactivo de detección. PRECAUCIONES

1. Este prospecto debe ser leído completamente antes de realizar la prueba. Si no se siguen las instrucciones del prospecto, los resultados de la prueba pueden ser inexactos.

2. Sólo para uso profesional de diagnóstico in vitro. No utilizar después de la fecha de caducidad.3. No coma, beba ni fume en la zona donde se manipulan los especímenes o los kits.4. No utilice la prueba si la bolsa está dañada.5. Maneje todos los especímenes como si contuvieran agentes infecciosos. Siga las precauciones establecidas

contra los peligros microbiológicos durante toda la recolección, manipulación, almacenamiento y eliminación de las muestras de los pacientes y el contenido del kit usado.

6. Use ropa protectora como batas de laboratorio, guantes desechables y protección ocular cuando se analicen los especímenes.

7. Los medios de transporte víricos (VTM) pueden afectar al resultado de la prueba, no almacene las muestras en los medios de transporte víricos; las muestras extraídas para las pruebas de PCR no pueden utilizarse para la prueba.

8. Lávese bien las manos después de manipular la muestra.9. Por favor, asegúrese de utilizar una cantidad apropiada de muestras para las pruebas. Un tamaño de

muestra demasiado grande o demasiado pequeño puede provocar una desviación de los resultados.10.La prueba utilizada debe ser descartada de acuerdo con las normativas locales.11.La humedad y la temperatura pueden afectar negativamente los resultados.

ALMACENAMIENTO Y ESTABILIDAD

Almacenar en su envase con la bolsa sellada a temperatura ambiente o refrigerado (2-30°C). La prueba es estable hasta la fecha de caducidad impresa en la bolsa sellada. La prueba debe permanecer en la bolsa sellada hasta su uso. NO CONGELAR. No utilizar pasada la fecha de caducidad.

RECOLECCIÓN, TRANSPORTE Y ALMACENAMIENTO DE MUESTRAS

Recolección de muestras1. Inserte un hisopo estéril en la fosa nasal del paciente, alcanzando la superficie de la nasofaringe posterior.2. Tome una muestra de la superficie de la nasofaringe posterior.3. Retire el hisopo estéril de la cavidad nasal.

Transporte y almacenamiento de muestras Las muestras deben ser analizadas tan pronto como sea posible después de la recolección. Si los hisopados no se procesan inmediatamente, se recomienda encarecidamente que la muestra de frotis se coloque en un tubo de plástico seco, estéril y herméticamente cerrado para su almacenamiento. La muestra de frotis en estado seco y estéril es estable hasta 8 horas a temperatura ambiente y 24 horas a 2-8°C. No almacene las muestras en medios de transporte víricos.

PREPARACIÓN DE MUESTRAS

Para la preparación de las muestras utilizar sólo el tampón de extracción y los tubos suministrados en el kit.Por favor, consulte la ficha de procedimiento para obtener información detallada de la extracción de muestras.

1. Coloque la muestra del hisopado en el tubo de extracción con tampón de extracción (aprox. 350μl). Gire el hisopo durante aproximadamente 10 segundos mientras presiona el cabezal del hisopo contra el interior del tubo para liberar el antígeno del hisopo.

2. Retire el hisopo presionando el cabezal contra el interior del tubo de extracción para extraer tanto líquido como sea posible. Deseche el hisopo de acuerdo con su protocolo de gestión de residuos de riesgo biológico.

*

MATERIALES

• Casetes de prueba Hisopos estériles • Prospecto informativo • Solución tampón• Tubos y puntas de extracción (opcional) •Estación de trabajo

Materiales requeridos no suministrados •Cronómetro

INSTRUCCIONES DE USO Deje que el test, el espécimen extraído y/o los controles alcancen la temperatura ambiente (15-30°C) antes de realizar la prueba.

1. Retire el cassette de prueba de la bolsa de aluminio sellada y utilícelo dentro de una hora. Los mejores resultados se obtendrán si la prueba se realiza inmediatamente después de abrir la bolsa de aluminio.

2. Invierta el tubo de extracción y añada 3 gotas de la muestra extraída (aprox. 100μl) a cada uno de los pozos de especímenes y luego ponga en marcha el temporizador.

3. Espera a que aparezca(n) la(s) línea(s) de color. Lea el resultado a los 15 minutos. No interprete el resultado después de 20 minutos.

INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOS

(Por favor, consulte la ilustración anterior) POSITIVO COVID-19:* Dos líneas de color distintas aparecen en la ventana izquierda. Una línea de color debe estar en la región de control (C) y otra línea de color debe estar en la región de prueba (T). Un resultado positivo en la región de prueba indica la detección de antígenos COVID-19 en la muestra. POSITIVO Gripe A:* Dos líneas de color distintas aparecen en la ventana derecha. Una línea de color debe estar en la región de control (C) y otra línea de color debe estar en la región de la Gripe A (A). Un resultado positivo en la región de la gripe A indica que se detectó el antígeno de la gripe A en la muestra. POSITIVO Gripe B:* Dos líneas de color distintas aparecen en la ventana derecha. Una línea de color debe estar en la región de control (C) y otra línea de color debe estar en la región de la Gripe B (B). Un resultado positivo en la región de la gripe B indica que se detectó el antígeno de la gripe B en la muestra. POSITIVO Gripe A + Gripe B:* Tres líneas de color distintas aparecen en la ventana derecha. Una línea de color debe estar en la región de control (C) y dos líneas de color deben estar en la región de la Gripe A (A) y la región de la Gripe B (B). Un resultado positivo en la región de la gripe A y la región de la gripe B indica que se detectó el antígeno de la gripe A y el antígeno de la gripe B en la muestra. *NOTA: La intensidad del color en la región de la línea de prueba (T) variará en función de la cantidad de

antígenos COVID-19, antígenos de la gripe A y/o B presentes en la muestra. Así que cualquier tonalidad de color en la región de prueba (T/B/A) debe considerarse positivo.

•

Positivo

Negativo

No válido No válido

Negativo

Positivo

3 gotas de muestra extraída

NOTA: El almacenamiento de la muestra después de la extracción es estable durante 2 horas a temperatura ambiente o 24 horas a 2-8°C.

Materiales suministrados

• Ficha de procedimiento

NEGATIVO: Una línea de color aparece en la región de control (C). No aparece ninguna línea de color aparente en la región de la línea de prueba (T/B/A).NO VÁLIDO: La línea de control no aparece. Un volumen insuficiente de las muestras o técnicas de procedimiento incorrectas son las razones más probables del fallo de la línea de control. Revise el procedimiento y repita la prueba con un nuevo cassette de prueba. Si el problema persiste, deje de utilizar el kit de prueba inmediatamente y póngase en contacto con su distribuidor local.

CONTROL DE CALIDAD Control de calidad interno

Controles de procedimiento interno están incluidos en el kit. Una línea de color que aparece en la región de control (C) es un control de procedimiento interno positivo. Confirma el volumen suficiente de la muestra y una técnica de procedimiento correcta. Un fondo claro es un control interno de procedimiento negativo. Si la prueba se realiza correctamente, el fondo de la zona de resultados debe ser de color blanco a rosa claro y no debe interferir con la capacidad de leer el resultado de la prueba.

Control de calidad externoControles externos no están incluidos en este kit. Sin embargo, en cumplimiento de las Buenas Prácticas de Laboratorio se recomienda realizar controles positivos/negativos.4

LIMITACIONES 1. El procedimiento y la interpretación del resultado del test deben seguirse de cerca cuando se compruebe

la presencia de antígenos del SARS-CoV-2/Influenza A/Influenza B en muestras nasofaríngeas de individuos sospechosos. Para que la prueba tenga un rendimiento óptimo, es fundamental que la toma de muestras se realice correctamente. Si no se sigue el procedimiento, los resultados pueden ser inexactos.

2. El rendimiento del test rápido de antígenos de COVID-19 y de la gripe A+B (frotis nasofaríngeo) se evaluó utilizando únicamente los procedimientos indicados en el presente prospecto. Las modificaciones de estos procedimientos pueden alterar el rendimiento del test. Las muestras de medios de transporte vírico (VTM) y las muestras extraídas para pruebas de PCR no pueden utilizarse para este test.

3. El test rápido de antígenos COVID-19 y gripe A+B (frotis nasofaríngeo) es sólo para uso de diagnóstico in vitro. Esta prueba debe utilizarse para la detección de los antígenos del SARS-CoV-2/Influenza A/Influenza B en muestras nasofaríngeas humanas como ayuda en el diagnóstico de pacientes con sospecha de infección por SARS-CoV-2, Influenza A o Influenza B junto con el historial clínico y los resultados de otras pruebas de laboratorio. Esta prueba cualitativa no permite determinar el valor cuantitativo ni la tasa de aumento de la concentración de antígenos del SARS-CoV-2/Influenza A/Influenza B.

4. El test rápido combinado de antígenos COVID-19 y gripe A+B (hisopado nasofaríngeo) sólo indicará la presencia de antígenos del SARS-CoV-2/Influenza A/Influenza B en la muestra y no deben utilizarse como único criterio para el diagnóstico de infecciones por SARS-CoV-2/Influenza A/Influenza B.

5. Los resultados obtenidos con el test deben sopesarse junto con otros resultados de pruebas de laboratorio y exámenes clínicos.

6. Si el resultado del test es negativo o no reactivo y los síntomas clínicos persisten se recomienda volver a tomar una muestra del paciente unos días después y hacer un nuevo test o una prueba con un dispositivo de diagnóstico molecular para descartar una infección en estos individuos.

7. El test mostrará resultados negativos si la concentración de antígenos del nuevo coronavirus, el virus de la gripe A o de la gripe B en la muestra es inferior al límite mínimo de detección de la prueba.

8. Los resultados negativos no descartan una infección por SARS-CoV-2,sobre todo en pacientes que han estado en contacto con el virus. Se debe considerar la posibilidad de realizar pruebas de seguimiento con un diagnóstico molecular para descartar una infección en estos individuos.

9. Un resultado negativo para Gripe A o Gripe B obtenido con este kit debe ser confirmado por cultivo/RT-PCR.

10. El exceso de sangre o mucosidad en la muestra del hisopo puede interferir en la realización de la prueba y puede dar un resultado positivo falso.

11. La precisión de la prueba depende de la calidad de la muestra del frotis. Los falsos negativos pueden ser el resultado de una recolección o almacenamiento inadecuado de la muestra.

12. Los resultados positivos de COVID-19 pueden deberse a la infección con cepas de coronavirus que no son de SARS-CoV-2 o a otros factores de interferencia. Un resultado positivo para la gripe A y/o B no excluye una coinfección subyacente con otro patógeno, por lo que debe considerarse la posibilidad de una infección bacteriana subyacente.

VALORES PREVISTOS El test rápido de antígenos COVID-19 y gripe A+B (hisopado nasofaríngeo) se ha comparado con las principales pruebas comerciales de RT-PCR. La correlación entre estos dos sistemas no es inferior al 98%.CARACTERÍSTICAS DE RENDIMIENTO

Sensibilidad, especificidad y precisión El test rápido combinado de antígenos COVID-19 y gripe A+B (hisopado nasofaríngeo) se ha evaluado con muestras obtenidas de los pacientes. El test RT-PCR se utilizó como método de referencia para el test rápido combinado de antígenos COVID-19 y gripe A+B (hisopado nasofaríngeo). Las muestras se consideraron positivas si el RT-PCR indicaba un resultado positivo. Las muestras se consideraron negativas si el RT-PCR indicaba un resultado negativo.

Pruebas de especificidad con varias cepas viralesEl test rápido de antígenos COVID-19 y gripe A+B se analizó con las siguientes cepas virales. No se observó ninguna línea discernible en ninguna de las regiones de la línea de prueba a estas concentraciones indicadas: Test COVID-19:

Descripción Nivel de prueba Adenovirus tipo 3 3.16 x 104 TCID50/ml

Adenovirus tipo 7 1.58 x 105 TCID50/ml

Coronavirus humano OC43 2.45 x 106 LD50/ml

Influenza A H1N1 3.16 x 105 TCID50/ml

Influenza A H3N2 1 x 105 TCID50/ml

Influenza B 3.16 x 106 TCID50/ml

Rinovirus humano 2 2.81 x 104 TCID50/ml

Rinovirus humano 14 1.58 x 106 TCID50/ml

Rinovirus humano 16 8.89 x 106 TCID50/ml Sarampión 1.58 x 104 TCID50/ml Parotiditis 1.58 x 104 TCID50/ml

Virus de parainfluenza 2 1.58 x 107 TCID50/ml

Virus de parainfluenza 3 1.58 x 108 TCID50/ml

Virus sincitial respiratorio 8.89 x 104 TCID50/ml

Test influenza A+B:

Descripción Nivel de pruebaAdenovirus tipo 3 3.16 x 104 TCID50/ml

Adenovirus tipo 7 1.58 x 105 TCID50/ml

Coronavirus humano OC43 2.45 x 106 LD50/ml

Rinovirus humano 2 2.81 x 104 TCID50/ml

Rinovirus humano 14 1.58 x 106 TCID50/ml

Rinovirus humano 16 8.89 x 106 TCID50/ml

Sarampión 1.58 x 104 TCID50/ml

Parotiditis 1.58 x 104 TCID50/ml

Virus de parainfluenza 2 1.58 x 107 TCID50/ml

Virus de parainfluenza 3 1.58 x 108 TCID50/ml

Virus sincitial respiratorio 8.89 x 104 TCID50/ml

TCID50 = Dosis Infecciosa de Cultivo de Tejidos (Tissue Culture Infectious Dose). Es la dilución del virus que bajo las condiciones del ensayo se puede esperar que infecte al 50% de los vasos de cultivo inoculados. LD50 = Dosis letal (Letal Dosis). Es la dilución del virus que bajo las condiciones del ensayo se puede esperar que mate al 50% de los ratones lactantes inoculados.

Precisión Intra e Inter-EnsayoLa precisión dentro de una misma serie y entre distintas series se ha determinado utilizando siete muestras de COVID-19 y el control estándar de la Gripe A/B. Tres lotes diferentes del test rápido de antígenos COVID-19 y de la gripe A+B (frotis nasofaríngeo) han sido analizados usando un resultado negativo, antígeno SARS-COV-2 débil, antígeno SARS-COV-2 fuerte, gripe A débil, gripe B débil, gripe A fuerte y gripe B fuerte. Diez réplicas de cada nivel fueron probadas cada día durante 3 días consecutivos. Los especímenes fueron identificados correctamente >99% del tiempo.

Reactividad cruzada Los siguientes agentes fueron probados a 1.0x108 org/ml y todos resultaron negativos cuando se analizaron con el test rápido combinado de antígenos COVID-19 y Gripe A+B (hisopado nasofaríngeo):

Arcanobacterium Pseudomonas aeruginosa

Candida albicans Staphylococcus aureus subspaureus

Corynebacterium Staphylococcus epidermidis

Escherichia coli Streptococcus pneumoniae

Moraxella catarrhalis Streptococcus pygenes

Neisseria lactamica Streptococcus salivarius

Nesseria subllava Streptococcus sp group F

BIBLIOGRAFÍA

1. Williams, KM, Jackson MA, Hamilton M. (2002) Rapid Diagnostic Testing for URIs in Children; Impact onPhysician Decision Making and Cost. Infec. Med. 19(3): 109-111.

2. Betts, R.F. 1995. Influenza virus, p. 1546-1567. In G.L. Mandell, R.G. Douglas, Jr. and J.E. Bennett (ed.), Principle and practice of infectious diseases, 4th ed. Churchill Livingstone, Inc., New York, N.Y.

3. WHO recommendations on the use of rapid testing for influenza diagnosis, World Health Organisation, July2005.

4. Westgard JO, Barry PL,Hunt MR, Groth T. A multi-rule Shewhart for quality control in clinical chemistry,Clinical Chemistry 1981;27:493-501

Sólo para uso de diagnóstico in vitro

Almacenar entre 2-30°C

No utilizar si el envase está dañado

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Nro. catálogo

Test por kit

Fecha de caducidad

Nro. Lote

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No reutilizar

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Fabricante

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#550, Yinhai Street,

Hangzhou Economic & Technological Development Area,

Hangzhou, Zhejiang, 310018, P.R. China

Web: www.alltests.com.cn Email: info@alltests.com.cn

Lotus NL B.V.

Koningin Julianaplein 10, 1e

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Número:

Fecha de vigencia:146309802

2020-10-09

Test COVID-19:

Test rápido combinado de antígenos COVID-19 y gripe A+B

RT-PCR Total

Positivo Negativo

Antígeno COVID-19Positivo 80 1 81

Negativo 3 120 123

Total 83 121 204

Sensibilidad relativa 96,4% (95%CI*: 89,8%~99,2%)

Especificidad relativa 99,2% (95%CI*: 95,5%~99,9%)

Precisión 98,0% (95%CI*: 95,1%~99,5%)

*Intervalos de confianza

Test Influenza A+B:

Test rápido combinado de antígenos COVID-19 y gripe

A+B

Tipo A Tipo B

RT-PCR Total

RT-PCR Total

Positivo Negativo Positivo Negativo

Gripe A+B Positivo 38 2 40 39 2 41

Negativo 2 215 217 3 213 216

Total 40 217 257 42 215 257

Sensibilidad relativa 95,0% (95%CI*: 82,6%-99,5%) 92,9% (95%CI*: 80,3%-98,2%)

Especificidad relativa 99,1% (95%CI*: 96,5%-99,9%) 99,1% (95%CI*: 96,5%-99,9%)

Precisión 98,4% (95%CI*: 95,9%-99,5%) 98,1% (95%CI*: 95,4%-99,3%)

*Intervalos de confianza

Tabla de símbolos

1463098042020-11-061463098042020-11-06