2.biosintesís de metabolitos primarios y secundarios.2015

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Metabolitos primarios y secundarios, descripcion general

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  • Biosintess de

    Metabolitos Primarios

    y Secundarios

    Dra. Sully Cruz V.

    Fitoqumica

  • Biognesis y Biosntesis

    Biognesis: Sntesis de cualquier sustancia,

    sin importar si se requiere o no energa.

    Biosntesis: Lo reservan para definir la

    produccin de molculas mediante un

    proceso endoergnico.

  • Importancia del estudio de

    los procesos biosintticos

    Quimiotaxonoma

    Determinacin de estructuras orgnicas.

    El estudio de mecanismos de reacciones

    orgnicas.

    Cultivo de tejidos y rganos para producir

    metabolitos en gran escala.

    Elaborar productos naturales a partir de los

    intermediarios.

    Sntesis de frmacos.

  • Enzimas

    Muchas reacciones que tienen lugar

    en la clula son enzimo-dependientes.

    Catalizadores orgnicos.

    Suelen actuar slo sobre una

    sustancia o clase de sustancias, ya que es especfica para un grupo o enlace determinado.

    Influyen en la velocidad de una reaccin sin cambiar el punto de equilibrio.

    Lipasa cataliza la sntesis e hidrlisis de los glicridos formados por el glicerol y cidos grasos.

    -glucosidasa (prunasa) sntesis e hidrlisis de -glucsidos.

    En las plantas, estas reacciones son reversibles, segn las diferentes condiciones que dan lugar a variaciones diarias y estacionales de la acumulacin de metabolitos.

  • Enzimas Son de naturaleza coloidal, se componen de

    protena.

    Son solubles en agua como en soluciones salinas diluidas y precipitan por el alcohol o la acetona.

    Son inactivadas mediante calor, luz UV y rayos X.

    Son biocatalizadores (qumica analtico o clnica) o para efectuar transformaciones qumicas especficas.

    La actividad se ve afectada por la reaccin del medio y la presencia de sustancias (sales).

    Sus pesos moleculares son elevados.

    Pueden inactivarse la parte proteica purificada (apoenzima).

  • Coenzimas

    Molculas orgnicas constituidas por

    steres del cido fosfrico y diversos nuclesidos.

    Sirven para transportar energa en forma de enlaces fosfato de alta energa.

    ATP (adenosin trifosfato) y ADP aporta energa.

    NAD y NADP intervienen en los sistemas de oxidoreduccin con enzimas apropiadas.

    CoA (coenzima A) participa en el transporte de grupos acetilo y acilo.

    Acetil-CoA desempea un papel central en el metabolismo vegetal y animal.

  • Clasificacin de las enzimas

    Oxidoreductasas (sustancias fenlicas quinonas)

    Transferasas

    Hidrolasas (hidrlisis de steres, glicridos)

    Liasas

    Isomerasas

    Ligasas (Sintetasas)

  • Enzimas ms importantes

    Aminocido-descarboxilasas:

    Acido glutmico Acido gama-amino

    butrico

    cido glutmico

    descarboxilasa

  • Amino-transferasas:

    H

    R- C-COOH Aminotransferasa R-CO-COOH + NH3

    NH2

    Las aminotransferasas o transaminasas

    son un conjunto de enzimas del grupo de

    las transferasas, pues transfieren grupos

    amino desde un metabolito a otro,

    generalmente aminocidos

  • Metil-transferasas:

    Metil-transferasa Acido nicotnico Trigonelina

    COOH -COOH

    N N-CH3

  • Hidroxilasas aromticas:

    Fenilalanina-hidroxilasa

    Fenilalanina Tirosina

  • Estearasas:

    Estearasa

    Tropina + Ac. Trpico Atropina + H2O

  • Fotosntesis Proceso de conversin de la energa luminosa

    solar en energa qumica. La energa qumica as obtenida hace posible la sntesis de las molculas orgnicas. Proceso de xido-reduccin.

    El dixido de carbono es convertido en azcares por las plantas verdes.

    CO2 + H2O (CH2O) + O2 Tiene lugar en los cloroplastos.

    Produccin de ATP a partir de ADP y fosfato y descomposicin de agua por la energa de la luz.

    Se distinguen dos fases:

    La fase lumnica.

    La fase oscura.

  • Metabolismo Vegetal

    En los organismos vivos los compuestos qumicos son sintetizados y degradados por una serie de reacciones qumicas, muchas de ellas mediadas por un enzima.

    Ese proceso es conocido colectivamente como metabolismo, e incluye el catabolismo (degradacin) y el anabolismo (biosntesis).

    Tipos:

    Primario y Secundario

  • Metabolismo Primario

    El metabolismo primario conjunto de aquellas vas de sntesis y de utilizacin de los compuestos esenciales para la supervivencia y el desarrollo correcto de los organismos, que son denominados metabolitos primarios.

    Todos los organismos poseen caminos metablicos similares con los que sintetizan y utilizan para ello un cierto nmero de sustancias qumicas: azcares, aminocidos, cidos grasos comunes, nucletidos y los polmeros derivados de ellos (polisacridos, protenas, lpidos, ARN, ADN, etctera).

  • Metabolismo Primario

    El metabolismo primario comprende los procesos qumicos que cada planta debe realizar cada da para sobrevivir y reproducirse

    Fotosntesis

    Gliclisis

    Ciclo del cido ctrico

    Sntesis de aminocidos

    Transaminacin

    Sntesis de protenas y enzimas

    Sntesis de coenzimas

    Sntesis de materiales estructurales

    Duplicacin de material gentico

    Reproduccin celular (crecimiento)

    Absorcin de nutrientes

  • Metabolismo Secundario Los metabolitos secundarios y las vas para su

    sntesis y utilizacin constituyen el metabolismo secundario.

    Esas rutas metablicas son debidas a la informacin gentica especfica del organismo, en mayor grado que las rutas del metabolismo primario.

    Son activadas durante estados particulares del crecimiento o durante perodos de condiciones adversas (dficit hdrico y nutricional, ataque, etctera).

    Aunque entre esos organismos se encuentran bacterias, hongos, levaduras y animales, los vegetales son los organismos con mayor actividad y riqueza de metabolismo secundario.

  • Metabolitos Secundarios

    No son esenciales para la clula vegetal.

    Su deteccin contribuye a efectuar

    caracterizaciones quimio-taxonmicas.

    Ej: alcaloides, glicsidos, aceites

    esenciales, resinas, taninos, esteroides,

    saponinas. Aminocidos escasos en el

    reino vegetal y que no forman

    protenas: cido pipeclico,

    hipoglicinas, cido stizoblico, beta-

    urasil-3-alanina.

  • Factores que afectan produccin

    de metabolitos secundarios:

    Factores extrnsecos:

    Clima y temperatura.

    Agua de lluvia y humedad

    atmosfrica.

    Condiciones del suelo: condiciones

    fsicas: tamao de las partculas,

    humedad y temperatura.

    Condiciones qumicas: pH, iones.

    Condiciones microbiolgicas.

  • Factores que afectan

    produccin de metabolitos

    secundarios:

    Factores intrnsecos:

    Genticos.

  • Metabolismo Primario y Secundario

  • Clasificacin

    Los productos naturales de origen vegetal se

    clasifican en grandes categoras qumicas:

    Glcidos.

    Lpidos.

    Aminocidos, aminas y protenas.

    Compuestos fenlicos.

    Terpenoides (isoprenoides).

    Alcaloides.

  • Glcidos

    Los componentes glucdicos del reino vegetal son muy diversos y son los ms abundantes.

    La celulosa es el compuesto orgnico ms sintetizado.

    Los glcidos pueden ser:

    Monosacridos.

    Oligosacridos.

    Polisacridos.

    Hetersidos.

  • Acido orselinico

    fenilpirona Antrona

  • Polictidos

    Est presente en bacterias, hongos y en

    plantas.

    Sirve nicamente para la produccin de

    metabolitos secundarios.

    arte del malonil-CoA que forma el primer

    paso en la sntesis de cidos grasos.

    Ejemplos:

    Griseofulvina (antibitico producido por Penicillium griseofulvum)

    Aflatoxinas (toxinas producidas por Aspergillus flavus y por A. parasiticus)

    Ocratoxinas (toxinas producidas por algunos tipos de Aspergillus y de

    Penicillium)

    Lovastatina (producida por A. terreus).

  • Terpenos (Terpenoides)

    Se inician a partir del Acetil-CoA.

    Produce tanto metabolitos primarios

    (carotenos, esteroles) como secundarios.

    Ejemplos:

    Ciertos carotenos.

    Toxinas como la toxina T2 y los tricotecenos (producidos por alguna especie

    de Fusarium).

  • Terpenos (Terpenoides)

    Grupo de compuestos lipdicos diverso y

    numeroso:

    formado por alrededor de 30,000 compuestos

    insolubles a parcialmente miscibles en agua

    son biosintetizados a partir del acetil-CoA o intermediarios de la gliclisis

    Compuestos derivados de la unin de unidades isopreno de 5-carbonos (C5H8)

    los terpenos se conocen tambin como isoprenos o isoprenoides

    Tambin se conocen como terpenoides si se encuentran presentes otros elementos (especialmente oxigeno)

  • Terpenos (Terpenoides)

    Ruta del cido mevalnico: 3 molculas de acetil-

    CoA se unen para formar cido mevalnico

    El cido mevalnico es un intermediario de 6-

    carbonos -fosforilado con 2 grupos fosfato

    (pirofosfato) -descarboxilado y deshidratado para

    producir isopentenil pirofosfato (isopentenil

    difosfato) - IPP

    Ruta independiente del mevalonato: utiliza

    intermediarios de la gliclisis para sintetizar IPP

  • Biosntesis de terpenos

    La biosntesis de los terpenos depende de

    un nmero variable de condensaciones

    consecutivas de los dos monmeros

    activos

  • La principal funcin de los esteroles

    en plantas es formar parte de las

    membranas y determinar su

    viscosidad y su estabilidad.

    Algunos esteroles tienen funciones

    protectoras frente a insectos como en

    el caso de la ecdisona aislada del

    helecho comn

  • cidos grasos y derivados

    cidos grasos: cidos monocarboxlicos

    de cadena carbonada lineal, de nmero

    par de tomos de C. Saturados e

    Insaturados.

    Metabolitos derivados de los cidos

    grasos naturales: Triglicridos,

    Poliacetilenos, Eicosanoides.

  • Sntesis de cidos grasos

  • Compuestos Fenlicos

    El elevado nmero de compuestos fenlicos puede formarse gracias a una biosntesis muy compleja, pero perfectamente regulada.

    Se conocen tres vas que pueden llevar a la formacin de compuestos aromticos:

    Acetato-mevalonato: puede producir anillos aromticos con grupos hidroxilo en algunos casos, pero los compuestos formados son terpenos.

    Acetato-malonato: produce el anillo A de los flavonoides.

    cido shiqumico: es la va principal de formacin de compuestos fenlicos.

  • Sntesis de Fenoles: Va del

    Acetato-Malonato

    En algunas plantas el ciclo bencnico se forma

    mediante la ciclacin de cadenas policetnicas.

    stas se forman por condensacin de grupos acetato

    que proceden del cido malnico.

    La condensacin de tres molculas de malonil CoA

    se produce mediante una descarboxilacin

    simultnea, con lo cual se forma el anillo bencnico.

    A partir del cual se puede formar el anillo A de los

    flavonoides o el 6-metil-salcilico, importantsmo

    como seal sistmica de defensa de la planta.

  • Sntesis de Fenoles: Va del

    cido Shiqumico

    El cido trans-cinmico es precursor de las cumarinas y furocumarinas.

    El cido p-cumrico es precursor de: lignanos y ligninas.

    El cido dihidroxi-shiqumico, precursor inmediato del cido shiqumico forma compuestos fenol-carboxlicos (C6-C1).

    El cido dihidroxiqunico, segundo precursor inmediato del cido shiqumico, (se mantiene en equilibrio con el cido qunico) se une el cido protocatquico (un fenol-carboxlico) cido glico.

    El cido glico y sus derivados constituyen los taninos hidrolizables por esterificacin con monosacridos.

  • Sntesis de Fenoles: Origen

    Mixto

    Generalmente, los fenoles se forman mediante la incorporacin de uno, dos o tres residuos acetatos (procedentes cada uno de ellos de un malonil CoA) a un cido cinmico (o a alguno de sus derivados).

    Esta cadena lateral as formada, con frecuencia sufre una ciclacin, con lo cual se obtienen muy diversos compuestos qumicos.

    Un grupo lo constituyen los derivados estilbnicos. Algunos se comportan como fitoalexinas, sustancias de defensa vegetal, con actividad antifngica y antibacteriana.

  • Sntesis de Fenoles: Origen

    Mixto El grupo ms numeroso e importante lo constituyen los

    flavonoides, que presentan dos anillos (A y B) unidos por

    una cadena de tres tomos de carbono

    Con frecuencia entre ambos anillos (A y B) se sita un

    heterociclo que, en parte, es responsable de la gran

    diversidad de flavonoides identificados en el reino vegetal.

    Suelen encontrarse en forma de O-hetersidos, aunque

    tambin hay C-hetersidos.

  • Sntesis de Fenoles El ncleo de chalcona es el precursor de todos los

    flavonoides.

    Este ncleo se forma en los cloroplastos, a partir de cinamoil-CoA, que procede del retculo endoplasmtico.

    Los grupos acetato proceden de tres malonil-CoA.

    La chalcona sintetasa (eliminndose tres molculas de CoA y tres CO2) incorpora una cadena poliacetilnica, formndose la chalcona

  • Sntesis de Fenoles

    A partir de las chalconas se forman, por reacciones catalizadas mediante enzimas especficos, los distintos grupos y compuestos de flavonoides y afines

  • La ruta del cido malnico es una fuente importante

    de fenoles en hongos y bacterias, pero es poco

    empleada en plantas superiores.

    La ruta del cido siqumico es responsable de la

    biosntesis de la mayora de los compuestos fenlicos

    de plantas. Esta ruta est presente en plantas, hongos

    y bacterias, pero no en animales.

    La fenilalanina y el triptfano se encuentran entre

    los aminocidos esenciales para los animales que

    se incorporan en la dieta.

    La tirosina no es esencial en el sentido de que los

    animales pueden sintetizarla por hidroxilacin de

    fenilalanina.

  • Biosntesis de alcaloides

    Estructuras complejas, muchos pasos biosinteticos

    se encuentran como mezclas de compuestos estructuralmente relacionados (ej. alcaloides triterpnicos de la papa)

    las rutas biosintticas comienzan con una descarboxilacin

    Pueden incluir otros componentes (ej) vinblastina, (terpenoide indlico dimrico); solanidina (alcaloide tripterpnico de la papa)

    sntesis y almacenamiento rgano especficos (cortezas, races, flores)

    secuestrados en clulas y estructuras especiales (vacuolas, vesculas de ltex, epidermis)

  • Biosntesis de alcaloides

    La sntesis de alcaloides est relacionada con la

    evolucin de las plantas. As, se hallan en muchas Angiospermas, sobre todo Dicotiledneas, siendo raras en las Monocotiledneas (a excepcin de las Liliceas).

    Raramente se encuentran alcaloides en las Gimnospermas, las Pteridofitas y las Talofitas.

    Algunos alcaloides son peculiares de un gnero (como la aconitina del Acnito), mientras que otros, como la cafena, se pueden localizar en numerosas plantas filogenticamente muy alejadas: Rubiceas, Esterculiceas, Sapindceas, Lilicceas...

  • Aminocidos esenciales como

    precursores biosintticos

  • Biosntesis de Alcaloides

    AMINOCIDOS

    BSICOS:

    Ornitina, arginina: Pirrolidnicos (nicotina).

    Tropnicos (hiosciamina).

    Pirrolizidnicos (retronecina).

    Lisina: Piperidnicos (anabasina, sedamina, lobelina,

    espartena, lupinina).

    Alcaloides del Lycopodium.

    AROMTICOS:

    Fenil-alanina: (Efedrina, taxol, lunarina).

  • Biosntesis de Alcaloides - Tirosina:

    Feniletilaminas (tiramina, hordenina).

    Isoquinolnicos (peyotina, lofoforina).

    Benzilisoquinolnicos: Derivados de la reticulina (morfina, berberina, papaverina, narcotina).

    - Otros.

    Isoquinolnicos derivados de la norbelladina (Amaryllidaceae).

    (Colchicina).

    (Emetina y relacionados).

    Betalainas (Cariofilales).

    Triptfano:

    Bases simples (triptamina, bufotenina, psilocina,estricnina).

    Derinados de la carbolina (harmanina).

    Ergolina: (ergotamina).

    Triptfano-monoterpenos.

  • Vas de sntesis simplificadas

    de algunos alcaloides

  • Tipos de reacciones

    involucradas en los procesos

    biosintticos

    Formacin de la base de Schiff: es la condensacin

    de un grupo amino con un grupo carbonilo

    C=O + NH2-R` C=N-R` + H2O

    Condensacin aldlica entre compuestos que

    contienen el grupo amino

    H-N=CH-CH2 + -CH2-CH=N- NH-CH-CH2-

    -CH-CH=N-

  • Tipos de reacciones

    involucradas en los procesos

    biosintticos

    Condensacin de la carbinolamina

    N-C-OH + HC-X N-C-C-X + H2O

    Oxidaciones

    -CH2OH NAD+ NADH + H+ -C=O

    H

  • Tipos de reacciones

    involucradas en los procesos

    biosintticos

    Transaminaciones

    CH3 CH3

    C=O H-C-NH2

    COCH COOH

    Reduccin de los grupos carbonilos y de

    dobles enlaces conjugados

    -CH=CH-C=O -CH2-CH2-CH2OH

  • Mtodos para el estudio

    de las Rutas Biosintticas

    Marcaje con Istopos:

    Se utilizan istopos marcados (C, H, N) con el

    objeto de rastrear el metabolismo de las

    sustancias.

    Se pueden hacer crecer las plantas en una

    atmsfera de CO2 marcado con C14.

    Se analizan los tejidos a determinados intervalos

    para establecer cmo van apareciendo los nuevos

    compuestos formados.

  • Mtodos para el estudio

    de las Rutas Biosintticas

    Secuencia Precursor-Productos

    Un probable precursor de la molcula se

    administra ya marcado a la planta.

    Se separa el producto, se purifica y se

    determina su radioactividad la cual se

    compara con la de la molcula del

    producto esperado.

  • Mtodos para el estudio

    de las Rutas Biosintticas

    Mtodos para la introduccin del precursor a la planta:

    Por inyeccin directa de soluciones radioactivas a la planta.

    A travs del cultivo de la planta en una solucin del metabolito.

    Esparciendo sobre las hojas una solucin del metabolito.

    Infiltrando la solucin radioactiva a travs del tallo.

    Mediante el cultivo de rganos aislados, con lo cual se elimina la interferencia de otros rganos que puedan producir cambios en los metabolitos.

  • Cultivo de tejidos

    Cultivos en medio slido:

    Consiste en germinar las semillas aspticamente y

    cuando se hayan desarrollado suficientemente se

    separa una raz, un tallo, o una hoja en

    condiciones estriles y se coloca sobre el medio de

    cultivo.

    La esterilizacin puede hacerse tratando la planta

    con una solucin de hipoclorito de sodio o calcio al

    0.8-2.5% durante 5 a 30 min. Luego el tejido se

    lava varias veces con agua destilada.

  • Cultivo de tejidos

    Cultivos en Medio Lquido

    Se limita a rganos en suspensin. La raz es el

    rgano ms comnmente cultivado.

    Para ello se transfiere tejidos de callus a un medio lquido, luego que ste se ha dispersado, se transfiere

    peridicamente a otro medio (agua de coco, levadura

    o casena).

    El cultivo de tejidos permite conocer los reguladores

    del crecimiento de las plantas, lo cual ha llevado a

    optimizar la produccin de plantas medicinales,

    comestibles y ornamentales.

  • Los estudios de cultivo de tejidos

    vegetales han permitido entender y

    descubrir los reguladores de

    crecimiento de las plantas, lo que ha

    llevado a optimizar la produccin de

    plantas medicinales, comestibles y

    ornamentales.

  • Micropropagacin de

    especies medicinales y

    aromticas

    Se define como el conjunto de

    tcnicas que permiten el cultivo en

    condiciones aspticas de rganos,

    tejidos, clulas y organelas,

    empleando medios de cultivo

    artificiales (Pierik, 1991).

  • Coleccin de germoplasma

    Establecimiento de un huerto clonal

    Marcha fitoqumica

    Seleccin de material elite

    Establecimiento de un protocolo de asepcia

    Seleccin del explante

    Evaluacin de medios de cultivo

    Iniciacin

    Multiplicacin

    Enraizamiento

    Endurecimiento y aclimatacin

    Adaptacin en campo

    Etapas de la micropropagacin

    para la regeneracin de especies

  • La clula vegetal como unidad

    fundamental

  • Subcultivos bajo cmara de flujo laminar

  • Test de viabilidad y estabilidad celular

  • Regeneracin in vitro de

    especies

  • ETAPAS

    Seleccin del explante elite procedente de plntulas

    micropropagadas

    Evaluacin de las condiciones de cultivo para induccin de

    callognesis

    Multiplicacin de los callos

    Transferencia y disgregacin de los callos en medios sumergidos

    (a nivel de matraces)

    Evaluacin de las condiciones (fsico-qumicas y biolgicas) de

    cultivo para el mantenimiento y multiplicacin de biomasa

    Tamizaje y produccin de un inculo adecuado para llevar a

    condiciones de un biorreactor

    Evaluacin de condiciones de cultivo (fisicos-qumicos y

    biolgicos) bajo condiciones automatizadas de un biorreactor

    de laboratorio

    Cultivo de clulas en suspensin

    para produccin de bioactivos

  • Secuencia del proceso para

    produccin de callo friable

  • Multiplicacin de callos

  • Transferencia y disgregacin de

    callos en medio sumergido

  • Establecimiento de clulas en

    suspensin

  • Cultivo de clulas en

    suspensin

  • Evaluacin de condiciones de cultivo bajo

    condiciones automatizadas de un

    biorreactor de laboratorio

  • Fsicoqumicos

    Luz: presencia o ausencia; fotoperodo, intensidad y calidad

    Agitacin

    Temperatura

    Concentracin de gases (O2 y CO2)

    Composicin qumica del medio de cultivo

    pH

    Biolgicos

    Estado fisiolgico celular

    Viabilidad

    Estabilidad celular

    Inmovilizacin celular

    Monitoreo de elicitores biolgicos

    Parmetros a evaluar

  • Monitoreo del ciclo celular

    Curva de cintica celular

  • Alcaloides Alergenos Antraquinonas Agentes antileucmicos Agentes antitumorales Agentes antivirales Agentes antibiticos Agentes insecticidas Agentes molusquicidas Aromas Perfumes Saborizantes Pigmentos Aceites esenciales Benzoquinonas Carbohidratos Chalconas Diantronas Furanocumarinas Hormonas Vitaminas

    Lpidos Naftoquinonas Acidos nuclicos Nucletidos Inhibidores enzimticos Opiaceos Acidos rganicos Protenas Pptidos Fenoles Hormonas Reguladores de crecimiento Esteroides Reserpina Glicsidos cardacos Esteroides derivados Azcares Taninos Flavones y flavonoides Terpenos y terpenoides

    Algunos de los productos generados por

    plantas

    Fuente: Fundamentals of Food Technology, 1996

  • Algunos de los productos

    comercializados en la

    actualidad Producto Fuente de clulas Biorreactor Volumen

    Shikonin Lithospermum erythrorhizon

    Batch culture 750 litros

    Sistma en dos etapas

    Berberine Thalictrum minus, Coptis japonica

    Batch culture y en produccin continua en biorreactores de turbina

    4000 litros

    Saponinas de Ginseng

    Panax ginseng Cultivo de clulas y raices

    20.000 litros

    Taxol Taxus brevifolia Biorreactor de turbinas

    75.000 litros

    Sanguinarine Papaver somniferum Biorreactor Airlift

    300 litros

    Fuente: Smith, 1995

  • Comparacin de la produccin de clulas

    vegetales en biorreactores, con respecto a

    los cultivos naturales

    Producto Especie Produccin en cultivos celulares

    % Peso seco Cultivo natural

    Relacin de produccin Cultivo/Planta

    Antociania Vitis sp 16 10 1.6

    Euphorbia milli 4 0.3 13.3

    Perilla frutescens

    24 1.5 16

    Antraquinona

    Morinda citrifolia

    18 2.2 8.2

    Berberina Coptis japonica 13 4 3.3

    Thalictrum minor

    10 0.01 1000

    Acido rosmarnico

    Coleus blumei 27 3 9

    Shikonina Lythospermum erythrorhizon

    14 1.5 3.3

    Fuente: Zhong et al., 1995.

  • 1. Seleccin de la fuente vegetal

    2. Induccin de callos in vitro en medios slidos

    3. Seleccin de lneas celulares altamente productoras

    4. Cultivo de clulas en suspensin en medios lquidos a nivel de matrax

    5. Optimizacin del cultivo y seleccin

    6. Produccin de un buen inculo para llevar a biorreactor

    7. Transferencia a biorreactor a escala de 100 litros

    8. Transferencia a biorreactor a escala de 10.000 litros o ms

    9. Procesos de separacin celular y de producto

    10. Procesos de recuperacin: Separacin y purificacin (Down-stream processing)

    Mhlbach, 1998.

    Secuencia del proceso para

    produccin de metabolitos en

    biorreactores

  • Bioproductos de las nuevas

    bioindustrias