2013_memoria_caracterización funcional y sensorial de jugo de batabel
DESCRIPTION
Jugo de Betabel caracterizacion funcionalTRANSCRIPT
INSTITUTO TECNOLÓGICO DE
DURANGO Memoria de residencia profesional:
Asesor externo:
Doctora Juliana Morales Castro Asesor interno:
M.C. María Antonia Castillo Marrufo Nombre:
Jessahel Salvador Simental Hernández
“Caracterización funcional y sensorial del jugo de betabel (Beta vulgaris) procesado”
Para obtener el título de: Ingeniero Bioquímico
Ing. Bioquímica ITD Residencia Profesional
1
Ing. Bioquímica ITD Residencia Profesional
2
Ing. Bioquímica ITD Residencia Profesional
3
INDICE I. INTRODUCCIÓN ...................................................................................................................... 6
II. JUSTIFICACION .................................................................................................................. 7
III. OBJETIVOS .......................................................................................................................... 7
IV. CARACTERIZACION DEL ÁREA DE TRABAJO.......................................................... 7
V. PROBLEMAS A RESOLVER ................................................................................................ 8
VI. ALCANCES Y LIMITACIONES ......................................................................................... 8
6.1 Alcances ............................................................................................................................... 8
6.2 Limitaciones ........................................................................................................................ 9
VII. PLANTEAMIENTO TEÓRICO ........................................................................................... 9
7.1 Características .................................................................................................................... 9
7.2 Producción y consumo ..................................................................................................... 9
7.3 El betabel como alimento funcional ............................................................................ 10
7.4 Jugo de betabel ................................................................................................................ 11
7.5 Trabajos previos ............................................................................................................... 12
7.6 Aceptabilidad de los alimentos .................................................................................... 12
7.7 El sabor ............................................................................................................................... 13
7.8 El color ................................................................................................................................ 13
7.9 Los pigmentos del betabel ............................................................................................ 13
7.10 Betalaínas ........................................................................................................................... 14
7.11 Betaxantinas ...................................................................................................................... 14
7.12 Efecto del tratamiento térmico en las principales betalaínas .............................. 14
7.13 El betabel como alimento funcional ............................................................................ 16
7.14 Estabilidad de los pigmentos ........................................................................................ 16
7.15 Pardeamiento enzimático ............................................................................................... 17
7.16 Principales enzimas en el betabel ............................................................................... 17
7.16.1 Peroxidasa (POD) ......................................................................................................... 17
7.16.2 Polifenoloxidasa (PPO) ............................................................................................... 18
7.17 Pardeamiento enzimático ............................................................................................... 18
7.18 Prevención de pardeamiento enzimático................................................................... 18
VIII. PROCEDIMIENTO Y DESCRIPCION DE LAS ACTIVIDADES A REALIZAR ....... 19
8.1.1 Obtención del jugo ............................................................................................... 19
8.1.2 Seguimiento de la calidad del jugo ................................................................. 20
Ing. Bioquímica ITD Residencia Profesional
4
8.1.3 Determinación de la vida de anaquel .............................................................. 21
8.1.4 Diseño experimental ............................................................................................ 21
8.1.5 Métodos .................................................................................................................. 22
8.1.5.1 pH ......................................................................................................................... 22
8.1.5.2 Solidos solubles ............................................................................................... 22
8.1.5.3 Color .................................................................................................................... 23
8.1.5.4 Viscosidad .......................................................................................................... 23
8.1.5.5 Pigmentos totales ............................................................................................ 23
8.1.5.6 Rendimiento ....................................................................................................... 23
8.1.5.7 Determinación de propiedades funcionales ............................................. 23
8.1.5.8 Capacidad antioxidante .................................................................................. 23
Polifenoles totales................................................................................................................ 23
8.1.5.9 Análisis microbiológico .................................................................................. 24
8.1.5.10 Evaluación sensorial ....................................................................................... 24
IX. RESULTADOS Y DISCUSION ........................................................................................ 24
9.1 Evaluación de pH en el jugo de betabel ..................................................................... 24
Figura 8. Evaluación del pH en el jugo de betabel .............................................................. 25
9.2 Evaluación de capacidad antioxidante en jugo de betabel ................................... 25
Figura 9. Evaluación de la Capacidad Antioxidante en el jugo de betabel ................... 26
9.3 Evaluación de la viscosidad en el jugo de betabel ................................................. 27
Figura 10. Evaluación de la viscosidad en el jugo de betabel ......................................... 27
9.4 Evaluación de los sólidos solubles en el jugo de betabel .................................... 28
Figura 11. Evaluación de los sólidos solubles en el jugo de betabel ............................ 28
9.5 Análisis microbiológico .................................................................................................. 28
Tabla 6. Análisis microbiológico .............................................................................................. 29
9.6 Evaluación de la Peroxidasa en el jugo de betabel ................................................. 29
Figura 12. Evaluación de la actividad enzimática de la Peroxidasa ............................... 30
9.7 Evaluación de la Polifenoloxidasa en el jugo de betabel ...................................... 30
Figura 13. Evaluación de la actividad enzimática de la polifenoloxidasa ..................... 31
9.8 Evaluación de los Pigmentos totales en el jugo de betabel ................................. 31
Figura 13. Evaluación de los pigmentos totales .................................................................. 32
9.9 Evaluación de la Capacidad antioxidante en el jugo de betabel ......................... 32
Figura 14. Evaluación de la capacidad antioxidante del jugo de betabel ..................... 32
Ing. Bioquímica ITD Residencia Profesional
5
9.10 Evaluación de los polifenoles totales en el jugo de betabel ................................ 33
Figura 15. Evaluación de los polifenoles totales en el jugo de betabel ........................ 33
9.11 Evaluación sensorial ....................................................................................................... 33
Figura 16. Evaluación sensorial del jugo de betabel .......................................................... 34
X. CONCLUSIONES ................................................................................................................... 34
XI. CRONOGRAMA ACTIVIDADES ........................................ ¡Error! Marcador no definido.
XII. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS ............................................................................... 36
Ing. Bioquímica ITD Residencia Profesional
6
I. INTRODUCCIÓN
El betabel rojo también es conocido por otros nombres coloquiales como: remolacha
de mesa, betarraga, remolacha roja o remolacha de huerta. Es un vegetal de raíz
roja, con hojas verdes brillantes que contiene una gran variedad de colores
existentes en sus raíces y hojas. Pertenece al reino Plantae, división Magnoliophyta,
clase Magnoliopsida, orden Caryophyllales, familia Amaranthaceae, subfamilia
Chenopodiaceae, género Beta y especie B. vulgaris y su nombre científico es Beta
vulgaris subsp. vulgaris L. var. conditiva. (SAGARPA, 2012).
En Europa se producen más de 200 000 toneladas al año, mientras que en México
tan solo 14,912.20 toneladas y de ellas Durango aporta solo 10 toneladas.
(SAGARPA, 2012).
El betabel está formado principalmente por agua, seguido de proteínas, fibra, grasas
e hidratos de carbono, tiene un índice glicémico muy bajo y puede ayudar a
disminuir el colesterol en sangre. Sin embargo, su importancia no radica en estos
componentes sino en aquéllos que brindan el color rojo-violeta característico de esta
hortaliza y las enzimas endógenas como Polifenoloxidasa y Peroxidasa que en
conjunto brindan una alta capacidad antioxidante.
No obstante, es de vital importancia elaborar un jugo de betabel que sea atractivo
para el consumidor para lo que es primordial analizar el efecto que tienen los
procesos térmicos involucrados en el proceso de elaboración del jugo con la
finalidad de tener más herramientas que permitan el desarrollo de un jugo de betabel
estable y de calidad con propiedades funcionales y sensoriales.
En la Unidad de Posgrado e Investigación y Desarrollo Tecnológico, UPIDET, del
Instituto Tecnológico de Durango se desarrolla investigación con jugo de betabel,
ya que el consumo de éste tiene un efecto benéfico en nuestra salud,
principalmente, colaborando a retrasar el envejecimiento, a prevenir enfermedades
cardiovasculares, cáncer, enfermedades de tubo neural, hipoxia y contribuye a
aumentar el rendimiento físico de los atletas.
Ing. Bioquímica ITD Residencia Profesional
7
II. JUSTIFICACION
En el 2011 Rivera-Rojas, propuso el proceso para la estabilización del jugo de
betabel, utilizando operaciones térmicas de escaldado, clarificado y pasteurizado,
obteniendo un jugo con características totalmente diferentes al jugo natural cuya
aceptabilidad se vio grandemente reducida, puesto que el color y el sabor se vieron
modificados. Por tal motivo, se requieren estudios adicionales que permitan
identificar aquellas etapas del proceso propuesto que inciden negativamente en los
atributos sensoriales y funcionales, con la finalidad de preservar las propiedades
funcionales y la aceptabilidad del jugo.
III. OBJETIVOS
Objetivo general
Preservar la aceptabilidad y las propiedades funcionales del jugo de betabel durante
el procesamiento.
Objetivos específicos
Identificar la o las etapas del proceso del jugo de betabel en la que
la aceptabilidad disminuye significativamente
Evaluar el efecto del procesamiento térmico combinado sobre las
características fisicoquímicas, funcionales y sensoriales del jugo de
betabel
Determinar la vida de anaquel del jugo obtenido en los dos
procesamientos.
IV. CARACTERIZACION DEL ÁREA DE TRABAJO
La residencia profesional se realizó en la Unidad de Posgrado Investigación y
Desarrollo Tecnológico (UPIDET), y en el l laboratorio de Desarrollo de Nuevos
Productos (DNP). Del Instituto Tecnológico de Durango, en la Cd. de Durango, Dgo.
El laboratorio DNP cuenta con varias áreas que son: salón de trabajo, almacén de
reactivos, Laboratorio de Evaluación Sensorial, Reología, zona de preparación de
muestras, Envases y Estudios de Vida de Anaquel. El equipamiento es diverso e
incluye, entre otros equipos reómetros, espectrofotómetro, material de vidrio,
refrigeradores, congelador, incubadoras entre otros, cámara ambiental, equipo de
envasado bajo vacío, estufa, etc.
La persona que dirigió y asesoró este trabajo fue la Dra. Juliana Morales Castro,
quien proporcionó todos los materiales necesarios para realizar la presente
investigación.
Ing. Bioquímica ITD Residencia Profesional
8
Misión
Formar profesionistas ciudadanos del mundo, de nivel licenciatura y posgrado, con
amplio sentido social y humano, que promuevan la cultura, los valores humanos y
el conocimiento científico, preparados con excelencia académica, con mística de
trabajo, productividad y creatividad, comprometidos con los retos que demanda el
desarrollo estatal, regional, nacional y los retos de la globalización, para ser una
institución de clase mundial.
Visión
Ser una institución líder en educación superior, en un entorno en permanente
transformación, altamente competitiva y reconocida a nivel nacional e internacional,
que forme de manera integral a las personas, inspirada en los más altos valores que
proporcionen bienestar y progreso a la comunidad.
V. PROBLEMAS A RESOLVER
En México no se cuenta con un jugo de betabel, envasado y que circule en el
mercado, es por eso que se sometió el jugo a diferentes tratamientos térmicos, con
la finalidad de establecer un jugo de alta calidad, con las mejores características
funcionales y sensoriales y que cumpla con las normas establecidas en México.
VI. ALCANCES Y LIMITACIONES
6.1 Alcances
Se logró elaborar la primera etapa de este proyecto de residencia, con todas sus
pruebas y técnicas a realizar, no se tuvo inconveniente alguno con lo que a material,
equipo y disposición de las personas que están encargadas en el área donde se
realizó la residencia profesional, se contó con todo el apoyo tanto de la Dra. Juliana
Morales Castro, así mismo como de la I.B.Q. Paloma Quiñones Morales, la etapa
que se elaboró fue el establecido por Rivera-Rojas en el 2011, en el cual se utilizaron
diferentes procesos térmicos para la elaboración del jugo de betabel, con un control
natural (Jugo Natural), además de un escaldado, pasteurizado y clarificado.
Se logró comenzar con la segunda etapa en la cual se eliminó el proceso de
escaldado debido a que en la evaluación sensorial no presento una aceptabilidad,
ya que presentó un alto sabor a cocido, así mismo como un cambio en la coloración.
Ing. Bioquímica ITD Residencia Profesional
9
6.2 Limitaciones
Se logró comenzar con la segunda etapa en la cual, la cual consta de una vida de
anaquel, la cual se logró elaborar hasta la segunda semana de las cuatro a las que
estaba previsto, esto debido a la falta de tiempo, debido a que las últimas semanas
estuve trabajando en la exposición de lo que se elaboró en la residencia, y por los
seminarios internos que se llevan a cabo en la UPIDET, es por eso que solo se
alcanzó a reportar hasta la segunda semana de esta etapa.
VII. PLANTEAMIENTO TEÓRICO
7.1 Características
El betabel rojo es considerado como una hortaliza de raíz, aunque en realidad es
un “tallo engrosado bulboso”, que constituye un órgano de almacenamiento,
principalmente de azúcares y almidones. El sistema de raíces es muy profundo y
ramificado; el tallo floral puede alcanzar una altura de 1 a 1.30 m, presenta flores
hermafroditas con estambres y pistilos, las hojas son de un color verde intenso y los
pecíolos o tallos de las hojas son de color rojo púrpura. Es una planta de clima frío,
aunque se puede explotar en un clima cálido, pero éste será de menor calidad. La
temperatura de germinación es de 10-30°C, siendo la óptima entre los 20-25 °C. La
temperatura para el desarrollo es de 16-21°C. Esta hortaliza tolera bien las heladas.
A temperaturas mayores de 25 °C se forman 3 anillos concéntricos de color blanco
en el “tallo bulboso” y baja el contenido de azúcares (SAGARPA, 2012).
El betabel es sensible a suelos ácidos, se desarrolla mejor en suelos neutros y
alcalinos, prefiriendo un pH de 6.5-7.5, es altamente tolerante a la salinidad. En
cuanto a la textura, se desarrolla mejor en suelos arenosos ya que en suelos
arcillosos se deforman los bulbos. Se utilizan dos indicadores de cosecha: uno que
implica conocer el diámetro del “bulbo” (cuando presente un diámetro de entre 8 a
10 cm) y otro es el tiempo en días, 60 a 80 días para cultivares precoces, 80 a 100
días para intermedios y 100 a 110 días para tardíos (SAGARPA, 2012).
7.2 Producción y consumo
En Europa su consumo es amplio, ya que se producen más de 200 000 toneladas
anuales. En Asia, Estados Unidos y la región Mediterránea aunque en menor
proporción también ha crecido su producción. En el norte de América no es
considerado como un vegetal popular y su consumo per cápita se encuentra entre
los últimos de los vegetales que se consumen (Vinson, 1998). En términos
generales no es uno de los principales vegetales cultivados en el mundo, en
producción o de consumo (Goldman y Navazio, 2007).
En la tabla 1 se observa la producción nacional y estatal de esta hortaliza. En
México, la producción anual de betabel es 14 912.20 toneladas (SIAP, 2012). Los
mayores productores son Puebla (6158) toneladas al año, Jalisco (3220), Baja
Ing. Bioquímica ITD Residencia Profesional
10
California (1989), México (1053) y Sonora (765). A su vez, Durango (10) ocupa el
número dieciséis a nivel nacional (SIAP, 2012).
El betabel es consumido en gran variedad de estilos en el mundo. Las hojas son
consumidas en ensaladas y las raíces se añaden a ensaladas o se consumen solas.
Las ensaladas de betabel son populares en todo el mundo, en New Zeland y Austria
se utilizan en sándwiches. Las raíces pueden estar en escabeche, asadas, cocidas,
o usadas para elaborar sopas. En Europa, el 90% de la producción es consumido
como vegetal y el 10% restante es procesado en jugos y utilizado como colorante
en productos alimenticios (Goldman y Navazio, 2007).
Tabla 1. Resumen Nacional de la producción de Betabel, Modalidad en México en
el 2012
Ubicación Sup.
Sembrada
(Ha)
Sup. Cosechada
(Ha)
Producción (Ton)
Rendimiento (Ton/Ha)
PMR ($/Ton)
Valor Producción
(Miles de Pesos)
PUEBLA 335 332 6,158.14 18.55 2,680.19 16,504.96
JALISCO 168 168 3,230.00 19.23 2,344.20 7,571.75
BAJA CALIFORNIA 121 121 1,989.50 16.44 6,791.47 13,511.63
MÉXICO 54.37 54.37 1,053.15 19.37 6,760.63 7,119.96
SONORA 78 78 765.3 9.81 7,387.91 5,653.96
TLAXCALA 26 26 732.11 28.16 1,791.02 1,311.22
MICHOACÁN 22 22 384 17.46 2,812.50 1,080.00
BAJA CALIFORNIA SUR 6 6 150 25 7,066.67 1,060.00
SAN LUIS POTOSÍ 14 14 126 9 3,203.57 403.65
GUANAJUATO 7 7 113 16.14 2,793.81 315.7
CHIHUAHUA 9.5 9.5 95 10 2,973.68 282.5
AGUASCALIENTES 4 4 69 17.25 4,228.99 291.8
DISTRITO FEDERAL 4 4 37 9.25 2,770.27 102.5
DURANGO 0.5 0.5 10 20 6,000.00 60
Fuente: Servicio de información Agroalimentaria y Pesquera (SAGARPA, 2012)
7.3 El betabel como alimento funcional
El betabel es una hortaliza que posee características funcionales y que ayuda a
disminuir la presión sanguínea. Además de mostrar una actividad antioxidante juega
un papel importante en la prevención de enfermedades cardiovasculares y
cancerígenas (Webb et al., 2008). Es una fuente de vitamina B y folato dietario,
puede prevenir defectos en el tubo neural (Jiratana et al., 2004). Por su contenido
de fibra puede ayudar a reducir los niveles de colesterol en la sangre. También se
ha encontrado que el betabel protege al hígado contra toxicidad química (Bobek et
Ing. Bioquímica ITD Residencia Profesional
11
al., 2000). Por su parte, se ha atribuido a los pigmentos del betabel actividades
antivirales y antimicrobianas (Stintzing et al., 2005).
Además el betabel es una rica fuente de carbohidratos, es excelente fuente de fibra
dietaría y proteínas, prácticamente no tiene grasa ni colesterol (Thakur y Das Gupta,
2006), en la tabla 2 se puede observar detalladamente su composición química
(USDA-Nutrient-Data-Base, 2012).
Tabla 2. Composición del betabel (por 100 ml o 100 g de porción comestible)
Atributos Cantidad
Agua(g) 87.5
Proteínas 1.61
Grasas (g) 0.17
Hidratos de carbono (g) 9.56
Fibra (g) 2.8
Energía (Kcal) 43
Sodio (mg) 78
Calcio (mg) 325
Potasio (mg) 16
Fósforo (mg) 40
Magnesio (mg) 23
Hierro (mg) 0.8
Zinc (mg) 0.35
Vitamina A (IU) 36
Tiamina (mg) 0.06
Rivoflavina 0.04
Niacina 0.33
Vitamina C (mg) 4.9
Vitamina E (mg) 0.3
Folacina (mcg) 109
Fuente: USDA Nutrient Data Base 2008.
7.4 Jugo de betabel
De acuerdo a la Norma Mexicana de la Secretaria de Economía (NOM-173-SCFI-
2009):
“El jugo es el producto líquido sin fermentar, pero a su vez fermentable obtenido al
exprimir frutas en buen estado, debidamente maduras y frescas o frutas que se han
mantenido en buen estado por procedimientos adecuados, inclusive por
Ing. Bioquímica ITD Residencia Profesional
12
tratamientos de superficie aplicados después de la cosecha, clarificado o no, y
sometido al tratamiento adecuado que asegura su conservación en el envase. No
debe contener corteza y semillas, ni materia extraña. El jugo debe prepararse
mediante procedimientos que mantengan las características físicas, químicas,
organolépticas y nutricionales esenciales de la fruta de que procede. Podrán
añadirse pulpa y células (en el caso de las frutas cítricas, la pulpa y las células son
las envolturas del jugo obtenido del endocarpio) obtenidas por procedimientos
físicos adecuados del mismo tipo de fruta. Este producto puede elaborarse a partir
de jugo de fruta congelado, y/o de jugo de fruta Concentrado reconstituido, siempre
que cumpla con las especificaciones citadas en la presente norma”.
La popularidad en el consumo de jugos de vegetales como el de betabel rojo no es
significativa comparada con la producción y consumo de otro tipo de jugos de frutas
como el de naranja y manzana, ya que tan sólo en Estados Unidos de América el
jugo de naranja representa cerca del 20% del total de la fruta que se consume en
ese país.
En general, el jugo de betabel rojo tiene un gran potencial debido a su alto contenido
de nutrientes, antioxidantes y su atractivo color; sin embargo, en términos de
producción o consumo no es uno de las principales hortalizas cultivas en el mundo
y por ende tampoco su jugo es común.
7.5 Trabajos previos
En el Posgrado en Ing. Bioquímica, se ha estado trabajando con el betabel desde
el año 2009, ya que se iniciaron trabajos con la elaboración de jugo en polvo de
betabel combinado con otras frutas, micro encapsulación de jugo de betabel (Beta
vulgaris L.) (Ramírez, 2012 y Garza-Juárez, 2012); así mismo, se han aplicado
métodos de deshidratado osmótico del betabel con soluciones salinas y azucaradas
para obtener un producto seco (Esquivel-Gonzáles, 2012 y Morales-Contreras,
2012); recientemente se concluyó otro trabajo sobre la estabilidad del jugo de
betabel por Rivera-Rojas (2011) y también como antecedente, se están aplicando
tecnologías emergentes, como es el procesamiento bajo altas presiones a jugo de
betabel buscando estabilizarlo minimizando pérdidas de componentes funcionales
que a la vez contribuyen a disminuir los atributos funcionales del jugo (Efecto del
tratamiento de alta presión en jugo de betabel Beta vulgaris L. ) sobre sus
propiedades fisicoquímicas y enzimáticas durante su almacenamiento (Luna-Silerio,
en desarrollo).
7.6 Aceptabilidad de los alimentos
La aceptación de los alimentos es el resultado de la interacción entre el alimento y
el hombre en un momento determinado. Por un lado, las características del alimento
(composición química y nutritiva, estructura y propiedades físicas) y por otro, las de
cada consumidor (genéticas, etarias, estado fisiológico y sicológico) y las del
entorno que le rodea (hábitos familiares y geográficos, religión, educación, moda,
Ing. Bioquímica ITD Residencia Profesional
13
precio o conveniencia de uso), influyen en su actitud en el momento de aceptar o
rechazar un alimento. (Costell, 2001).
Los compuestos responsables del aroma y sabor, son los compuestos que se
encuentran en menor concentración en un alimento pero que tienen una función
muy importante (Hail y Merwin, 1981). Sin embargo, es obvio, que el sabor y aroma,
tienen gran importancia en la aceptación o rechazo de los alimentos. En el desarrollo
de nuevos productos estos factores son de gran importancia ya que si el producto
se elabora con materia prima de alta calidad para que tengan un valor nutritivo
elevado pero no presentan el sabor, color y aroma adecuados, estos productos no
serán consumidos (Jackson, 2002).
7.7 El sabor
Son las percepciones que resultan de la estimulación simultánea a la entrada del
sistema digestivo y vías respiratorias (Coultate, 1984).
En evaluación sensorial, sabor es la impresión percibida de las sensaciones
químicas de un producto en la boca (Meilgard, 1999). El ser humano identifica varias
percepciones del sabor como dulce, salado, amargo, ácido, astringente, picante,
refrescante, entre otros. Para efectos de evaluación sensorial, el sabor se considera
como un fenómeno tetradimensional integrado por cuatro sabores primarios, dulce
(sacarosa), amargo (quinina), salado (cloruro de sodio) y ácido (ácido cítrico) y el
resto de las percepciones con combinaciones de éstos (Yamanishi, 1979).
7.8 El color
El color es el primer contacto que el consumidor tiene con el producto. Si el color de
algún producto se altera sin cambiar aroma, forma o sabor, el consumidor rechaza
o incluso los catadores ya entrenados distorsionan su juicio sobre las propiedades
sensoriales de un alimento cuando se cambia solo el color (Clydesdalea, 1993).
Los pigmentos constituyen uno de los factores organolépticos más importantes en
las frutas (Hernández, 2010). Son sustancias orgánicas que dan color al fruto, entre
éstos se encuentran los carotenoides (color naranja y amarillo), clorofila (color
verde), antocianinas (color púrpura y rojo). Los pigmentos son de gran importancia
porque de ellos depende el tiempo de cosecha del fruto y la calidad del producto
elaborado a partir del fruto (Suárez, 2003).
7.9 Los pigmentos del betabel
El color que posee el betabel (rojo intenso) se debe gracias al alto contenido de
betalaínas. Las betalaínas son metabolitos secundarios que se encuentran en las
plantas, los cuales contienen nitrógeno, además contienen dos tipos de pigmentos
hidrosolubles: betacianinas (pigmentos rojo-violetas) y betaxantinas (pigmentos
amarillos) que están acumulados en las vacuolas de las células.
Ing. Bioquímica ITD Residencia Profesional
14
7.10 Betalaínas
Las betalaínas son los metabolitos encontrados en la raíz del betabel, son
pigmentos hidrosolubles y existen como sales en las vacuolas de las células
vegetales. Dichos compuestos son derivados del cromóforo Ácido Betalámico
(Figura 1), que son los responsables de su coloración roja característica.
Químicamente, la definición de Betalaínas abarca a todos los compuestos con
estructuras basadas en la fórmula general mostrada en la figura, son derivados de
la condensación de una amina primaria o secundaria con el Ácido Betalámico
(Piatelli, 1981).
Figura 1. Ácido Betalámico Figura 2. Estructura las betalaínas
7.11 Betaxantinas
Son los pigmentos amarillos. El compuesto prototipo que representa la presencia
natural de betaxantinas es la indicaxantina, aislada del fruto del cactus Opuntia
ficus-indica, y fue la primera betaxantina aislada y caracterizada. Posteriormente de
la remolacha se han aislado dos betaxantinas llamadas vulgaxantina I y II. Son
mucho más lábiles que las betacianinas en relación 1:10 (Coultate, 1984; Dominic,
1989).
7.12 Efecto del tratamiento térmico en las principales betalaínas
Estudios detallados dentro de la estabilidad térmica de las betacianinas, presentaron nuevas ideas en la degradación de las betalaínas así como los cambios de color en los productos alimenticios la importancia crucial para la evaluación de los alimentos son pocos los estudios en la retención del color y la betalaína después del tratamiento térmico (Herbach et al, 2006). En general la degradación de la betalaína está relacionado con el incremento de la luminosidad (L*) (von Elbe and Maing, 1973). La evolución del color en la betalaína puede ser monitoreada
Ing. Bioquímica ITD Residencia Profesional
15
espectrofotométricamente dividiendo las absortividades entre los valores máximos de amarillo y rojo. Estos cambios de color ocurren durante los tratamientos térmicos y pueden ser analizados mediante otros métodos espectrofotométricos y HPLC. Los cambios cromáticos en las preparativos betalaínicos son el resultado de la degradación y transformación, dando como resultado compuestos de color amarillo y rojo, tal como se muestra en la figura 3. Nuevos hallazgos sobre la estabilidad y la degradación de betalaínas se han publicado, complementando los términos existentes de degradación de las betalaínas y sus correspondientes cambios cromáticos. Las explicaciones de la degradación de las betalaínas requieren de la aplicación de condiciones extremas de temperatura-tiempo que no son relevantes para el procesamiento de alimentos. Aunque en condiciones suaves durante la fabricación de alimentos, se quiere anticipar la detección de toda la matriz de productos de degradación de las betalaínas (Herbach et al, 2004).
Figura 3. Esquema de la degradación térmica de las betaninas (Herbach et al., 2004)
Debido al rompimiento del enlace de aldimina se produce un amarillo brillante como
producto del ácido Betalámico y a la formación de ciclo DOPA 5-O-β-glucósido
(Figura 4) ocasionando que se forme un color amarillo. Bajo condiciones ácidas y
altas temperaturas (Jackman y Smith, 1996) y en presencia de β-glucosidasa, la
mitad de la betanina puede ser desglucosilada resultando en un cambio betacrómico
de aproximadamente 4 nm. Por lo tanto, esta reacción puede ser intencionalmente
utilizada para obtener preparaciones de betabel rojo violeta profundas (Stintzing y
Carle, 2004).
Ing. Bioquímica ITD Residencia Profesional
16
Figura 4. Descarboxilación de las betalaínas (Herbach et al., 2006a).
7.13 El betabel como alimento funcional
El betabel es una hortaliza que posee características funcionales y que ayuda a
disminuir la presión sanguínea. Además de exhibir actividad antioxidante juega un
rol importante en la prevención de enfermedades cardiovasculares y cancerígenas
(Webb et al., 2008). Es una fuente de vitamina B y folato dietario, puede prevenir
defectos de tubo neural (Jiratana et al., 2004). Por su contenido de fibra puede
ayudar a reducir los niveles de colesterol en la sangre. También se ha encontrado
que el betabel protege al hígado contra toxicidad química (Bobek et al., 2000). Por
su parte, se ha atribuido a los pigmentos del betabel actividades antivirales y
antimicrobianas (Stintzing et al., 2005). Investigaciones, asocian el consumo de
betabel con una mejora en el desempeño de los deportistas por el contenido de
nitratos así como una producción de stamina, lo que produce menos cansancio.
7.14 Estabilidad de los pigmentos
Las betalaínas son estables dentro de un pH de 3-7, su pH óptimo es 5.8. Si el pH
del jugo se torna ácido se ocasiona una hidrólisis de las betaninas en el enlace
aldimina (Jackman y Smith, 1996) y si el pH es básico se produce una
recondensación del ácido betalámico (Schwartz y von Elbe, 1983).
La longitud de onda máxima de absorción para las betacianinas se encuentra entre
537 y 538 nm, mientras el máximo para las betaxantinas se encuentra
aproximadamente a 475 nm. A pH ácidos, λ se desplaza a un valor más bajo y por
tanto se torna más violeta. A valores de pH superiores a 7, cambia a un valor más
elevado de λ y cambia a un color más amarillo-café, esto a causa de la pérdida de
la betanina (Sánchez, 2006).
Temperatura. La temperatura es un factor crítico y el más importante en la
estabilidad de las betalaínas (Drdak y Vallova, 1990) durante el procesamiento y
Ing. Bioquímica ITD Residencia Profesional
17
almacenamiento. Varios autores han evaluado la degradación térmica de la
betanina (Altamirano et al., 1993), observando que al calentar soluciones de
betanina se produce una reducción gradual del color rojo característico de este
pigmento y surge la aparición de un color ligeramente marrón.
7.15 Pardeamiento enzimático
El oscurecimiento es uno de los problemas más importantes que se produce en las
frutas y hortalizas frescas cortadas y una de las causas más importantes de su
pérdida de calidad. Este deterioro tiene gran importancia por su impacto visual que
perjudica la aceptación sensorial, la calidad comercial y por reducir el valor nutricio
de frutas y hortalizas (Artés et al., 1998).
En términos generales se conoce como pardeamiento enzimático a la
transformación de compuestos fenólicos en polímeros coloreados,
denominándosele melaninas a los pigmentos que se forman frecuentemente de
colores pardos o negros (Cheftel y Cheftel, 1992). Es necesaria la presencia de tres
componentes para que se produzca el pardeamiento enzimático oxidativo: oxígeno,
enzima y substrato oxidable como tirosina, catecol, ácido gálico, hidroquinonas y
flavonoides, entre otros. Si cualquiera de estos componentes falta o se impide que
actúe, se evitará el oscurecimiento enzimático (Schmidt-Hebbel, 1981).
7.16 Principales enzimas en el betabel
Como muchos otros pigmentos naturales, las betacianinas del betabel son muy
sensibles al calentamiento, luz y oxidación, siendo una de las causas la enzima
peroxidasa (POD) que es la principal causante de la decoloración del pigmento
(Lashley y Wiley, 1979; Martínez y Muñoz, 2001). Sin embargo, el oscurecimiento
enzimático inducido por la polifenoloxidasa (PPO) en el betabel es otro problema
frecuente en la producción de jugo de betabel y en la industria de enlatado donde
se puede observar el oscurecimiento causado por la PPO en la superficie de las
rebanadas de betabel al estar en contacto con el aire (Lee y Smith, 1979). La
peroxidasa y polifenoloxidasa pertenecen a un grupo de enzimas llamadas
oxidoreductasas, que son enzimas relacionadas con las reacciones de óxido
reducción en sistemas biológicos y, por lo tanto, con los procesos de respiración y
fermentación (Martínez y Muñoz, 2001).
7.16.1 Peroxidasa (POD)
La peroxidasa es una enzima que cataliza la siguiente reacción general:
ROOH + AH2 ------ > H2O + ROH + A
Ing. Bioquímica ITD Residencia Profesional
18
En esta reacción, el ROOH puede ser HOOH o algún otro peróxido orgánico. Según
la reacción anterior el peróxido estaría siendo reducido, junto con esto resulta
oxidado un donador de electrones (AH2), el ascorbato, los fenoles, las aminas y
otros compuestos orgánicos, serían los responsables de dicha oxidación. El
producto de ésta, posee en muchos casos una coloración intensa, lo cual es usado
para la determinación colorimétrica de la actividad de dicha enzima (Richardson y
Hyslop, 1993).
7.16.2 Polifenoloxidasa (PPO)
La polifenoloxidasa (PPO) es una metaloenzima que se encuentra ampliamente
distribuida en plantas y hongos. La PPO contiene dos átomos de cobre en el sitio
activo que catalizan dos tipos de reacciones usando O2 como agente oxidante: (a)
la o-hidroxilacion de monofenoles para producir o-difenoles (actividad monofenol
oxidasa) y (b) la posterior oxidación de o-difenoles a o-quinonas (actividad
catecolasa) (Mayer y Harel, 1979). La reacción general sugiere que la enzima
cataliza la formación de quinonas altamente reactivas que reaccionan con grupos
amino o sulfhidrilo de proteínas. Estas reacciones generan cambios en las
características, físicas, químicas y nutricionales del alimento. Las quinonas también
pueden conducir a la polimerización y a reacciones de condensación entre proteínas
y polifenoles, produciendo como consecuencia pigmentos de color café, proceso
conocido como pardeamiento enzimático (Eskin, 1990; Mayer y Harel, 1991)
7.17 Pardeamiento enzimático
En términos generales se conoce como pardeamiento enzimático a la
transformación de compuestos fenólicos en polímeros coloreados,
denominándosele melaninas a los pigmentos que se forman frecuentemente de
colores pardos o negros (Cheftel y Cheftel, 1992). Es necesaria la presencia de tres
componentes para que se produzca el pardeamiento enzimático oxidativo: oxígeno,
enzima y substrato oxidable como tirosina, catecol, ácido gálico, hidroquinonas y
flavonoides, entre otros. Si cualquiera de estos componentes falta o se impide que
actúe, se evitará el oscurecimiento enzimático (Schmidt-Hebbel, 1981).
7.18 Prevención de pardeamiento enzimático
Para inhibir el pardeamiento enzimático se pueden emplear tratamientos térmicos
que incluyen el escaldado con vapor o con agua hirviendo aunque también se puede
recurrir a otros tratamiento que van a depender del tipo de producto que se desee
obtener. Entre estos, está la inmersión en agua ligeramente acidulada con ácido
ascórbico, ácido cítrico, o benzoato de sodio, tratamientos con SO2 o bisulfitos
exclusión de oxígeno, así como el uso de altas presiones, campos eléctricos
pulsados, procesamiento ultrasónico, entre otros (Hernando et al., 2007)
Ing. Bioquímica ITD Residencia Profesional
19
VIII. PROCEDIMIENTO Y DESCRIPCION DE LAS ACTIVIDADES A
REALIZAR
8.1.1 Obtención del jugo
El proceso el jugo de betabel establecido por (Rivera-Rojas, 2011) se muestra a
continuación en el siguiente diagrama mostrado en la figura 5 y se lleva a cabo de
Selección del betabel: El betabel seleccionado no debe contener golpes ni partes
blancas y el color debe ser rojo-violeta.
Lavado: Se realizó por inmersión del betabel en agua potable y su posterior lavado
con cepillo, para remover la tierra.
Desinfección: Se emplearon un agente químico como el cloro de acuerdo a la Norma
Mexicana de Secretaría de Salud (NOM-093-SSA1-1994) con el fin de reducir el
número de microorganismos presentes en la superficie del betabel.
Pelado: Se realiza por medios físicos, empleando para ello un pelador de verduras
de acero inoxidable.
Escaldado: Se lleva a cabo con la finalidad de inactivar enzimas endógenas,
cortando trozos de un centímetro cuadrado y después de que el agua destilada
alcanza 95°C, estos se añaden y se dejan por 5 minutos.
Clarificación: Para aumentar el porcentaje de rendimiento, disminuir la turbidez y la
viscosidad se aplica un tratamiento enzimático a baño María a una temperatura de
40°C, agregando las enzimas pectinasa/celulasa en una relación de 25/75
respectivamente y un periodo de incubación de 60 minutos.
Pasteurización: La pasteurización se lleva a cabo a 91°C por 5 minutos con la
finalidad de estabilizar el jugo microbiológicamente (bacterias mesófilas aeróbias,
mohos y levaduras) y mantener o disminuir al mínimo la capacidad antioxidante,
contenido de polifenoles y degradación del color del jugo.
Almacenamiento: El almacenamiento se lleva a cabo a 3°C y 10°C por 30 días.
Ing. Bioquímica ITD Residencia Profesional
20
Figura 5. Diagrama de proceso (Rivera–Rojas, 2011)
8.1.2 Seguimiento de la calidad del jugo
El trabajo se realizó en dos etapas: En la Etapa I, el jugo se sometió al proceso
previamente establecido por Rivera Rojas (2011), realizando una evaluación
sensorial para evaluar la tendencia en la aceptabilidad y la determinación de sus
propiedades fisicoquímicas del jugo obtenido en cada etapa del proceso (Figura 6).
En la Etapa II se eliminará el escaldado y se combinaran las condiciones de
escaldado y pasteurización de la Etapa I con la finalidad de disminuir un tratamiento
térmico durante el proceso (Figura 7) realizando una evaluación sensorial para
evaluar la intensidad de sus atributos sensoriales y la tendencia en la aceptabilidad.
Figura 6. Diagrama de proceso para la Etapa 1
Ing. Bioquímica ITD Residencia Profesional
21
Figura 7. Diagrama de proceso de le Etapa II
En cada etapa, se realizarán las siguientes determinaciones para monitorear el
efecto de ambos tratamientos:
i. Color
ii. Viscosidad
iii. pH
iv. Actividad enzimática
v. Pigmentos totales
vi. Actividad Antioxidante
vii. Polifenoles totales.
viii. Evaluación sensorial, por el Método de grupos dirigidos para
determinar la tendencia en la aceptabilidad y el Método QDA
para medir la intensidad de los atributos sensoriales del jugo.
8.1.3 Determinación de la vida de anaquel
El estudio de vida de anaquel se realizará, sometiendo el jugo procesado por ambos
métodos, así como el jugo fresco, a almacenamiento bajo 2 condiciones de
temperatura 3°C y 10°C, durante 30 días. El monitoreo de la calidad del jugo se
realizará cada 7 días por las determinaciones siguientes:
1. pH
2. Actividad antioxidante
3. Cuenta Total de Microorganismos
4. Color
5. Pigmentos totales
8.1.4 Diseño experimental
Ing. Bioquímica ITD Residencia Profesional
22
Para la Etapa I se utilizarán las condiciones de procesamiento mostradas en la
siguiente tabla.
Tabla 3. Condiciones de proceso de la Etapa 1.
Operación Condiciones
Escaldado 95°C por 5 min
Clarificación 25/75 (P/C) a 1000 ppm, 40°C y 60 min
Pasteurización 91°C por 5 min
Para la Etapa II se utilizará el siguiente diseño en donde se combinarán las
condiciones de escaldado y pasteurización para reducir el número de tratamientos
térmicos. El diseño experimental a seguir se muestra en la tabla 4.
Tabla 4. Condiciones de la Etapa II
Temperatura/Tiempo del método combinado
91°C 95°C
5 minutos
El diseño experimental para la determinación de la vida de anaquel del producto
final en cada una de las etapas se muestra en la tabla 5.
Temperatura/Tiempo Días
7 15 22 30
3°C
10°C
8.1.5 Métodos
8.1.5.1 pH
La medición del pH se realizó de acuerdo al Método Oficial 981.12, sólidos pH de
alimentos acidificados, de acuerdo con la AOAC (2005).
Para la medición de pH (HACH® Sension Modelo 378), primeramente se calibra el
potenciómetro.
8.1.5.2 Solidos solubles
La medición del contenido de sólidos solubles se realizó mediante el uso de un
refractómetro portátil tipo Abbe (marca METTLER TOLEDO® modelo 30PX), de
Ing. Bioquímica ITD Residencia Profesional
23
acuerdo al Método Oficial 932.12, sólidos solubles en frutas y productos de frutas,
de la AOAC (2005).
8.1.5.3 Color
Igualmente se determinó el color en las muestras sometidas a los distintos procesos
de pasteurización, para ello se empleó el colorímetro Color Flex de HunterLab®
(Mini-Scan, Hunter Lab Color Flex, Eay Match QC, Hunter, Virginia, USA). El
objetivo fue determinar las condiciones de pasteurización que promuevan,
mantengan o disminuyan al mínimo el color original del jugo sometido a los
diferentes procesos.
8.1.5.4 Viscosidad
Se midió inmediatamente después de la determinación del rendimiento la viscosidad
del jugo, para ello se empleó un viscosímetro programable marca (Brookfield® DV-
II+), donde se utilizó el spindle para pequeñas muestras No. 18 y se calibró el
viscosímetro a 100 RPM.
Los resultados en esta determinación se reportaron como porcentaje de disminución
de la viscosidad (Cp) con respecto al control.
8.1.5.5 Pigmentos totales
El contenido de pigmentos totales del betabel se determina de acuerdo a lo
reportado por Sánchez (2006).
8.1.5.6 Rendimiento
Una vez que el betabel fue pelado, se extrajo un jugo, posteriormente se pesa 100
g de betabel y se mide el volumen del jugo obtenido para determinar el rendimiento
(mL/100 g de betabel).
8.1.5.7 Determinación de propiedades funcionales
De la misma manera que en la determinación de las propiedades fisicoquímicas, las
propiedades funcionales se determinarán en cada una de las operaciones unitarias
donde se emplea un tratamiento térmico.
8.1.5.8 Capacidad antioxidante
Para la determinación de la capacidad antioxidante en las diferentes etapas del
procesamiento del jugo de betabel se empleó el reactivo DPPH (2,2-difenil-1-
picrihidracil) de acuerdo a la técnica reportada por Brand-Williams, (1995)
Polifenoles totales
Ing. Bioquímica ITD Residencia Profesional
24
Para la determinación de los polifenoles totales en las muestras tratadas y sin tratar
en las diferentes etapas durante el procesamiento del jugo de betabel se utilizó el
método de Folin-Ciocalteu empleando como estándar para esta determinación el
ácido gálico. Los resultados fueron expresados como miliequivalentes de ácido
gálico por litro de jugo de betabel. En esta determinación se empleó el reactivo Folin-
Ciocalteu de acuerdo a lo reportado por Singleton y Rossi, (1965).
Las muestras se leyeron en el espectrofotómetro (DR 5000 marca HACH®) a una
absorbancia de 760 nm, anotando las lecturas correspondientes a cada una de las
muestras.
8.1.5.9 Análisis microbiológico
Mesofílicos aerobios. Se utilizó la técnica por vaciado en placa, el método consistió
en contar las colonias que se desarrollaron en el agar para métodos estándar
después de 48 h de incubación a 35 ±2 °C, suponiendo que cada colonia proviene
de un microorganismo de la muestra bajo estudio, los resultados se reportaron como
UFC/ml o g de muestra (NOM-092-SSA1-1994)
Mohos y Levaduras. Se utilizó la técnica por vaciado en placa, el método consistió
en contar las colonias que se desarrollaron en el agar dextrosa de papa acidificado
después de 24, 48 y 72 h de incubación a 30 ±2 °C, suponiendo que cada colonia
proviene de un microorganismo de la muestra bajo estudio, los resultados se
reportaron como UFC/ml o g de muestra (NOM-111-SSA1-1994)
8.1.5.10 Evaluación sensorial
La evaluación sensorial se llevó a cabo a 12 panelistas donde se evaluará la
tendencia en la aceptabilidad del jugo de betabel por el método de grupos dirigidos
en una escala del 1 al 7 donde 1 significa me desagrada mucho y 7 me gusta mucho
y por el método QDA utilizando una escala de intensidad categorizada del 1 al 9
para cada uno de los atributos donde 1 significa nada 9 significa mucho.
IX. RESULTADOS Y DISCUSION
9.1 Evaluación de pH en el jugo de betabel
Ing. Bioquímica ITD Residencia Profesional
25
De acuerdo a los resultados obtenidos, se encontró que si existe una diferencia
significativa entre el jugo natural y el pasteurizado, con un valor de pH de 5.5 por lo
que el jugo obtenido tiene un valor de pH que permite que las betalaínas sean
estables, ya que su pH óptimo es de 3-7 tal como lo reporta (Schwatrtz y von Elbe,
1983).
Figura 8. Evaluación del pH en el jugo de betabel
9.2 Evaluación de capacidad antioxidante en jugo de betabel
La actividad antioxidante expresada como porcentaje de inhibición o atrapamiento
del radical DPPH, como se puede observar en la figura el tratamiento que cuenta
con más capacidad antioxidante es el jugo natural de betabel, tal como lo reporta
Calderón, (2007) menciona que las condiciones de temperatura y tiempo a las que
se someten los jugos modifican su propiedades antioxidantes.
Evaluación del pH
Muestra
1 2 3 4
pH
0
1
2
3
4
5
6
7
Natural
Escaldado
Clarificado
Pasteurizado
Ing. Bioquímica ITD Residencia Profesional
26
Figura 9. Evaluación de la Capacidad Antioxidante en el jugo de betabel
Capacidad Antioxidante del jugo de betabel
Muestra
1 2 3 4
% D
e A
trap
amie
nto
0
5
10
15
20
25
Natural
Escaldado
Clarificado
Pasteurizado
Ing. Bioquímica ITD Residencia Profesional
27
9.3 Evaluación de la viscosidad en el jugo de betabel
Según lo reportado por Rivera-Rojas, 2011, la viscosidad del jugo natural se
encuentra por encima del valor obtenido en el presente trabajo, debido a diferentes
factores como: condiciones de cultivo, temporada de cultivo, manejo postcocecha y
almacenamiento de acuerdo a lo reportado por Cardona (2005) y Carvajal (2007)
Figura 10. Evaluación de la viscosidad en el jugo de betabel
Evaluación de la viscosidad
Muestra
1 2 3 4
Visc
osid
ad
0
1
2
3
4
Natural
Escaldado
Clarificado
Pasteurizado
Ing. Bioquímica ITD Residencia Profesional
28
9.4 Evaluación de los sólidos solubles en el jugo de betabel
Los sólidos solubles representan el cociente total de sacarosa disuelta en un líquido.
La concentración de solidos solubles se relaciona con la viscosidad; es decir, que
si hay un incremento de solidos solubles, aumenta la viscosidad según lo reportado
por Beirao Dacosta, 2006.
Figura 11. Evaluación de los sólidos solubles en el jugo de betabel
9.5 Análisis microbiológico
Los resultados obtenidos en el análisis microbiológico de cada una de las muestras
tratadas se muestran en la Tabla 6. Todos los tratamientos térmicos fueron efectivos
al inhibir el crecimiento de bacterias, hongos y levaduras a excepción del tratamiento
con temperatura y tiempo menores en el cual las bacterias fueron las únicas que
proliferaron; cabe señalar que dicho crecimiento estuvo por debajo del rango que
recomienda la NOM-092-SSA1-1994 el tratamiento más efectivo fue el pasteurizado
Evaluación de los solidos solubles
Muestra
1 2 3 4
Sol
idos
sol
uble
s
0
2
4
6
8
10
12
Natural
Escaldado
Clarificado
Pasteurizado
Ing. Bioquímica ITD Residencia Profesional
29
donde no hubo formación de levaduras y en bacterias y hongos hubo muy poca
proliferación.
Tabla 6. Análisis microbiológico
Tratamiento Bacterias UFC/mL
Hongos UFC/mL
Levaduras UFC/mL
Natural 225x10^3 40x10^3 Incontable
Escaldado 18x10^3 92x10^2 160x10^2
Clarificado 23x10^3 28x10^3 88x10^2
Pasteurizado 1x10^3 24x10^2 Sin crecimiento
9.6 Evaluación de la Peroxidasa en el jugo de betabel
La Peroxidasa es la principal enzima causante es la principal causante de la
decoloración del pigmento (Lashley y Wiley, 1979; Martínez y Muñoz, 2001). Como
puede observarse en la siguiente gráfica, en el juego natural se puede apreciar que
la enzima Peroxidasa se encuentra activa, no así como se puede observar en el
pasteurizado que la inactivación fue mucho mayor con respecto al jugo natural,
según lo reportado por Richardson y Hyslop, 1993.
Ing. Bioquímica ITD Residencia Profesional
30
Figura 12. Evaluación de la actividad enzimática de la Peroxidasa
9.7 Evaluación de la Polifenoloxidasa en el jugo de betabel
La Polifenoloxidasa (PPO) es una metaloenzima que se encuentra ampliamente
distribuida en plantas y hongos. El oscurecimiento enzimático inducido por la
Polifenoloxidasa (PPO) en el betabel es otro problema frecuente en la producción
de jugo de betabel y en la industria de enlatado, donde se puede observar el
oscurecimiento causado por la PPO en la superficie de las rebanadas de betabel al
estar en contacto con el aire (Lee y Smith, 1979). En la gráfica se puede observar
que en el tratamiento clarificado puede verse un aumento de la actividad enzimática,
esto debido a la adición de la celulasa y pectinasa, en el pasteurizado y escaldado,
hubo una disminución de la actividad enzimática debido a la exposición a la alta
temperatura.
Actividad enzimatica de la peroxidasa
Muestra
1 2 3 4
Ui/m
L
0.0
5.0e+4
1.0e+5
1.5e+5
2.0e+5
2.5e+5
Natural
Escaldado
Clarificado
Pasteurizado
Ing. Bioquímica ITD Residencia Profesional
31
Figura 13. Evaluación de la actividad enzimática de la polifenoloxidasa
9.8 Evaluación de los Pigmentos totales en el jugo de betabel
Como se puede observar en la figura el contenido de betacianinas disminuyo y
aumento el contenido de betaxantinas dando como resultado una coloración de un
tono naranja en el jugo de betabel pasteurizado, Estos resultados coinciden con lo
mencionado por Von Elbe et al., (1981), de que a pesar de que las betacianinas son
sensibles al calor es posible su regeneración después de procesos térmicos.
Evaluación de la polifenoloxidasa
Muestra
1 2 3 4
Ui/m
L
0
50
100
150
200
250
Natural
Escaldado
Clarificado
Pasteurizado
Ing. Bioquímica ITD Residencia Profesional
32
Figura 13. Evaluación de los pigmentos totales
9.9 Evaluación de la Capacidad antioxidante en el jugo de betabel
La actividad antioxidante expresada como porcentaje de inhibición o atrapamiento
del radical DPPH como se puede observar en la figura el tratamiento que cuenta
con más capacidad antioxidante es el jugo natural de betabel como lo reporta
Calderón, (2007) menciona que las condiciones de temperatura y tiempo a las que
se someten los jugos modifican su propiedades antioxidantes.
Figura 14. Evaluación de la capacidad antioxidante del jugo de betabel
Capacidad Antioxidante del jugo de betabel
Muestra
1 2 3 4
% D
e At
rapa
mien
to
0
5
10
15
20
25
%atrapamiento DPPH: 9.82
%atrapamiento DPPH: 18.5
%atrapamiento DPPH: 17.78
%atrapamiento DPPH: 21.1
Natural Escaldado Clarificado Pasteurizado
0
1
2
3
4
5
Ing. Bioquímica ITD Residencia Profesional
33
9.10 Evaluación de los polifenoles totales en el jugo de betabel
En esta determinación se emplea el reactivo Folin-Ciocalteu de acuerdo a lo
reportado por Singleton y Rossi, (1965) como se puede apreciar en la figura los
tratamientos térmicos disminuyen la cantidad de polifenoles totales según lo
reportado por Lima et al., (2009) los cuales observaron que el tratamiento térmico
afectó dramáticamente el contenido fenólico de alimentos cultivados convencional
y orgánicamente.
Figura 15. Evaluación de los polifenoles totales en el jugo de betabel
9.11 Evaluación sensorial
La evaluación sensorial arrojo los resultados siguientes, en los cuales los panelistas
descartaron el jugo de betabel escaldado, debido a su alto sabor a cocido, aunque
la gráfica muestra que el de menor aceptabilidad fue el pasteurizado, el escaldado
fue el que obtuvo las mayores críticas de acuerdo a los panelistas además de
mostrar un cambio de color, con respecto al jugo natural de betabel.
Evaluación de los polifenoles totales
Muestra
1 2 3 4
mL de
Ácido
Gáli
co/m
L de j
ugo
0.0
0.1
0.2
0.3
0.4
0.5
0.6
Natural
Escaldado
Clarificado
Pasteurizado
Ing. Bioquímica ITD Residencia Profesional
34
Figura 16. Evaluación sensorial del jugo de betabel
IX. CONCLUSIONES
La operación de escaldado fue la que menor aceptabilidad obtuvo en la evaluación
sensorial, esto debido a su alto sabor a cocido, y si cambio significativo en el color,
dentro del análisis microbiológico estuvo dentro de la norma oficial mexicana,
además de que en el jugo de betabel pasteurizado no hubo ningún crecimiento.
En cuando a la determinación de polifenoles totales se empleó el reactivo Folin-
Ciocalteu de acuerdo a lo reportado por Singleton y Rossi, (1965) como se puede
apreciar en la figura los tratamientos térmicos disminuyen la cantidad de polifenoles
totales según lo reportado por Lima et al., (2009)
En cuanto a la capacidad antioxidante se puede observar que el natural es el que
muestra mayor capacidad, como lo reporta Calderón, (2007) menciona que las
condiciones de temperatura y tiempo a las que se someten los jugos modifican su
propiedades antioxidantes.
Tratamiento
Ace
pta
bili
dad
0
1
2
3
4
5
6
7
Ing. Bioquímica ITD Residencia Profesional
35
En la determinación de pigmentos totales hay un aumento en las betacianinas en el
jugo de betabel pasteurizado el aumento de betacianinas como de betaxantinas fue
casi igual esto nos arrojó como resultado una coloración naranja en el jugo de
betabel, esto debido al tratamiento térmico al cual fue sometido.
Los resultados mostrados en la Polifenoloxidasa se puede apreciar que hubo un
aumento en el tratamiento de jugo de betabel clarificado, esto puede deberse al
adicionamiento de la pectinasa/celulasa.
En cuanto a la Peroxidasa se inactivo la enzima en los tratamientos clarificado y
pasteurizado, con respecto al jugo natural en el cual se aprecia que la enzima se
encuentra muy activa, esta enzima es la causante de la decoloración del color en el
betabel según lo reportado por Richardson y Hyslop, 1993.
En cuanto a la concentración de solidos solubles se relaciona con la viscosidad; es
decir, que si hay un incremento de solidos solubles, aumenta la viscosidad según lo
reportado por Beirao Dacosta, 2006, la viscosidad se mantuvo a la par de los sólidos
solubles en el jugo de betabel, la viscosidad del jugo natural se encuentra por
encima del valor obtenido en el presente trabajo, debido a diferentes factores como:
condiciones de cultivo, temporada de cultivo, manejo postcocecha y
almacenamiento de acuerdo a lo reportado por Cardona (2005) y Carvajal (2007).
En cuanto al pH se puede apreciar diferencia significativa del jugo natural con
respecto al pasteurizado, con un valor de pH de 5.5 por lo que el jugo obtenido
tiene un valor de pH que permite que las betalaínas son estables ya que su pH
óptimo es de 3-7 tal como lo reporta (Schwatrtz y von Elbe, 1983).
Ing. Bioquímica ITD Residencia Profesional
36
X. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS
Altamirano RC, Drdák M, Simon P, Rajniakova A, Karovicova J, Preclík L. 1993.
Thermal degradation of betanine in various water alcohol model systems. Food
Chem 46: 73-75.
AOAC (Association of Official Analytical Chemists). 2005. Official Methods of
Analysis. United States of America.
Attoe EL, y von Elbe JH. 1982. Degradation kinetics of betanine in solutions as influenced by oxygen. J Agric Food Chem 30: 708–712. Attoe EL, y von Elbe JH. 1984. Oxygen involvement in betanina degradation. Zeitschrift fu¨r Lebensmitteluntersuchung und – forschung A 179: 232–236. Brookfield Engineering Laboratories, Inc. (1999). Specialist in the measurement and
control of viscosity. M/97-164-D1000
CATALOGUE-OF-LIFE. Beta vulgaris subsp. vulgaris. Consultado el 8 sep de 2012
http://www.catalogueoflife.org/details/species/id/10791468.
Chance B, Maehly AC. 1955. Assay of catalase and peroxidase. In Methods in Enzymology. Ed. S.P. Colowick, N. O Kaplan, Academic Press 764-775.
Cheftel JC, H Cheftel. 1992. Introducción a la bioquímica y tecnología de los
alimentos. Ed. Acribia, S.A 1: 333-334.
Clydesdale FM. 1993. Color as factor in food choice: A review. J Food Sci Nutr 33: 83-101.
Coultate TP.1984. Alimentos química de sus componentes. Ed. Acribia, S.A. 115-127. Derave W, y Taes Y. 2009. Beware of the pickle: health effects of nitrate intake. J.Appl Physiol 107-1677. Escribano J, Ganda-Herrero F, Caballero N y Pedreño MA. (2002). Subcellular localization and isoenzyme pattern of peroxidase and polyphenol oxidase in beet root (Beta vulgaris L). J Agric Food Chem 50: 6123–6129. Escribano J, Pedreño MA, García F, Muñoz R. 1998. Characterization of the antiradical activity the betalains from Beta vulgaris L. roots. Phytochem Anal 124-127.
Ing. Bioquímica ITD Residencia Profesional
37
Eskin NAM. 1990. Biochemistry of food spoilage: enzymatic browning. Ed. Academic Press. New York: 401-432. Fennema OR. 1996. Food Chem 3ra. Ed. Marcel Dekker, Inc. New York. Francis FJ. 1995. Quality as influenced by color. Elsevier 6: 149-155. Han D, Kim SJ, Kim DM. 1998. Repeated regeneration of degraded red beet juice pigments in the presence of antioxidants. J Food Sci 63: 69–72. Herbach KM, Stintzing FC, y Carle R. 2004. Impact of thermal treatment on color and pigments pattern of red beet (Beta vulgaris L.) Preparations. J Food Sci 69(6): C491-c498. Herbach KM, Rohe M, Stintzing FC y Carle R. 2006.Structural and chromatic stability of purple pitaya (Hylocereus polyrhizus [Weber] Britton & Rose) betacyanins as affected by the juice matrix and selected additives. Food Research International. 39: 667–677. Hernando l, Larrea V, Llorca E, Lluch MA, Pérez-Munuera I, Puig A. y Quiles A. 2007. Prácticas de Tecnología Bioquímica. Universidad Politécnica de Valencia. Escuela Técnica Superior de Ingenieros Industriales. Departamento de Tecnología de Alimentos. 232-234. Hunter Associates Laboratory, Inc. (2004). Measuring Translucent Semisolids using
the MiniScan 45/0 LAV. 11(3):1-4
Jackman RL. y Smith JL. 1996. Anthocyanins and betalains. In:Natural food colourants (edited by GF, Hendry & JD, Houghton). 244–309. London: Blackie Academic & Professional. Jiratana T y Liu RH. 2004. Antioxidant activity of precessed table beets (Beta vulgaris var. conditiva) and green beans (Phaseolus vulgaris L.). J Agric Food Chem 12: 123-124. Kanner J, Harel S y Granit R. 2001. Betalains a new class of dietary cationized antioxidants. J Agric Food Chem 49(11): 5178-5185. Kearsley MW y Katsaboxakis KZ. 1980. Stability and use of natural colours in foods. J Food Technol 15: 501–514. Lashley D y Wiley RC. 1979. A betacyanine decolorizing enzyme found in red beet tissue. J Food Sci 44: 1568−1569. Lawless H y Heymann H. 1999. Sensory evaluation of food: principles and practices. Ed. Springer. 15: 519-526.
Ing. Bioquímica ITD Residencia Profesional
38
Masschelein E, Van Thienen R, Wang Xu, Van Schepdael A, Thomis M and Hespel
P. 2012. Dietary nitrate improves uscle but not cerebral oxygenation status during
exercise in hypoxia. J App Physiol
Martínez-Parra J, Muñoz R. 2001. Characterization of betacyanin oxidation catalyzed by a peroxidase from Beta vulgaris L. roots. J Agric Food Chem 49(8): 4064−4068. Meilgaard M, Civille GV y Carr TB. 1999. Sensory Evaluation Techniques. 3ra. Ed. CRC Press. Washington. Mortensen A. 2003. Carotenoids and other pigments as natural colorants. P App Chem 78(8): 1477-1491. Piatelli M. 1981. The betalains: structure, biosynthesis and chemical taxonomy. In: the biochemistry of plants-acomprehensive teatrise. Ed. New York Academic Press. 17-19. Pizzocaro F, Torreggiani D y Gilardi G. 1993. Inhibition of apple polyphenoloxidase (PPO) by ascorbic acid, citric acid and sodium chloride. J Food Process Preserv 17 (1): 21-30. Putnam J, Allshouse J, Scott-Kantor L. 2002. U.S. Per Capita Food Supply Trends: More Calories, Refined Carbohydrates and Fats. 2 Food Review, Economic Research Service, USDA. 25: 3-10. Richardson T, Hyslop DB. 1993. Enzimas en: Química de alimentos. Ed. Acribia, S.A. p.p 501-503. Rivera-Rojas AC. 2011. Efecto del procesamiento sobre las características funcionales del jugo de betabel (Beta vulgaris L.). Unidad de Posgrado, Investigación y Desarrollo Tecnológico del Instituto Tecnológico de Durango. Durango, México. SAGARPA. Betabel. Consultado el 6 de septiembre de 2012 http://www.encuentra.gob.mx/resultsAPF.html?q=betabel&client=sagarpa. Sánchez N. 2006. Extracción y Caracterización de los principales pigmentos del Opuntia joconostle c.v (xoconostle). Tesis maestría. Instituto Politécnico Nacional. Centro de Investigación en Ciencia Aplicada y Tecnología Avanzada. México. Schmidt-Hebbel H. 1981. Ciencia y tecnología de los alimentos. Ed. Alfabeto. p.p 65-66. Schwartz SJ y von Elbe JH. 1983. Identification of betanina degradation products. Eur Food Res Technol 176: 448–453.
Ing. Bioquímica ITD Residencia Profesional
39
Secretaría de economía. NOM-173-SCFI-2009. Norma Oficial Mexicana, Jugos de frutas preenvasados-Denominaciones, especificaciones fisicoquímicas, información comercial y métodos de prueba. http://www.economia-noms.gob.mx/noms/inicio.do.
Secretaría de Salud. Norma Oficial Mexicana. NOM-093-SSA1-1994. Bienes y servicios. Prácticas de higiene y sanidad en la preparación de alimentos que se ofrecen en establecimientos fijos. http://www.salud.gob.mx/unidades/cdi/nom/093ssa14.html. SIAP. Producción de cultivos perennes nacional anual. Consultado el 10 de septiembre de 2012 http://www.siap.gob.mx/index.php?option=com_wrapper&view=wrapper&Itemid=351 SIAP. EL betabel. Consultado el 10 de septiembre de 2012 http://w4.siap.sagarpa.gob.mx/appestado/monografias/hortalizas/betabel%20.html. Singleton VL y Rossi JA. 1965. Colorimetry of total phenolics with phospho-molybdic-phosphotungstic acid reagents. Am J Enol Viticulture. 16:144-158. Stephen JB, Winyard P, Vanhatalo A, Blackwell JR, DiMenn FJ, Wilkerson DP, Tarr
J, Benjamin N and Jones AM. 2009. Dietary nitrate supplementation reduces the O2
cost of low-intensity exercise and enhances tolerance to high-intensity exercise in
humans. J Appl Phys 107: 1144-1155
Stintzing FC, Herbach KM y Mosshammer MR. 2005. Color, betalain pattern and antioxidant properties of cactus pear (Opuntia spp.) clones. J Agric Food Chem 53: 442–451. Strack D, Vogt T. 2003. Resent advances in betalain reseach. Phytochemistry. 62: 247-251. Suárez DX. 2003. Guía de procesos para la elaboración de néctares, mermeladas, uvas pasas y vinos. Ed. Convenio Andrés Bello. Bogotá. 5-6. Thakur V y Das Gupta DK. 2006. Studies on the clarification and concentration of beetroot juice Journal of food processing and preservation. 30(2): 194–207. USDA-Nutrient-Data-Base. Propierties of beets. Consultado el 13 de septiembre de 2012 www.botanical-online.com/commonbeets.htm. Vinson JA, Hao Y, Su X. y Zubik L. 1998. Phenol antioxidant quantity and quality in food: vegetables. J Agric Food Chem 46: 3630-3634. von Elbe JH. 1975. Stability of betalaines as food colors. Food Technol 5: 42–44.
Ing. Bioquímica ITD Residencia Profesional
40
von Elbe JH, Maing I y Amundson CH. 1974. Colour stability of betanin. J Food Sci 39: 334–337.
Yamanishi S. 1979. The umami taste: Food taste chemistry. Ed. JC, Boudreau. American Chem Society. Washington.